基因工程的原理和技术上课

怎样能在大肠杆菌中生产出人的胰岛素呢？基因工程的基本原理：让人们感兴趣的基因（目的基因）在宿主细胞中稳定和高效表达。第二节

基因工程的原理和技术1、获取目的基因。2、形成重组DNA分子。3、将重组DNA导入受体细胞。4、筛选含有目的基因的受体细胞。5、目的基因的表达。爱情五步曲：1、找准目标2、约会牵手3、进入殿堂4、神父作证5、爱情结晶基因工程的一般操作步骤基因工程基本操作步骤的演示：1.获取目的基因⑴化学方法合成⑶从基因文库获得目的基因⑵用PCR技术扩增目的基因基因序列已知基因序列未知2.形成重组DNA分子⑴用一定的_________切割质粒，使其出现一个切口，露出____________。⑵用_____________切断目的基因，使其产生_________________。⑶将切下的目的基因片段插入质粒的______处，再加入适量___________，形成了一个重组

DNA分子。限制酶粘性末端同一种限制酶切口DNA连接酶相同的粘性末端质粒含目的基因的DNA分子同一种限制酶处理（一般）一个切口两个黏性末端两个切口获得目的基因DNA连接酶重组DNA分子（重组质粒）过程:3.将重组DNA导入受体细胞将目的基因导入微生物细胞CaCl2处理受体细胞（大肠杆菌），增大细胞壁的通透性。将目的基基因导入入动物细细胞显微注射射法（将基因因表达载载体提纯纯，用显显微仪注注射到受受精卵中中）农杆菌转转化法（表达载载体导入入农杆菌菌，再让让农杆菌菌感染植植物细胞胞）将目的基基因导入入植物细细胞农杆菌转转化法基因枪法法花粉管通通道法将目的基基因导入入植物细细胞四环素抗性基因氨苄青霉素抗性基因4.筛选含有有目的基基因的受受体细胞胞如何筛选选含有胰胰岛素原基因的大肠肠杆菌呢呢？ABCD把每个大大肠杆菌菌分别放放在有氨苄青霉霉素的培培养基中中生长，，看能否否长出菌菌落，再作出判断。。5.目的基因因的表达达无表达产物无表达产物有表达产物无表达产物细菌的检检测，将将每个受受体细胞胞单独培培养形成成菌落，，检测菌菌落中是是否有目目的基因因的表达达产物。。淘汰无无表达产产物的菌菌落，保保留有表表达产物物的进一一步培养养、研究究。1）以下说说法正确确的是（（））A、所有的的限制酶酶只能识识别一种种特定的的核苷酸酸序列B、质粒是是基因工工程中唯唯一的运运载体C、运载体体必须具具备的条条件之一一是：具具有多个个限制酶酶切点，，以便与与外源基基因连接接D、基因控控制的性性状都能能在后代代表现出出来C练习2）有关基因因工程的的叙述中中，错误误的是（（））A、DNA连接酶将将黏性末末端的碱碱基对连连接起来来B、限制制性内切切酶用于于目的基基因的获获得C、目的基基因须由由运载体体导入受受体细胞胞D、人工工合成目目的基因因不用限限制性内内切酶A练习3）有关基因因工程的的叙述正正确的是是（（））A、限制酶酶只在获获得目的的基因时时才用B、重组质质粒的形形成在细细胞内完完成C、质粒都都可作为为运载体体D、蛋白质质的结构构可为合合成目的的基因提提供资料料D练习4）基因工程程是在DNA分子水平平上进行行设计施施工的。。在基因因操作的的基本步步骤中，，不进行行碱基互互补配对对的步骤骤是（（））A、人工合合成目的的基因B、目的基基因与运运载体结结合C、将目的的基因导导入受体体细胞D、目的基基因的检检测和表表达C练习人工合成成基因的的方法反转录法法根据已知知的氨基基酸序列列合成DNA甲硫氨酸酸——苯丙氨酸酸——色氨酸蛋白质：：信使RNAAUGUUUUGG或AUGUUCUGG基因或DNATACAAAACCATGTTTTGGTACAAAACCATGTTTTGG或利用PCR技术扩增增目的基基因DNA合成仪DNA合合成仪能自动进进行化学学合成的的仪器，能按设计计自动连连接脱氧核苷苷酸的设备。。人工合成成基因的的方法反转录法法根据已知知的氨基基酸序列列合成DNA甲硫氨酸酸——苯丙氨酸酸——色氨酸蛋白质：：信使RNAAUGUUUUGG或AUGUUCUGG基因或DNATACAAAACCATGTTTTGGTACAAAACCATGTTTTGG或基因文库库：将含有某种种生物不不同基因因的许多多DNA片断，导入受受体菌的群体体中储存，各各个受体菌分分别含有这种种生物的不同同基因，称为为基因文库。基因文库的构构建：关于基因工程程的图片：我国生产的部分基因

