三体综合征产前诊断满分

21，三体综合征产前诊断

泸州医学院第三组满分PPT案例张某，女，31岁，商场收银员，怀孕15周，担心所孕胎儿不正常，前来进行遗传咨询。经询问得知，张某的一表姐曾生育一智力低下儿子，经某医院诊断为先天愚型，但具体核型不详。张某孕前检查各项优生指标均正常，孕前无感冒服药史，无有毒有害物质接触史。张某的丈夫，32岁，司机，有烟酒嗜好，在妻子怀孕前半年已戒酒，减少吸烟量。两人核型检查均正常，家族中其他特殊疾病患者。根据张某的情况，作中孕期唐氏筛查，结果张某血清的AFP,hCG和uE3检查结果阳性，再进行B超检查胎儿情况，证实胎儿胎龄正确，发育正常。根据上述资料，张某所孕胎儿具有21三体综合症的高风险，建议进行产前诊断。

孕妇就诊

常规筛查综合分析风险值孕期检查进一步确诊羊膜穿刺产前诊断定义对象方法产前诊断产前诊断是在遗传咨询的基础上，主要通过遗传学检测和影像学检查，对高风险胎儿进行明确诊断，通过对患胎的选择性流产达到胎儿选择的目的，从而降低出生缺陷率，提高优生质量和人口素质。产前诊断又称宫内诊断。它是为了了解胎儿在子宫内的健康情况，有无先天性畸形或遗传病，用某些特殊检查方法在子宫内对胎儿进行诊断，以便及早采取措施避免残疾儿的出生，提高出生人口的素质，是有生学的重要组成部分。产前诊断定义对象方法案例张某，女，31岁，商场收银员，怀孕15周，担心所孕胎儿不正常，前来进行遗传咨询。经询问得知，张某的一表姐曾生育一智力低下儿子，经某医院诊断为先天愚型，但具体核型不详。张某孕前检查各项优生指标均正常，孕前无感冒服药史，无有毒有害物质接触史。张某的丈夫，32岁，司机，有烟酒嗜好，在妻子怀孕前半年已戒酒，减少吸烟量。两人核型检查均正常，家族中其他特殊疾病患者。根据张某的情况，作中孕期唐氏筛查，结果张某血清的AFP,hCG和uE3检查结果阳性，再进行B超检查胎儿情况，证实胎儿胎龄正确，发育正常。根据上述资料，张某所孕胎儿具有21三体综合症的高风险，建议进行产前诊断。产前诊断定义对象方法产前诊断方法1.X线检查2.超声波检查3.胎儿镜4.羊膜穿刺术5.绒毛吸取术6.脐带穿刺术7.孕妇外周血分离胎儿细胞8.植入前诊断产前诊断定义对象方法一、实实验目目的掌握遗遗传病病的产产前诊诊断过过程，，通过过对21三三体综综合征征的诊诊断设设计，，培养养运用用遗传传学现现代技技术解解决医医学实实际问问题的的能力力。二、实实验原原理1.羊羊水中中有一一定数数量胎胎儿脱脱落细细胞，，通过过羊膜膜穿刺刺获取取羊水水中的的胎儿儿细胞胞，经经体外外培养养后通通过G显带带实验验进行行核型型分析析，判判断染染色体体是否否畸形形，诊诊断是是否患患有21三三体综综合征征。2.G显带带是指指以Giemsa染染料染染色后后，使使染色色体显显带的的技术术。Giemsa染染料是是由噻噻嗪和和曙红红组成成的，，着色色时DNA先于于2个个噻嗪嗪分子子结合合，然然后再再与一一个曙曙红分分子结结合，，形成成沉淀淀物，，而DNA的某某些部部位对对染料料不敏敏感，，由此此形成成明暗暗相间间的条条带。。三、实实验材材料、、试剂剂及器器材（1））器材材：离离心管管，离离心机机，天天平，，37℃温温箱，，载玻玻片，，盖玻玻片，，恒温温水浴浴锅，，光学学显微微镜，，标本本板，，玻璃璃铅笔笔，定定时钟钟，染染色缸缸，直直柄虹虹膜镊镊，滴滴管。。（2））药品品：pH6.8PBS，Giemsa，，0.025%胰蛋蛋白酶酶（取取0.9%氯化化钠100ml，加加0.25%胰胰蛋白白酶1ml）。。四、实实验步步骤取材↓体外细细胞培培养↓制片↓显带↓核型分分析取材1、腹腹部备备皮，，排光光膀胱胱，平平卧位位常规规消毒毒后铺铺无菌菌洞巾巾。2、麻麻醉，，一般般不必必需要要，精精神紧紧张者者或可可用普普鲁卡卡因或或利多多卡因因麻醉醉。取材3、选选择穿穿刺部部位，，经B超胎胎盘定定位后后避开开胎盘盘。中期妊妊娠时时，一一般选选择在在耻骨骨联合合上3横指指相当当于子子宫下下段处处，于于腹中中线或或其左左右侧侧旁，，扪及及囊样样感的的部位位做穿穿刺；；也可可于宫宫底与与耻骨骨联合合连线线中点点或左左右任任何一一侧穿穿刺。。