无创产前基因检测筛查胎儿性染色体异常

无创产前基因检测筛查胎儿性染色体异常孟繁杰;罗丽双;于月新;张宁;郝冬梅ObjectiveToexploretheclinicalsignificanceofnon-invasiveprenatalgenetictestingtoscreenprenatalfetalchromosomalabnormalities.MethodsPeripheralbloodwascollectedfrom6283pregnantwomenwhounderwentnon-invasiveprenatalgenetictestingatourhospital,andfetalDNAplementarybaseprincipleofsemiconductorchiptechnologywasusedtoanalyzeallsequencedsignalswithBioelectronSeq4000.Invasiveprenataldiagnosiswasperformedinhigh-riskpregnantwomenaccordingtotheresultsofthesexchromosomesequencingsignalanalysis.Ofthe6283pregnantwomenscreened,14werefoundtohavechromosomalabnormalities,andthepositiveratewas0.2.Karyotypeanalysiswasperformedon11ofthewomen;theremaining3refusedtobediagnosed.Ofthese11women,2ofthe5patientswithahighriskofXOwerediagnosedwithfetalchromosomalabnormalities(diagnosedasXO/XXXchimeraandXO,respectively),and3werediagnosedwithanormalkaryotype;5patientswithahighriskofXXYwerediagnosedasXXY;and1patientwithahighriskofXXXwasconfirmedasXXX.NIPTaccuracywasmeasuredtobe73％(8/11).Thedetectionrateoffetalchromosomalabnormalitiesbynon-invasiveprenatalgenetictestingwassignificantlyhigherintheyears2015-2016thanin2011-2014

