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文档简介

免疫球蛋白细胞免疫检测肿瘤标志物第一页,共六十一页,2022年,8月28日概述免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)是指一组具有抗体活性的球蛋白。由浆细胞合成与分泌,存在于机体的血液、体液、外分泌液和部分细胞的膜上。按其功能和理化性质分IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五大类。第二页,共六十一页,2022年,8月28日一、免疫球蛋白G检测

免疫球蛋白G(IgG)为人体含量最多和最主要的Ig,占总Ig的70~80%;对病毒、细菌和寄生虫都有抗体活性;唯一能够通过胎盘的Ig。第三页,共六十一页,2022年,8月28日一、免疫球蛋白G检测参考值:7.0~16.6g/L临床意义:1、IgG增高:①多克隆增高:即IgG、IgA、IgM均增高。常见于慢性感染、慢性肝病、淋巴瘤、肺结核、链球菌感染及自身免疫性疾病如SLE、RA。第四页,共六十一页,2022年,8月28日一、免疫球蛋白G检测临床意义:

1、IgG增高:②单克隆增高:仅有某一种Ig增高。主要见于免疫增殖性疾病,如分泌型MM(分为IgG型、IgA型、IgD型、IgE型)第五页,共六十一页,2022年,8月28日一、免疫球蛋白G检测临床意义:

2、IgG降低:①各种先天性和获得性体液免疫缺陷病②肾病综合征:蛋白丢失③病毒感染:抑制免疫④应用免疫抑制剂患者第六页,共六十一页,2022年,8月28日二、免疫球蛋白A检测IgA分为血清型IgA与分泌型IgA(SIgA)血清型IgA占血清总Ig的10~15%SIgA在外分泌系统中有重要的免疫功能:如呼吸道、消化道、泌尿生殖道的感染、炎症、肿瘤第七页,共六十一页,2022年,8月28日二、免疫球蛋白A检测参考值:血清IgA:0.7~3.5g/LSIgA:唾液平均为0.3g/L

泪液30~80g/L

初乳平均为5.06g/L

粪便平均为1.3g/L第八页,共六十一页,2022年,8月28日二、免疫球蛋白A检测临床意义:

1、IgA增高:IgA型MM、SLE、肝硬化、肾脏疾病

2、IgA降低:反复呼吸道感染、非IgA型

MM、原发性和继发性免疫缺陷病第九页,共六十一页,2022年,8月28日三、免疫球蛋白M检测IgM是分子质量最大的Ig;占血清总Ig的5~10%;是有效的凝聚和溶解细胞的因子。参考值:0.5~2.6g/L第十页,共六十一页,2022年,8月28日三、免疫球蛋白M检测临床意义:

1、IgM增高:初期病毒性感染、肝硬化、RA、SLE、原发性巨球蛋白血症。

2、IgM降低:IgG型重链病、IgA型

MM、先天性免疫缺陷症、免疫抑制疗法。第十一页,共六十一页,2022年,8月28日四、免疫球蛋白E检测血清中最少的一种Ig;与变态反应、寄生虫感染和过敏反应有关。参考值:ELISA法:0.1~0.9mg/L第十二页,共六十一页,2022年,8月28日四、免疫球蛋白E检测临床意义:1、IgE增高:IgE型MM、重链病、肝脏病、结节病、RA以及各种

过敏性疾病(哮喘、荨麻疹、寄生虫感染)。第十三页,共六十一页,2022年,8月28日四、免疫球蛋白E检测临床意义:2、IgE降低:①先天性或获得性丙种球蛋白缺乏症②恶性肿瘤③应用免疫抑制剂第十四页,共六十一页,2022年,8月28日五、血清M蛋白检测M蛋白又称单克隆免疫球蛋白,是一种单克隆B细胞增殖产生的具有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白分子及其分子片段。参考值:阴性第十五页,共六十一页,2022年,8月28日五、血清M蛋白检测临床意义:阳性提示单克隆免疫球蛋白增殖病

MM、巨球蛋白血症、重链病、轻链病、半分子病、

7SIgG病第十六页,共六十一页,2022年,8月28日第二节

血清补体检测第十七页,共六十一页,2022年,8月28日概述补体(complement,C)是一组具有酶原活性的糖蛋白;补体参与灭活病原体的免疫反应;补体也参与自身免疫损伤;第十八页,共六十一页,2022年,8月28日一、总补体溶血活性检测CH50以溶血素致敏的绵羊红细胞(抗原抗体复合物)激活待测血清的C1,引起补体活化的连锁反应,最终引起绵羊红细胞溶解。溶血程度与补体量呈正相关,为S形曲线关系。一般以50%溶血作为检测终点(CH50

