第二十章螺旋体课件

二、回归热螺旋体

回归热螺旋体是以节肢动物为媒介引起人类回归热的病原体。在疏螺旋体中能引起该病的螺旋体有两种：一种是以体虱为传播媒介引起流行性回归热的回归热疏螺旋体，另一种是以软蜱为传播媒介引起地方性回归热的赫姆斯疏螺旋体二、回归热螺旋体1血液涂片×200血液涂片×2002第三节钩端螺旋体属

钩端螺旋体是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物钩端螺旋体种类很多，可分为两个种：问号钩端螺旋体能引起人类和动物钩端螺旋体病该病呈世界性分布双曲钩端螺旋体(非致病性(即腐生性)

第三节钩端螺旋体属3

一、生物学性状（一）形态与染色螺旋盘绕细密、规则、一端或两端弯曲呈钩状，在暗视野显微镜下观察形似细小闪亮的珍珠串，运动活泼。常使菌体呈C、S或8字形。G－，但着色较难。常用Fontana镀银染色法，钩端螺旋体呈棕褐色

4（二）.培养和生化反应钩端螺旋体是较易人工培养的致病性螺旋体。需氧，营养要求不高。常用Korthof培养基(含10%兔血清、蛋白胨、磷酸缓冲液、pH7.4)培养经25～30℃培养1-2w后，在液体培养基中呈半透明云雾状生长，在半固体培养基中形成扁平、透明、圆形菌落。用复方明胶液体培养基培养5-7d可达生长高峰（二）.培养和生化反应钩端螺旋体是较易人工培5

第二期全身皮肤粘膜出现梅毒疹、淋巴结肿大，亦可侵犯骨、眼及中枢神经系统。在梅毒疹和淋巴结中含有大量梅毒螺旋体。由于抗体产生，即使不治疗症状亦可在3w～3个月后消退。从硬性下疳至梅毒疹消失后一年之内称为早期梅毒，传染性强，但损伤性较小。第二期全身6（三）.抵抗力

对热和酸抵抗力弱，60℃1min即死亡，4℃冰箱中可存活1-2w。但在中性的湿土或水中能存活数月，这在钩端螺旋体的传播上有重要意义（三）.抵抗力7（四）.分类致病性钩端螺旋体目前可按抗原构造和按DNA同源性两种方法进行分类1.按抗原构造分类根据致病性钩端螺旋体属特异抗原、群特异抗原、型特异抗原性不同分类目前全世界已发现问号钩端螺旋体有25个血清群、273个血清型。我国常见的问号钩端螺旋体菌株有19个血清群、74个血清型

2.按DNA同源性分类通过DNA杂交技术将主要的致病性分为6组（四）.分类致病性钩端螺旋体目前可按抗原构造和按DNA8二、致病性与免疫性

（一）.传染方式其中以鼠类和猪为主要传染源和储存宿主。动物感染后多不发病，但钩端螺旋体在肾脏长期繁殖，并随尿不断排出，污染环境。人类接触这些被污染的环境，螺旋体就可通过破损的皮肤或粘膜侵入机体而感染。孕妇感染后，亦可通过胎盘感染胎儿导致流产。偶有经哺乳传给婴儿者或经吸血昆虫传播而发病者二、致病性与免疫性9第二十章螺旋体课件10（

(二）钩端螺旋体致病物质溶血素类似磷脂酶作用，能破坏红细胞膜而溶血内毒素样物质类似革兰阴性菌的内毒素只是活性较低细胞毒因子将之注入小白鼠体内，可出现肌肉痉挛、呼吸困难而死亡（

