免疫血液学第五章血液成分制备

免疫血液学第五章血液成分制备第一页，共三十五页，2022年，8月28日输血前检查的目的和要求选择与患者血型配合的各种血液成分，使之能在患者体内有效地存活，无不良反应。即输入的红细胞在患者体内必须不溶血，输入的血浆成份不导致患者红细胞破坏，也就是供者与患者之间的血液在免疫血液学方面“相溶”从而达到安全、有效输血的目的。第二页，共三十五页，2022年，8月28日二、输血前检查的内容包括以下几个方面：1、患者的病史和标本等的检查、核对及处理。2、受血者、献血者ABO和Rh血型鉴定。3、不规则抗体的筛选和鉴定。4、交叉配血试验5、标签和发血。第三页，共三十五页，2022年，8月28日（一）标本的要求1、标本必须经鉴定和标记，确实来自患者和献血者。2、符合患者体内状态，能代表患者当前的免疫学情况，3、防止血样的稀释和溶血的产生。（输液患者对侧抽血）4、最好用血清（血浆有纤维蛋白原的干扰）配血5、输血后所有标本（患者及供者）保存2-8℃一周。第四页，共三十五页，2022年，8月28日（二）ABO血型鉴定用抗A和抗B试剂检测红细胞抗原，称之正定型，用A型和B型、O型红细胞检测血清中抗体称之反定型人ABO血型由红细胞抗原和血清抗体所决定，其正、反定型相符。见表ABO血型常规定型

正定型（检查红细胞抗原）反定型（检查血清中抗体）血型红细胞标本+抗体试剂血清标本+标准红细胞试剂抗A抗BA细胞B细胞O细胞A型+--+-B型-++--O型--++-AB型++---第五页，共三十五页，2022年，8月28日2、ABO血型正反定型不符及其原因可能因为操作技术，管理上问题也可能是红细胞和血清标本问题第六页，共三十五页，2022年，8月28日（1）技术操作、管理错误假阴性结果：试管中未加入抗体试剂或血清未能认识溶血也是阳性反应血清或试剂与红细胞比例太小离心速度时间不够使用了失效的抗体和红细胞试剂没能正确地记录和解释试验结果。假阳性结果：离心速度过大和离心时间过长使用了受到细菌污染的试剂使用了不干净的试管、器皿错误记录、解释试验结果第七页，共三十五页，2022年，8月28日（2）红细胞标本相关问题①某些ABO亚型、白血病或其它恶性疾病病人红细胞ABO抗原太弱（或缺乏），抗A抗B试剂未能出现预期的凝集反应。②红细胞获得性或遗传性的异常，如获得性B抗原红细胞或Tn/T多凝集红细胞，试剂可与这些异常的红细胞反应③悬浮红细胞的血清或血浆中含的型物质浓度高，中和了抗体试剂，出现假阴性，如卵巢囊肿病例。④病人红细胞自凝，病人血清中高活性，高浓度自身凝集严重致敏（包被）自身红细胞，以至在稀释液存在下，自发地发生凝集，而不是抗体试剂的特异性作用。⑤近期输血：输入过与自身血型不一致的血液，使标本成为“混合外观凝集”第八页，共三十五页，2022年，8月28日（3）血清标本的问题①异常的血浆蛋白：受检查血浆中异常的白蛋白，球蛋白比例（某些肝病、传染病如结核、多发性骨髓瘤等疾病患者球蛋白增加）高浓度的纤维蛋白原（心梗、感染、外伤、肿瘤患者）均易使红细胞发生缗钱状凝集现象。②免疫抑制疾病或免疫抑制治疗的病人血清中ABO抗体减少或消失。③年龄：老年人随年龄增高，ABO抗体减弱，婴儿血清抗体是阴性或很弱（0-6月不做反定型）④不规则抗体的存在：反复多次输血者妊娠者血清中有ABO血型以外的同种异型抗体，如盐水抗M、高效价冷凝集素抗I。第九页，共三十五页，2022年，8月28日（三）Rh（D）定型和定型中应注意的问题假阳性结果：受检细胞已被免疫球蛋白致敏，受检细胞与血清孵育的时间过长多凝集细胞造成定型的假阳性器材或抗血清被污染，造成的假阳性假阴性结果：受检细胞浓度太高，与抗血清比例失调漏加或错加定型血清定型血清使用方法错误抗血清保存不当，导致失效第十页，共三十五页，2022年，8月28日关于弱D（传统称Du型）弱D型（Du型）是D的弱抗原，这种抗原与大部分盐水抗D试剂不产生直接凝集反应，而与部分的IgG抗D血清用间接抗球蛋白试验反应阳性弱D（Du型）鉴定：三种不同批号的IgG抗D定型—如果全部阴性方可认定患者为RhD阴性，否则为弱D弱D临床意义：作为供血者Du→RhD阳性作为受血者Du→RhD阴性第十一页，共三十五页，2022年，8月28日（四）不规则抗体筛选和鉴定1对受血者的血清做抗体筛选，以发现有临床意义的不规则抗体，不规则抗体是指抗A抗B以外的血型抗体抗体筛选的原则让受检血清与已知的试剂红细胞起反应，以发现在37℃中有反应的抗体方法：盐水法、凝胶法、聚凝胺法、抗球蛋白试验等抗体筛选阳性的，则须做鉴定试验，以确定其特异性第十二页，共三十五页，2022年，8月28日（五）交叉配血试验1、要求及内容主侧：受血者血清+供者红细胞——检测对供者红细胞起反应的抗体。次侧：供者血清+受者红细胞——检测对受者红细胞起反应的抗体。自身对照：Rs+Rc——显示自身抗体、直抗阳性。第十三页，共三十五页，2022年，8月28日2、方法