)。第十九页,共六十一页,2022年,8月28日一、总补体溶血活性检测

参考值:试管法50~100kU/L

临床意义:主要反映补体传统途径活化的活性程度。①CH50增高:见于急性炎症、组织损伤、恶性肿瘤。第二十页,共六十一页,2022年,8月28日一、总补体溶血活性检测临床意义:①CH50减低:更有意义。见于各种免疫复合物性疾病,如肾小球肾炎、自身免疫性疾病(SLE)、感染性心内膜炎、病毒性肝炎和慢性肝病。第二十一页,共六十一页,2022年,8月28日三、补体C3检测补体C3是一种由肝脏合成的β2-球蛋白,由α和β两条多肽链组成;在补体系统各成分中含量最多;是传统途径和旁路途径被激活的关键物质;第二十二页,共六十一页,2022年,8月28日三、补体C3检测参考值:0.8~1.5g/L临床意义:①增高:见于急性炎症、传染病早期、肿瘤、排异反应。②减低:见于急性肾小球肾炎、链球菌感染后肾炎、狼疮肾炎;活动性的SLE、RA。第二十三页,共六十一页,2022年,8月28日四、补体C4检测是一种多功能β1-球蛋白.在补体活化、促进吞噬、防止免疫复合物沉着和中和病毒方面发挥作用.

参考值:0.2~0.6g/L第二十四页,共六十一页,2022年,8月28日四、补体C4检测临床意义:①升高:急性风湿热、结节性动脉炎、皮肌炎。②降低:自身免疫性肝炎、1型糖尿病、SLE、狼疮肾炎、RA、SSc、IgA性肾病、胰腺癌。第二十五页,共六十一页,2022年,8月28日第三节

细胞免疫检测第二十六页,共六十一页,2022年,8月28日概述人体淋巴细胞分为T、B、NK等细胞群;其分别有若干亚群,并各有其特异的表面标志和功能;临床上各种免疫病可出现不同淋巴细胞数量和功能的变化;第二十七页,共六十一页,2022年,8月28日一、T细胞亚群的检测(一)T细胞花结形成试验

T细胞表面有绵羊红细胞(SRBC)受体,可与SRBC结合形成花结样细胞,称为红细胞玫瑰花结形成试验或E玫瑰花结形成试验(ERFT)。第二十八页,共六十一页,2022年,8月28日一、T细胞亚群的检测以每个T淋巴细胞粘附≥3个羊红细胞者称为花结形成细胞(EtRFC)。显微镜下计数花结形成细胞占淋巴细胞的比例,而检测T细胞的数量。不能反映T细胞的免疫功能。参考值:EtRFC64.4±6.7%第二十九页,共六十一页,2022年,8月28日一、T细胞亚群的检测临床意义:①降低::见于免疫缺陷疾病,如恶性肿瘤、免疫性疾病、大面积烧伤、多发性神经炎等。②升高:见于甲亢、甲状腺炎、重症肌无力、慢活肝、SLE活动期和器官移植排斥反应。第三十页,共六十一页,2022年,8月28日一、T细胞亚群的检测(二)T细胞转化试验⑴体外培养时,T淋巴细胞被PHA和ConA刺激,转化为母细胞。⑵计数淋巴细胞和转化的母细胞数,求出转化率。第三十一页,共六十一页,2022年,8月28日一、T细胞亚群的检测参考值:形态学法:转化率60.1±7.6%临床意义:同T淋巴细胞花结试验,但Down综合征时明显增高。①反映T细胞的免疫功能;②估计疾病的疗效和预后;第三十二页,共六十一页,2022年,8月28日一、T细胞亚群的检测(三)T细胞分化抗原测定T细胞膜表面有许多特异性抗原,统称为白细胞分化抗原(CD);

CD3代表总T细胞

CD4代表T辅助细胞(TH)

CD8代表T抑制细胞(TS)第三十三页,共六十一页,2022年,8月28日一、T细胞亚群的检测参考值:

免疫荧光法流式细胞术

CD363.1±10.8%61~85%

CD442.8±9.5%28~58%

CD819.6±5.9%19~48%CD4/CD82.2±0.7/10.9~2.0/1第三十四页,共六十一页,2022年,8月28日一、T细胞亚群的检测临床意义:⑴CD3减低:见于自身免疫性疾病,如SLE、RA⑵CD4减低:见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷症、艾滋病、应用免疫抑制剂者⑶CD8减低:见于自身免疫性疾病或变态反应性疾病第三十五页,共六十一页,2022年,8月28日一、T细胞亚群的检测临床意义:⑷CD4/CD8比值增高:①见于恶性肿瘤、自身免疫性疾病、病毒感染、变态反应;②提示器官移植后的排斥反应第三十六页,共六十一页,2022年,8月28日一、T细胞亚群的检测临床意义:⑸CD4/CD8比值减低:见于艾滋病(常<0.5)⑹CD1~CD8增高:可能为T细胞型ALL第三十七页,共六十一页,2022年,8月28日二、B细胞分化抗原检测应用CD19、CD20、CD22等单克隆抗体,分别与B细胞表面抗原结合。分别求出CD19、CD20、CD22等阳性细胞百分率。第三十八页,共六十一页,2022年,8月28日二、B细胞分化抗原检测参考值:CD1911.74±3.37%临床意义:①升高:ALL、CLL②降低:无丙种球蛋白血症、使用化疗或免疫抑制剂后。第三十九页,共六十一页,2022年,8月28日第四节

