DB42T1786.3-2023生猪疫病防控技术 第3部分-非洲猪瘟监测样品采集技术规程

ICS65.020.30ICS65.020.30CCSB41湖 北 省 地 方 标 准DB42/T1786.3—2023生猪疫病防控技术3Preventionandcontroltechnologyofswinedisease—Part3：Preventionandcontroltechnologyofswinedisease—Part3：Technicalregulationsofsamplecollectionformonitoringafricanswinefevervirus2023010620230306湖北省市场监督管理局发布目 次前言 III引言 V1范引文件 1语定义 1品集理检法 1采前备 1样的集 2样处、存输 2检方法 2场境测品集 2采位选原则 2环监样采法 2办及活样集 2猪内境测采集 3猪外境测采集 3人监样采集 3车监样采集 4群测品集 4理案 4案录 4附录A（料）车样品集位意图 6附录B（料）种群样采数计公式 7附录C（范）群数量大采数表 8前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件是DB42/T1786《生猪疫病防控技术》的第3部分。DB42/T1786已经发布了以下部分：——第1部分：伪狂犬病监测评估技术规程；——第2部分：传染性胸膜肺炎监测评估技术规程；——第3部分：非洲猪瘟监测样品采集技术规程。本文件为首次发布。本文件实施应用中的疑问，可咨询湖北省农业农村厅，联系电话bxms@163.com。引 言（OIE）DB42/T1786——第1部分：伪狂犬病监测评估技术规程。目的在于对采用的检测技术，监测群体的规模以及监测频次提出相应的规范要求。——第2部分：传染性胸膜肺炎监测评估技术规程。目的在于对猪传染性胸膜肺炎的检测、预防和治疗提出相应的规范要求。——3生猪疫病防控技术第3部分:非洲猪瘟监测样品采集技术规程范围（GB/T18648非洲猪瘟诊断技术GB19489实验室生物安全通用要求GB/T27522畜禽养殖污水采样技术规范NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范NY/T1948兽医实验室生物安全要求通则GB/T27522畜禽养殖污水采样技术规范NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范NY/T1948兽医实验室生物安全要求通则SN/T1559-2010非洲猪瘟检疫技术规范3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。非洲猪瘟africanswinefever是由非洲猪瘟病毒（ASFV）感染家猪和野猪的一种急性、热性、高度接触性动物传染病，以高热、网状内皮系统出血和高死亡率为特征。[来源：SN/T1559-2010，3.1，有修改]监测monitoring采用规定的方法，持续对特定群体中疫病的发生、流行、分布及相关因素进行观察和检测的过程。监测样品monitoringsample取自生猪或环境，拟通过检测反映个体、群体或者环境有关状况的材料或物料。4样品采集处理与检测方法采样前准备采样人员经洗手消毒，穿戴好一次性手套、防护服、口罩、鞋套，携带采样所需物品。PBS75样品的采集NY/T541GB/T25169275222-5g6样品处理、保存与运输样品处理、保存及运输，应符合NY/T541中的规定。检测方法按GB/T18648中的非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测方法检测非洲猪瘟病毒核酸。采样位置选择原则工作中高频率接触点、不易清洗点等高风险点。环境监测样品采集方法采样位置选择原则工作中高频率接触点、不易清洗点等高风险点。