(二）钩端螺旋体致病物质11（三）所致疾病钩端螺旋体自皮肤粘膜眼结膜等侵入，在局部迅速繁殖，并经淋巴进入血液或直接进入血流，引起钩端螺旋体血症患者出现高热、乏力、头痛、腓肠肌痛、眼结膜充血、淋巴结肿大等症状。患者有全身毛血细管内皮细胞损伤并伴有微循环障碍，以及肝、肾功能损害，严重病例可出现休克、DIC、黄疸、出血、心肾功能不全、脑膜炎等（三）所致疾病12由于所感染钩端螺旋体型别、毒力、数量及个体免疫状态不同，其病程的发展和临床症状的轻重有很大差异，表现为各种临床类型。临床上常见的为：①黄疸出血型主要表现为败血症、出血、黄疸与肝肾损害等症状，又称外尔病；②流感伤寒型早期有败血症，症状如流感或伤寒，但较轻，内脏损害较少，部分病人在退热后，可发生钩端螺旋体性虹膜睫状体炎、脉络膜炎或全血管内膜炎;也可有脑底多发性栓塞性动脉炎。其发病机制可能是超敏反应所致由于所感染钩端螺旋体型别、毒力、数量及个体免疫状态不13（四）免疫性病后或隐性感染后可获得对同型钩端螺旋体的持久免疫力，但对异型钩端螺旋体仅有部分或无抵抗力,故有再感染的可能性。病后1-2w随着特异性抗体的增加，调理作用的发挥，吞噬功能的增强，血流中的钩端螺旋体迅速被清除,但肾脏内的钩端螺旋体不易被清除,因此尿中排菌可达数周数、月甚至数年而成为带菌者（四）免疫性14（五）.微生物学检查法

钩端螺旋体病的临床表现多种多样，易与其他传染病混淆，因此微生物学检查对钩端螺旋体病的确诊甚为重要1.病原体检测发病10d内取血，1w后取尿，有脑膜刺激症状者需取脑脊液(CSF)进行检查（1）直接镜检将标本用差速离心集菌后作暗视野检查，或用Fontana镀银法染色镜检。还可用直接IF法或免疫酶染色法检查（五）.微生物学检查法15（2）分离培养与鉴定将检查标本接种于Korthof培养基中，25-30℃培养2-4w(或用复方明胶培养基培养5-7d)。如有生长，培养液变混浊，用暗视野显微镜检查有无钩端螺旋体存在。如有，再用血清学方法鉴定其群和型

（2）分离培养与鉴定将检查标本接种于Korthof培16（3）动物实验是分离钩端螺旋体的一种敏感方法。常用的实验动物有豚鼠及黄地鼠。将标本注入其腹腔，一般3-5d后。取心血及腹腔液镜检和培养。死后剖检可见皮下和肺部有大小不等的血斑，在脏器中可查见有大量钩端螺旋体（4）其他检测法用同位素或生物素标记DNA探针检查较培养法快速、敏感。此外，限制性内切酶指纹图谱可用于钩端螺旋体菌株鉴定、分型以及抗原变异的研究（3）动物实验是分离钩端螺旋体的一种敏感方法。常用的172.血清学诊断应采取病程早、晚双份血清。一般在病初及发病第3-4w各采一次。有脑膜刺激症状者也可采CSF检测

2.血清学诊断应采取病程早、晚双份血清。一般18（六）防治原则钩端螺旋体病的预防措施主要是搞好防鼠、灭鼠工作，加强对带菌家畜的管理，保护水资源以及对易感人群进行多价死疫菌接种。接种的疫苗必须包括当地流行的钩端螺旋体主要血清型。国内试用钩端螺旋体外膜亚单位菌苗，有一定效果。今后可望生产基因工程高效全价疫苗。治疗首选青霉素，亦可用庆大霉素、强力霉素等（六）防治原则19第三篇真菌学

第21章真菌概述

真菌(fungus)是一大类具有典型细胞核的真核细胞型微生物。细胞核高度分化，有核膜和核仁，胞浆内有完整的细胞壁。细胞器由几丁质或纤维素组成。但是真菌不含叶绿素，不分化根、茎、叶。除少数为单细胞外，大部分真菌为多细胞结构第三篇真菌学20真菌在自然界分布广泛、且种类繁多、数量较大，目前已有一万个属、十二万种之多。其中绝大多数有益于人类，少数可引起人类及动、植物疾病。如可引起人类感染性、中毒性及超敏反应性疾病近年来，真菌病发病率有明显上升趋势，尤其条件致病性真菌引起的感染，已引起医学界的高度重视真菌在自然界分布广泛、且种类繁多、数量较大，目前已21

