第六章黄酮类化合物

第六章

黄酮类化合物Flavonoids本章内容一、定义二、生理活性与分类三、理化性质与颜色反应四、提取与分离五、黄酮类化合物波谱解析六、生物活性

一、定义

色原酮

2-苯基色原酮（2-phenylchromone)黄酮类化合物泛指两个芳环（A环与B环）经中央三碳原子（三碳链）相联结而成的一系列化合物，其基本结构为：

本章内容一、定义二、生理活性与分类三、理化性质与颜色反应四、提取与分离五、黄酮类化合物波谱解析六、生物活性生理活性:

黄酮类化合物分布广，生理活性也较广

1、降低血管脆性及异常通透性，及扩冠作用（Vitp样作用）芦丁、橙皮苷、d－儿茶素、香叶木苷等（毛细血管性出血的止血药及治疗高血压、动脉硬化的辅助药）。2、抗肝脏毒作用水飞蓟素，异水飞蓟素、及次异水飞蓟素等（治疗急、慢性肝炎，肝硬化及多种中毒性肝损伤等疾病辅助药）

3、抗炎作用芦丁、羟基芦丁、二氢槲皮素及橙皮苷－甲基查儿酮（对佐剂引发的大鼠关节炎有明显抑制作用）。二、生理活性与分类4、雌性激素样作用

染料木素、金雀花异黄素、大豆素等。有人认为其与己烯雌酚结构相似，故活性相似。

金雀花异黄素己烯雌酚

5、抗菌抗病毒作用黄芩苷，木犀草素，山奈酚等有抗菌或抗病毒作用。6、泻下作用营实苷A7、解痉作用异甘草素，大豆素等（有类似罂粟碱样的解除平滑肌痉挛的作用，治疗缓解高血压患者的头痛症状）。另外还有止咳平喘等作用（杜鹃素）。二、生理活性与分类结构分类根据黄酮类化合物A环和B环间三碳链的结构状态（氧化程度、是否成环），B环连接的位置等特点，可将主要的天然黄酮类化合物分为14大类。

1、黄酮类（flavone）

黄芩苷黄酮(2－苯基色原酮)芹菜素

木犀草素2、黄酮醇（flavonol）

黄酮醇（C3连羟基）山萘酚槲皮素R=H芦丁R＝rhaα16glc杨梅素

3、二氢黄酮（flavanone）

二氢黄酮（C2，C3氢化）甘草素R=H甘草苷R=glc橙皮素R=H橙皮苷R=芸香糖基4、二氢黄酮醇（flavanonol）

二氢黄酮醇（C2，C3氢化C3连羟基）二氢槲皮素二氢桑色素水飞蓟素（保肝）5、异黄酮（isoflavone）

异黄酮（B环连C3）大豆素R1=R2=R3=H大豆苷R1=R3=HR2=glc葛根素R2=R3=HR1=glc

解痉大豆素－7，4’－二葡萄糖苷R1=HR2=R3=glc葛根素木糖苷R1=glcR2=xylR3=H6、二氢异黄酮（isoflavanone）

鱼藤酮（杀绦虫，毒鱼）

二氢异黄酮（C2,C3氢化）

紫檀素R=CH3三叶豆紫檀苷R=glc

抗癌活性高丽槐素R=H（若4－羰基与C6’未成环，其编号不变）7、查耳酮（Chalcone）

2’－羟基查耳酮（黄色）（α－吡喃酮开环）二氢黄酮（无色）此类可看成缩的产物，同时在酸碱性条件下可与二氢黄酮相互转化，

因二氢黄酮的结构可看作是一个插烯内酯，可在碱性条件下开环，酸性环合。红花苷异甘草素8、二氢查耳酮（dihydrochalcone）

梨根苷

二氢查耳酮（α－吡喃酮开环，α，β-碳氢化）9、花色素类（anthocyanidin）

芍药花苷元R1=OCH3R2=H矢车菊苷元R1=OHR2=H飞燕草苷元R1=R2=OH天竺葵苷元R1=R2=H花色素类（4－酮基还原，以烊盐存在）10、黄烷－3，4－二醇类（flavan－3，4－diol）

