生物材料检验质量控制

第四节生物材料检验

质量控制1实际上就是对实验误差进行控制

生物材料检验的特点：样品基体较复杂，大多数被测物质是痕量组分，以µg/g、g/ml或ng/g、ng/ml级水平存在；痕量分析的突出问题之一：易受玷污，造成被测组分的损失或引入被测组分或其它干扰组分，从而使测定结果产生误差。2检验人员应了解整个分析过程中可能出现哪些误差？误差产生原因及其对测定结果的影响；采取有效措施，使误差控制在允许限度内；同时对分析结果进行质量评价，及时发现问题并加以纠正。3一、生物材料检验质量控制一般方法分析误差产生于分析全过程：样品采集样品处理分析方法仪器和器皿化学试剂和实验用水数据记录与处理检验人员的技术水平实验环境4实验室质量控制包括实验室内部质量控制intralaboratorialqualitycontrol实验室间质量控制interlaboratorialqualitycontrol

5（一）实验室内质量控制的基本条件1．实验室管理

应建立、健全各项规章制度和标准操作规程，要有经验丰富的专业管理人员，从制度上杜绝质量事故的发生，保证各项质量控制措施的实施。62．检验人员培训检验人员的责任感和技术水平直接影响分析质量，必须对检验人员进行专业技术培训，不断更新知识，进行操作训练和技术等级考核，强化对分析质量保证工作重要性的认识。73．实验室环境实验室温度、湿度实验室空气中悬浮尘埃的污染如实验室空气中尘埃达200µg/m3时，对金属元素测定将带来严重影响。

84．仪器设备及容器应进行定期检定，以确保实验测量可追溯到已有的国家计量基准，并进行经常性维护，保持其处于良好运行状态。实验用容器表面的玷污和容器材料中杂质成分的溶出及表面吸附是样品污染的重要来源，不同材料的容器各具特性，适于不同的分析项目。

