六味地黄颗粒中丹皮酚和马钱苷的测定

六味地黄颗粒中丹皮酚和马钱苷的测定课程：药品检验技术一实验目的

了解紫外可见分光光度法和高效液相色谱法在测定中药制剂中成分含量中的应用及其优缺点；了解六味地黄的组成、性质以及其成分测定的方法；掌握中药制剂含量测定中检测对象的选择原则。二实验原理（一）处方：熟地黄320g，酒萸肉160g，牡丹皮120g，山药160g，茯芩120g，泽泻120g。

《中国药典》规定，本品每袋含牡丹皮按丹皮酚（C9H10O3）计，不得少于7.2mg，本品每袋含酒萸肉按马钱苷（C17H26O10）计，不得少于4.8mg。二实验原理

（二）

测定原理六味地黄颗粒由熟地黄、酒萸肉、牡丹皮、山药、茯苓、泽泻六味中药制成。其中牡丹皮、酒萸肉是其主要药味。

牡丹皮的特征性成分丹皮酚具挥发性，且在紫外光区有吸收，因此可以采用水蒸气蒸馏提取，紫外可见分光光度法测定含量，吸光系数法定量。

二实验原理

马钱苷属环烯醚萜苷类,是酒萸肉中的主要药效成分之一，具有对非持异性免疫功能有增强作用，能促进巨噬细胞吞噬功能，延缓衰老；有良好的防癌防辐射功效和抗炎、抗菌作用，《中国药典》（2015年版）规定酒萸肉以其中马钱苷为指标，采用高效液相色谱法测定其含量。三实验试剂与仪器2.仪器

紫外-可见分光光度计，水蒸气蒸馏装置，高效液相色谱仪，具塞锥形瓶，回流装置，容量瓶，移液管，研钵，柱层析色谱柱。1．实验试剂四操作方法1.牡丹皮中丹皮酚的含量测定取六味地黄颗粒10袋，精密称定内容物重量，研细，取约2g，精密称量，用水蒸气蒸馏，收集馏出液约450mL，置500mL容量瓶中，加水稀释至刻度。利用紫外-可见分光光度计，在274nm波长处测定吸光度，按丹皮酚（C9H10O3）吸收系E1cm1%

数为862计算，即得。四操作方法2.酒萸肉中马钱苷的含量测定（1）色谱条件与系统适用性实验以十八烷基硅基键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（15：85）为流动相；柱温为40℃；检测波长为236nm。理论板数按马钱苷峰计算，应不低于4000。（2）对照品溶液的配制取马钱苷对照品适量，精密称量，用50%甲醇配制成每1mL含20μg的溶液。四操作方法（3）供试照品溶液的配制

取装量差异项下的本品内容物适量，研细，取约1g，精密称量，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，密塞，称定重量，加热回流1h。放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减少的重量，摇匀，过滤。精密量取续滤液10mL，加在中性氧化铝柱（100~200目，4g，内径为1cm）上，用40%甲醇50mL洗脱，收集流出液及洗脱液，蒸干，残渣用50%甲醇适量使溶解，并转移至10mL容量瓶中，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液，即得。四操作方法（4）测定法

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，进样，测定。根据对照品、供试品的峰面积，计算马钱苷的含量。本品每袋含酒萸肉按马钱苷（C17H26O10）计，不得少于4.8mg。1.水蒸气蒸馏过程中要时刻注意安全管中水位的变化。2.中性氧化铝柱的填充要均匀。3.采用外标测定含量时，应严格定量操作，且需要平衡3次以上的操作。五注意事项1.中成药含量测定中检测对象的选择原则有哪些？本品为什么选择丹皮酚和马钱苷进