无色矢车菊素R1=OHR2=H无色飞燕草素R1=R2=OH无色天竺葵素

R1=R2=H黄烷－3，4－二醇类（C3,C4氢化并连羟基）

11、黄烷－3－醇类（flavan－3－ol）

花生仁儿茶素黄烷－3－醇类（儿茶素类）（C2，C3氢化且C3连羟基）

（+）儿茶素（－）表儿茶素12、橙酮类（噢

类）（aurone）

金鱼草素橙酮类（噢类）（C环为含氧五元环）13、双苯吡喃酮类（xanthone）

双苯吡喃酮类（苯环与色原酮2，3位骈合）

龙胆

酮

14、其他类

（1）双黄酮类

由二分子黄酮相联而成，由于联结方式不同又可分3种小类：

①3’，8’－双芹菜素型

银杏素（解痉，降压，扩冠）

②8，8’’－双芹菜素型：

柏黄素

③双苯醚型

扁柏黄酮

（2）高异黄酮（homoisoflavone）

（3）黄酮木脂素类（flavonolignan）

基本结构中有苯丙素的碳架

水飞蓟素

（4）生物碱型黄酮

基本结构中有含氮的部分

本章内容一、定义二、生理活性与分类三、理化性质与颜色反应四、提取与分离五、黄酮类化合物波谱解析六、生物活性三、理化性质与颜色反应（一）性状（二）荧光（三）溶解性（四）酸碱性（五）显色反应

（一）性状多为晶性固体，少数为无定形粉末。颜色：与分子中是否存在交叉共轭体系及助色团的类型、数目及取代位置有关。黄酮、黄酮醇及其苷类——灰黄~黄色查耳酮——黄~橙黄色二氢黄酮及醇、异黄酮——不显色或微黄色

三、理化性质与颜色反应（一）性状（二）荧光（三）溶解性（四）酸碱性（五）显色反应

（二）荧光

C3-OH在紫外光下有强烈荧光（亮黄色或亮绿色）

C3-OH成苷后荧光减弱。

三、理化性质与颜色反应（一）性状（二）荧光（三）溶解性（四）酸碱性（五）显色反应

（三）溶解性黄酮苷元——难溶或不溶于H2O

易溶MeOH、EtOH等溶剂易溶稀碱液

黄酮、黄酮醇、查耳酮——难溶于水（均属平面型分子）二氢黄酮及醇——对水有一定溶解度（属非平面分子）黄酮苷——易溶于水、MeOH、EtOH等溶剂（苷元引入—OH多，则水中溶解度大）

