血栓和止血检测课件

内容一、止血、凝血和纤溶机制二、止凝血障碍的实验室检测

＊血管壁检测＊血小板检测＊凝血因子检测＊抗凝物质检测＊纤溶活性检测三、检测项目的选择和应用内容一、止血、凝血和纤溶机制1目的要求掌握止血与凝血障碍常用实验室检查项目及其临床意义熟悉引起止血与凝血障碍的原因了解出血性疾病的实验室诊断步骤及常用检查方法的原理和临床意义目的要求掌握止血与凝血障碍常用实验室检查项目及其临床意义2血管中流动的血液为什么不凝固?破损的血管为什么能止血?止血与凝血调节抗凝与纤溶的调节出血血栓正常生理状态低凝状态出血倾向血栓前状态血栓形成

？血管中流动的血液为什么不凝固?止血与凝血调节抗凝与纤溶的调节3正常止血机能两个方面四个因素凝血机制抗凝机制血管壁（vesselwall）血小板（platelet）凝血系统（coagulationsystem）抗凝及纤溶系统（anticoagulationandfibrinolytic）一.凝血与抗凝机制的病理生理基础正常止血机能两个方面四个因素凝血机制抗凝机制血管壁（vess4正常止血过程正常止血过程5

Ⅰ.神经反射管腔收缩

血流变慢出血/停止

Ⅱ.内皮细胞分泌vWF、Fn促进plt粘附

Ⅲ.释放FIII启动外源性凝血途径

Ⅳ.暴露内皮下胶原

Ⅴ．释放u-PA，激活纤溶系统．促进血小板粘附启动内源性凝血途径１．血管壁机制

血管受损后五大因素Ⅰ.神经反射管腔收缩血流变慢促进血小62.血小板机制1)维持血管壁的完整性，毛细血管通透性2)粘附、聚集在血管破损处，形成白色血栓3)释放活性物质，促进血小板聚集(ADP,ATP,PF4等)，增强血管收缩（TXA2,5-HT等）4)提供膜磷脂表面（PF3)，提供凝血反应介质5)促使血块收缩（血栓收缩蛋白）形成稳固血栓

五大因素2.血小板机制1)维持血管壁的完整性，毛细血管通透性五712个经典因子I-XIII（FVI=Va）

高分子激肽原(HMWK)和前激肽释放酶(PK)

除IV（Ca++）外，均为蛋白质。大多数由肝脏产生。FIII广泛存在。II、VII、IX、X

合成依赖于Vitk，称Vitk依赖因子

3．凝血因子机制五大因素12个经典因子I-XIII（FVI=Va）3．凝血因子机制8

分为三个阶段，两个途径

（内源性、外源性）第一阶段：凝血酶原激活物形成第二阶段：凝血酶形成第三阶段：纤维蛋白形成分为三个阶段，两个途径

（内源性、外源性）第一阶段9内凝途径外凝途径凝血活酶生成期凝血酶生成期纤维蛋白

生成期ⅫaⅪaⅨaⅧaCa2+PF3ⅩaⅤaCa2+PF3凝血酶原（Ⅱ）凝血酶ⅡaⅢⅦaCa2+纤维蛋白原(I)纤维蛋白单体（Ia）交联纤维蛋白ⅩⅢⅩⅢa共同途径内凝途径10正常的止血机制-3个时相血管破损后：1.血管收缩2.一期止血