第一节生物学性状

一、形态与结构

真菌有单细胞和多细胞两类。单细胞真菌有称酵母菌，多细胞真菌又称霉菌，如条件发生改变，两种形态发生互变，称为二相性。

22(一)单细胞真菌单细胞真菌呈圆形或椭圆形，如酵母型和类酵母型真菌。酵母型真菌不产生菌丝，由母细胞以芽生方式繁殖，其菌落与细菌的菌落相似。类酵母型真菌也是芽生方式繁殖，其延长的芽体可伸进培养基内，称假菌丝

(一)单细胞真菌23

多细胞真菌基本上都是由菌丝和孢子两大部分组成

气中(生)菌丝菌丝营养菌丝生殖菌丝

24

1菌丝

孢子出嫩芽，称为芽管。芽管逐渐延长呈丝状，称为菌丝。菌丝可长出许多分枝，交织成团，称菌丝体菌丝分为有隔菌丝与无隔菌丝。绝大部分的病原性丝状真菌为有隔菌丝。伸入到培养基内者称为营养菌丝；露出于培养基表面的菌丝称为气中菌丝；部分气中菌丝可产生具有不同形状、大小和颜色的孢子，称为生殖菌丝。显微镜下菌丝的不同形态可作为识别的依据

1菌丝25不同种类的真菌有不同形态的菌丝，故菌丝的形态有助于真菌的鉴别不同种类的真菌有不同形态的菌丝，故菌丝的形态有262.孢子孢子是真菌的生殖结构，是由生殖菌丝产生的。大多数真菌是通过各种有性或无性的孢子繁殖的。无性孢子又分：分生孢、子、叶状孢子和孢子囊孢子。孢子也是真菌鉴定和分类的主要依据2.孢子孢子是真菌的生殖结构，是由生殖菌27二真菌的培养特性

真菌的营养要求不高，常用沙保弱培养基培养。真菌在各种不同培养基中虽皆能生长，但菌落及菌体形态却有很大差别。为了统一标准，鉴定时以沙保弱培养基上生长的真菌形态为准。大多数病原性真菌生长缓慢，培养1-4w才出现典型菌落，培养真菌的温度为22-28℃，但某些深部感染的真菌其最适生长温度为37℃。最适酸碱度为pH4.0-6.0

二真菌的培养特性28真菌菌丝和孢子囊孢子真菌菌丝和孢子囊孢子29在沙保弱培养基上，不同种的真菌可形成以下２种类型的菌落：1.酵母型菌落菌落圆形、柔软、光滑、湿润。隐球菌菌落即属此型。有部分单细胞真菌出芽繁殖后，其牙管延长不与母体分离，形成假菌丝，其延长的芽体可伸进培养基内，称为类酵母型菌落。白色念珠菌菌落即属此型2.丝状型菌落菌落系由多细胞菌丝体所组成，由于菌丝一部分向空中生长，并形成孢子，从而使菌落呈絮状。见于大多数丝状真菌或霉菌的菌落在沙保弱培养基上，不同种的真菌可形成以下２种类型的菌30

三抵抗力真菌对热的抵抗力不强。孢子不同于细菌芽胞，一般60℃经1h即被杀灭。对干燥、日光、紫外线及多种化学药物的耐受性较强。对1%-3%石碳酸、2.5%碘酊、0.1%升汞及10%甲醛液则比较敏感。用甲醛液熏蒸被真菌污染的物品，可达到消毒的目的。对常用的抗细菌的抗生素不敏感，而对抗真菌药敏感三抵抗力31第二节致病性与免疫性

一、致病性(一)真菌性感染自然界存在的真菌种类很多，目前发现对人有致病性的真菌和条件致病性真菌已超过百种。其中，同一种疾病可以由不同种类真菌引起；一种真菌也可以引起不同类型的疾病。由真菌引起感染并表现临床症状者称为真菌病。引起真菌病的真菌，有的属于病原性真菌；有的属于条件致病性真菌第二节致病性与免疫性321致病性真菌感染

主要是外源性真菌感染。浅部真菌如皮肤癣菌有嗜角质性，并能分泌角蛋白酶水解角蛋白。在局部大量繁殖后，通过机械刺激和代谢产物的作用，引起局部的炎症和病变深部真菌感染后不被杀死，能在吞噬细胞中生长、繁殖，引起慢性肉芽肿或组织溃疡坏死1致病性真菌感染332条件致病性真菌感染

