临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立

临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立临床基因扩增检验实验室的设置依据：卫生部颁发的《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》（卫医发[2002]10号）临床标本的接收

通常的工作流程：标本采集血清分离编号保存或检测应在四个测定区域之外的地方或区域内接收接收的标本应收集在原始容器中在核酸提取时带入至标本制备区理想的PCR实验室设置A产物分析区空气流向空气流向空气流向空气流向缓冲间缓冲间缓冲间专用走廊工作流向扩增区标本制备区试剂准备区产物分析区空气流向空气流向空气流向空气流向缓冲间缓冲间缓冲间专用走廊工作流向扩增区标本制备区试剂准备区理想的PCR实验室设置B门试剂准备区标本制备区扩增区产物分析区外走廊门门门门试剂准备区标本制备区扩增及产物分析区外走廊门门门门AB试剂准备区标本制备区扩增及产物分析区门门门门空气流向空气流向空气流向走廊走廊试剂准备区标本制备区扩增和产物分析区空气流向空气流向空气流向其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室门试剂准备区标本制备区扩增及产物分析区门门门空气流向空气流向+空气流向++走廊走廊试剂准备区标本制备区扩增和产物分析区空气流向空气流向+空气流向++其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室空气流向临床基因扩增实验室设置的一般原则各区独立注意风向因地制宜方便工作“十六字口诀”产物分析区空气流向空气流向空气流向空气流向缓冲间缓冲间缓冲间专用走廊工作流向扩增区标本制备区试剂准备区传递窗传递窗传递窗实验室质量量管理体系系的建立质量手册质量体系程程序文件标准操作程程序(相关记录录表格)质量管理的的内涵写你所做的的做你所写的的记录你已做做的分析你已做做的怎样编写SOP？实验室清洁洁SOP要要点目的:为了了使实验室室台面、地地面和仪器器设备在实实用后，处处于洁净和和无感染性性状态，以以防止出现现因仪器设设备不洁影影响检测或或仪器使用用寿命；防防止因实验验室台面、、地面和仪仪器设备的的生物传染染危险性造造成实验室室人员感染染，以及防防止实验室室交叉污染染而出现假假阳性结果果等。适用范围应应包括实验验室地面、、台面和仪仪器设备等等的清洁。。按实验室台台面、地面面和仪器设设备分开来来写各自的的具体清洁洁方法，要要具体而又又有可操作作性应规定工作作人员在清清洁时，必必须按试剂剂准备区标本制备区区扩增(及产产物分析)区方向进进行，不得得逆行规定每一工工作区域的的清洁必须须使用专用用的清洁用用具，不得得混用规定有潜在在生物传染染危险性材材料溅出时时的消毒清清洁方法生物安全防防护SOP要点明确规定实实验室工作作人员在进进行哪一类类接触到有有潜在生物物传染危险险性的物品品和材料时时，应使用用哪类个体体生物安全全防护设备备和用具制定实验室室内锐器物物品的使用用规则制定发生意意外如手指指划破、血血清溅入眼眼内等情况况下的处理理程序明确有潜在在生物传染染危险性的的废弃物（（包括废弃弃临床标本本）拿出实实验室前的的消毒方法法如高压或或化学消毒毒仪器设备的的维护和校校准SOP责任人维护和校准准的基本方方面：光路路、滤光片片、波长、、加热模块块的清洁、、具体的校校准点选择择（如加样样器的校准准体积点选选择、温度度计的校准准温度点选选择等）、、维护和校校准的具体体方法包括括用具校准合格的的判断标准准维护和校准准的间隔时时间仪器设备的操作SOP按照每台仪仪器设备的的使用说明明书，将其其详细操作作步骤包括括开机关机机次序、编编程、调试试、运行、、计算等按按实际使用用中的先后后顺序逐项项列出，最最后还应有有使用的注注意事项。。临床标本的的采集、运运送、接收收和保存SOP特定标本采采集的具体体方法步骤骤明确规定标标本的采集集容器要求求明确标本的的采集量明确标本采采集后送到到实验室检检测所能容容许的最大大时间间隔隔，亦即标标本采集后后，应在多多长时间内内送至实验验室明确标本采采集后，在在送至实验验室检测前前的保存方方式和条件件明确标本从从采集处运运送至实验验室过程中中所要求的的运送条件件明确标本接接收时，签签收的程序序、拒收的的标准和标标本唯一编编号的规则则规定标本在在实验室内内的短期（（应有具体体时间）和和长期（应应有具体时时间）保存存条件和要要求制定保证标标本安全，，即如何防防止标本丢丢失、掉换换、变质的的措施试剂和消耗耗品的质检检SOP试剂质检的的基本方面面，如试剂剂的抗干扰扰能力（主主要是针对对提取试剂剂），即对对溶血、脂脂血标本扩扩增抑制作作用的了解解。可通过过自行制备备含已知量量病毒核酸酸的不同程程度溶血或或脂血的标标本进行质质检。如为为定量检测测试剂，还还应包括检检测的重复复性、线性性范围等的的质检，通通常使用2-3份样样本进行检检测即可。。如为定性性检测试剂剂，则应重重点考察测测定下限，，可用系列列稀释的含含已知量靶靶核酸的血血清标本进进行核酸提取用用离心管质质检的基本本方面带滤心吸头头的质检主主要是滤心心的密封性性项目检测、、结果判断断、解释和和报告SOP标本进入实实验程序后后的操作编编号方式根据所用试试剂盒确定定的详细操操作流程仪器器编编程程及及文文件件名名的的编编写写规规则则结果果判判读读的的流流程程和和规规则则结果果分分析析解解释释的的流流程程结果果报报告告流流程程实验验记记录录及及其其管管理理SOP日常常检检验验过过程程中中应应记记录录的的基基本本内内容容的的规规定定，，如如仪仪器器设设备备操操作作、、维维护护和和校校准准过过程程及及有有关关数数据据；；检检验验试试剂剂来来源源和和批批号号；；检检验验标标本本的的来来源源和和唯唯一一编编号号；；试试剂剂的的配配制制；；实实验验环环境境条条件件的的控控制制记记录录；；实实验验室室清清洁洁的的记记录