-血小板血栓

(血小板黏附、聚集于血管破损处)3.二期止血

血浆凝固，纤维蛋白网加固血小板血栓，(凝血系统启动，纤维蛋白生成)正常的止血机制-3个时相血管破损后：11防止机体凝血过度，以保证血液畅通。

4.抗凝血机制吞噬清除五大因素凝血过程中有关物质和产物细胞抗凝机制:单核-巨噬细胞防止机体凝血过度，以保证血液畅通。4.抗凝血机制吞噬清12

抗凝血酶（Antithrombin,AT）

→灭活Ⅱ、Ⅸa、Ⅹa、Ⅺa、Ⅻa；

体内最重要的抗凝物质，其抗凝作用占体内总抗凝血功能的50％－67％，在肝素介导下起作用。

肝素辅因子Ⅱ（HeparincofactorⅡ,HCⅡ）→抗凝谱同AT-Ⅲ活性仅AT-Ⅲ的1/3在肝素协同下作用可扩大1000倍

注意：病理性抗凝物抗凝血酶系统：抗凝血酶系统：13

组织因子途径抑制物

TissueFactorPathwayInhibitor－TFPI

TFPI——抑制“TF-FⅦa”复合物和Ⅹa

蛋白C/蛋白S系统

灭活Va、VIIIa，激活纤溶系统

组织因子途径抑制物

TissueFacto145.纤维蛋白溶解系统主要作用：分解纤维蛋白（原），清除血管内由于纤维蛋白沉积引起的阻塞，保持血流通畅

纤溶酶原纤溶酶u-PAt-PA＋ⅫaPK＋五大因素5.纤维蛋白溶解系统主要作用：分解纤维蛋白（原），清除血管内15血栓和止血检测课件16原发性纤溶亢进：凝血瀑布没有形成，无凝血酶生成，纤溶酶活性↑，导致纤溶亢进，纤维蛋白原被降解；FDP↑继发性纤溶亢进：继发于凝血酶生成后，有纤维蛋白单体生成及交联的纤维蛋白形成，而后发生的纤溶。FDP↑,D-D二聚体↑原发性纤溶亢进：17止凝血障碍性疾病的发病机制血管壁结构与功能异常血小板质与量异常凝血因子质与量异常循环中抗凝物质增加纤溶系统异常综合因素一期止血缺陷二期止血缺陷纤溶系统缺陷止凝血障碍性疾病的发病机制血管壁结构与功能异常一期止血缺陷二18二、止凝血障碍的实验检查二、止凝血障碍的实验检查19（一）血管壁检测（一）血管壁检测201.出血时间（BleedingTime,BT）

原理皮肤刺破后，血液自然流出到出血自然停止所需要的时间，主要反映血管壁和血小板相互作用。

方法出血时间测定器法，用标准弹簧针或刀片刺破皮肤2-3mm深，观察出血自然停止的时间。

参考值

6.9±2.1分钟>9min为延长

临床意义

Plt明显减少如原发或继发性Plt减少性紫癜血小板功能异常（如血小板无力症）严重缺乏血浆某些凝血因子(vWD、DIC)血管异常药物1.出血时间（BleedingTime,BT）原理皮肤21原理

对毛细血管壁施加压力，使静脉血流受阻，致毛细血管负荷，检查一定范围内皮肤出现出血点的数目，估计血管通透性、脆性，即观察血管壁、血管内皮、血小板等综合止血作用。方法血压计袖带上臂加压8min

在前臂直径5cm圆圈内计数出血点(收缩压+舒张压)÷22、束臂试验原理对毛细血管壁施加压力，使静脉血流受阻，致毛细血管负222.束臂试验

参考值男性＜5女性和儿童＜10临床意义阳性见于：（１）Plt减少如ITP、AA（２）Plt功能异常（３）血管性病变血管病变：坏血病、败血症、血管性紫癜；（４）其他如vW病、抗血小板药物过量。2.束臂试验

23

其他有关血管方面的检测：vWF（抗原检测）免疫火箭电泳法、ELISA

减低：血管性血友病（VWD）

增高：血栓性疾病vWF活性检测6酮-前列素F1a测定其他有关血管方面的检测：vWF（抗原检测）24（二）血小板检测（二）血小板检测25１、血小板计数

２、血块收缩（CRT）原理血浆凝固后由于血小板变性释放的血栓收缩蛋白使纤维蛋白网收缩而析出血清，血块因而缩小。是血小板数量和质量检测的双关试验。方法

全血标本注入试管中，静置，观察析出的血清占原有全血量的百分比了解血块退缩的程度。１、血小板计数26２.血块收缩（CRT）参考值２h开始收缩

18h-24h收缩完全：血块收缩率65.8%±11%临床意义收缩不良见于ITP、Plt无力症、纤维蛋白原减少等。２.血块收缩（CRT）参考值２h开始收缩27３.血小板相关免疫球蛋白（pAIg）

血小板自身抗体分类：自身抗体：血小板相关免疫球蛋白（plateletassociatedIg，PAIg，又称血小板相关抗体，如PAIgG、PAIgM特异性抗体：如抗GPIIb-IIIa抗体，见于自身免疫病（ITP、SLE）同种抗体：多为反复输血时产生免疫复合物相关抗体：某些病毒感染、药物可产生３.血小板相关免疫球蛋白（pAIg）血小板自身抗体分类28测定方法：ELISApAIg增高：是免疫性血小板减少的共同特征①自身抗体（最多90%），如ITP、SLE、类风湿；②同种抗体，如大量输血或血小板、新生儿免疫性血小板减少症；③免疫复合物相关抗体，见于药物性、败血症及AIDS等。测定方法：ELISA29４.血小板粘附试验

参考值：62.5﹪±8.6﹪意义：粘附减低:血小板无力症、vWD、MDS、异常蛋白增多、尿毒症、肝硬化。粘附增高：心肌梗塞、甲亢、血栓性静脉炎、脑血栓、糖尿病、高脂血症、手术后等。４.血小板粘附试验

参考值：62.5﹪±8.6﹪30５.血小板聚集试验参考值：意义：

聚集减低:血小板无力症、VW病、骨髓增生性疾病，应用抗血小板药物。聚集增高：静脉血栓病、心肌梗塞、脑栓塞、糖尿病。５.血小板聚集试验参考值：31（三）凝血因子检测