主要由一些内源性真菌感染，如假丝酵母菌、曲霉、毛霉。这些真菌致病性不强，多系各种诱因使机体防御机能显著低下时才能发生。例如，肿瘤、糖尿病、免疫缺陷、长期大量使用光谱抗生素、皮质激素放疗或应用导管、手术等过程中易继发感染。例如导管、插管入口为真菌入侵提供门户，真菌粘附其上，并不断增殖，从而侵入血液，并播散至全身2条件致病性真菌感染34

(二)真菌性超敏反应

1.按性质可分为：

*感染性超敏反应在病原性真菌感染的基础上发生的超敏反应，属Ⅳ型超敏反应*接触性超敏反应即吸入或食入真菌孢子或菌丝而引起的超敏反应，分别属于Ⅰ-Ⅳ型超敏反应(二)真菌性超敏反应352.部位分为：

*皮肤超敏反应主要表现有过敏性皮炎、湿疹、荨麻疹、瘙痒症等*呼吸道超敏反应最主要的是支气管哮喘以及过敏性鼻炎。农民肺是由于吸入含真菌孢子的霉草尘而引起的，以呼吸困难、咳嗽、发热、不适、紫绀等为特征的一种综合病症*消化道超敏反应与真菌有一定关系，多由于食物中混入真菌所致

2.部位分为：36

(三)真菌毒素中毒真菌毒素是由生长在农作物、食物或饲料上的真菌在其代谢过程中产生的。人类则因食入含有真菌的食物而引起急、慢性中毒。真菌毒素中毒极易引起肝、肾、神经系统功能障碍以及造血机能损伤。几年前，发生在河北及河南两者的霉甘蔗中毒即是由节菱孢菌等引起，毒素作用于脑，引起抽搐、昏迷、死亡率达20%(三)真菌毒素中毒37另外，有些真菌的毒素与致癌有关。已证明黄曲霉所产生的黄曲霉毒素有致癌作用。还有一些曲霉也可以产生类似黄曲霉毒素的致癌物质，如黑曲霉、红曲霉、棒状曲霉、烟曲霉、棕曲霉、文氏曲霉以及杂色曲霉等另外，有些真菌的毒38二、免疫性

真菌在自然界分布广泛，但真菌病的发病率较低，说明人体对真菌有较高的非特异性免疫力。在感染过程中，也可产生特异性细胞免疫和体液免疫。但一般说来，免疫力不强二、免疫性39(一)天然免疫构成机体天然抗真菌免疫因素主要有：1.机体的屏障作用和正常菌群的拮抗作用健康的皮肤粘膜对皮肤癣菌具有一定的屏障作用。皮脂腺分泌的不饱和脂肪酸有杀真菌作用。例如，学龄前儿童皮脂腺发育不够完善，头皮分泌的不饱和脂肪酸较成人少，因而儿童易感染头癣；成人的趾间和足底无皮脂腺，也是易发生足癣的原因之一(一)天然免疫构成机体天然抗真菌免疫因素主要有：40白色念珠菌是口腔、阴道、肠道的正常菌群成员。正常情况下与其他肠道菌构成拮抗关系。如大肠埃希菌类能产生细菌素，可抑制其大量繁殖。但长期应用广谱抗生素破坏菌群间的拮抗关系，则可引起继发性白色念珠菌感内分泌失调也是促使某种真菌感染的一种因素。铁浓度过高有助于细菌和真菌的感染

白色念珠菌是口腔、阴道、肠道的正常菌群成员。正常情况412.吞噬作用真菌进入机体后易被单核巨噬细胞及中性粒细胞吞噬。但被吞噬的真菌孢子并不能完全被杀灭。有的可能在细胞内增殖，刺激组织增生，引起细胞浸润形成肉芽肿；有的还被吞噬细胞带到深部组织器官(如脑或内脏器官)中增殖，引起内部病变此外，正常体液中的抗菌物质在抗真菌感染方面也具有一定作用2.吞噬作用真菌进入机体后易被单核巨噬细胞及中性粒42