录；；质质控控的的记记录录；；原原始始检检测测数数据据及及其其推推导导记记录录等等对实实验验记记录录者者的的签签名名方方式式的的规规定定和和要要求求实验验记记录录管管理理的的基基本本方方面面：：指指定定专专门门的的管管理理人人；；有有专专门门的的保保存存处处如如柜柜子子等等；；记记录录的的登登记记归归档档方方法法；；记记录录的的借借阅阅及及销销毁毁记记录录；；记记录录保保存存的的时时间间；；电电子子记记录录的的备备份份保保存存具具体体方方法法及及保保存存时时间间等等室内内质质量量控控制制SOP明确确室室内内质质控控物物的的来来源源及及浓浓度度明确确所所选选用用的的质质控控方方法法明确确失失控控的的判判断断标标准准或或所所采采用用的的失失控控规规则则明确确失失控控后后的的分分析析及及处处理理措措施施参加加室室间间质质量量评评价价SOP明确确规规定定室室间间质质评评样样本本的的接接收收记记录录方方式式、、保保存存条条件件及及实实验验编编号号规规则则明确确室室间间质质评评样样本本的的检检测测流流程程，，要要强强调调的的是是，，室室间间质质评评样样本本应应以以与与临临床床标标本本相相同同的的方方式式处处理理和和检检测测明确确室室间间质质评评样样本本的的报报告告流流程程，，即即填填写写、、复复核核和和签签发发如如何何进进行行，，由由谁谁负负责责明确确对对返返回回结结果果的的分分析析流流程程和和责责任任人人明确确室室间间质质评评检检测测失失败败的的原原因因分分析析流流程程明确确如如果果测测定定准准确确性性出出现现问问题题后后，，如如何何针针对对性性采采取取措措施施的的流流程程投诉诉处处理理SOP明确确投投拆拆第第一一接接触触人人对对投投拆拆的的处处理理流流程程，，即即如如何何记记录录、、如如何何针针对对相相关关投投诉诉的的进进一一步步处处理理程程序序、、是是否否需需要要报报告告和和如如何何报报告告、、以以及及如如何何向向投投拆拆人人返返回回处处理理意意见见等等。。可可将将投投拆拆分分为为不不同同类类如如对对检检验验结结果果正正确确性性、、服服务务态态度度、、报报告告单单填填写写错错误误等等分分别别编编写写处处理理流流程程投拆拆有有效效时时的的如如何何改改进进和和采采取取何何种种措措施施的的具具体体流流程程。。应应非非常常具具体体并并具具有有可可操操作作性性临床床PCR检检验验流流程程记记录录表表检验验日日期期检验验项项目目：：扩增增仪仪中中保保存存文文件件名名：：使用用说说明明：：1．．本本记记录录表表须须严严格格遵遵循循试试剂剂准准备备区区标本本制制备备区区扩增增区区（（产产物物分分析析区区））单单一一流流向向移移动动，，严严禁禁逆逆向向移移动动。。2．．各各项项工工作作执执行行后后，，在在相相应应叙叙述述前前的的““”内内打打““”。。3．．本本记记录录表表最最后后与与相相应应的的标标本本接接收收记记录录等等归归档档保保存存于于扩扩增增区区的的专专用用文文件件柜柜内内，，以以备备查查找找。。实验验前前准准备备试剂剂在在有有效效期期内内扩增增仪仪、、加加样样器器和和温温度度计计在在校校准准的的有有效效期期内内生物物安安全全柜柜的的滤滤膜膜在在使使用用有有效效期期内内消毒毒溶溶液液在在有有效效期期内内冲眼眼器器内内无无菌菌生生理理盐盐水水在在有有效效期期内内离心心管管、、带带滤滤心心吸吸头头已已经经过过质质检检合合操作作者者：试剂剂准准备备区区（（1区区））实验验前前：：打开开通通风风设设备备实验验台台面面清清洁洁（（水水或或70%酒酒精精擦擦拭拭））冰箱箱温温度度：：冷冷藏藏室室（（2~8℃℃））℃；；冷冷冻冻室室（（18℃℃2℃℃））℃实验验室室温温度度：：℃（（允允许许范范围围：：10~30℃℃））；；相相对对湿湿度度：：（允允许许范范围围：：30%~70%））PCR试试剂剂来来源源：：（可可直直接接列列出出有有关关厂厂家家名名称称））批号号：：检验验项项目目：：本次次实实验验用用量量：：人份份，，剩剩余余量量：：人份份。。其他他有有关关试试剂剂配配制制：：按XXX（（将将有有关关SOP编编号号列列出出））SOP配配制制1%含含氯氯消消毒毒液液毫升升；；按XXX（（将将有有关关SOP编编号号列列出出））SOP配配制制4％％NaOH溶溶液液毫升升；；按XXX（（将将有有关关SOP编编号号列列出出））SOP配配制制0.1%焦焦磷磷酸酸二二乙乙酯酯毫升升；；按XXX（（将将有有关关SOP编编号号列列出出））SOP配配制制毫升升；；其他他：：仪器器设设备备使使用用：：离心心机机：：正常常不正正常常振振荡荡器器：：正常常不正正常常实验验后后：：按XXX（（将将有有关关SOP编编号号列列出出））SOP清清洁洁实实验验室室台台面面、、地地面面、、加加样样器器和和离离心心机机，，并并进进行行紫紫外外照照射射30分分钟钟以以上上。。按XXX（（将将有有关关SOP编编号号列列出出））SOP处处理理实实验验废废弃弃物物。。操作者者：标本制制备区区（2区））实验前前：打开通通风设设备实验台台面清清洁（（水或或70%酒酒精擦擦拭））冰箱（（柜））温度度：冷冷藏室室（2~8℃））℃；冷冷冻室室（18℃℃2℃））℃实验室室温度度：℃（允允许范范围：：10~30℃℃）；；相对对湿度度：（允许许范围围：30%~70%）阳性室室内质质控物物来源源：浓度及及批号号：扩增位位置：阴性室室内质质控物物来源源：批号：扩增位位置：所取理理的标标本（（对应应标本本接收收的唯唯一编编号））及拟拟扩增增位置置：1917252101826311192741220285132129614223071523318162432核酸提提取及及加样样过程程：按XXX（（列出出编号号）SOP进行行。仪器设设备使使用：：生物安安全柜柜：正常不正常常恒恒温仪仪温度度校准准：℃离心机机：正常不正常常振振荡荡器：：正常不正常常实验后后：按XXX（（将有有关SOP编号号列出出）SOP清洁洁实验验室台台面、、地面面及仪仪器设设备。。按XXX（（将有有关SOP编号号列出出）SOP处理理实验验废弃弃物。。操作者者：