（三）凝血因子检测

32XIIXIIXVIIIIIIVIIXVIII血液凝固内源凝血途径外源凝血途径共同凝血途径XIIXIIXVIIIIIIVIIXVIII血液凝固内源凝血331、凝血时间（CT）原理

观察血液自离体后，到玻璃试管中凝固所需时间血液从血管中抽出与带负电荷表面接触内源性凝血途径启动纤维蛋白形成（血液凝固）XIIXIIa

参考值

6-12min（试管法）临床意义

CT延长、CT缩短病因见APTT。

1、凝血时间（CT）原理血液从血管中与带负电荷表面接触内源34[原理与方法]

XII因子活化剂＋Ca+++

磷脂（代替PF3）启动血浆内源性凝血途径观察血浆凝固时间（normal:31-43s，>正常对照10s为延长。)血浆XII因子活化剂Ca+++

磷脂（代替PF3）２、活化的部分凝血活酶时间（ActivatedPartialThromboplastinTime,APTT）[原理与方法]血浆XII因子活化剂Ca+++磷脂（代替35临床意义

主要检测内凝途径凝血因子缺陷

延长见于：（1）内源性途径的凝血因子缺陷（Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ

）：血友病A、B，因子XI缺乏症

（2）共同途径凝血因子缺陷：

FV、FX、凝血酶原、纤维蛋白原（3）严重肝病、DIC（4）循环中抗凝物质增多（5）普通肝素应用的首选监测指标－使APTT延长1.5-2.5倍

缩短：

高凝状态（脑血栓、心梗、DIC高凝期）临床意义主要检测内凝途径凝血因子缺陷（36３、血浆凝血酶原时间

（ProthrombinTime;PT）

[原理与方法]

血浆+Ca+++TF→

血浆凝固通过外源性凝血系统Normal:11-13s;应有正常对照，超过对照3s为延长血浆TFCa++３、血浆凝血酶原时间

（ProthrombinTime;37临床意义PT延长：①先天性凝血因子异常：Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ因子的缺乏；②后天性凝血因子异常，严重肝病、VitK缺乏。纤溶亢进、DIC后期及使用抗凝药物如双香豆素。PT缩短：

DIC、心梗、脑血栓、血栓性静脉炎、MM、乙醚麻醉后。

临床意义PT延长：38

4、血浆纤维蛋白原测定原理：在受检血浆中加人一定量凝血酶，后者使血浆中的纤维蛋白原（fibrinogen，Fg）转变为纤维蛋白，通过比浊原理计算Fg的含量。参考值：

2~4g／L

4、血浆纤维蛋白原测定原理：在受39临床意义FIB减低：肝脏疾病、DIC中晚期、原发性纤溶亢进、低或无纤维蛋白原血症、溶栓治疗等。FIB增高：１．血栓前状态或血栓性疾病如脑梗塞、心机梗塞，非特异急性相反应急性感染，外科手术后、恶性肿瘤等。

2．生理性：部分正常老人，妊娠晚期。

临床意义FIB减低：肝脏疾病、DIC中晚期、原发性纤溶亢进、405、血浆因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ

促凝活性测定

临床意义:

增高主要见于血栓前状态和血栓性疾病，如DVT、肺栓塞、妊高征、晚期妊娠、口服避孕药、肾病综合征、恶性肿瘤等。减低FⅧ∶C减低见于血友病A、vWD、FⅧ抗体、DIC。FⅨ∶C减低见于血友病B、肝脏病、维生素K缺乏症、DIC、口服抗凝药物。FⅪ∶C减低见于因子Ⅺ缺乏症、肝脏疾病、DIC等。FⅫ∶C减低见于先天性因子Ⅻ缺乏症、肝脏疾病、DIC和某些血栓性疾病等。

5、血浆因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ

促凝活性测定

临床意义:416、血浆因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ和X

促凝活性测定临床意义增高:血栓前状态和血栓性疾病减低:相应的先天性因子Ⅱ、V、Ⅶ和X缺乏症获得性主要见于肝病、DIC、口服抗凝剂、维生素K缺乏症等6、血浆因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ和X

促凝活性测定临床意义42（四）抗凝血功能检查病理性抗凝物质测定筛选试验凝血酶时间TT甲苯胺蓝纠正试验APTT交叉试验诊断试验狼疮抗凝物质检测抗心磷脂抗体生理性抗凝因子测定血浆抗凝血酶活性测定血浆PC活性测定血浆PS抗原和总蛋白测定血浆凝血酶-抗凝血酶复合物（四）抗凝血功能检查病理性抗凝物质测定生理性抗凝因子测定431.