晚期妊妊娠时时，先先扪清清胎先先露，，然后后上推推先露露部，，在先先露部部下方方穿刺刺；也也可在在胎儿儿颈背背部空空隙处处或胎胎儿肢肢体侧侧空隙隙处穿穿刺。。取材4、确确定穿穿刺部部位后后，以以20～21号号腰椎椎穿刺刺针垂垂直刺刺入腹腹壁，，通过过腹壁壁及宫宫壁两两次阻阻力，，当有有落空空感时时即进进入羊羊膜腔腔，抽抽出芯芯针，，见羊羊水溢溢出，，接上上注射射器，，顺利利抽得得清亮亮羊水水，再再次证证实在在羊膜膜腔内内后，，可注注射药药物。。如欲欲做羊羊水检检查，，则抽抽取羊羊水20ml立立即送送检。。5、穿穿刺完完毕后后拔出出穿刺刺针，，局部部压迫迫5分分钟，，穿刺刺部位位敷以以无菌菌纱布布，胶胶布固固定。。四、实实验步步骤取材↓体外细细胞培培养↓制片↓显带↓核型分分析细胞体体外培培养无菌超超净台台上将将羊水水注入入50ml无菌菌离心心管内内，1500r/min常温温离心心10min，，移去去上清清，留留约0.5ml上清清液，，枪尖尖混匀匀，分分装吸吸取至至3个个60mm培养养皿（（falcon），，每皿皿添加加4ml羊羊水完完全培培养基基，37℃℃5%CO2培养养箱中中培养养6-7d。四、实实验步步骤取材↓体外细细胞培培养↓制片↓显带↓核型分分析制片培养6-7d后后，倒倒置显显微镜镜下观观察细细胞生生长情情况，，有若若干梭梭形型型细胞胞克隆隆生长长，每每个克克隆细细胞状状态较较好且且形成成细胞胞岛，，更换换新鲜鲜培养养液，，每天天观察察，2-3d后后，每每个细细胞岛岛已长长成一一个个个较大大克隆隆且细细胞融融合度度达70%-80%，并并出现现数目目不等等的较较多圆圆形，，类圆圆形透透亮细细胞时时，可可进行行细胞胞收获获，收收获前前一天天或当当天更更换培培养液液，加加入秋秋水仙仙素，，终浓浓度为为0.1微微克每每毫升升，作作用4-4.5h,镜下下观察察有大大量““鱼眼眼样””透明明细胞胞出现现时，，即可可收获获。吸吸取培培养上上清至至一新新离心心管，，加入入0.25%胰胰酶，，37℃消消化2min，，1000r/min离离心10min，弃弃上清清，加加入0.075mol/LKCl低低渗液液，37℃℃12-13min，用用3:1甲甲醇/冰醋醋酸预预固定定和固固定后后，滴滴片，，常规规G显显带。。四、实实验步步骤取材↓体外细细胞培培养↓制片↓显带↓核型分分析显带1、将将制好好的染染色体体标本本，置置72℃～～75℃烤烤箱中中烤片片3h。2、放放入预预温至至37℃的的0.025%胰酶酶溶液液中（（pH=7.2～7.4）消消化1min左左右，，每次次的作作用时时间并并不完完全相相同，，可先先试一一张片片子，，再根根据显显带效效果调调整胰胰酶作作用时时间。。显带3、在Giemsa染液中中染色10min，，自来水冲冲洗干净，，晾干后，，即可阅片片。4、镜检：：在显微镜镜高倍目镜镜下检查显显带标本，，在染色体体上若出现现清晰的深深浅相间的的带型，即即为可取标标本，可供供摄像分析析四、实验步步骤取材↓体外细胞培培养↓制片↓显带↓核型分析结果判断纯合型嵌合型易位型结果判断(1)标准准型占患者总数数的92.5%，患患儿体细胞胞染色体有有47条，，有一条额额外的21号染色体体，核型为为47，XX（或XY）+21。其发发生机制为为亲代（多多为母亲））的生殖细细胞在减数数分裂时染染色体不分分离所致。。核型分析纯合型结果判断纯合型嵌合型易位型结果判断(2)嵌合合型仅占21-三体综合合征的2.5%-5%，是指指受精卵在在有丝分裂裂期间染色色体不分离离而导致的的，因此只只是部分而而不是所有有的细胞存存在缺陷。。患儿体内内含有正常常和21-三体细胞胞二种细胞胞株，形成成嵌合体，，核型为46，XX（或XY）/47，XX（（或XY））+21，，其临床表表现随正常常细胞所占占百分比而而定。嵌合合型的患儿儿的智商较较其它两型型高，临床床并发症的的发生率也也相对较少少。结果判断纯合型嵌合型易位型核型分析易位型结果判断(3)易位位型约占全部病病例的2.5%～5%，多为为罗伯逊易易位，即着着丝粒融合合，其额外外的21号号染色体长长臂易位到到另一近端端着丝粒染染色体上。。