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文档简介

标本采集:空腹安静状态采血单独一管(促凝管)4ml-5ml参考值:β2-MG(β2微球蛋白)0-3mg/L(0.8-2.0)是反映肾小球滤过功能的较好指标肾小球滤过率β2-MG升高。β2-MG(β2微球蛋白明显增高,而下尿路感染则正常。hsCRP(C反应蛋白(CRP))0-3mg/L是反应炎症的敏感指标CysC(C)的一个重要指标1-14岁 0.51-0.95mg/L14-50岁 男0.63-1.25mg/L0.54-1.15mg/L50岁以上 0.60-1.55mg/LHA(血清透明质酸)0-110ng/mlHA,对鉴别急、慢性肾病及对肾病综合征与单部位损害的部位和程度,映肾脏的病情变化有重要意义,对肾脏疾病诊断具有重要意义血清LN(层粘连蛋白) 0-95ng/ml肝纤维化、肿瘤转移的最新指标血清P(血清Ⅲ型前胶原) 0-90ng/ml联合检测血清Ⅲ型前胶元(PCⅢ、透明质酸(HA、层粘连蛋白(LN)三项指升高与肝纤维组织增生呈同步性,显示出良好的正相关(P<0.01)结论三项指标的联合检测可极大增加临床诊断血清血清型胶原) 0-85ng/mlTIMP-1(血清组织金属蛋白酶抑制物-1)53-153pg/ml在目前情况下是一种较好的肝脏纤维化无创诊断和随访指标。肾小管三项,包括尿β2-MG、尿NAG、尿GGT/尿Cr

血清TIMP-1水平反映了慢性肝病肝内炎症和纤维化的一些重要特征,ECMECM真正含义上的血清肾脏纤维化标记物,国内外研究较多的有以下几种,可用作肾脏纤维化的辅助诊断。1.β2-MG2.hsCRP3.CysC4.HA5.LN6.PCⅢ7.C-lV8.TIMP-1另外,在阻断肾纤维化的过程中,TGF-β,PDGF能诱导系膜细胞增生(PDGF,又可被PDGF作用)间质纤维化。血清组织金属蛋白酶抑制物-1(tissueinhibitorsofmetalloproteinases-I,TIMP-1)β2-MGhsCRP,3.CysCHA,5.C-lVTIMP-1转化生长因子、PDGF(血小板原性生长因子、补体等相关检查。该几项检查是针对对肾脏纤维化进展程度的特异性检查项目,一般医疗机构尚未开展。显示患者仍有保守治疗的意义。血清:层粘连蛋白(LN)(CG)透明质酸(HA)(PLD)(PC、透明质酸(HA、层粘连蛋白(LN)人血清层粘蛋白(LN)ELISA定量检测1.试剂:(包被板和标准品需);①LN包被板(2次,剩余)②LN标准品:LNstandard(2000ng/ml)③标准品稀释液:Standarddiluents④LN酶结合物:LNEnzymetracer(1.1ml)

8孔×121管1瓶1管⑤洗涤缓冲液:(10ml),用蒸馏水20倍稀释A/B(6ml)⑦终止液1瓶各1瓶1瓶2.操作程序:步骤内容试剂配制) 按试剂组成说明操作操作步骤条件、时间H1~A1LN标准品】① 标准曲线 100ul自H1→B1依次倍比稀释A1为空白孔(加样 含稀释液,不加酶!)。

加10ulLN酶结合物充分混匀!

37℃,45min待测血清(洗板)底物)③(终止反应)