血浆凝血酶时间（ThrombinTimeTT）原理：

血浆+凝血酶→纤维蛋白形成；（16－18s)

超过正常对照3s为延长。血浆标准凝血酶1.血浆凝血酶时间（ThrombinTimeTT）原理44临床意义

主要检测凝血过程第三阶段

1．纤维蛋白原质与量异常

2．FDP增多，如纤溶亢进

3．循环中抗凝物质增多，如AT-Ⅲ、肝素样物质

4．异常球蛋白增多，如多发性骨髓瘤临床意义主要检测凝血过程第三阶段45

2、血浆抗凝血酶Ⅲ活性(AT-Ⅲ:A)

参考值

108.5％±5.3％临床意义增高:见于血友病、白血病和再障等的急性出血期以及口服抗凝药物治疗过程中。减低:见于先天性和获得性AT-Ⅲ缺乏症，后者见于血栓前状态、血栓性疾病、DIC和肝脏疾病等。

2、血浆抗凝血酶Ⅲ活性(AT-Ⅲ:A)

参考值46

3、血浆蛋白C活性测定

参考值

100.24％±13.18%临床意义减低：先天性或获得性PC缺乏症，后者见于DIC、肝病、手术后、口服抗凝剂、急性呼吸窘迫综合征

3、血浆蛋白C活性测定

47（五）纤溶系统检查

（五）纤溶系统检查

48纤溶活性检测筛选试验优球蛋白溶解时间D-二聚体定性试验血浆纤维蛋白原降解产物定性试验纤溶活性检测筛选试验49纤溶活性检测诊断试验血浆组织型纤溶酶原激活剂测定血浆纤溶酶原活性测定血浆纤溶酶原激活抑制物-1活性测定血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验血浆纤溶酶-抗纤溶酶复合物测定D-二聚体定量检测血浆纤维蛋白原降解产物定量检测纤溶活性检测诊断试验501.血浆纤维蛋白（原）降解产物

Fibrin(ogen）DegradationProducts,FDP原理、方法：“抗原—抗体”反应（乳胶凝集法）参考值：阴性，＜5mg/L临床意义：主要见于继发性纤溶活性增强，如DIC、严重感染、休克、恶性肿瘤、大手术后、深静脉血栓、肺梗塞、溶栓治疗期FDP增高对DIC诊断有重要价值，其灵敏度达100%原发性纤溶时FDP显著增高1.血浆纤维蛋白（原）降解产物

Fibrin(512.D-二聚体测定D-二聚体（D-dimer）:交联纤维蛋白被纤溶酶降解的特异性分子标志物。参考范围：阴性0~0.256mg／L，＞500μg／L有临床意义2.D-二聚体测定D-二聚体（D-dimer）:交联纤维蛋白52临床意义：深静脉血栓、肺梗塞、继发纤溶亢进（如DIC时）D-dimer显著增高。D-dimer正常时，可除外深静脉血栓形成。DIC诊断中的意义：常>2000μg／L以上，特异性可达100%。溶栓治疗：溶栓治疗时FDP和D-dimer增高，溶栓完全后D-dimer下降，但FDP并不下降。原发性纤溶亢进时D-dimer不增加。血栓和止血检测课件53FDPFDP纤维蛋白单体纤维蛋白纤维蛋白单体硫酸鱼精蛋白自行聚合３.血浆鱼精蛋白副凝试验

（PPPT即3P试验）原理与方法原理与方法FDPFDP纤维纤维纤维硫酸鱼自行聚合３.血浆鱼精蛋白副凝试54临床意义阳性：

提示血中FDP增多，见于DIC/纤溶亢进溶栓治疗后假阳性：大出血（创伤、手术、咯血、呕血），恶性肿瘤、人工流产等阴性：正常人原发性纤溶DIC晚期临床意义阳性：55一期止血缺陷的筛选试验二期止血缺陷的筛选试验纤溶亢进筛检试验血栓前状态DIC项目的选择与应用抗凝与溶栓治疗的监测检测项目的选择和应用一期止血缺陷的筛选试验检测项目的选择和应用561、皮肤、粘膜自发性出血（出血点瘀斑）：

一期止血缺陷（血小板、血管）？

血小板计数→血小板功能（或加BT检查）血管因素：直观，毛细血管脆性试验，1、皮肤、粘膜自发性出血（出血点瘀斑）：572、血小板正常/大面积瘀斑，皮下、深部、关节血肿

凝血功能（二期止血缺陷）？APTT↑PT

-

内凝途径因子缺陷：血友病A,B,XI因子缺乏症循环中抗凝血因子（获得性血友病）APTT-PT↑

外凝途径因子缺陷：遗传性VII因子缺乏症（病理性抗凝物，较少见）APTT↑PT↑

共同途径因子缺乏（FX,V,II,I);DIC，肝病抗凝剂治疗（病理性抗凝物，较少见）。APTT–PT-

XIII因子缺乏

2、血小板正常/大面积瘀斑，皮下、深部、关节血肿583、广泛出血：血小板、血管壁、PT、APTT正常

纤溶亢进所致出血？

TT,

Fb

FDP,D-D,3P（原发纤溶少见，继发纤溶伴有PT、APTT异常）若纤溶指标也正常XIII因子?—尿素溶解试验3、广泛出血：XIII因子?—尿素溶解试验594.广泛出血：血小板↓PT、APTT↑