扩增及产物分析区（3区）实验前打开通风设备实验台面清洁（水或70%酒精擦拭）实验室温度：

℃（允许范围：10~30℃）；相对湿度：

（允许范围：30%~70%）扩增仪操作：开机自检及运行正常按XXX（列出编号）SOP进行编程、参数设定标准曲线计算值：Slope值：（）Intercept值：（）r值：（）室内质控结果：结果：

□填写室内质控记录、描质控图是否失控：□否□是实验结果：见所附扩增仪打印结果实验后：按XXX（将有关SOP编号列出）SOP清洁实验室台面、地面及仪器设备。按XXX（将有关SOP编号列出）SOP处理实验废弃物。

操作者：

失控原因及分析：（失控判断标准及原因分析按XXXSOP进行）

临床PCR实验室标本接收记录唯一编号姓名性别病历号采集时间接收时间标本特性标本状态

以上标本编号从

至

，送检人（签字）：

接收人（签字）

以上标本编号从

至

，送检人（签字）：

接收人（签字）

以上标本编号从

至

，送检人（签字）：

接收人（签字）

男女月日时月日时全血

正常

男女月日时月日时全血

正常

男女月日时月日时全血

正常

男女月日时月日时全血

正常

男女月日时月日时全血

正常

男女月日时月日时全血

正常

男女月日时月日时全血

正常

姓名名性性别别病病历号号采采集集时间间接接收收时间间标标本本特性性拒拒收收原因因男女月月日日时时月月日日时时全血（列出出原因因号））男女月月日日时时月月日日时时全血（列出出原因因号））男女月月日日时时月月日日时时全血（列出出原因