(二)获得性免疫真菌感染产生的免疫以细胞免疫为主，同时可诱发迟发型超敏反应1.抗体的作用深部感染性真菌可刺激机体产生相应抗体。但这些抗体的抗真菌作用尚不能肯定。如念珠菌阴道炎患者的血液及阴道分泌物中，可证明有特异性的IgG及IgA抗体，但不能抑制阴道中的念珠菌感染。检测抗体对深部真菌感染的诊断有参考价值浅部真菌感染诱生抗体的水平很低，并且易出现交叉反应，无应用价值(二)获得性免疫真菌432.细胞免疫及超敏反应真菌性感染与细胞免疫有较密切的关系。一般认为真菌感染的恢复主要靠细胞免疫IFN-γ和IL-2等激活巨噬细胞、NK细胞和CTL等，参加对真菌的杀伤。播散性真菌感染患者常伴有T细胞功能的抑制，如AIDS、淋巴瘤和使用免疫抑制剂等。但细胞免疫对真菌感染者的康复起何作用尚不清楚。真菌感染可引起迟发性超敏反应真菌感染一般不能形成稳固的病后免疫2.细胞免疫及超敏反应真菌性感染与细胞免疫有较密切44

第三节微生物学检查法

真菌的形态和结构有一定的特殊性，一般可以通过直接镜检和培养进行鉴定

(一)标本不论直接涂片或是培养检查，皆须采取新鲜标本。浅部感染可取病变部位的鳞屑、病发或甲屑。深部感染真菌则取病变部位分泌物、排泄物、体液、痰液及血液等第三节微生物学45

(二)直接镜检

粘稠或含角质的甲屑类标本，先用10%KOH加于标本片上，不染色，微加温后用低倍或高倍显微镜观察。如见到孢子或菌丝可初步诊断为真菌病。液体标本需离心，取沉淀物直接镜检或染色检查。怀疑隐球菌感染时取CSF做墨汁负染色观察(二)直接镜检46(三)分离培养

对于直接镜检不能确诊时，则需进行真菌培养。一般常用含抗生素的沙保弱培养基，置25-28℃(丝状真菌)或37℃(酵母型真菌)培养数周，观察菌落特征。必要时作小培养与镜观察菌丝、孢子特征进行鉴定若疑为假丝酵母菌取菌落接种血清或玉米面培养基内，观察有无芽管生成和厚膜孢子形成，进行鉴定(三)分离培养47

第四节真菌感染的防治原则

皮肤癣菌感染的预防，目前尚无有效的方法，主要是注意清洁卫生，避免直接或间接与患者接触。预防足癣应经常保持鞋袜干燥，透气性好，以消除皮肤癣菌增殖的条件。浅部真菌感染的治疗，局部可用市售的癣药水或药膏，但较难根治，易复发

第四节真菌感染的防治原则48

对深部真菌病的预防，主要应除去各种诱因，提高机体抵抗力。治疗药物有二性霉素乙、5-氟胞嘧啶、克霉唑、益康唑等。但这些药物一般副作用都较大，治疗有效剂量与中毒剂量接近，实用性差。抗真菌新药酮康唑(里素劳)、伊曲康唑(斯皮仁诺)具有抗菌谱广，尤其对曲霉疗效好副作用低

预防真菌性食物中毒，应严禁销售和食用发霉的食品，加强市场管理及卫生宣传对深部真菌病的预防49二、回归热螺旋体

回归热螺旋体是以节肢动物为媒介引起人类回归热的病原体。在疏螺旋体中能引起该病的螺旋体有两种：一种是以体虱为传播媒介引起流行性回归热的回归热疏螺旋体，另一种是以软蜱为传播媒介引起地方性回归热的赫姆斯疏螺旋体二、回归热螺旋体50血液涂片×200血液涂片×20051第三节钩端螺旋体属

钩端螺旋体是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物钩端螺旋体种类很多，可分为两个种：问号钩端螺旋体能引起人类和动物钩端螺旋体病该病呈世界性分布双曲钩端螺旋体(非致病性(即腐生性)