(P

0.05).ConclusionNon-invasiveprenatalgenetictestingforscreeningchromosomalabnormalitieshasahighaccuracyrateandcouldimprovethedetectionrateoffetalchromosomalabnormalities.6283DNABioelectronSeq4000上利用半导体芯片技术应用碱基互补原理对所有测序信号进行分析,对测序信号分6283140223115XO21XO/XXX1XO),35XXYXXY;1XXXXXX.无创产前基因检测性染色体的准确73(8/11).20112014,2015年至2016P＜005).结论无创产前基因检测对性染色体异常的筛查准确率较高,在提高胎儿性染色体异常检出率上起到关键作用.【期刊名称】《中国医科大学学报》【年(卷),期】2018(047)003【总页数】4页(P240-243)【关键词】性染色体异常;无创产前基因检测;产前筛查【作者】孟繁杰;罗丽双;于月新;张宁;郝冬梅【作者单位】中国人民解放军第202医院生殖医学中心,沈阳110003;中国人民解放军第202医院生殖医学中心,沈阳110003;中国人民解放军第202医院生殖医学中心,沈阳110003;中国人民解放军第202医院生殖医学中心,沈阳110003;中国人民解放军第202医院生殖医学中心,沈阳110003【正文语种】中文【中图分类】R714.55近几年来，如何普及更精准的产前筛查项目一直是优生优育要解决的关键问题，唐氏筛查准确性低且伴有漏诊，并不能成为可信度高的筛查手段。羊水培养虽作为诊断的金标准，但很多孕妇无法接受其有创性的采样手段。孕妇血浆中存在胎儿游离DNA这一发现改变了这个局面［1-2］。随着二代测序技术的迅速发展，无创产前基因检测技术对胎儿染色体非整倍体疾病13-三体综合征、18-三体综合征、21-三体综合征的检测具有极高的准确性［3-4］，不仅如此，近几年的研究［5］发现其对性染色体的检测也具有很高准确性。本研究通过对2014年至2016年于中国人民解放军第202医院生殖中心就诊的6283例孕妇的血浆进行高通量二代测序，同时对高危患者进行有创性介入诊断，明确了无创产前基因检测对性染色体异常的筛查起到关键作用。材料与方法研究对象201412201612628316～5131.9）1934434916.09方法DNA（EDTA）5mL，41600g10min。取上清血浆，416000g10min。按照核酸提取试剂盒操作说明书进行血浆样本中游离DNA的提取。DNAB1B2qPCRDNAOneTouch2ESBioelectronSeq400018MΩPlan；准备上机文库；上机和测序。XYZZ结果无创产前基因染色体非整倍体检测的人群分布参加无创基因检测的6283例孕妇中，包含相当一部分染色体非整倍体的高危人群。这些高危人群包括高龄孕妇（分娩时年龄≥35岁），占36%（2262/6283）；血清学唐氏筛查结果显示高危的孕妇，占7%（377/6283）；彩超显示胎儿异常的孕妇，占2%（125/6283）。除此之外，还包括一些通过体外授精手段成功受孕的孕妇，占7%（440/6283），其他占49%（3079/6283）。无创产前基因检测性染色体非整倍体无创产前基因检测的6283例样本中筛查出性染色体异常14例，筛查阳性率为0.22%。这14例阳性结果中包括6例XO高危、6例XXY高危和2例XXX高危。其中，1例XO高危、1例XXY高危和1例XXX高危孕妇拒绝进一步诊断，对其1111，5XO2诊为胎儿性染色体异常（1XO/XXX1XO），3例被确诊为正常核型；5例XXY高危都被确诊为XXY；1例XXX高危确诊为XXX。本研究中无创产前基因检测性染色体异常的准确率为73%（8/11）。见表1。无创产前基因检测开展后我院性染色体异常检出率的变化2011年至2014年我院未开展无创产前基因检测前，平均每年通过羊水培养性染色体异常胎儿的检出率为0.8%，其中2011年为0.9%（2/229），2012年为1.1%（2/189），2013年为0.7%（1/154），2014年为0.6%（1/167）。2015年至2016年我院开展无创产前基因检测后，平均每年性染色体异常胎儿的检出率为4.3%，其中2015年为4.5%（5/112），2016年为4.1%（4/145）。与2011年至2014年未开展无创产前基因检测相比，2015年至2016年我院胎儿性染色体异常检出率增加，差异有统计学意义（χ2=11.394，P＜0.05）。3讨论胎儿游离DNA在母体外周血循环中的发现，标志着胎儿无创产前基因检测领域的开端，并且使得无创产前基因检测得以发展。无创产前基因检测作为一项通过分析孕妇外周血中游离DNA染色体数量的差异、对胎儿染色体非整倍体疾病21-三体综合征（唐氏综合症）、18-三体综合征（爱德华氏综合征）、13-三体综合征（帕陶氏综合征）进行无创产前筛查项目，以其高灵敏性（98.6%～100%）和（99.7%～100%）［6-10］。在我院参加无创产前628332年的应用中，对提高性染色体非整倍体异常的检出率起到了很大的作用。性染色体非整倍体异常主要包括Turner综合征（45，XO）、克氏综合征（47，XXY）、超雌综合征（47，XXX）、超雄综合征（47，XYY）。这些疾病在胎儿生长发育过程中造成不同程度的影响，包括性器官发育不全，伴有智力、神经功能障碍或其他脏器功能异常。其中，Turner综合征在胎儿中的发病率约为1/2500，并且有研究［11］Turner351.4%。克氏综合征在男婴中0.23%［12］。这些性染色体异常可能导致胎儿性分化异常，从而［13］。性染色体异常很少致死（3）［14］，B180对性染色体异常进行无创筛查是临床上需要的一种检测［10］。我院开展无创产13-三体综合征、18-三体综合征、212共有6283例孕妇在我院接受这项检测，其中36%为高龄人群，7%为人工授精受孕，这些孕妇很难接受羊水穿刺这种有创的检测手段。在检测到的14例无创产前基因检测显示性染色体异常的孕妇，仍有3例拒绝羊水穿刺诊断坚持分娩胎儿。无创产前基因检测技术虽然对于性染色体异常的检测只是一种筛查手段，但由于其高准确率的特点，可以提示孕妇在分娩之后注意观察孩子的生长发育，尽早发现、诊断和治疗患儿，在最佳阶段对患儿进行生长激素、性激素治疗和心理辅导。1Tab.1Sexchromosomeabnormalitiesdetectedbynon-invasiveprenatalgenetictesting?我院从2014年12月开始开展无创产前基因检测，在此之前，无胎儿性染色体异常的筛查方法，都是对一些高危人群通过羊水培养方法诊断出性染色体异常胎儿。2011水培养。随着对优生优育的重视，自2011年后进行羊水培养的孕妇数量有所增加。在我院开展无创产前筛查这2年里，胎儿性染色体检出率明显提高，由2011年至2014年的平均0.8%升高至2015年至2016年的平均4.3%，说明无创产前筛查可以很有效的提高性染色体异常的检出率。由此可见，无创产前基因检测的开展对性染色体异常的检出起到关键作用。参考文献：［1］LOYM，CORBEETTAN，CHAMBERLAINPF，etal.PresenceoffetalDNAinmaternalplasma［J］.Lancet，1997，350（9076）：485-487.［2］DONDORPW，DEWERTG，BOMBARDY，etal.Non-invasiveprenataltestingforaneuploidyandbeyond：challengesofresponsibleinnovationinprenatalscreening［J］.NaturePublishingGroup，2015，23（11）：1438-1450.DOI：10.1038/ejhg.2015.109.［3］PENGXL，JIANGP.BioinformaticsapproachesforfetalDNAfractionestimationinnoninvasiveprenataltesting［J］.IntJMolSci，2017，18（2）：453-462.DOI：10.3390/ijms18020453.［4］STRAVERR，OUDEJANSCB，SISTERMANSEA，etal.Calculatingthefetalfractionfornoninvasiveprenataltestingbasedongenome-widenucleosomeprofiles［J］.PrenatDiagn，2016，36（7）：614-621.DOI：10.1002/pd.4816.［5］WANGS，HUANGS，MAL，etal.MaternalXchromosomecopynumbervariationsareassociatedwithdiscordantfetalsexchromosomeaneuploidiesdetectedbynoninvasiveprenataltesting［J］.ClinChimActa，2015，444：113-116.DOI：10.1016/j.cca.2015.02.014.［6］CHETTYS，GARABEDIANMJ ，NORTONME ，etal.UptakeofnoninvasiveprenatalNIPT）inwomenfollowingpositiveaneuploidyscreening［Prenat，33（：542-546.DOI10.1002/pd.4125.［7］BIANCHIDW，PLATTLD，GOLDBERGJD ，etal.Genome-wideaneuploidydetectionbymaternalplasmaDNAsequencing ［ObstetGynecol，2012，119（5）：890-901.DOI：10.1097/AOG.0b013e-31824fb482.［8］NORTONME ，BRARH，WEISSJ，etal.Non-invasivechromosomalevaluation（NICE）ofamulticenterprospectivecohortstudyfordetectionoffetaltrisomy21andtrisomy18］.AmJObstetGynecol，2012，207（137）：131-138.DOI：10.1016/j.ajog.2012.05.021.［9］NICOLAIDESKH，SYNGELAKIA，GILM，etal.Validationoftargetedsequencingofsingle-nucleotidepolymorphismsfornon-invasiveprenataldetectionofaneuploidyofchromosomes13，18，21，X，andYPrenatDiagn，2013，33（：575-579.DOI：10.1002/pd.4103.［10］BIANCHIDW，PARKERRL，WENTWORTHJ ，etal.DNAsequencingversusstandardprenatalaneuploidyscre