100ul待测血清PBS(每孔加400ul,摔干)AB1滴(55ul),振荡混匀。OD2.5终止液50ul或1滴

5次室温,5~10min20min内测定完毕3.结果判断:酶标仪A450nm测定。酶标仪定量(设立程序)或电脑软件定量(公司提供软件)。定量范围:15.0—1000.0ng/ml,小于15.0时按15.0报告。4.正常参考值:115.7±17.3ng/ml注意事项:A2B为保证检测质量,标准品若不能在1月内使用完,请直接保存在-20℃,反复冻融对不影响实验结果。C自用户收到试剂开始,酶结合物在4℃保存2月内质量稳定,使用周期长者可于-20℃分装保存。临床意义:肝纤维化、肿瘤转移的最新指标——层粘连蛋白(LN)层粘连蛋白(laminin,LN)是细胞外间质(ECM)IVLN表达,窦周间质细胞及胆管上皮细胞中的mRNA3倍左右,DisseLN10倍。因此血清LN含量是反应肝脏纤维组织增生的良好指标。此外,LN合成和沉积大大增加,形成特殊改变“肝窦毛细血管化”,与慢性肝病门脉高压发生有关。癌症转移首先要突破基底膜,LN与肿瘤浸润转移有关。LN115.7±17.3微克/毫升,慢肝(中度)>140微克/毫升,肝硬化>160/LN浓度较低,肝纤维化LN浓度明显升高。其升高程度与慢性肝病肝纤维化程度一致,同时它也反映了肝窦毛细血管化的程度。因为在正常肝组织中,肝窦LNIV型胶原相结合,陈招灾DisseLN升高程度与门静脉高压程度也是一致的。综上所述,LN血清浓度升高程度不同,反映了肝纤维化的不同程度,当其显著增高时,常提示肝硬化的形成和门脉高压的存在。但血清层粘连蛋白在其他非肝纤维化病人亦有升高,如肝癌、胰腺癌、肾病、糖尿病等,分析时应引起重视。肝纤维化四项定量(ELISA一步法人血清透明质酸(HA)人血清三型前胶原人血清四型胶原(IV.C)人血清层粘蛋白(LN)CKD的分期:分期分期GFRml·(min·1.73m2)-1症状GFR≥90,性肾功能损伤的证据轻度异常;GFR60~89,伴有通常有高血压;甲状旁腺素(PTH)轻度升高其他慢性肾损伤证据中度异常;GFR30~59重度异常;GFR15~29常见高血压,钙吸收减少,磷排出少,甲状旁,,发性蛋白摄入减少,肾性贫血,左心室肥厚,,血钾,性欲减退已确定有肾功能衰竭;GFR出现上述所有症状(更加严重),并出现因显<15或正在接受透析 著心功能衰竭导致的水钠潴留,食欲减退,呕吐,皮肤瘙痒(没有皮肤病而出现瘙痒)肾小管三项,包括尿β2-MG、尿NAG、尿GGT/尿Cr尿β2-MG、β2-MG(β2微球蛋白明显增高,而下尿路感染则正常。尿NAGN—乙酰—B—D—氨基葡萄糖苷酶(NAG)值的测定,88%,90%,NAG,10,只能说明是尿路感染,但不能说明是上尿路感染(肾盂肾炎),还是下尿路感染(膀胱炎)。N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.30,N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG)140000ABI、S、P型同工酶[1]B、I、P、AS、B、I3NAG-B同工酶升高。NAG2种亚基组成,αβ。NAG-S2α亚基构成,NAG-AαβNAG-B、I、Pβ亚基[2~4]。NAG主要来源于肾脏本身,而不是来自血液。糖尿病患者由于存在持续高血糖使非酶糖酰化速率加快,导致组织缺氧,血液粘滞度增高[1,同时内皮细胞释放内皮素、P-物质[2,使肾小球毛细血管张力变化,引起肾血流动力学改变,使肾小球处于高滤过状态引起肾损害。本文通过定量检测尿中微量蛋白[包括白蛋白(mAlb),IgG],N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG),探讨其在糖尿病肾损害中的临床价值。1材料与方法1.1检测对象(1)临床确诊的糖152856743.2±15.5岁。(2)651.2IgG采用酶免疫法(ELISA)测定,NAG采用终点比色法,试剂盒均由福建太阳生物技术公司提供,严格按说明书操作,各组间采用tNAG含量正常参考值上限为:mA1b<19mg/L,IgG<5.0mg/L,NAG<18.5U/L,测定结果高于参考值上限者判断为阳性。-乙酰--氨基葡萄糖苷酶N-Acety--glucosaminaseNANAG14万,是一种重要的溶酶体酶,与粘多糖类及糖蛋白代谢有关,酶的活性最高值是在近曲小管PCT,低值在小球G、近端小管垂直部PR、髓袢上升支MA)和皮质集合管CCP,膀胱粘膜含量最NAG,但在小管上皮细胞变性、坏死时,NAG活性显著升高。尿中半乳糖苷酶(GAL)是一种广泛存在于人体组织细胞中的酶,属溶酶体酶。以近曲肾小管含量较多,正常人尿中含量很低,当肾组织尤持续升高,则表明肾损伤处在修复过程中,说明愈后较好。NAG/GALNAGGALGAL/NAG反之,比值越大则提示肾损伤轻微或恢复。一般GAL/NAG比值:尿毒症<慢性肾炎<肾病综合征和急性肾炎<肾炎恢复期。动态观察NAG和GAL两者变化对肾疾患的诊断、鉴别诊断、治疗监测和预后评估有重要价值。尿GGT/尿Cr尿微量蛋白(m-pro)N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG酶)r-谷氨酰转移酶(GGT)联合检测对早期肾脏损伤的诊断价值.方法:采用终点法检测NAG(cr),GGT.:m-pro/cr(7.05±5.8)mg/mmol,NAG/cr为(6.75±2.81)u/mmol,GGT/cr(23.64±15.88)u/mmol.m-pro/cr,NAG/cr,GGT/cr较正常对照组增高(P<0.01).单项及二项检测这三项指标阳性率较低,82.5%,75.8%85.2%,大大提高了阳性检出率.相关分析表明m-pro,NAG和GGT呈显著正相关.结论:联合检测尿m-pro,NAG及GGT是诊断肾脏早期损伤灵敏、可靠的实验室指标.在人体各器官中,γ-谷氨酰基转移酶(gamma-glutamyltransferase,GGT),但肾脏疾病时,血液中此酶增高并不明显,主要通过尿中排出[1],24hGGT1.标本来源:(1):20051~3108例,64例,44例,14~72(2)正常对照组:30,19例11例19~68岁。2.方法:,至次日…N乙酰-β(N

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