盐水交叉配血试验：检出IgM类抗体。检测不完全抗体的交叉配血试验蛋白酶（木瓜酶、波萝酶）传统抗人球蛋白试验新方法：促凝剂（凝聚胺）微柱凝胶试验第十四页，共三十五页，2022年，8月28日3、配血中异常原因与处理①缗线状假凝集特点：显微镜下红细胞膜完整，细胞界限清晰地成线串聚集37℃、室温结果一样，不受温度影响，但加盐水即可散开。解决方法：被检细胞用盐水洗涤后再配血。②自身抗体造成配血不合，共同特点是患者血清能凝集自身红细胞天然自身冷凝激素获得性病理性自身冷抗体：直抗阳性/室温较37℃强/Rs+Oc>Rs+Rc自免溶贫血清中的温型自身抗体，直抗阳性/37℃≥室温③血清中的不规则凝集素第十五页，共三十五页，2022年，8月28日三、常规和紧急情况下的发血程序血液的申请：医生填写输血申请单护士抽取血样，送至血库检验师进行血型鉴定、抗体筛选选择血液，交叉配血填写输血记录单发血给护士第十六页，共三十五页，2022年，8月28日第七节新生儿溶血病一、新生儿溶血病的发病机制二、新生儿溶血病的临床症状三、新生儿溶血病的血清学检查四、新生儿溶血病治疗与预防五、新生儿换血和输血第十七页，共三十五页，2022年，8月28日什么是新生儿溶血病？新生儿溶血病（hemolyticdiseaseofthenewborn）简称HDN。指母婴血型不合，孕母体内存在着与胎儿红细胞不配合的IgG性质的血型抗体，该抗体通过胎盘进入胎儿体内，作用于胎儿红细胞使之产生不同程度溶血。第十八页，共三十五页，2022年，8月28日二、临床症状

被IgG抗体体致敏的胎儿红细胞在分娩前后加速破坏，这在临床上有多种表现，严重可致胎儿宫内死亡，轻者只在血清学中有所表现，婴儿却很健康，HDN的病理变化主要同红细胞溶解所引起的，大量红细胞破坏使红细胞数目减少，引起贫血，组织和脏器因供氧减少而发生缺氧、并可影响其功能主要表现为水肿、黄疸、贫血、肝脾肿大、核黄疸。第十九页，共三十五页，2022年，8月28日水肿——全身性、伴低蛋白血症；胸水、腹水、心包积液。黄疸——进行性黄疸增高胆红素51.3mol/L（3mg%）脐带胶质黄疸（4-6mg%）面部淡黄（15-18mg%）面部+躯干橙黄，手心足底、呈淡黄

>342（>20mg%）手足橙黄色第二十页，共三十五页，2022年，8月28日贫血——组织缺氧：心律快、组织增高、嗜睡、少吃、少哭、心衰。肝脾肿大——骨髓外造血组织来代偿引起核黄疸——未结合胆红素是对中枢神经系统有毒害的物质，婴儿大脑发育未成熟，血脑屏障不健全，过多的未结合胆红素可影响脑组织——脑神经基底核，使脑神经细胞发生变性——表现为发热、嗜睡、吸吮反射弱、痉挛、肌张力病死率高，存活后有智力不全，运动障碍。第二十一页，共三十五页，2022年，8月28日三、血清学检查1、测母子（父）ABO血型，确定ABO相合/不相合2、患儿标本检查：（1）直接抗球蛋白试验：ABO溶血病患儿红细胞上抗体结合得很少，常得到阴性结果（2）释放试验：阳性，红细胞上有IgG抗体（3）游离抗体：阳性，就证明新生儿病情会继续加重第二十二页，共三十五页，2022年，8月28日