纤溶亢进（Fb↓FDP，D-D，3P阳性）

DIC？4.广泛出血：DIC？60血栓和止血检测课件61血栓和止血检测课件62抗血栓治疗二者均需监测血小板血浆AT活性测定普通肝素：APTT首选，控制在正常对照值的1.5-2.5倍药物浓度维持0.2-0.4IU/ml体外循环和透析时，用激活全血凝固时间（ACT）参考值为60-120秒，使其维持在250-360秒为宜LMWH：较大剂量需监测抗因子Xa活性测定

抗血栓治疗二者均需监测血小板血浆AT活性测定普通肝素：63口服抗凝药治疗PTPTR

维持在1.5-2.0INR

WHO推荐使用，中国人维持在2.0-2.5

每一个批号的PT试剂都有其特定的ISI值，在不同仪器上操作其值也可能不同。因此，ISI值对试剂和仪器来说都是特异的。

抗血栓治疗

INR=(病人PT/正常对照PT)ISI

口服抗凝药治疗PT每一个批号的PT试剂都有其特定的I64溶栓治疗监测可选用Fg、TT、FDP作为实验室监测指标Fg 1.2-1.5g/LTT 在正常对照值的1.5-2.5倍FDP300-400μg/L溶栓治疗监测可选用Fg、TT、FDP作为实验室监测指标65抗血小板药治疗监测BT 维持在治疗前的1-2倍PLT ≤（50-60）x109/LPAgT 最大振幅降至患者基础对照的40-50%抗血小板药治疗监测BT 维持在治疗前的1-2倍66思考题正常止血过程有哪些因素参与？可选择哪些试验作为一、二期止血缺陷的筛检试验？DIC的实验室诊断包括哪些项目？思考题正常止血过程有哪些因素参与？67TheEndTheEnd68内容一、止血、凝血和纤溶机制二、止凝血障碍的实验室检测

＊血管壁检测＊血小板检测＊凝血因子检测＊抗凝物质检测＊纤溶活性检测三、检测项目的选择和应用内容一、止血、凝血和纤溶机制69目的要求掌握止血与凝血障碍常用实验室检查项目及其临床意义熟悉引起止血与凝血障碍的原因了解出血性疾病的实验室诊断步骤及常用检查方法的原理和临床意义目的要求掌握止血与凝血障碍常用实验室检查项目及其临床意义70血管中流动的血液为什么不凝固?破损的血管为什么能止血?止血与凝血调节抗凝与纤溶的调节出血血栓正常生理状态低凝状态出血倾向血栓前状态血栓形成

？血管中流动的血液为什么不凝固?止血与凝血调节抗凝与纤溶的调节71正常止血机能两个方面四个因素凝血机制抗凝机制血管壁（vesselwall）血小板（platelet）凝血系统（coagulationsystem）抗凝及纤溶系统（anticoagulationandfibrinolytic）一.凝血与抗凝机制的病理生理基础正常止血机能两个方面四个因素凝血机制抗凝机制血管壁（vess72正常止血过程正常止血过程73

Ⅰ.神经反射管腔收缩

血流变慢出血/停止

Ⅱ.内皮细胞分泌vWF、Fn促进plt粘附

Ⅲ.释放FIII启动外源性凝血途径

Ⅳ.暴露内皮下胶原

Ⅴ．释放u-PA，激活纤溶系统．促进血小板粘附启动内源性凝血途径１．血管壁机制

血管受损后五大因素Ⅰ.神经反射管腔收缩血流变慢促进血小742.血小板机制1)维持血管壁的完整性，毛细血管通透性2)粘附、聚集在血管破损处，形成白色血栓3)释放活性物质，促进血小板聚集(ADP,ATP,PF4等)，增强血管收缩（TXA2,5-HT等）4)提供膜磷脂表面（PF3)，提供凝血反应介质5)促使血块收缩（血栓收缩蛋白）形成稳固血栓

五大因素2.血小板机制1)维持血管壁的完整性，毛细血管通透性五7512个经典因子I-XIII（FVI=Va）

高分子激肽原(HMWK)和前激肽释放酶(PK)