第三节钩端螺旋体属52

一、生物学性状（一）形态与染色螺旋盘绕细密、规则、一端或两端弯曲呈钩状，在暗视野显微镜下观察形似细小闪亮的珍珠串，运动活泼。常使菌体呈C、S或8字形。G－，但着色较难。常用Fontana镀银染色法，钩端螺旋体呈棕褐色

53（二）.培养和生化反应钩端螺旋体是较易人工培养的致病性螺旋体。需氧，营养要求不高。常用Korthof培养基(含10%兔血清、蛋白胨、磷酸缓冲液、pH7.4)培养经25～30℃培养1-2w后，在液体培养基中呈半透明云雾状生长，在半固体培养基中形成扁平、透明、圆形菌落。用复方明胶液体培养基培养5-7d可达生长高峰（二）.培养和生化反应钩端螺旋体是较易人工培54

第二期全身皮肤粘膜出现梅毒疹、淋巴结肿大，亦可侵犯骨、眼及中枢神经系统。在梅毒疹和淋巴结中含有大量梅毒螺旋体。由于抗体产生，即使不治疗症状亦可在3w～3个月后消退。从硬性下疳至梅毒疹消失后一年之内称为早期梅毒，传染性强，但损伤性较小。第二期全身55（三）.抵抗力

对热和酸抵抗力弱，60℃1min即死亡，4℃冰箱中可存活1-2w。但在中性的湿土或水中能存活数月，这在钩端螺旋体的传播上有重要意义（三）.抵抗力56（四）.分类致病性钩端螺旋体目前可按抗原构造和按DNA同源性两种方法进行分类1.按抗原构造分类根据致病性钩端螺旋体属特异抗原、群特异抗原、型特异抗原性不同分类目前全世界已发现问号钩端螺旋体有25个血清群、273个血清型。我国常见的问号钩端螺旋体菌株有19个血清群、74个血清型

2.按DNA同源性分类通过DNA杂交技术将主要的致病性分为6组（四）.分类致病性钩端螺旋体目前可按抗原构造和按DNA57二、致病性与免疫性

（一）.传染方式其中以鼠类和猪为主要传染源和储存宿主。动物感染后多不发病，但钩端螺旋体在肾脏长期繁殖，并随尿不断排出，污染环境。人类接触这些被污染的环境，螺旋体就可通过破损的皮肤或粘膜侵入机体而感染。孕妇感染后，亦可通过胎盘感染胎儿导致流产。偶有经哺乳传给婴儿者或经吸血昆虫传播而发病者二、致病性与免疫性58第二十章螺旋体课件59（

(二）钩端螺旋体致病物质溶血素类似磷脂酶作用，能破坏红细胞膜而溶血内毒素样物质类似革兰阴性菌的内毒素只是活性较低细胞毒因子将之注入小白鼠体内，可出现肌肉痉挛、呼吸困难而死亡（

(二）钩端螺旋体致病物质60（三）所致疾病钩端螺旋体自皮肤粘膜眼结膜等侵入，在局部迅速繁殖，并经淋巴进入血液或直接进入血流，引起钩端螺旋体血症患者出现高热、乏力、头痛、腓肠肌痛、眼结膜充血、淋巴结肿大等症状。患者有全身毛血细管内皮细胞损伤并伴有微循环障碍，以及肝、肾功能损害，严重病例可出现休克、DIC、黄疸、出血、心肾功能不全、脑膜炎等（三）所致疾病61由于所感染钩端螺旋体型别、毒力、数量及个体免疫状态不同，其病程的发展和临床症状的轻重有很大差异，表现为各种临床类型。临床上常见的为：①黄疸出血型主要表现为败血症、出血、黄疸与肝肾损害等症状，又称外尔病；②流感伤寒型早期有败血症，症状如流感或伤寒，但较轻，内脏损害较少，部分病人在退热后，可发生钩端螺旋体性虹膜睫状体炎、脉络膜炎或全血管内膜炎;也可有脑底多发性栓塞性动脉炎。其发病机制可能是超敏反应所致由于所感染钩端螺旋体型别、毒力、数量及个体免疫状态不62（四）免疫性病后或隐性感染后可获得对同型钩端螺旋体的持久免疫力，但对异型钩端螺旋体仅有部分或无抵抗力,故有再感染的可能性。病后1-2w随着特异性抗体的增加，调理作用的发挥，吞噬功能的增强，血流中的钩端螺旋体迅速被清除,但肾脏内的钩端螺旋体不易被清除,因此尿中排菌可达数周数、月甚至数年而成为带菌者（四）免疫性63（五）.微生物学检查法

