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文档简介
酱油中菌落总数的测定——菌落计数、计算与报告酱油中菌落总数的测定——菌落计数、计算与报告1复习提问1、菌落总数的测定步骤2、测定酱油中菌落总数时稀释度选择的原则是什么?3、本次酱油中菌落总数测定实验的设计?复习提问1、菌落总数的测定步骤2样品制备10倍梯度稀释接种倒平板倒置培养菌落计数报告菌落总数测定步骤菌落总数计算样品制备10倍梯度稀释接种倒平板倒置培养菌落计数报告菌菌落总3表1酱油中菌落总数的测定结果与报告稀释度10-110-210-3空白菌落总数报告平板1平板菌落计数平板菌落计数平板菌落计数平板菌落计数计算方式平板2平板菌落计数平板菌落计数平板菌落计数平板菌落计数平均稀释度菌落数稀释度菌落数稀释度菌落数表1酱油中菌落总数的测定结果与报告稀释度10-110-2104主要内容一、平板菌落计数的原则和方法二、各组进行菌落计数,并填表三、菌落总数计算方法四、学生练习计算方法五、报告方法六、各组进行报告主要内容一、平板菌落计数的原则和方法5一、平板菌落计数的原则与方法(一)原则1、平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用2、
若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,则可以计算半个平板后乘以2,以代表一个平板的菌落数3、若菌落分布均匀,300以下的平板直接进行菌落计数,大于300的可记为多不可计。4、当平板上有链状菌落生长时,且无明显界限的,则每条链均应按一个菌落计算。一、平板菌落计数的原则与方法(一)原则6不可计数不可计数64图1、菌落计数原则不可计数不可计数64图1、菌落计数原则7(二)菌落计数方法1、肉眼观察,记号笔点数,300以下的记录具体数据;300以上的可以不计数,写“多不可计”。2、多,密,且均匀,可以分四个小格,数一个小格,乘以4。3、可以使用放大镜观察。(二)菌落计数方法1、肉眼观察,记号笔点数,300以下的记录8图2、菌落计数方法图2、菌落计数方法9二、各组进行菌落计数,并填表稀释度10-110-210-3空白菌落总数报告平板1平板菌落计数平板菌落计数平板菌落计数平板菌落计数平板2平板菌落计数平板菌落计数平板菌落计数平板菌落计数平均二、各组进行菌落计数,并填表稀释度10-110-210-3空10三、稀释度的菌落数计算1、若两个平板均为“无法计数”,则填“无法计数”。2、若一个平板“无法计数”,则用另外一个平板菌落数代表该稀释度菌落数。3、若两个平板都有具体数据,则求平均,用整数表示。三、稀释度的菌落数计算1、若两个平板均为“无法计数”,则填“11三、稀释度菌落数的计算稀释度例110-1例210-2例310-3例410-4菌落总数报告平板1无法计数无法计数无法计数28平板2无法计数多不可计28827平均无法计数多不可计28828三、稀释度菌落数的计算稀释度例1例2例3例4菌落总数报告平板12稀释度:原溶液被冲淡的程度。稀释倍数:溶液被稀释的倍数。例如:稀释度为10-1和10-2,即1:10,1:100稀释倍数依次是10倍,100倍。
四、菌落总数的计算方法稀释度高稀释度:原溶液被冲淡的程度。四、菌落总数的计算方法稀释度高131、选择稀释度菌落数在30~300之间的,若只有一个,则用该稀释度菌落数乘以相应稀释倍数2、若所有稀释度的平板上菌落数都大于300CFU,则对稀释度最高的平板进行计数,结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。3、若所有稀释度的平板菌落数均小于30CFU,则应按稀释度最低的平板菌落数计算。
四、菌落总数的计算方法1、选择稀释度菌落数在30~300之间的,若只有一个,则用该144、若所有稀释度平板均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数计算。5、若所有稀释度的平板菌落数一部分小于30CFU或大于300CFU时,则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数计算。4、若所有稀释度平板均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数15试样例次稀释度选定计数稀释度菌落总数/(CFU/mL)10-210-310-41平均菌落数380521810-3520002无法计数56831210-4312000032612510-22600400010-2<100531529210-3290006多不可计2873410-3,10-4表2菌落总数计算方法汇总表试样例次稀释度选定计数菌落总数/(CFU/mL)10-210166、若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时,按如下公式计算:
N=∑C/(n1+0.1n2)d…………(1)
式中:
N―样品中菌落数;
∑C―适宜计数范围内平板菌落数之和;
nl―第一个适宜稀释度平板数;
n2―第二个适宜稀释度平板数;
d―稀释因子(第一稀释度)。6、若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时,按如下17稀释度10-310-410-5菌落总数CFU/ml报告CFU/ml平板128835?平板228633平均例6、菌落总数计数
N==1816=2918181728734稀释度10-310-410-5菌落总数报告平板128835?18五、报告原则1、菌落数小于100CFU时,按照“四舍五入”原则修约,以整数报告。2、菌落数大于或等于100CFU时,第3位数字采用“四舍五入”原则修约后,取前2位数字,后而用0代替位数;也可以用10的指数形式来表示,按照“四舍五入”修约后,采用两位有效数字。五、报告原则1、菌落数小于100CFU时,按照“四舍五入”原19五、报告原则3、若所有平板上为蔓延菌落而无法计数,则报告菌落蔓延。4、若空白对照上有菌落生长,则此次检测结果无效。5、单位:称重的样品,用CFU/g;量取体积的样品,用CFU/ml。CFU——菌落形成单位五、报告原则3、若所有平板上为蔓延菌落而无法计数,则报告菌落20稀释度10-310-410-5菌落总数CFU/ml报告CFU/ml平板1多不可计351834.5≈3535平板2多不可计3416平均多不可计3517菌落总数报告例1稀释度10-310-410-5菌落总数报告CFU/ml平板121稀释度10-310-410-5菌落总数CFU/ml报告CFU/ml平板12883518291818平板22863316菌落总数报告例2
N===291818290000稀释度10-310-410-5菌落总数报告平板128835122稀释度10-310-410-5菌落总数CFU/ml报告CFU/ml平板1无法计数无法计数无法计数菌落蔓延平板2无法计数无法计数无法计数平均无法计数无法计数无法计数菌落总数报告例3稀释度10-310-410-5菌落总数报告CFU/ml平板123稀释度10-110-210-3空白菌落总数报告平板12平板21平均菌落总数报告例4检验结果无效稀释度10-110-210-3空白菌落总数报告平板12平板224六、菌落计数方法练习六、菌落计数方法练习25酱油中菌落总数的测定——菌落计数、计算与报告酱油中菌落总数的测定——菌落计数、计算与报告26复习提问1、菌落总数的测定步骤2、测定酱油中菌落总数时稀释度选择的原则是什么?3、本次酱油中菌落总数测定实验的设计?复习提问1、菌落总数的测定步骤27样品制备10倍梯度稀释接种倒平板倒置培养菌落计数报告菌落总数测定步骤菌落总数计算样品制备10倍梯度稀释接种倒平板倒置培养菌落计数报告菌菌落总28表1酱油中菌落总数的测定结果与报告稀释度10-110-210-3空白菌落总数报告平板1平板菌落计数平板菌落计数平板菌落计数平板菌落计数计算方式平板2平板菌落计数平板菌落计数平板菌落计数平板菌落计数平均稀释度菌落数稀释度菌落数稀释度菌落数表1酱油中菌落总数的测定结果与报告稀释度10-110-21029主要内容一、平板菌落计数的原则和方法二、各组进行菌落计数,并填表三、菌落总数计算方法四、学生练习计算方法五、报告方法六、各组进行报告主要内容一、平板菌落计数的原则和方法30一、平板菌落计数的原则与方法(一)原则1、平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用2、