除IV（Ca++）外，均为蛋白质。大多数由肝脏产生。FIII广泛存在。II、VII、IX、X

合成依赖于Vitk，称Vitk依赖因子

3．凝血因子机制五大因素12个经典因子I-XIII（FVI=Va）3．凝血因子机制76

分为三个阶段，两个途径

（内源性、外源性）第一阶段：凝血酶原激活物形成第二阶段：凝血酶形成第三阶段：纤维蛋白形成分为三个阶段，两个途径

（内源性、外源性）第一阶段77内凝途径外凝途径凝血活酶生成期凝血酶生成期纤维蛋白

生成期ⅫaⅪaⅨaⅧaCa2+PF3ⅩaⅤaCa2+PF3凝血酶原（Ⅱ）凝血酶ⅡaⅢⅦaCa2+纤维蛋白原(I)纤维蛋白单体（Ia）交联纤维蛋白ⅩⅢⅩⅢa共同途径内凝途径78正常的止血机制-3个时相血管破损后：1.血管收缩2.一期止血

-血小板血栓

(血小板黏附、聚集于血管破损处)3.二期止血

血浆凝固，纤维蛋白网加固血小板血栓，(凝血系统启动，纤维蛋白生成)正常的止血机制-3个时相血管破损后：79防止机体凝血过度，以保证血液畅通。

4.抗凝血机制吞噬清除五大因素凝血过程中有关物质和产物细胞抗凝机制:单核-巨噬细胞防止机体凝血过度，以保证血液畅通。4.抗凝血机制吞噬清80

抗凝血酶（Antithrombin,AT）

→灭活Ⅱ、Ⅸa、Ⅹa、Ⅺa、Ⅻa；

体内最重要的抗凝物质，其抗凝作用占体内总抗凝血功能的50％－67％，在肝素介导下起作用。

肝素辅因子Ⅱ（HeparincofactorⅡ,HCⅡ）→抗凝谱同AT-Ⅲ活性仅AT-Ⅲ的1/3在肝素协同下作用可扩大1000倍

注意：病理性抗凝物抗凝血酶系统：抗凝血酶系统：81

组织因子途径抑制物

TissueFactorPathwayInhibitor－TFPI

TFPI——抑制“TF-FⅦa”复合物和Ⅹa

蛋白C/蛋白S系统

灭活Va、VIIIa，激活纤溶系统

组织因子途径抑制物

TissueFacto825.纤维蛋白溶解系统主要作用：分解纤维蛋白（原），清除血管内由于纤维蛋白沉积引起的阻塞，保持血流通畅

纤溶酶原纤溶酶u-PAt-PA＋ⅫaPK＋五大因素5.纤维蛋白溶解系统主要作用：分解纤维蛋白（原），清除血管内83血栓和止血检测课件84原发性纤溶亢进：凝血瀑布没有形成，无凝血酶生成，纤溶酶活性↑，导致纤溶亢进，纤维蛋白原被降解；FDP↑继发性纤溶亢进：继发于凝血酶生成后，有纤维蛋白单体生成及交联的纤维蛋白形成，而后发生的纤溶。FDP↑,D-D二聚体↑原发性纤溶亢进：85止凝血障碍性疾病的发病机制血管壁结构与功能异常血小板质与量异常凝血因子质与量异常循环中抗凝物质增加纤溶系统异常综合因素一期止血缺陷二期止血缺陷纤溶系统缺陷止凝血障碍性疾病的发病机制血管壁结构与功能异常一期止血缺陷二86二、止凝血障碍的实验检查二、止凝血障碍的实验检查87（一）血管壁检测（一）血管壁检测881.出血时间（BleedingTime,BT）

原理皮肤刺破后，血液自然流出到出血自然停止所需要的时间，主要反映血管壁和血小板相互作用。

方法出血时间测定器法，用标准弹簧针或刀片刺破皮肤2-3mm深，观察出血自然停止的时间。

参考值

6.9±2.1分钟>9min为延长

临床意义

Plt明显减少如原发或继发性Plt减少性紫癜血小板功能异常（如血小板无力症）严重缺乏血浆某些凝血因子(vWD、DIC)血管异常药物1.出血时间（BleedingTime,BT）原理皮肤89原理

对毛细血管壁施加压力，使静脉血流受阻，致毛细血管负荷，检查一定范围内皮肤出现出血点的数目，估计血管通透性、脆性，即观察血管壁、血管内皮、血小板等综合止血作用。方法血压计袖带上臂加压8min

在前臂直径5cm圆圈内计数出血点(收缩压+舒张压)÷22、束臂试验原理对毛细血管壁施加压力，使静脉血流受阻，致毛细血管负902.束臂试验

参考值男性＜5女性和儿童＜10临床意义阳性见于：（１）Plt减少如ITP、AA（２）Plt功能异常（３）血管性病变血管病变：坏血病、败血症、血管性紫癜；（４）其他如vW病、抗血小板药物过量。2.束臂试验