钩端螺旋体病的临床表现多种多样，易与其他传染病混淆，因此微生物学检查对钩端螺旋体病的确诊甚为重要1.病原体检测发病10d内取血，1w后取尿，有脑膜刺激症状者需取脑脊液(CSF)进行检查（1）直接镜检将标本用差速离心集菌后作暗视野检查，或用Fontana镀银法染色镜检。还可用直接IF法或免疫酶染色法检查（五）.微生物学检查法64（2）分离培养与鉴定将检查标本接种于Korthof培养基中，25-30℃培养2-4w(或用复方明胶培养基培养5-7d)。如有生长，培养液变混浊，用暗视野显微镜检查有无钩端螺旋体存在。如有，再用血清学方法鉴定其群和型

（2）分离培养与鉴定将检查标本接种于Korthof培65（3）动物实验是分离钩端螺旋体的一种敏感方法。常用的实验动物有豚鼠及黄地鼠。将标本注入其腹腔，一般3-5d后。取心血及腹腔液镜检和培养。死后剖检可见皮下和肺部有大小不等的血斑，在脏器中可查见有大量钩端螺旋体（4）其他检测法用同位素或生物素标记DNA探针检查较培养法快速、敏感。此外，限制性内切酶指纹图谱可用于钩端螺旋体菌株鉴定、分型以及抗原变异的研究（3）动物实验是分离钩端螺旋体的一种敏感方法。常用的662.血清学诊断应采取病程早、晚双份血清。一般在病初及发病第3-4w各采一次。有脑膜刺激症状者也可采CSF检测

2.血清学诊断应采取病程早、晚双份血清。一般67（六）防治原则钩端螺旋体病的预防措施主要是搞好防鼠、灭鼠工作，加强对带菌家畜的管理，保护水资源以及对易感人群进行多价死疫菌接种。接种的疫苗必须包括当地流行的钩端螺旋体主要血清型。国内试用钩端螺旋体外膜亚单位菌苗，有一定效果。今后可望生产基因工程高效全价疫苗。治疗首选青霉素，亦可用庆大霉素、强力霉素等（六）防治原则68第三篇真菌学

第21章真菌概述

真菌(fungus)是一大类具有典型细胞核的真核细胞型微生物。细胞核高度分化，有核膜和核仁，胞浆内有完整的细胞壁。细胞器由几丁质或纤维素组成。但是真菌不含叶绿素，不分化根、茎、叶。除少数为单细胞外，大部分真菌为多细胞结构第三篇真菌学69真菌在自然界分布广泛、且种类繁多、数量较大，目前已有一万个属、十二万种之多。其中绝大多数有益于人类，少数可引起人类及动、植物疾病。如可引起人类感染性、中毒性及超敏反应性疾病近年来，真菌病发病率有明显上升趋势，尤其条件致病性真菌引起的感染，已引起医学界的高度重视真菌在自然界分布广泛、且种类繁多、数量较大，目前已70

第一节生物学性状

一、形态与结构

真菌有单细胞和多细胞两类。单细胞真菌有称酵母菌，多细胞真菌又称霉菌，如条件发生改变，两种形态发生互变，称为二相性。

71(一)单细胞真菌单细胞真菌呈圆形或椭圆形，如酵母型和类酵母型真菌。酵母型真菌不产生菌丝，由母细胞以芽生方式繁殖，其菌落与细菌的菌落相似。类酵母型真菌也是芽生方式繁殖，其延长的芽体可伸进培养基内，称假菌丝

(一)单细胞真菌72

多细胞真菌基本上都是由菌丝和孢子两大部分组成

气中(生)菌丝菌丝营养菌丝生殖菌丝

73

1菌丝

孢子出嫩芽，称为芽管。芽管逐渐延长呈丝状，称为菌丝。菌丝可长出许多分枝，交织成团，称菌丝体菌丝分为有隔菌丝与无隔菌丝。绝大部分的病原性丝状真菌为有隔菌丝。伸入到培养基内者称为营养菌丝；露出于培养基表面的菌丝称为气中菌丝；部分气中菌丝可产生具有不同形状、大小和颜色的孢子，称为生殖菌丝。显微镜下菌丝的不同形态可作为识别的依据