若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,则可以计算半个平板后乘以2,以代表一个平板的菌落数3、若菌落分布均匀,300以下的平板直接进行菌落计数,大于300的可记为多不可计。4、当平板上有链状菌落生长时,且无明显界限的,则每条链均应按一个菌落计算。一、平板菌落计数的原则与方法(一)原则31不可计数不可计数64图1、菌落计数原则不可计数不可计数64图1、菌落计数原则32(二)菌落计数方法1、肉眼观察,记号笔点数,300以下的记录具体数据;300以上的可以不计数,写“多不可计”。2、多,密,且均匀,可以分四个小格,数一个小格,乘以4。3、可以使用放大镜观察。(二)菌落计数方法1、肉眼观察,记号笔点数,300以下的记录33图2、菌落计数方法图2、菌落计数方法34二、各组进行菌落计数,并填表稀释度10-110-210-3空白菌落总数报告平板1平板菌落计数平板菌落计数平板菌落计数平板菌落计数平板2平板菌落计数平板菌落计数平板菌落计数平板菌落计数平均二、各组进行菌落计数,并填表稀释度10-110-210-3空35三、稀释度的菌落数计算1、若两个平板均为“无法计数”,则填“无法计数”。2、若一个平板“无法计数”,则用另外一个平板菌落数代表该稀释度菌落数。3、若两个平板都有具体数据,则求平均,用整数表示。三、稀释度的菌落数计算1、若两个平板均为“无法计数”,则填“36三、稀释度菌落数的计算稀释度例110-1例210-2例310-3例410-4菌落总数报告平板1无法计数无法计数无法计数28平板2无法计数多不可计28827平均无法计数多不可计28828三、稀释度菌落数的计算稀释度例1例2例3例4菌落总数报告平板37稀释度:原溶液被冲淡的程度。稀释倍数:溶液被稀释的倍数。例如:稀释度为10-1和10-2,即1:10,1:100稀释倍数依次是10倍,100倍。
四、菌落总数的计算方法稀释度高稀释度:原溶液被冲淡的程度。四、菌落总数的计算方法稀释度高381、选择稀释度菌落数在30~300之间的,若只有一个,则用该稀释度菌落数乘以相应稀释倍数2、若所有稀释度的平板上菌落数都大于300CFU,则对稀释度最高的平板进行计数,结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。3、若所有稀释度的平板菌落数均小于30CFU,则应按稀释度最低的平板菌落数计算。
四、菌落总数的计算方法1、选择稀释度菌落数在30~300之间的,若只有一个,则用该394、若所有稀释度平板均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数计算。5、若所有稀释度的平板菌落数一部分小于30CFU或大于300CFU时,则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数计算。4、若所有稀释度平板均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数40试样例次稀释度选定计数稀释度菌落总数/(CFU/mL)10-210-310-41平均菌落数380521810-3520002无法计数56831210-4312000032612510-22600400010-2<100531529210-3290006多不可计2873410-3,10-4表2菌落总数计算方法汇总表试样例次稀释度选定计数菌落总数/(CFU/mL)10-210416、若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时,按如下公式计算:
N=∑C/(n1+0.1n2)d…………(1)
式中:
N―样品中菌落数;
∑C―适宜计数范围内平板菌落数之和;
nl―第一个适宜稀释度平板数;
n2―第二个适宜稀释度平板数;
d―稀释因子(第一稀释度)。6、若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时,按如下42稀释度10-310-410-5菌落总数CFU/ml报告CFU/ml平板128835?平板228633平均例6、菌落总数计数
N==1816=2918181728734稀释度10-310-410-5菌落总数报告平板128835?43五、报告原则1、菌落数小于100CFU时,按照“四舍五入”原则修约,以整数报告。2、菌落数大于或等于100CFU时,第3位数字采用“四舍五入”原则修约后,取前2位数字,后而用0代替位数;也可以用10的指数形式来表示,按照“四舍五入”修约后,采用两位有效数字。五、报告原则1、菌落数小于100CFU时,按照“四舍五入”原44五、报告原则3、若所有平板上为蔓延菌落而无法计数,则报告菌落蔓延。4、若空白
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