91

其他有关血管方面的检测：vWF（抗原检测）免疫火箭电泳法、ELISA

减低：血管性血友病（VWD）

增高：血栓性疾病vWF活性检测6酮-前列素F1a测定其他有关血管方面的检测：vWF（抗原检测）92（二）血小板检测（二）血小板检测93１、血小板计数

２、血块收缩（CRT）原理血浆凝固后由于血小板变性释放的血栓收缩蛋白使纤维蛋白网收缩而析出血清，血块因而缩小。是血小板数量和质量检测的双关试验。方法

全血标本注入试管中，静置，观察析出的血清占原有全血量的百分比了解血块退缩的程度。１、血小板计数94２.血块收缩（CRT）参考值２h开始收缩

18h-24h收缩完全：血块收缩率65.8%±11%临床意义收缩不良见于ITP、Plt无力症、纤维蛋白原减少等。２.血块收缩（CRT）参考值２h开始收缩95３.血小板相关免疫球蛋白（pAIg）

血小板自身抗体分类：自身抗体：血小板相关免疫球蛋白（plateletassociatedIg，PAIg，又称血小板相关抗体，如PAIgG、PAIgM特异性抗体：如抗GPIIb-IIIa抗体，见于自身免疫病（ITP、SLE）同种抗体：多为反复输血时产生免疫复合物相关抗体：某些病毒感染、药物可产生３.血小板相关免疫球蛋白（pAIg）血小板自身抗体分类96测定方法：ELISApAIg增高：是免疫性血小板减少的共同特征①自身抗体（最多90%），如ITP、SLE、类风湿；②同种抗体，如大量输血或血小板、新生儿免疫性血小板减少症；③免疫复合物相关抗体，见于药物性、败血症及AIDS等。测定方法：ELISA97４.血小板粘附试验

参考值：62.5﹪±8.6﹪意义：粘附减低:血小板无力症、vWD、MDS、异常蛋白增多、尿毒症、肝硬化。粘附增高：心肌梗塞、甲亢、血栓性静脉炎、脑血栓、糖尿病、高脂血症、手术后等。４.血小板粘附试验

参考值：62.5﹪±8.6﹪98５.血小板聚集试验参考值：意义：

聚集减低:血小板无力症、VW病、骨髓增生性疾病，应用抗血小板药物。聚集增高：静脉血栓病、心肌梗塞、脑栓塞、糖尿病。５.血小板聚集试验参考值：99（三）凝血因子检测

（三）凝血因子检测

100XIIXIIXVIIIIIIVIIXVIII血液凝固内源凝血途径外源凝血途径共同凝血途径XIIXIIXVIIIIIIVIIXVIII血液凝固内源凝血1011、凝血时间（CT）原理

观察血液自离体后，到玻璃试管中凝固所需时间血液从血管中抽出与带负电荷表面接触内源性凝血途径启动纤维蛋白形成（血液凝固）XIIXIIa

参考值

6-12min（试管法）临床意义

CT延长、CT缩短病因见APTT。

1、凝血时间（CT）原理血液从血管中与带负电荷表面接触内源102[原理与方法]

XII因子活化剂＋Ca+++

磷脂（代替PF3）启动血浆内源性凝血途径观察血浆凝固时间（normal:31-43s，>正常对照10s为延长。)血浆XII因子活化剂Ca+++

磷脂（代替PF3）２、活化的部分凝血活酶时间（ActivatedPartialThromboplastinTime,APTT）[原理与方法]血浆XII因子活化剂Ca+++磷脂（代替103临床意义

主要检测内凝途径凝血因子缺陷

延长见于：（1）内源性途径的凝血因子缺陷（Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ

）：血友病A、B，因子XI缺乏症

（2）共同途径凝血因子缺陷：

FV、FX、凝血酶原、纤维蛋白原（3）严重肝病、DIC（4）循环中抗凝物质增多（5）普通肝素应用的首选监测指标－使APTT延长1.5-2.5倍

缩短：

高凝状态（脑血栓、心梗、DIC高凝期）临床意义主要检测内凝途径凝血因子缺陷（104３、血浆凝血酶原时间

（ProthrombinTime;PT）

[原理与方法]

血浆+Ca+++TF→

血浆凝固通过外源性凝血系统Normal:11-13s;应有正常对照，超过对照3s为延长血浆TFCa++３、血浆凝血酶原时间

（ProthrombinTime;105临床意义PT延长：①先天性凝血因子异常：Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ因子的缺乏；②后天性凝血因子异常，严重肝病、VitK缺乏。纤溶亢进、DIC后期及使用抗凝药物如双香豆素。PT缩短：

DIC、心梗、脑血栓、血栓性静脉炎、MM、乙醚麻醉后。

临床意义PT延长：106

4、血浆纤维蛋白原测定原理：在受检血浆中加人一定量凝血酶，后者使血浆中的纤维蛋白原（fibrinogen，Fg）转变为纤维蛋白，通过比浊原理计算Fg的含量。参考值：

2~4g／L

4、血浆纤维蛋白原测定原理：在受107临床意义FIB减低：肝脏疾病、DIC中晚期、原发性纤溶亢进、低或无纤维蛋白原血症、溶栓治疗等。FIB增高：１．血栓前状态或血栓性疾病如脑梗塞、心机梗塞，非特异急性相反应急性感染，外科手术后、恶性肿瘤等。