最常见为为D/G易易位，D组组中以14号染色体体为主，核核型为46，XX（或XY）-14，+t（14q;21q），少数为15号染色体体。另一种种为G/G易位，是是由于G组组中两个个21号染染色体发生生着丝粒融融合，形成成等臂染色色体，核型型为46，XX（或XY）-21，+t（21q；21q）。易位型先天天愚型五、注意事事项（1）胰蛋蛋白酶浓度度和处理时时间随气温温高低有所所不同。一一般规律是是标本存放放时间越长长，在胰蛋蛋白酶当中中处理时间间越长。太太新鲜的标标本，染色色体会出现现毛茸现象象。片龄很很长的标本本往往会导导致斑点状状的染色体体。（2）胰蛋蛋白酶温度度：温度越越高，反应应的速度就就越快，一一般是室温温，但温度度必须稳定定至少20min。。（3）胰蛋蛋白酶处理理的时间：：如果细胞胞呈紫蓝色色，说明胰胰蛋白酶的的作用时间间不够，如如果细胞呈呈桃红色，，说明作用用时间刚好好。综上总结给给与遗传建建议：若出现上述述情况则为为21三体体综合症。。就目前的的医疗水平平而言，21-三体体综合征既既没有方法法治愈也没没有方法预预防，建议议该孕妇不不宜生育该该患儿。如如果核型为为46，XX(XY)则没没有21三三体综合症症，可以生下小小孩。thankyou9、静夜四无邻邻，荒居旧业业贫。。1月-231月-23Sunday,January1,202310、雨中黄叶树树，灯下白头头人。。14:18:4614:18:4614:181/1/20232:18:46PM11、以我我独沈沈久，，愧君君相见见频。。。1月-2314:18:4614:18Jan-2301-Jan-2312、故人江海海别，几度度隔山川。。。14:18:4614:18:4614:18Sunday,January1,202313、乍见翻疑梦梦，相悲各问问年。。1月-231月-2314:18:4614:18:46January1,202314、他乡生白白发，旧国国见青山。。。01一月月20232:18:46下下午14:18:461月-2315、比不了了得就不不比，得得不到的的就不要要。。。。一月232:18下午午1月-2314:18January1,202316、行行动动出出成成果果，，工工作作出出财财富富。。。。2023/1/114:18:4614:18:4601January202317、做做前前，，能能够够环环视视四四周周；；做做时时，，你你只只能能或或者者最最好好沿沿着着以以脚脚为为起起点点的的射射线线向向前前。。。。2:18:46下下午午2:18下下午午14:18:461月月-239、没有失败，，只有暂时停停止成功！。。1月-231月-23Sunday,January1,202310、很多事事情努力力了未必必有结果果，但是是不努力力却什么么改变也也没有。。。14:18:4614:18:4614:181/1/20232:18:46PM11、成功就是是日复一日日那一点点点小小努力力的积累。。。1月-2314:18:4614:18Jan-2301-Jan-2312、世世间间成成事事，，不不求求其其绝绝对对圆圆满满，，留留一一份份不不足足，，可可得得无无限限完完美美。。。。14:18:4614:18:4614:18Sunday,January1,202313、不知知香积积寺，，数里里入云云峰。。。1月-231月-2314:18:4714:18:47January1,202314、意志坚强强的人能把把世界放在在手中像泥泥块一样任任意揉捏。。01一月月20232:18:47下下午14:18:471月-2315、楚塞三湘湘接，荆门门九派通。。。。一月232:18下下午1月-2314:18January1,202316、少少年年十十五五二二十十时时，，步步行行夺夺得得胡胡马马骑骑。。。。2023/1/114:18:4714:18:4701January202317、空空山山新新雨雨后后，，天天气气晚晚来来秋秋。。。。2:18:47下下午午2:18下下午午14:18:471月月-239、杨柳散和和风，青山山澹吾虑。。。1月-231月-23Sunday,January1,202310、阅读一切切好书如同同和过去最最杰出的人人谈话。14:18:4714:18:4714:181/