果蝇的性别鉴定性状观察及饲养方法

实验二果蝇的性别鉴定、性状观察及饲养方法一、实验原理

普通果蝇（Drosophilamelenogaster）为双翅目昆虫，具完全变态，与家蝇是不同的种。作为实验材料的优点是：生活史短，生长迅速，每12天左右即可完成一个世代；繁殖能力较强，每只受精的雌蝇约可产卵400-500个，因此在短时间内即可获得多数子代，有利于遗传分析；容易饲养，饲料如玉米粉简便易得；突变性状多达400以上，且多数是形态变异，便于观察。因此在遗传学研究中得到广泛应用，尤其在基因分离、连锁、交换等二、实验目的

1.了解果蝇生活史中各个阶段的形态特征2.几种常用突变型的主要性状3.掌握果蝇的性别鉴定方法4.掌握果蝇的饲养管理以及培养基的配制方法三、实验材料和用具材料：饲养的野生型和几种习见的突变型果蝇。用具体视解剖镜、放大镜、麻醉瓶、培用品养皿、乙醚、滤纸条、白纸、毛笔、棉花、纱布、玉米面等。：四、实验内容和步骤

生活史的观察

用放大镜从培养瓶外观察果蝇生活史中的四个时期。卵—幼虫—蛹—成虫成虫卵蛹幼虫

卵：孵化后的雌蝇一般在12小时后开始交配，两天以后才能产卵。卵长约0.5毫米，椭圆形，腹面稍扁平，在背面的前端伸出一对触丝，它能使卵附着在食物（或瓶壁）上，不致深陷到食物中去。

幼虫：幼虫从卵中孵化出来后，经过两次蜕皮到第三龄期，此时体长可达4-5毫米，肉眼观察下可见一端稍尖为头部，并且有一黑点即口器；稍后有一对半透明的唾腺管向后延伸，然后汇合成一条导管通向消化道。神经节位于消化道前端的上方。通过体壁，还可以看到一对生殖腺位于身体后半部的上方两侧，精巢较大，外观为一明显的黑色斑点，卵巢则较小，熟悉观察后可借以鉴别雌雄。

蛹：幼虫生活4-5天即化蛹。化蛹前从培养基上爬出伏在瓶壁上，逐渐形成一个梭形的蛹，起初颜色淡黄，柔软，而后逐渐硬化变成深褐色，这就显示将要羽化了。

成虫：刚从蛹壳里孵化而出的果蝇，虫体较长、大，翅还没有展开，体表也未完全角质化，所以呈半透明的乳白色，透过腹剖体壁还可以看到消化道和性腺。不久，蝇体变为短粗椭圆形，双翅伸展体色加深，如野生型果蝇初为浅灰色，而后成灰褐色。当营养条件适宜时，在20℃下饲养，卵—幼虫期平均为8天，蛹—成虫期约为6.3天；若在25℃下饲养，卵—幼虫期平均为5天，蛹—成虫期约为4.2天。因此当营养条件适合而在25℃下饲养时，只需10天即可完成一代生活史。

普通果蝇生活的最适温度为20-25℃，当温度低至10℃时，生活周期将延长至57天以上，而且生活力明显降低，如果高于30℃时则将引起不育和死亡。2.几种常见突变类型的观察

突变名称基因符号形状特征染色体上座位白眼W复眼白色X1.5棒眼B复眼横条纹,小眼数少X57.0黑檀体e身体呈乌黑色,黑亮ⅢR70.7黑体b体黑色,比黑檀体深ⅡL48.5黄体y全身呈浅橙黄色X0.0残翅vg翅明显退化,部分残留ⅡR67.0不能飞焦刚毛Sn3刚毛卷曲如烧焦状X21.0

