启动子与转录起始

白雪李晓莲种工二班启动子与转录起始3.4.1启动子区的基本结构3.4.2启动子区的识别3.4.3RNA聚合酶与启动子区的结合3.4.4-10区与-35区的最佳间距3.4.5增强子及功能3.4.6真核生物启动子对转录的影响3.4.7转录的抑制主要内容：★启动子：是一段位于结构基因5’端上游区的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确地结合并具有转录起始的特异性。★转录单元：从启动子到终止子的DNA序列★转录起始位点：与新生RNA链第一个nt相对应DNA链上的碱基。通常为嘌呤DNA启动子转录起点-1+1终止子编码链模板链转录区域RNA转录3.4.1启动子区的基本结构启动子区的结构特点★Pribnow

实验（Pribnowbox）P76图

-35区-10区

…..T85T83G81A61C69A52…T89A89T50A65A100YANT/AYY真核基因★TATA区：Hognessbox（类似原核的Pribnowbox）-60-40上游元件-35区间隔区间隔区转录起始位点-10区-30+1多种不同的调控元件5’3’TATAAATATA区第一位转录碱基YANT/AYY

3.3.2启动子区的识别启动子的功能既受DNA序列的影响，又受其构象的影响，推测RNA聚合酶并不直接识别碱基本身，而是通过氢键互补的方式加以识别。（类似于酶与底物的结合）3.4.3RNAPol

与启动子区的结合3.4.4-10区与-35区的最佳距离原核生物中，-10区与-35区之间的距离大约是16-19bp，小于15或大于20都会降低启动子活性。间隔的序列不严格，但是距离的大小可能是决定启动子强度的因素之一。保持适当距离对RNA聚合酶的功能是必要的。保持启动子这两段序列以及它们之间的距离十分重要，否则就会改变他所控制基因的表达水平间隔序列对启动子功能相对并不十分重要；但在90%的启动子中，两序列之间的距离约17bp，或者说相隔2个螺旋左右，因而这两个位点大致在DNA双螺旋的同一侧。不同启动子起动效率不同，分为强启动子（1-2sec启动1次转录）和弱启动子（至少10min才启动1次转录）。3.4.5增强子及其功能

1981年Benerji在SV40DNA中发现一个140bp的序列，它能大大提高SV40DNA／兔β—血红蛋白融合基因的表达水平。它位于SV40早期基因的上游，由两个正向重复序列组成，每个长72bp。目前发现的增强子多半是重复序列，一般长50bp，通常有一个8~12bp组成的“核心”序列，如SV40增强子的核心序列是5’—GGTGTGGAAAG—3’。

增强子或强化子:能强化转录起始的序列。不是启动子的一部分，但能增强或促进转录的起始，除去这两段序列会大大降低基因的转录水平，保留其中一段或取出插至DNA的任何部位，就能保持基因的正常转录。增强子很可能通过影响染色质DNA-蛋白质结构或改变超螺旋的密度而改变模板的整体结构，从而使得RNA酶更容易与模板DNA相结合，起始基因的转录。1）远距离效应；2）无方向性;3）顺式调节：只调节位于同一染色体上的基因;4）无物种和基因的特异性;5）具有组织特异性;6）具有相位性：其作用和DNA构象有关;7）有的增强子可对外部信号产生反应。★增强子的特点：真核生物启动子的结构特点1）启动子：确保转录精确而有效起始的DNA序列2）真核生物启动子结构核心启动子：保证RNAPolⅡ正常转录所必需的、最少的DNA序列。单独起作用时，只能确定转录起始位点并产生基础水平的转录。

TATABox（TATA盒）：-30~-25区，类似于原核的-10区。功能：使转录精确起始。上游启动子元件或称上游激活序列

CAATBox（CAAT区）：一致序列CCAAT,-70附近。与原核的-35区对应。

GCBox（GC区）：一致序列GCCACACCC或GGGCGGG，-70附近。功能：控制转录起始的频率，基本不参与起始位点的确定。3.4.6真核生物启动子对转录的影响原核和真核生物基因转录起始点上游区的结构比较mRNATTGACATATAATPu＞Py~-35-10~-7RNAPol

主要接触位点-70正调控因子结合区-30-20+1负调控因子结合区原核生物GC区CAAT区TATAA/TAPyAPy增强子-110-40-30-20+1

mRNA真核生物1）DNA模板功能抑制剂：通过与DNA结合而改变模板的功能2）RNAPol的抑制剂：与RNAPol结合而抑制其活力抑制剂靶酶抑制作用利福霉素细菌全酶和β亚基