9例如：微量元素分析所用容器：聚四氟乙烯为最佳，其次为聚乙烯或聚丙烯制品；玻璃容器：硅硼玻璃；容器使用前要选用合适方法进行清洗，如3%HNO3(CP)浸泡至少一天，自来水水冲洗，再用纯水冲洗干净，于无烟尘处晾干保存待用。有机成分的分析则多使用玻璃器皿。105．化学试剂剂和实验用水水化学试剂和实实验用水的纯纯度是空白值值的主要来源源，直接影响响分析结果的的可靠性，特特别是生物样样品前处理过过程中要使用用较大量的各各种酸对样品品进行消解，，必须使用用纯度符合要求求的化学试剂，，纯水的电电导率应<1µs/cm。11（二）测试过过程中的质量量控制1．分析方法选选择优先选择国家标准准分析方法或或有关学术团团体推荐的方方法，若无国标方法法，应选择灵灵敏度高、选选择性好、准准确度高、精精密度好和相相对快速的分分析方法。122．样品的采采集和外理采样和样品制制备时，采样样器具、器皿皿及所用试剂剂是污染的又又一重要来源源，如微量元元素测定，采采样时若使用用不锈钢刀、、剪、针头等等，其中Mn、Cr、Ni等的含量与生生物样品中这这些元素的含含量存在巨大大的浓度差，，使这些元素素扩散至生物物样本中而产产生玷污；132．样品的采采集和外理整个分析过程程往往需要较较多的操作，，分析人员使使用化妆品、、染发剂、抽抽烟、手触摸摸样品等都可可能玷污样品品，也应引起起重视。143．．分分析析误误差差预预评评价价检验验人人员员用用选选定定的的方方法法反反复复多多次次进进行行实实验验操操作作，，以以正正确确掌掌握握分分析析方方法法的的原原理理、、实实验验过过程程、、条条件件及及特特性性，，并并绘绘制制出出校校正正曲曲线线。。153．分析析误差预预评价对空白溶溶液、标标准溶液液（取测测定上限限浓度的的0.2倍和0.8倍两个浓浓度）、、样品、、加标样样品四类类溶液进进行平行双样样测定，每每天测定定一批，，共测定定6批。16由测定结结果对分分析误差差、精密密度和准准确度进进行预评评价：由空白实实验的批批内标准准偏差计计算分析析方法的的检出限限；比较各溶溶液的批批内变异异和批间间变异，，检验变变异差异异的显著著性，以以判断分分析方法法的精密密度；17由测定结结果对分分析误差差、精密密度和准准确度进进行预评评价：比较样品品、加标标样品与与标准溶溶液测定定结果的的标准偏偏差，判判断样品品中是否否存在有有影响测测定精密密度的干干扰物质质，并确确定有无无消除干干扰物质质的必要要；计算样品品的加标标回收率率，判断断样品中中是否存存在改变变分析准准确度而而不影响响方法精精密度的的组分。。18分析误差差预评价价用标准参考考物质与试样在在完全相相同的条条件下进进行测定定，将标标准物质质测定结结果与给给出的保保证值相相比较，，若其误误差符合合方法规规定的不不确定度度，说明明方法和和测定过过程无系系统误差差，结果果准确可可靠。通过以以上实实验，，确认认分析析方法法的精精密度度、准准确度度合格格后，，即可可运用用于常常规样样品的的检验验工作作。19（三））绘制制质量量控制制图简称质质控图图目的：：对日日常分分析系系统进进行经经常性性核对对，以以便及及时发发现问问题、、分析析原因因、采采取措措施。。20均值控控制图图最简单和常常用的质控控图以逐步累积积的20次以上“质控标准样样”的测定结结果计算出出平均值X和标准差S，以平均值值X为中心线，，以X±2S作为上、下下警告限，，X±3S作为上、下下控制限作作图，再将将各测定值值点在图上上，并用直直线将其连连接。如图图1-1所示21均值控制图图22常规样品分分析过程中中，每分析一批批样品(或每每测测定定10个样样品品)插入入一一个个““质质控控样样””，，与样样品品平平行行进进行行测测定定。。将每每次次测测定定未未知知样样时时，，所所分分析析的的“质质控控样样””所得得的的结结果果，，点点在在质质控控图图上上。。“质质控控样样””测测量量值值落落在在警警告告限限内内———分析析数数据据准准确确可可靠靠；；23落在在警警告告限限外外、、控控制制限限内内———测定定结结果果可可以以接接受受，，质质量量仍仍在在控控制制中中，，但但同同时时提提示示分分析析结结果果开开始始变变劣劣，，可可能能存存在在失失控控倾倾向向，，应应进进行行初初步步检检查查，，并并采采取取相相应应的的校校正正措措施施，，但但结结果果仍仍可可保保留留；；超出控控制限限——测定过过程失失控，，应停停止测测定，，找出出原因因加以以纠正正，并并重新新测定定该批批全部部样品品。24质控图图类型型多种类类型：：均值控控制图图空白实实验值值控制制图回收率率控制制图均值-极差控控制图图等。。25（四））实验验室间间质量量控制制定义：：为保保证各各实验验室间间分析析结果果有可可比性性，常常由上上级主主管部部门及及中心心实验验室对对其所所属各各实验验室及及其分分析人人员的的分析析质量量进行行定期期或不不定期期的考考核，，称为为实验验室间间质量量控制制。常用用的的方方法法有有：：标准物质检验法双样样图图法法261．．标标准准物物质质检检验验法法将考考核核样样品品（（标准准物物质质）分分发发给给各各参参加加考考核核的的实实验验室室，，要要求求按按选选定定的的统统一一方方法法对对其其进进行行测测试试，，并并上上报报测测定定结结果果。。27将上上报报的的测测试试结结果果进进行行统统计计处处理理，，分分别别计计算算各各实实验验室室的的测测定定结结果果与与考考核核样样品品保保证证值值（（真真值值））的的相相对对误误差差，，或或将将考考核核样样品品的的保保证证值值（（中中心心值值及及不不确确定定度度））中中的的不不确确定定度度适适当当展展宽宽后后，，用用以以评评价价各各实实验验室室的的测测定定结结果果。。最后后将将结结果果返返回回各各实实验验室室，，以以检检查查是是否否存存在在系系统统误误差差，，并并查查找找原原因因，，加加以以纠纠正正。。282．．双双样样图图法法（（尤尤登登试试验验法法））将组组分分相相同同但但浓浓度度相相差差不不大大的的两两个个样样品品A、B分发发给给各各实实验验室室，，用用统统一一的的方方法法对对样样品品进进行行测测定定，，然然后后在在坐坐标标纸纸上上以以样样品品A的浓浓度度为为X横轴轴、、样样品品B的浓浓度度为为Y纵轴轴绘绘图图。。29将样品A、B的真值（或均均值）标在图图上作为中心心点，通过该该点绘一条垂垂线为A(X)值线，绘一条条水平线为B(Y)值线。测定结果落在在中心点附近近时，表示结结果的准确度度高，距离远远时表示准确确度低。30图中，X（平均值）垂垂直线和Y（平均值）水水平线将坐标标系分成四个个象限，即++，――，+―，和―+象限。若各实验室间间不存在系统统误差，代表表各实验室测测定值的点应应随机分布在在四象限中，，且大致落在在以代表两均均值直线交点点为中心的圆圆形范围内，，见A图；31若各实室间存存在系统误差差，则两样品品测定值会出出现偏高，或或者偏低，各各实验室测定定值将主要分分布在++或--象限内，大大致落在与与纵轴约成成45度倾斜的椭椭圆形范围围内，根据据此椭圆形形的长轴和和短轴之差差及其位置置，可估计计实验室间间系统误差差的大小程程度和正负负方向。(B图)32还可根据双双样品图中中各点的分分散程度估估计实验室室间的精密密度和准确确度。33二、标准参参考物质及及其