肿瘤标记物检测第四十页,共六十一页,2022年,8月28日概述肿瘤标志物(tumormarker)是由肿瘤细胞本身合成、释放或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。主要包括蛋白质类、糖类物质和酶类肿瘤标志物。第四十一页,共六十一页,2022年,8月28日一、蛋白质肿瘤标志物的检测(一)甲种胎儿球蛋白(AFP)测定AFP是在胎儿早期由肝脏合成的一种糖蛋白,出生后受到抑制。当干细胞或生殖腺胚胎组织发生恶性病变时,又重新合成,致血中AFP明显增高。对诊断干细胞癌及滋养细胞恶性肿瘤有重要临床价值。第四十二页,共六十一页,2022年,8月28日一、蛋白质肿瘤标志物的检测参考值:RIA或ELISA法<25µg/L临床意义:1、原发性肝细胞性肝癌>300µg/L2、生殖腺胚胎癌(睾丸癌、卵巢癌、畸胎瘤)、胃癌、胰腺癌时,AFP可增高。第四十三页,共六十一页,2022年,8月28日一、蛋白质肿瘤标志物的检测临床意义:

3、病毒性肝炎、肝硬化

AFP↑(20~200µg/L)4、妊娠3~4月,AFP开始增高,

7~8月达到高峰,然后下降。多低于300µg/L第四十四页,共六十一页,2022年,8月28日一、蛋白质肿瘤标志物的检测(二)癌胚抗原(CEA)测定CEA是一种富含多糖的蛋白复合物,胎儿六月后渐减少,出生时含量极低。CEA水平对肿瘤的诊断、预后、复发的判断有意义。第四十五页,共六十一页,2022年,8月28日一、蛋白质肿瘤标志物的检测参考值:ELISA法和RIA法<15µg/L临床意义:1、明显增高见于90%胰腺癌、74%结肠癌、60%乳腺癌,常>60µg/L2、CEA浓度随病情变化而波动。第四十六页,共六十一页,2022年,8月28日一、蛋白质肿瘤标志物的检测临床意义:3、结肠炎、胰腺炎、肝脏疾病、哮喘等也常见CEA轻度增高。4、胃液和唾液中CEA对胃癌诊断有一定价值。第四十七页,共六十一页,2022年,8月28日二、糖脂肿瘤标志物检测(一)癌抗原-50(CA-50)测定

CA-50是一种肿瘤糖类相关抗原,对肿瘤的诊断有广泛性。参考值:

IRMA和CLIA法0~2.0万u/L第四十八页,共六十一页,2022年,8月28日二、糖脂肿瘤标志物检测临床意义:1、增高见于87%的胰腺癌、80%胆囊癌、73%的原发性肝癌、50%的卵巢癌、20%的结肠癌、乳腺癌、子宫癌。第四十九页,共六十一页,2022年,8月28日二、糖脂肿瘤标志物检测临床意义:

2、动态观察其水平变化对肿瘤疗效、预后判断及复发检测具有意义。

3、鉴别良恶性胸腹水。

4、慢性肝病时增高。第五十页,共六十一页,2022年,8月28日二、糖脂肿瘤标志物检测(三)糖链抗原19-9(CA19-9)

CA19-9是一种糖蛋白,在成人的胰、胆部位少量存在。

参考值:健康人血清CA19-9<3.7万u/L第五十一页,共六十一页,2022年,8月28日二、糖脂肿瘤标志物检测临床意义:1、胰腺癌、肝胆和胃肠道疾病可明显增高。其阳性率胰腺癌85~95%,胆囊癌和胆管癌85%,胃癌、结肠癌40%。但无早期诊断价值。2、结合CEA检测,对胃癌诊断符合率85%第五十二页,共六十一页,2022年,8月28日二、糖脂肿瘤标志物检测临床意义:3、连续检测对病情进展、手术疗效、预后估计、复发诊断有重要意义。4、急性胰腺炎、胆汁淤积型胆管炎、胆石症、急性肝炎亦增高。第五十三页,共六十一页,2022年,8月28日二、糖脂肿瘤标志物检测(四)癌抗原125(CA125)测定

CA125是一种糖蛋白性肿瘤相关抗原,存在卵巢肿瘤的上皮细胞内。参考值:<3.5万u/L第五十四页,共六十一页,2022年,8月28日二、糖脂肿瘤标志物检测临床意义:1、对诊断卵巢癌(阳性率60~90%)有较大临床意义。2、宫颈癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、

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