环境监测样品采集方法戴一次性PE手套，将用生理盐水充分浸湿的无菌棉拭子在物体表面涂抹3-5次后，放入装有1-2ml灭菌PBS的离心管中。做好标记后冷藏或冷冻状态下保存或送检。办公及生活区样品采集办公及生活区各场所样品采集按表1规定执行。表1办公及生活区样品采集份数及采样频率采样区域采样点样品份数采样频率药房地面、墙壁、门把手、药品货架、窗户、桌椅每个采样点采集3-5个样品，每个采样区域的样品混1进行检测。每周1次库房地面、墙壁、门把手、窗户、垫板、货架、维修工具把手办公室地面、墙壁、门把手、窗户、桌椅兽医室门把手宿舍水孔门卫房地面、墙壁、门把手、窗户、桌椅、钥匙猪舍外环境监测样品采集猪舍外环境监测样品采集猪舍外环境样品采集按表3规定执行。表3猪舍外环境样品采集点、样品采集份数及采样频率人员监测样品采集表1办公及生活区样品采集份数及采样频率（续）采样区域采样点样品份数采样频率洗澡间地面、墙壁、门把手、窗户、盥洗台面、水龙头把手、排水孔每个采样点采集个样品，每个采样区域的样1样本进行检测。每周1次餐厅地面、墙壁、门把手、窗户、桌椅化验室操作台面、冰箱门外表面、地面、门把手、座椅、显微镜调焦把手厨房冰箱冰柜门把手、蔬菜筐外来物资表面饲料、兽药、食材、果蔬、办公用品及外包装每次进场前猪舍内环境样品采集按表2规定执行。表2猪舍内环境样品采集点、样品采集份数及采样频率采样区域采样点样品份数采样频率猪舍栏位3盘、料桶每个采样点域采集1-2份样品，51份。每周1次舍内过道猪舍内每个过道，选取至少3处猪舍粪道侧壁、粪沟内水样、生产工具(粪铲或扫把)各2处通风系统所有风机叶片，防护网窗口各2处猪舍水源每栋猪舍采集2处采样区域采样点样品份数采样频率主要道路（无交叉路面的为一段3个点采集混合样品每个采样点采集1-2份样5每周1次出猪台地面、墙壁、地磅、栏杆、挡板赶猪通道地面、栏杆、挡板猪舍外墙每栋舍每块水帘缝隙、窗户滑道，各3处无害化处理点地面、墙壁、门把手、窗户粪污每栋的排污口、场区主排污口污水每栋的排污口、场区主排污口洗消点所有通道、墙壁、排污口冷库墙壁、门把手、通道土壤主要道路边、猪舍周边裸露的土壤各类人员样品采集按表4规定执行。表4各类人员样品采集份数及采样频率人员分类采样部位及份数采样频率猪场隔离点人员用生理盐水浸湿的无菌棉拭子采集1每次入场前洗消人员、司机每隔3天1次生猪转运人员（司机、赶猪人员、司磅员等）每次入场前其他人员每次入场前场内办公及生产人员每月一次车辆监测样品采集2011。表5不同猪群抽样比例及采样频率7处理方案按照本文件采样方案检测样品中如非洲猪瘟病毒核酸出现阳性，则按照国家现行非洲猪瘟疫情处表5不同猪群抽样比例及采样频率7处理方案按照本文件采样方案检测样品中如非洲猪瘟病毒核酸出现阳性，则按照国家现行非洲猪瘟疫情处19489和NY/T1948GB194898档案记录猪群抽样比例（%）样品类型采样频率新引种猪100扁桃体、口鼻拭子每次引种前种公猪100扁桃体、口鼻拭子每月一次后备种猪100扁桃体、口鼻拭子生产母猪B件下，不同预期流行率、不同可接受误差的采样数量参见附录C。口鼻拭子口鼻拭子口鼻拭子保育猪口鼻拭子育成猪口鼻拭子异常猪/病死猪100尾根血拭子、深部咽拭子、口腔液、腹股沟淋巴结随时注：每5头猪样混成一份样品检测。附录A（资料性）车辆样品采集部位示意图小型车监测样品采集部位参见图1。图A.1小型车监测样品采集部位示意图货车等大型车监测样品采集部位参见图2。图A.2大型车监测样品采集部位示意图附录B（资料性）种猪群样品采集数量计算公式群内个体数量大，对抽样数量的影响可忽略不计时，采样数量的公式如下：2𝑛=𝑝(1−𝑝)×𝑧2 (B.1)2𝑒式中：P——预期流行率；z——1-α/2z90%951.641.96e——可接受的最大绝对误差。𝑛𝑎

𝑛1+𝑛=𝑁=

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