三、理化性质与颜色反应（一）性状（二）荧光（三）溶解性（四）酸碱性（五）显色反应

（四）酸碱性分子中多Ar-OH——显酸性（可溶于碱性水溶液、吡啶等溶剂中）由于Ar-OH数目、位置不同，酸性强弱也不同以黄酮为例：

7,4‘-二-OH>7或4’-OH>一般酚-OH>5-OH（溶NaHCO3）（溶Na2CO3）（溶不同浓度NaOH）（可用于提取、分离及鉴定工作）酸性

（四）酸碱性

-吡喃酮环上1-位氧原子，因有未共用电子对——显微弱的碱性——可与强无机酸（H2SO4、HCl）等生成盐。碱性

三、理化性质与颜色反应（一）性状（二）荧光（三）溶解性（四）酸碱性（五）显色反应

（五）显色反应

1.还原反应（1）盐酸-镁粉反应（HCl-Mg）（2）四氢硼钠反应（NaBH4）

2.金属盐类试剂的络合反应（1）铝盐（4）镁盐（2）铅盐（5）氯化锶（3）锆盐（6）三氯化铁反应

3.硼酸显色反应

4.碱性试剂显色反应（五）显色反应

1.还原反应

(1)盐酸—镁粉反应（HCl-Mg）（五）显色反应

1.还原反应（2）四氢硼钠反应（NaBH4）

（五）显色反应

1.还原反应（1）盐酸-镁粉反应（HCl-Mg）（2）四氢硼钠反应（NaBH4）

2.金属盐类试剂的络合反应（1）铝盐（4）镁盐（2）铅盐（5）氯化锶（3）锆盐（6）三氯化铁反应

3.硼酸显色反应

4.碱性试剂显色反应

常可与金属类试剂反应，生成有色络合物。

（1）铝盐（2）铅盐（3）锆盐（4）镁盐（5）氯化锶（6）三氯化铁反应黄酮类化合物分子结构中多具有下列结构：（五）显色反应

2.金属盐类试剂的络合（1）铝盐

——可用于定性及定量分析（五）显色反应

2.金属盐类试剂的络合（2）铅盐（3）锆盐（ZrOCl2）（五）显色反应

2.金属盐类试剂的络合（4）镁盐（五）显色反应

2.金属盐类试剂的络合（5）氯化锶（SrCl2）（五）显色反应

2.金属盐类试剂的络合（6）三氯化铁反应

（五）显色反应

1.还原反应（1）盐酸-镁粉反应（HCl-Mg）（2）四氢硼钠反应（NaBH4）

2.金属盐类试剂的络合反应（1）铝盐（4）镁盐（2）铅盐（5）氯化锶（3）锆盐（6）三氯化铁反应

3.硼酸显色反应

4.碱性试剂显色反应（五）显色反应

3.硼酸显色反应

（五）显色反应

1.还原反应（1）盐酸-镁粉反应（HCl-Mg）（2）四氢硼钠反应（NaBH4）

2.金属盐类试剂的络合反应（1）铝盐（4）镁盐（2）铅盐（5）氯化锶（3）锆盐（6）三氯化铁反应

3.硼酸显色反应

4.碱性试剂显色反应（五）显色反应

4.碱性试剂显色反应

三、理化性质与颜色反应（一）性状（二）荧光（三）溶解性（四）酸碱性（五）显色反应本章内容一、定义二、分类三、理化性质与颜色反应四、提取与分离五、黄酮类化合物波谱解析六、生物活性

四、黄酮类化合物的提取分离根据化合物的性质，采取哪些提取方法呢？化合物的极性？方法——溶剂萃取化合物的酸性？方法——碱提酸沉化合物的解离性？方法——离子交换

四、黄酮类化合物的提取分离（一）提取

1.溶剂萃取法

2.碱提酸沉法

3.离子交换法

4.炭粉吸附法（一）提取

1.溶剂萃取法（一）提取

1.溶剂萃取法

四、黄酮类化合物的提取分离（一）提取

1.溶剂萃取法

2.碱提酸沉法

3.离子交换法

4.炭粉吸附法（一）提取

2.碱提取酸沉淀法注意：加入的酸、碱度应尽可能低。例如：芦丁的提取

四、黄酮类化合物的提取分离（一）提取

1.溶剂萃取法

2.碱提酸沉法

3.离子交换法

4.炭粉吸附法（一）提取

3.离子交换树脂法注意：应用此法主要目的是除杂质。

四、黄酮类化合物的提取分离（一）提取

1.溶剂萃取法

2.碱提酸沉法

3.离子交换法

4.炭粉吸附法（一）提取

4.炭粉吸附法主要适用于苷类成分的精制。

四、黄酮类化合物的提取分离

（一）提取

1.溶剂萃取法

2.碱提酸沉法

3.离子交换法

4.炭粉吸附法（二）分离

（二）分离根据化合物的性质，采取哪些分离方法呢？

化合物的极性大小？方法——吸附、分配色谱化合物的酸性强弱？方法——pH梯度萃取化合物的分子大小？方法——葡聚糖凝胶分子中具有特殊结构？

（如：邻二酚羟基）

方法——金属盐络合

四、黄酮类化合物的提取分离（二）分离

1.柱色谱法（硅胶、氧化铝、纤维粉、聚酰胺、葡聚糖凝胶）

2.pH梯度萃取法

3.铅盐沉淀法（二）分离

1.柱色谱法（1）硅胶柱色谱

出柱先后顺序：①若母核结构相同，而-OH取代数目不同，则-OH多的后出柱②易形成分子内氢键的-OH，其极性变小先出柱如：邻二-OH>间二-OH（Rf值）③一般出柱顺序：苷元>单糖苷>双糖苷>多糖苷（二）分离

1.柱色谱法（2）氧化铝柱色谱

通常情况下，要求在分子的结构中无酸性基团，或Ar-OH被甲基化。（3）纤维粉柱色谱

其分离原理同纸层色谱。（二）分离

1.柱色谱法（4）聚酰胺柱色谱聚酰胺（Polyamide）是由酰胺聚合而成的一类高分子物质。商品名——绵纶、尼龙。原理：——氢键吸附学说聚酰胺分子内有很多酰胺键，可与酚类、酸类、醌类、硝基化合物等形成氢键，因而对这些物质产生了吸附作用。（二）分离1.柱色谱法（4）聚酰胺柱色谱聚酰胺吸附物质的原理如下图：（二）分离1.柱色谱法（4）聚酰胺柱色谱吸附强弱取决于化合物与聚酰胺形成氢键的能力。聚酰胺对化合物的吸附力在水中有下列规律：