新生儿血清中游离抗体检查与指示红细胞反应结果判定

AcBcOc

＋－－有游离的抗A抗体－＋－有游离的抗B抗体＋＋－有游离的抗A、抗B或抗A，B抗体＋／－＋／－＋有游离的ABO系统以外抗体－－－无游离的抗体第二十三页，共三十五页，2022年，8月28日

患儿红细胞抗体释放试验与指示红细胞反应结果判定AcBcOc

＋－－释放出IgG抗A抗体－＋－释放出IgG抗B抗体＋＋－释放出IgG抗A、抗B或抗A，B抗体－－－未释放出抗体＋＋＋释放出ABO血型系统以外的抗体第二十四页，共三十五页，2022年，8月28日

新生儿ABO

HDN血清学试验直接抗球游离抗体抗体释放结果意义蛋白试验试验试验判定＋＋＋确诊ABO

HDN

＋－＋确诊ABO

HDN

－－＋确诊ABO

HDN

＋－－可疑可疑ABO

HDN

－＋－可疑可疑ABO

HDN

－－－否定血清学试验未能证实HDN第二十五页，共三十五页，2022年，8月28日四、治疗（一）药物治疗：葡萄糖、白蛋白（二）光照（蓝光照射）：胆红素能吸收光，以波长450-460m作用最强，未结合胆红素（Z）转化为异物体（E）后者不能进入脑组织，为无毒水溶性，双吡咯，易从尿内排出，使血清胆红素浓度降低。（三）换血：换出抗体和致敏红细胞，减轻溶血，纠正贫血，防心衰，换血清胆红素，防核黄疸。ABO系HDN：O型洗涤细胞加AB血浆/同型浆Rh系HDN：ABO血型同患儿，Rh血型同母亲如子B型母Accdee血清含有抗D选B型D阴性血。第二十六页，共三十五页，2022年，8月28日（一）宫内输血（二）提早分娩>64妊娠期内的治疗：（三）药物治疗孕妇服Vc、VE、VK注射葡萄糖，吸氧，苯巴比妥为酶的诱导剂，促进肝脏清除胆红素，新生儿输白蛋白，能结合胆红素防核黄疸。预防：对未致敏的Rh阴性妇女在分娩Rh阳性婴儿72小时内，肌注30mg（145-435mg）抗Rh(D)IgG，通常可预防Rh阴性妇女发生同种免疫。第二十七页，共三十五页，2022年，8月28日第五章血液成份制备第一节血液的生理功能输送氧气和二氧化碳，在肺脏和人体组织间进行气体交换。输送养分到组织，从组织带走代谢产物。输送激素，维生素和各种药物。维持渗透压、酸碱度以及电解质平衡保持体温恒定防御微生物或异物入侵有效的凝血和纤维蛋白溶解机制第二十八页，共三十五页，2022年，8月28日细红细胞——人体的内呼吸，向机体组织运送O2、带走CO2、由

Hb完成胞白细胞——粒细胞——中性、嗜酸、嗜碱、免疫系统，吞噬破坏入侵细胞成淋巴细胞——T细胞参与细胞免疫B细胞参与体液免疫分40-45%血小板——粘附，释放凝固、收缩非（血浆）白蛋白保持渗透压和体液平衡；载体蛋白的作用，传递运输细胞免疫球蛋白——血浆中具有抗体活性的球蛋白的统称，它包括所有血液中的抗体。成分凝血因子共14个、血浆中含除组织因子（FIII）外所有因子55-60%凝血过程分三个阶段，凝血酶原激活物的形成，凝血酶原激活形成凝血酶；纤维蛋白原分解形成纤维蛋白。分内源性途径、外源性途径和共同途径。第二十九页，共三十五页，2022年，8月28日第二节全血保养液ACDCPDCPDA-1组成成分枸橼酸-枸橼酸三钠、葡萄糖Acid-Cutrate-Dextrose枸橼酸盐、磷酸盐、葡萄糖Citrate-Phosphate-Dextrose

添加腺嘌呤（A）枸橼酸盐：抗凝葡萄糖：维持红细胞代谢枸橼酸：降PH到5.0解决葡萄糖焦糖化磷酸盐：调节PH到5.6以利于维持血液中2、3-DPC（2，3二磷酸甘油酸）维持细胞放氧能力。腺嘌呤（A）是ATP的一个成分，能增加ATP合成

保存期限*21天21天35天第三十页，共三十五页，2022年，8月28日

血液成分的最佳保存条件红细胞：4℃±2℃血小板：22℃±2℃水平振荡，如4℃贮存，24h50%以上丧失功能，48h减小显著，72h基本无止血作用，5天全部遭破坏。白细胞：室温，24h微量减弱，3-5天显著减弱，7天完全消失凝血因子：-20℃以下冷冻保