工程疫苗和药物转生长激素鲤鲤鱼转基因超级小小鼠我国生产的部部分基因工程程疫苗和药物物对照抗虫转基因抗虫棉花和普通棉花果实耐贮藏，，在25℃温度下，可贮贮藏40－50天，较对照延延长贮藏期20－30天。转基因耐贮藏藏番茄和普通通番茄转基因抗除草草剂玉米施用除草剂，，杂草被杀死死，转基因抗抗除草剂的玉玉米不受影响响（右侧为未未施用除草剂剂的对照）9、静静夜夜四四无无邻邻，，荒荒居居旧旧业业贫贫。。。。12月月-2212月月-22Wednesday,December28,202210、雨中黄黄叶树，，灯下白白头人。。。20:43:2920:43:2920:4312/28/20228:43:29PM11、以我我独沈沈久，，愧君君相见见频。。。12月月-2220:43:2920:43Dec-2228-Dec-2212、故人江海海别，几度度隔山川。。。20:43:2920:43:2920:43Wednesday,December28,202213、乍见翻疑梦梦，相悲各问问年。。12月-2212月-2220:43:2920:43:29December28,202214、他他乡乡生生白白发发，，旧旧国国见见青青山山。。。。28十十二二月月20228:43:29下下午午20:43:2912月月-2215、比不不了得得就不不比，，得不不到的的就不不要。。。。十二月月228:43下下午午12月月-2220:43December28,202216、行动出成成果，工作作出财富。。。2022/12/2820:43:2920:43:2928December202217、做前，，能够环环视四周周；做时时，你只只能或者者最好沿沿着以脚脚为起点点的射线线向前。。。8:43:29下午午8:43下午午20:43:2912月-229、没有失败，，只有暂时停停止成功！。。12月-2212月-22Wednesday,December28,202210、很多事情努努力了未必有有结果，但是是不努力却什什么改变也没没有。。20:43:2920:43:2920:4312/28/20228:43:29PM11、成成功功就就是是日日复复一一日日那那一一点点点点小小小小努努力力的的积积累累。。。。12月月-2220:43:2920:43Dec-2228-Dec-2212、世间成成事，不不求其绝绝对圆满满，留一一份不足足，可得得无限完完美。。。20:43:2920:43:2920:43Wednesday,December28,202213、不知知香积积寺，，数里里入云云峰。。。12月月-2212月月-2220:43:2920:43:29December28,202214、意意志志坚坚强强的的人人能能把把世世界界放放在在手手中中像像泥泥块块一一样样任任意意揉揉捏捏。。28十十二二月月20228:43:29下下午午20:43:2912月月-2215、楚塞三湘接接，荆门九派派通。。。十二月228:43下下午12月-2220:43December28,202216、少年年十五五二十十时，，步行行夺得得胡马马骑。。。2022/12/2820:43:2920:43:2928December202217、空空山山新新雨雨后后，，天天气气晚晚来来秋秋。。。。8:43:29下下午午8:43下下午午20:43:2912月月-229、杨柳散散和风，，青山澹澹吾虑。。。12月-2212月-22Wednesday,December28,202210、阅读一切切好书如同同和过去最最杰出的人人谈话。20:43:2920:43:2920:4312/28/20228:43:29PM11、越是没有有本领的就就越加自命命不凡。12月-2220:43:2920:43Dec-2228-Dec-2212、越是无能的的人，越喜欢欢挑剔别人的的错儿。20:43:2920:43:2920:43Wednesday,December28,202213、知知人人者者智智，，自自知知者者明明。。胜胜人人者者有有力力，，自自胜胜者者强强。。12月月-2212月月-2220:43:2920:43:29December28,202214、意志坚坚强的人人能把世世界放在在手中像像泥块一一样任意意揉捏。。28十十二月20228:43:29下午午20:43:2912月-2215、最具挑战战性的挑战战莫过于提提升自我。。。十二月228:43下下午12月-2220:43December28,202216、业业余余生生活活要要有有意意义义，，不不要要越越轨轨。。2022/12/2820:43:2920:43:2928D