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ELISA的原理及基本类型1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附测定(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)用于IgG定量测定的文章，使得1966年用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。ELISA的原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。进行检测时，样品中的受检物质(抗原或抗体)与固定的抗体或抗原结合。通过洗板除去非结合物，再加入酶标记的抗原或抗体，止匕时，能固定下来的酶量与样品中被检物质的量相关。通过加入与酶反应的底物后显色，根据颜色的深浅可以判断样品中物质的含量，进行定性或定量的分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的灵敏度。ELISA的基本类型ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。这种测定方法中有3种必要的试剂：固相的抗原或抗体；酶标记的抗原或抗体；酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。双抗体夹心法测抗原

洗涤洗涤洗涤洗涤洗涤洗涤加底物显色针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体。适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。竞争法测抗原3a2a3ajg育

洗涤jg育

洗涤加酚标Id加酚标Id杭原和被测抗加底物显色2b1'包被特异性抗体孵育

洗涤2b1'包被特异性抗体孵育

洗涤首先将特异性抗体包被于固相载体表面，经洗涤后分成两组：一组加酶标记抗原和被测抗原的混合液，另一组只加酶标记抗原，经孵育洗涤后加底物显色，这两组底物降解量之差，即为所要测定的未知抗原的量。此方法测定的抗原只要有一个结合部位即可，对小分子抗原如激素和药物类的测定常用此法。优点是快，缺点是需要较多量的酶标记抗原。免疫抑制法测抗原

洗涤t丿川底物畝何加入稱粤抗休的酶结舍物洗涤t丿川底物畝何加入稱粤抗休的酶结舍物被检标本对底物显色的抑制程度与标本中所含抗原的量成正比，二者之差即为预测抗原的量。间接法测抗体是检测抗体最常用的方法，原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体。□D孵U包被抗氐加酶标id抗拉体加底物显色洗涤□D孵U包被抗氐加酶标id抗拉体加底物显色洗涤洗涤孵育洗涤本法只

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