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文档简介
高效液相色谱概述HighPerformanceLiquidChromatograph兽药残留检测高效液相色谱法:以液体作为流动相的色谱法。它是在经典液相色谱实验基础上,引入气相色谱的理论,在技术上采用高压输液泵,高效固定相和高灵敏的检测器,而发展起来的快速分离分析技术。具有分离效能高,检出限低,操作自动化和应用范围广的特点。2023/1/13(一)HPLC与经典LC区别经典液相色谱高效液相色谱
常压或减压
填料颗粒大
柱效低
分析速度慢
色谱柱只用一次不能在线检测
高压,40~50MPa
填料颗粒小,2~50μm
柱效高,40000~60000块/m
分析速度快
色谱柱可重复多次使用
能在线检测2023/1/13(二)HPLC与GC异同点气相色谱高效液相色谱只能分析挥发性物质,只能分析20%的化合物不能用于热不稳定物质的分析用毛细管色谱可得到很高的柱效有很灵敏的检测器如ECD和较灵敏的通用检测器(FID和TCD)流动相为气体,无毒,易于处理运行和操作容易仪器制造难度较小几乎可以分析各种物质
可以用于热不稳定物质的分析色谱柱不能很长,柱效不会很高没有较高灵敏的通用检测器①
流动相有毒,费用较高运行和操作比GC难一些仪器制造难度大①近来出现的蒸发激光光散射检测器(ELSD)是灵敏度较高的通用检测器2023/1/13流动相差别GC:流动相为惰性气体组分与流动相无亲合作用力,只与固定相作用。HPLC:流动相为液体组分与流动相和固定间有亲合作用力,为提高柱的选择性、改善分离度增加了因素,对分离起很大作用。流动相种类较多,选择余地广流动相极性和pH值的选择也对分离起到重要作用选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相可以增大分离选择性操作条件差别
GC:加温操作
HPLC:室温;高压(液体粘度大,峰展宽小)2023/1/13液相色谱仪(1)2023/1/13液相色谱仪(2)2023/1/13液相色谱仪(3)2023/1/13液相色谱仪(4)
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