神经母细胞瘤组织MYCN扩增水平

神经母细胞瘤组织MYCN扩增水平

与Ki-67LI等生物学指标的关系王会娟王焕民宫丽平伏利兵

秦红

吕蓓蓓神经母细胞瘤(NB)

儿童最常见的颅外实体恶性肿瘤具有自然消退和快速进展两种截然不同的生物学特点

N-Myc基因扩增主要发生于进展期NB中，与肿瘤的侵袭行为和不良预后密切相关

为NB危险度的评估、治疗方案的选择、预后的判断提供分子学依据

N-Myc基因

是一种具有代表性的细胞增殖标记，

Ki-67LI定量地反映肿瘤的增殖情况。

Ki-67标记指数(LabelingIndex,LI)：指肿瘤细胞中Ki-67阳性细胞所占的百分比。

Ki-67抗原N-Myc扩增与Ki-67LI和NB的临床病理因素间分别有何关系？N-Myc扩增与Ki-67LIN-Myc扩增与Ki-67LI间有何关系？

2008.9至2009.330例石蜡包埋组织标本神经母细胞瘤（NB）节细胞性神经母细胞瘤(GNB)研究对象

性别：男：19例，女：11例；年龄：2月～9岁6月＜18个月13例，≥18个月17例原发部位：肾上腺23例，非肾上腺7例

研究对象

病理分型：

NB：分化型8例，分化差型7例，未分化型1例，不明确型7例. GNB:7例临床参照INSS系统分期：

1期5例，2期4例，3期6例，

4期11例，4S期4例研究对象研究内容N-Myc扩增与Ki-67LI分别与NB的临床病

理因素(性别、年龄、原发部位、分期、分

型、NSE、VMA)间的关系。2.N-Myc扩增与Ki-67LI间的关系。

N-Myc基因的检测：FISH探针：位点特异性N-myc/CEP2双色探针

实验方法N-Myc基因

获得：拷贝数4～9个；

扩增：拷贝数≥10个。

Ki-67LI:

免疫组化二步法

抗体:鼠抗人Ki-67抗原免疫组化单克隆抗体阳性细胞是指细胞核内出现棕黄色颗粒

<10%（－）

10%～30%(+)≥30%(++)实验方法SPSS11.5软件确切概率法。秩和检验(Mann-WhitneyUtest，

Kruskal–Wallistest)。

P＜0.05认为有统计学意义。统计学分析1.15例出现扩增（拷贝数≥10个），扩增率为16.67%

FISH检测N-Myc拷贝数的结果1扩增率1、2、4S期15.38%（2/13）

3、4期17.65%（3/17）P＞0.05

病理诊断:NB

均为男性，就诊时年龄均＞18个月

3例为进展期，2例为早期分化差型FISH检测N-Myc拷贝数的结果1例数/

诊断性别/

年龄原发部位INSS分期病理分型Ki-67LIMYCN拷贝数术前化疗1/NBM/6岁4月左肾上腺3分化型阴性>25是2/NBM/3岁左肾上腺3未分化型80%>15是3/NBM/21月左肾上腺1分化差型50%>15否4/NBM/28月右肾上腺3不明确80%>50是5/NBM/5岁左肾上腺2分化差80%>15是表1.5例扩增病例的临床资料N-MycP值

扩增（≥10）获得（4～9）无异常INSS分期1+2+4S13256Pa=0.2223+4173131Pb=0.021Pc=0.025组织学分型NB235153Pa=0.081GNB7034Pb=0.066Pc=0.033N-Myc拷贝数水平与临床病理因素的关系2Pa

：N-Myc扩增组和N-Myc无异常组之间的P值;Pb:N-Myc获得组和N-Myc无异常组之间的P值;Pc:N-Myc增多组（获得组+扩增组）与无异常组之间的P值。病例数表2.2.1

N-Myc扩增水平在另外6组（包括患者性别、年龄、肿瘤原发部位、是否接受化疗以及血清

NSE、24小时尿VMA水平）中的差异均无统计学意义（P＞0.05）。N-Myc拷贝数水平与NB临床病理因素的关系2N-Myc无异常，40×100绿色信号代表N-Myc基因附图N-Myc扩增40x100绿色信号代表N-Myc基因Ki-67LI

与NB其它临床因素间的关系3表3.Ki-67标记指数与肿瘤组织学类型之间的关系例数Ki-67LI平均秩次P值―+++NB23451418.130.003GNB75206.86P<0.05，说明两组的Ki-67LI有显著差异。由于NB组的平均秩次是18.13大于GNB组的平均秩次6.86，故NB组的Ki-67LI明显大于GNB组。Ki-67LI

与NB其它临床因素间的关系3

例数Ki-67LI平均秩次P值―+++病理分型

分化型81345.880.026未分化+分化差型710711.13P<0.05，说明两组的Ki-67LI有显著差异。由于未分化+分化差型组的平均秩次是5.88，大于组分化型组的平均秩次11.13，故Ki-67在未分化型和分化差型中的表达明显高于分化型表4.Ki-67LI与NB病理类型之间的关系Ki-67LI

与NB其它临床因素间的关系3

例数Ki-67LI平均秩次P值―+++术前化疗是136168.930.013否1003716P<0.05，说明两组的Ki-67LI有显著差异。由于化疗组的平均秩次是8.93，小于未化疗组的平均秩次16，故化疗组Ki-67表达低于未接受化疗组。表5.Ki-67LI与化疗的关系Ki-67LI在年龄、性别、肿瘤的分期各组中的差异无统计学意义Ki-67LI

与NB其它临床因素间的关系3Ki-67（－）4x10附图Ki-67LI（+）10x10Ki-67LI（++）10x10Ki-67LI>50%10x10MYCN扩增水平与Ki-67LI

之间的关系4例数Ki-67LIMeanrankP值―+++MYCN①扩增510423.000.092

获得1857614.67

无异常731312.29②扩增510423.000.036

非扩增2588714.00③获得+扩增23671016.480.267

无异常731312.29

总之，N-Myc扩增与Ki-67LI在NB分期、分型中的意义并不是完全一致的。

N-Myc扩增率仅为20-25%，而Ki-67LI容易受化疗的影响，因此，两者结合分析肿瘤的侵袭行为和恶性程度会更加合理。Ki-67LI在NB中明显高于GNB，在NB分化差型中的表达明显高于分化型；化疗影响Ki-67的表达。2N