①形成氢键的基团越多，则吸附力越强；（二）分离

1.柱色谱法（4）聚酰胺柱色谱

②易形成分子内氢键，则吸附力减弱；（二）分离

1.柱色谱法（4）聚酰胺柱色谱

③芳香核、共轭双键多者吸附力大；（二）分离

1.柱色谱法（4）聚酰胺柱色谱以上介绍了聚酰胺对化合物吸附力的影响因素。即：①形成氢键的基团越多，则吸附力越强；（Ar-OH、-COOH、醌基、硝基等）②易形成分子内氢键，则吸附力减弱；

（邻二-OH、3-OH4-酮基、5-OH4-酮基等）

③芳香核、共轭双键多者吸附力大；（二）分离

1.柱色谱法（4）聚酰胺柱色谱

聚酰胺柱色谱在分离黄酮类化合物时有下述规律：（二）分离

1.柱色谱法（4）聚酰胺柱色谱①不同类型黄酮化合物的出柱先后顺序：

异黄酮

>二氢黄酮醇

>黄酮

>黄酮醇

（二）分离

1.柱色谱法（4）聚酰胺柱色谱②苷元相同，出柱先后顺序：

叁糖苷

>双糖苷

>单糖苷

>苷元

③查尔酮往往比相应的黄酮类化合物难于洗脱。（二）分离

1.柱色谱法（4）聚酰胺柱色谱在聚酰胺柱上，常用的洗脱溶剂如下：水甲醇丙酮氢氧化钠/H2O

甲酰胺二甲基甲酰胺尿素/H2O（洗脱能力：弱

强）（二）分离

1.柱色谱法（4）聚酰胺柱色谱聚酰胺色谱的应用：黄酮类、酚类、生物碱类、萜类、甾体、糖类等（二）分离

1.柱色谱法（5）葡聚糖凝胶柱色谱葡聚糖凝胶（Sephadexgel）

用于黄酮类化合物的分离，主要有两种型号：

Sephadex-G型SephadexLH-20型（羟丙基葡聚糖凝胶）（二）分离

1.柱色谱法（5）葡聚糖凝胶柱色谱作用机理：分离游离黄酮时——吸附作用

（取决于游离Ar-OH的数目，

Ar-OH少则先出柱）分离黄酮苷是——分子筛起主导作用

（分子量大的先出柱）（二）分离

1.柱色谱法（5）葡聚糖凝胶柱色谱常用洗脱溶剂：①碱性水溶液（0.1mol/LNH4OH）（含盐水溶液——0.5mol/LNaCl等）②醇及含水醇③其它溶剂含水丙酮、甲醇-氯仿等。

四、黄酮类化合物的提取分离（二）分离

1.柱色谱法（硅胶、氧化铝、纤维粉、聚酰胺、葡聚糖凝胶）

2.pH梯度萃取法

3.铅盐沉淀法（二）分离

2.pH梯度萃取法

适用于酸性强弱不同的黄酮苷元的分离。

四、黄酮类化合物的提取分离

（二）分离

1.柱色谱法（硅胶、氧化铝、纤维粉、聚酰胺、葡聚糖凝胶）

2.pH梯度萃取法

3.铅盐沉淀法（二）分离

3.铅盐沉淀法

根据分子中某些特定官能团进行分离。

四、黄酮类化合物的提取分离（一）提取

1.溶剂萃取法

2.碱提酸沉法

3.离子交换法

4.炭粉吸附法（二）分离

1.柱色谱法2.pH梯度萃取法

3.铅盐沉淀法一、纸色谱(纤维素色谱)PC是小量制备性分离黄酮类化合物较为有效的方法。一般用30张（46cm×57cm）的滤纸分离后即可得到足够水解和紫外分析的样品。色谱法在黄酮类化合物鉴定中的应用色谱法检识除具与对照品或“参照物”进行可见光、荧光及显色剂显色斑点颜色及Rf检识外，还具色谱分离排除杂质干扰的性质，其检识的专属性和可靠性高于化学检识。常用的色谱检识条件有：

（1）展开方式及条件①苷类多用双向展开。第一向

醇性系统:BAW（4:1:5），TBA（3:1:1），水饱和n-BuOH等。

展开前,滤纸用下层水饱和，此向主要利用混合物的分配系数不同进行正相分配色谱分离（移动相醇的亲水性小于固定相）。第二向水性系统（多为酸水或电解质）2%～6%HOAC，HOAC-浓HCl-H2O（30:3:10），3%NaCl等。