性状突变名称基因符号性状特征染色体号数翅形残翅vg翅退化Ⅱ小翅m翅小Ⅰ(X)勺状翅nub2翅小似勺Ⅱ翘翅cy翅后翻Ⅱ眼白眼w复眼白色Ⅰ(X)棒眼B复眼棒状Ⅰ体色黑檀体e体色黑亮Ⅲ黑体b体色黑Ⅱ黄体y体色浅橙黄色Ⅰ刚毛焦刚毛sn3刚毛卷曲Ⅰ叉刚毛f刚毛近中部分叉Ⅰ野生型(+)突变型bodycolor（y-黄体）Eyecolor：（w）Eyecolor（v-朱红眼）Eyecolor（se-墨色眼）Eyeshape（B）Wingsize（m-小翅）Wingsize（dp-短翅）Wingshape（Cy-卷曲翅）Wingshape（vg）Cv-无横隔脉Sb-短刚毛f-叉刚毛腹部尖端细长腹部尖端呈钝圆形第一对足的跗节基部：性梳3.果蝇雌雄鉴别果蝇雌雄外形判别（体形大小）雌雄腹部体节数目雌果蝇6节，腹部底部为产卵管，呈现圆锥状凸出。腹部体节数目雄果蝇4节，腹部底部为交尾器，呈现黑色圆形外观。雄果蝇在前肢先端具有性梳性梳性梳雌雄在幼虫期区分较难，雌雄成蝇的区别很明显，可以用放大镜或直接观察鉴别，其特点如下：

雌果蝇①体型较大②腹部椭圆形、末端稍尖③腹部背面外观有5条黑色条纹④腹部腹面有6个腹片⑤无性梳⑥外生殖器的外观比较简单雄果蝇

①体型较小②腹部末端钝圆③腹部背面有三条黑色条纹，前两条细，后一条宽而延伸至腹面，呈一明显的黑斑④腹部腹面有4个腹片⑤第一对足的付节基部有黑色鬃毛状流苏称性梳⑥外生殖器的外观较复杂，用低倍镜观察刚羽化的幼蝇，可见到明显的生殖弧，肛上板及阳茎等。

性梳的有无是鉴别雌雄果蝇的明显标志之一。性状观察方法为了便于细致的观察，需将果蝇进进行麻醉处理，可使用专用的麻醉瓶，或者以适当大小的广口瓶代用,麻醉时，先取下麻醉瓶塞倒立放在瓶侧，再取培养瓶轻拍瓶壁，使果蝇落在培养瓶底部，用右手两指取下培养瓶的棉塞（夹在指间不要放在台上），迅速和麻醉瓶口对接紧密，左手握紧两瓶口稍微倾斜，右手轻拍培养瓶将果蝇震落麻醉瓶中，然后迅速盖好两个瓶塞。或者培养瓶在下，麻醉瓶在上，去塞对接口，达到一定数量后，迅速分别盖好两个瓶口。

如果用自制的麻醉瓶，可在瓶塞的棉花团上先加几滴乙醚，随即迅速塞紧瓶口，果蝇对乙醚很敏感，易麻醉，约经半分钟，果蝇便被麻醉，麻醉的深度看实验要求而定（作种蝇以轻度麻醉为宜，作观察可深度麻醉，致死也无妨），这时可倾倒在用酒精擦过的白磁板上进行观察，当发现果蝇苏醒时，可用一条吸水纸加几滴乙醚贴在培养皿内盖住果蝇，再次麻醉。注意勿使麻醉过度，如蝇翘外展和身体呈450角，表明已麻醉致死不能复苏。4、培养基的配制成熟的柔质水果，如葡萄、香蕉等，特别是成熟过度开始发酵时，常可招致很多野生果蝇。因为果蝇是以果汁上的酵母菌为食的，所以根据果蝇的生活习性，可以在一些发酵的基质上进行饲养，常用的有香蕉饲料、玉米粉琼脂饲料等。玉米粉—糖—琼脂培养基：配方水琼脂红糖玉米粉丙酸酵母粉175ml1.5g13.5g10.0g0.15-0.2g适量2380ml3.0g31.0g42.0g2.5ml适量按配方（2）：可将琼脂放入190ml水中加热溶解后，再加糖煮沸，另将