2．生理性：部分正常老人，妊娠晚期。

临床意义FIB减低：肝脏疾病、DIC中晚期、原发性纤溶亢进、1085、血浆因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ

促凝活性测定

临床意义:

增高主要见于血栓前状态和血栓性疾病，如DVT、肺栓塞、妊高征、晚期妊娠、口服避孕药、肾病综合征、恶性肿瘤等。减低FⅧ∶C减低见于血友病A、vWD、FⅧ抗体、DIC。FⅨ∶C减低见于血友病B、肝脏病、维生素K缺乏症、DIC、口服抗凝药物。FⅪ∶C减低见于因子Ⅺ缺乏症、肝脏疾病、DIC等。FⅫ∶C减低见于先天性因子Ⅻ缺乏症、肝脏疾病、DIC和某些血栓性疾病等。

5、血浆因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ

促凝活性测定

临床意义:1096、血浆因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ和X

促凝活性测定临床意义增高:血栓前状态和血栓性疾病减低:相应的先天性因子Ⅱ、V、Ⅶ和X缺乏症获得性主要见于肝病、DIC、口服抗凝剂、维生素K缺乏症等6、血浆因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ和X

促凝活性测定临床意义110（四）抗凝血功能检查病理性抗凝物质测定筛选试验凝血酶时间TT甲苯胺蓝纠正试验APTT交叉试验诊断试验狼疮抗凝物质检测抗心磷脂抗体生理性抗凝因子测定血浆抗凝血酶活性测定血浆PC活性测定血浆PS抗原和总蛋白测定血浆凝血酶-抗凝血酶复合物（四）抗凝血功能检查病理性抗凝物质测定生理性抗凝因子测定1111.

血浆凝血酶时间（ThrombinTimeTT）原理：

血浆+凝血酶→纤维蛋白形成；（16－18s)

超过正常对照3s为延长。血浆标准凝血酶1.血浆凝血酶时间（ThrombinTimeTT）原理112临床意义

主要检测凝血过程第三阶段

1．纤维蛋白原质与量异常

2．FDP增多，如纤溶亢进

3．循环中抗凝物质增多，如AT-Ⅲ、肝素样物质

4．异常球蛋白增多，如多发性骨髓瘤临床意义主要检测凝血过程第三阶段113

2、血浆抗凝血酶Ⅲ活性(AT-Ⅲ:A)

参考值

108.5％±5.3％临床意义增高:见于血友病、白血病和再障等的急性出血期以及口服抗凝药物治疗过程中。减低:见于先天性和获得性AT-Ⅲ缺乏症，后者见于血栓前状态、血栓性疾病、DIC和肝脏疾病等。

2、血浆抗凝血酶Ⅲ活性(AT-Ⅲ:A)

参考值114

3、血浆蛋白C活性测定

参考值

100.24％±13.18%临床意义减低：先天性或获得性PC缺乏症，后者见于DIC、肝病、手术后、口服抗凝剂、急性呼吸窘迫综合征

3、血浆蛋白C活性测定

115（五）纤溶系统检查

（五）纤溶系统检查

116纤溶活性检测筛选试验优球蛋白溶解时间D-二聚体定性试验血浆纤维蛋白原降解产物定性试验纤溶活性检测筛选试验117纤溶活性检测诊断试验血浆组织型纤溶酶原激活剂测定血浆纤溶酶原活性测定血浆纤溶酶原激活抑制物-1活性测定血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验血浆纤溶酶-抗纤溶酶复合物测定D-二聚体定量检测血浆纤维蛋白原降解产物定量检测纤溶活性检测诊断试验1181.血浆纤维蛋白（原）降解产物

Fibrin(ogen）DegradationProducts,FDP原理、方法：“抗原—抗体”反应（乳胶凝集法）参考值：阴性，＜5mg/L临床意义：主要见于继发性纤溶活性增强，如DIC、严重感染、休克、恶性肿瘤、大手术后、深静脉血栓、肺梗塞、溶栓治疗期FDP增高对DIC诊断有重要价值，其灵敏度达100%原发性纤溶时FDP显著增高1.血浆纤维蛋白（原）降解产物

Fibrin(1192.D-二聚体测定D-二聚体（D-dimer）:交联纤维蛋白被纤溶酶降解的特异性分子标志物。参考范围：阴性0~0.256mg／L，＞500μg／L有临床意义2.D-二聚体测定D-二聚体（D-dimer）:交联纤维蛋白120临床意义：深静脉血栓、肺梗塞、继发纤溶亢进（如DIC时）D-dimer显著增高。D-dimer正常时，可除外深静脉血栓形成。DIC诊断中的意义：常>2000μg／L以上，特异性可达100%。溶栓治疗：溶栓