主要以反相分配色谱为主进行分离(利用化合物极性不同进行分离)。

②苷元

多用一向

醇性系统，

或用苯-HOAC-H2O（125:72:3），

CHCl3-HOAC-H2O(13:6:1),

酚-水（4:1）,

或HOAC浓HCl-H2O（30:3:3）。③花色素及苷

多用含HCl或HOAC水性系统。

（2）分子结构与Rf值的关系

①苷元

水性系统（如3-5%HOAC）

平面型苷元（黄酮、黄酮醇、查二酮）亲水性差，共轭程度高，极性强，

Rf<0.02(几乎不动)。非平面型苷元（二氢黄酮、二氢黄酮醇、二氢查二酮）亲水性较强，共轭程度底，极性弱，Rf0.10～0.30。②苷与苷元醇性系统（正相分配，羟基越多，亲水性越强，越Rf小）苷元>单糖苷>双糖苷>三糖苷水性展系统（反相分配，羟基越多，亲水性越强，越Rf大）苷元<单糖苷<双糖苷<三糖苷

纤维素色谱CC的色谱分离条件可参考PC的移、固相条件（滤纸的本质是纤维素），但纤维素质地轻，装柱较难，因此用得不多。二.薄层色谱检识

1.聚酰胺TLC现多用聚酰胺薄膜进行黄酮苷元及苷的检识，其（国产的聚酰胺薄膜

浙江

黄岩）分离效果优于硅胶TLC及PC。其色谱规律与柱色谱相同。展开剂

游离黄酮

多用纯有机溶剂系统氯仿-甲醇（94∶6，96∶4）氯仿-甲醇-丁酮（12∶2∶1）苯-甲醇-丁酮（90∶6∶4，84∶8∶8，60∶20∶20）等。

黄酮苷

多用醇—水系统甲醇-乙酸-水（90∶5∶5）甲醇-水（1∶1）丙酮-水（1∶1）异丙醇-水（3∶2）水-乙醇-丁酮-乙酰丙酮（65∶15∶15∶5）水-正丁醇-丙酮-乙酸（16∶2∶2∶1）等。

2.硅胶TLC检识游离黄酮多于黄酮苷。

展开剂

游离黄酮

甲苯-甲酸甲酯-甲酸（5∶4∶1，甲苯与甲酸的比例可调整）适合分离二氢黄酮二氯甲烷-乙酸-水（2∶1∶1）苯-乙酸（45∶4）苯-甲醇-乙酸（35∶5∶5）氯仿-甲醇（8.5∶1.5，7∶0.5）苯-甲醇（95∶5）黄酮苷

黄酮O-苷、黄酮C-苷和黄酮醇O-苷类

正丁醇-乙酸-水（3∶1∶1）二氢黄酮O-苷类

氯仿-乙酸（100∶4）

甲酸-乙酸乙酯-水（9∶1∶1）氯仿-乙酸乙酯-丙酮（5∶1∶4）氯仿-甲醇-水（65∶45∶12）等苯-乙酸（100∶4）

氯仿-乙酸-甲醇（90∶5∶5）等。

本章内容一、定义二、分类三、理化性质与颜色反应四、提取与分离五、黄酮类化合物波谱解析六、生物活性

五、黄酮类化合物波谱解析在黄酮类化合物结构分析中的应用主要有：（一）紫外光谱（UV）（二）核磁共振——1H-NMR

（三）核磁共振——13C-NMR

（四）质谱（MS）

五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）多数黄酮类化合物在紫外（UV）谱中主要由两个吸收带组成。苯甲酰基系统桂皮酰基系统

(benzoyl)(cinnamoyl)BandIIBandI220~280nm300~400nm

五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）黄酮类化合物结构中的交叉共轭体系苯甲酰基系统桂皮酰基系统