在生生物材料检检验中的应应用（一）标准准参考物质质（ReferenceMaterial，RM）有证参考物物质（certifiedreferencematerial，CRM）标准物质有证标准物物质34国际标准化化组织（ISO）的定义是是：已很好地确确定了其一一种或多种种特性的材材料或物质质，用于校校准测量仪仪器、评价价测量方法法或确定材材料特性值值。35我国生产的的标准物质质分为两个等等级一级标准物物质（GBW）二级标准物物质[GBW(E)]一级标准物物质由国务务院计量行行政部门批批准、颁布布并授权生生产。36标准物质特特征：（1）其一种或或几种特性性值用建立立了溯源性的程序确定定，使之可可溯源到准准确复现的的表示该特特性值的测测量单位，，即它的特特性值是用用绝对量值值法、或两两种以上不不同原理的的准确可靠靠的方法、、或多个实实验室（8个以上）用用准确可靠靠方法协同同确定。37（2）定值的准准确度具有有国内最高高水平，每每一种出证证的特性值值都附有给给定置信水水平的不确确定度。（3）具有国家家统一编号号的标准物物质证书。。（4）均匀性保保证在定值值的精度以以内，且稳稳定性在一年以上，具有有规定的合合格的包装装形式。38二级级标标准准物物质质[GBW(E)]：其特特性性量量值值通通过过与与一一级级标标准准物物质质直直接接比比对对或或用用其其他他准准确确可可靠靠的的分分析析方方法法测测试试而而获获得得准确确度度和和均均匀匀性性能能满满足足一一般般测测量量的的需需要要，，稳稳定定性性在在半年年以上上；；或能能满满足足实实际际测测量量需需要要；；经有有关关主主管管部部门门审审查查批批准准，，报报国国家家计计量量局局直直接接备备案案。。39实验验室室还还经经常常使使用用质质量量控控制制样样品品（（质质控控样样）），，其其作作用用是是在在一一定定范范围围内内用用于于分分析析过过程程的的质质量量控控制制，，保保证证分分析析结结果果的的精精密密度度及及准准确确度度。。40生物物材材料料（（尿尿或或血血））的的质质控控样样通通常常可可以以用用不不含含被被测测物物的的尿尿样样或或血血样样加加入入一一定定量量被被测测物物的的标标准准品品配配制制。。此此外外，，也也可可用用被被测测物物的的主主要要基基体体成成分分和和一一定定量量被被测测物物的的标标准准品品配配制制模模拟拟样样品品。。常用生物物材料标标准参考考物质见见表1-141（二）标标准参考考物质的