(benzoyl)(cinnamoyl)BandIIBandI220~280nm300~400nm

五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）黄酮类化合物在MeOH溶液中的紫外（UV）光谱特征

◆黄酮及黄酮醇类

◆查尔酮及橙酮类

◆异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇类

五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）

◆

黄酮及黄酮醇类

五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）

◆

黄酮类在MeOH中——B环氧代对BandI的影响

五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）

◆

黄酮类在MeOH中——A环氧代对BandII的影响

五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）

◆

利用在MeOH中的UV区别黄酮和黄酮醇类BandI

五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）黄酮类化合物在MeOH溶液中的紫外（UV）光谱特征

◆

黄酮及黄酮醇类

◆查尔酮及橙酮类

◆异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇类

五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）

◆

查耳酮及橙酮类波谱特征：

带I强——主峰带II弱——次强峰2,3,4-三羟基查耳酮3’,4’-二羟基橙酮

五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）◆

查耳酮类

BandII——220~270nmBandI——340~390nm

有时分裂为Ia（340~390）

Ib（300~320）

环上引入氧取代基（同黄酮及黄酮醇类）

——使带I红移（2’-OH影响最大）

2’-OH甲基化或苷化——使带I紫移15~20nm

五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）◆

橙酮类

常出现3~4个吸收峰主峰（BandI）——370~430nm天然来源的橙酮——388~413nm五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）黄酮类化合物在MeOH溶液中的紫外（UV）光谱特征

◆

黄酮及黄酮醇类

◆

查尔酮及橙酮类

◆异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇类

五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）

◆异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇7-羟基异黄酮4’,7-二羟基二氢黄酮

五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）

◆异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇共同特点：带I弱——B环不能与吡喃酮环上羰基共轭带II强——主峰根据主峰位置——区别：异黄酮——245~270nm

二氢黄酮、二氢黄酮醇——270~295nm五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）黄酮类化合物在MeOH溶液中的紫外（UV）光谱特征

◆

黄酮及黄酮醇类

◆

查尔酮及橙酮类

◆

异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇类

五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）

加入诊断试剂后引起的位移及其在结构测定中的意义

下面以黄酮及黄酮醇为例进行说明◆NaOMe◆

NaOAc◆NaOAc/H3BO3◆AlCl3、AlCl3/HCl五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）◆NaOMe

NaOMe是个强碱，在一定程度上可使黄酮及黄酮醇上所有的Ar-OH解离。因此，将使BandI及II向红位移。1.BandI——+40~60nm强度不降——有4’-OH

+50~60nm强度下降——无4’-OH

有3-OH

五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）◆NaOMe

2.

立即测试光谱=5分钟后测试光谱

（即：BandI和BandII吸收谱不随时间延长而衰退）说明——无3,4’-二-OH结构（free）

（即无对碱敏感的取代图式）3.

立即测试光谱≠5分钟后测试光谱说明——可能存在3,4’-二-OH结构（free）注：对碱敏感的取代图式

——3,4’-3,3’,4’-5,6,7-5,7,8-3’,4’,5’-等

五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）◆NaOMe◆

NaOAc◆NaOAc/H3BO3◆AlCl3、AlCl3/HCl五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）◆NaOAc

NaOAc的碱性<NaOMe，故只能使黄酮及黄酮醇上酸性较强的酚-OH解离，如7-，3-及4’-OH。

NaOAc（未熔融）

BandI——在长波一侧有肩峰示有4’-OH

但无3-及/或7-OHBandII——+5~20nm——示有7-OH五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）◆NaOAcNaOAc（熔融）

BandI——+40~65nm——有4’-OH

（强度不降）谱图随时间处长而衰退——有碱敏感系统

五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）◆NaOMe◆NaOAc◆NaOAc/H3BO3◆AlCl3、AlCl3/HCl五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）◆

NaOAc/H3BO3

（H3BO3可与邻二酚-OH螯合）

BandI——+12~30nm——B环有邻二酚-OHBandII——+5~10nm——A环有邻二酚-OH

（不包括5,6-位）

五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）◆NaOMe◆NaOAc◆NaOAc/H3BO3◆AlCl3、AlCl3/HCl五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）◆

AlCl3、AlCl3/HClAlCl3可与下列结构系统螯合，并引起相应的吸收带向红位移。

其中，邻二酚-OH形成的络合物不稳定，加少量酸水即可分解。反应过程如下：五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）◆AlCl3、AlCl3/HCl

黄酮类化合物与AlCl3形成的络合物五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）◆AlCl3、AlCl3/HCl

AlCl3/HCl

=

AlCl3谱图——结构中无邻二酚-OHAlCl3/HCl≠AlCl3谱图——可能有邻二酚-OH

BandI

紫移30~40nm——B环有邻二酚-OH

紫移50~65nm——A、B环均有邻二酚-OH五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）◆AlCl3、AlCl3/HCl

AlCl3/HCl

=

MeOH谱图——无3-及/或5-OHAlCl3/HCl≠

MeOH谱图——可能有3-及/或5-OH

BandI

红移

35~55nm——只有5-OH

红移

60nm——

只有3-OH

红移

50~60nm——可能同时有3-及5-OH

红移

17~20nm——除5-OH外尚有6-含氧取代

五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）◆NaOMe◆NaOAc◆NaOAc/H3BO3◆AlCl3、AlCl3/HCl

五、黄酮类化合物波谱解析（一）紫外光谱（UV）◆

MeOH——了解结构类型、-OH取代数目等；◆

MeOH/NaOMe——了解是否有Ar-OH；◆

MeOH/NaOAc——了解酸性强的Ar-OH，即7、4’-OH；◆

NaOAc/H3BO3——了解邻二Ar-OH；◆

AlCl3、AlCl3/HCl——邻二Ar-OH或C3、C5-OH一般测定程序：五、黄酮类化合物波谱解析在黄酮类化合物结构分析中的应用主要有：

（一）紫外光谱（UV）（二）核磁共振——1H-NMR

（三）核磁共振——13C-NMR

（四）质谱（MS）

五、黄酮类化合物波谱解析（二）1H-NMR溶剂——

氘代氯仿、氘代二甲基亚砜（DMSO-d6）

氘代吡啶等。也可作成三甲基硅醚衍生物，溶于四氯化碳中进行测定。1H-NMR在黄酮类化合物结构分析中的应用

五、黄酮类化合物波谱解析（二）1H-NMR

1.A环质子2.B环质子

3.C环质子4.糖端基碳上的质子

5.乙酰氧基上的质子

6.甲氧基上的质子从以下几个方面介绍：

五、黄酮类化合物波谱解析（二）1H-NMR1.A环质子(1)5,7-二羟基黄酮类黄酮、黄酮醇、异黄酮二氢黄酮、二氢黄酮醇

五、黄酮类化合物波谱解析（二）1H-NMR1.A环质子

(1)5,7-二羟基黄酮类

五、黄酮类化合物波谱解析（二）1H-NMR

1.A环质子2.B环质子

3.C环质子4.糖端基碳上的质子

5.乙酰氧基上的质子

6.甲氧基上的质子

五、黄酮类化合物波谱解析（二）1H-NMR2.B环质子(1)4’-氧取代黄酮类化合物

五、黄酮类化合物波谱解析（二）1H-NMR2.B环质子(2)3’,4’-二氧取代黄酮及黄酮醇类化合物

五、黄酮类化合物波谱解析（二）1H-NMR

依据H-2’及H-6’的化学位移，可以区别黄酮及黄酮醇的3’,4’-位上是

3’-OH,4’-OMe3’-OMe,4’-OH。2.B环质子

(2)3’,4’-二氧取代黄酮及黄酮醇类化合物

五、黄酮类化合物波谱解析（二）1H-NMR

1.A环质子

2.B环质子

3.C环质子4.糖端基碳上的质子

5.乙酰氧基上的质子

6.甲氧基上的质子

五、黄酮类化合物波谱解析（二）1H-NMR孤立芳氢的单峰信号易与之相混——注意3.C环质子(1)黄酮类

五、黄酮类化合物波谱解析（二）1H-NMR3.C环质子(2)异黄酮类

五、黄酮类化合物波谱解析（二）1H-NMR3.C环质子(3)二氢黄酮及二氢黄酮醇

五、黄酮类化合物波谱解析（二）1H-NMR3.C环质子(4)查耳酮及橙酮类

五、黄酮类化合物波谱解析（二）1H-NMR

1.A环质子

2.B环质子

3.C环质子4.糖端基碳上的质子

5.乙酰氧基上的质子

6.甲氧基上的质子

五、黄酮类化合物波谱解析（二）1H-NMR黄酮苷类化合物上糖的质子信号（端基质子）黄酮醇-3-O-葡萄糖苷5.70~6.00

黄酮醇-3-O-鼠李糖苷5.00~5.10

黄酮类-7-O-葡萄糖苷4.80~5.20

黄酮类-4’-O-葡萄糖苷黄酮类-5-O-葡萄糖苷黄酮类-6及8-C-糖苷4.糖端基碳上的质子

五、黄酮类化合物波谱解析（