1菌丝74不同种类的真菌有不同形态的菌丝，故菌丝的形态有助于真菌的鉴别不同种类的真菌有不同形态的菌丝，故菌丝的形态有752.孢子孢子是真菌的生殖结构，是由生殖菌丝产生的。大多数真菌是通过各种有性或无性的孢子繁殖的。无性孢子又分：分生孢、子、叶状孢子和孢子囊孢子。孢子也是真菌鉴定和分类的主要依据2.孢子孢子是真菌的生殖结构，是由生殖菌76二真菌的培养特性

真菌的营养要求不高，常用沙保弱培养基培养。真菌在各种不同培养基中虽皆能生长，但菌落及菌体形态却有很大差别。为了统一标准，鉴定时以沙保弱培养基上生长的真菌形态为准。大多数病原性真菌生长缓慢，培养1-4w才出现典型菌落，培养真菌的温度为22-28℃，但某些深部感染的真菌其最适生长温度为37℃。最适酸碱度为pH4.0-6.0

二真菌的培养特性77真菌菌丝和孢子囊孢子真菌菌丝和孢子囊孢子78在沙保弱培养基上，不同种的真菌可形成以下２种类型的菌落：1.酵母型菌落菌落圆形、柔软、光滑、湿润。隐球菌菌落即属此型。有部分单细胞真菌出芽繁殖后，其牙管延长不与母体分离，形成假菌丝，其延长的芽体可伸进培养基内，称为类酵母型菌落。白色念珠菌菌落即属此型2.丝状型菌落菌落系由多细胞菌丝体所组成，由于菌丝一部分向空中生长，并形成孢子，从而使菌落呈絮状。见于大多数丝状真菌或霉菌的菌落在沙保弱培养基上，不同种的真菌可形成以下２种类型的菌79

三抵抗力真菌对热的抵抗力不强。孢子不同于细菌芽胞，一般60℃经1h即被杀灭。对干燥、日光、紫外线及多种化学药物的耐受性较强。对1%-3%石碳酸、2.5%碘酊、0.1%升汞及10%甲醛液则比较敏感。用甲醛液熏蒸被真菌污染的物品，可达到消毒的目的。对常用的抗细菌的抗生素不敏感，而对抗真菌药敏感三抵抗力80第二节致病性与免疫性

一、致病性(一)真菌性感染自然界存在的真菌种类很多，目前发现对人有致病性的真菌和条件致病性真菌已超过百种。其中，同一种疾病可以由不同种类真菌引起；一种真菌也可以引起不同类型的疾病。由真菌引起感染并表现临床症状者称为真菌病。引起真菌病的真菌，有的属于病原性真菌；有的属于条件致病性真菌第二节致病性与免疫性811致病性真菌感染

主要是外源性真菌感染。浅部真菌如皮肤癣菌有嗜角质性，并能分泌角蛋白酶水解角蛋白。在局部大量繁殖后，通过机械刺激和代谢产物的作用，引起局部的炎症和病变深部真菌感染后不被杀死，能在吞噬细胞中生长、繁殖，引起慢性肉芽肿或组织溃疡坏死1致病性真菌感染822条件致病性真菌感染

主要由一些内源性真菌感染，如假丝酵母菌、曲霉、毛霉。这些真菌致病性不强，多系各种诱因使机体防御机能显著低下时才能发生。例如，肿瘤、糖尿病、免疫缺陷、长期大量使用光谱抗生素、皮质激素放疗或应用导管、手术等过程中易继发感染。例如导管、插管入口为真菌入侵提供门户，真菌粘附其上，并不断增殖，从而侵入血液，并播散至全身2条件致病性真菌感染83

(二)真菌性超敏反应

1.按性质可分为：

*感染性超敏反应在病原性真菌感染的基础上发生的超敏反应，属Ⅳ型超敏反应*接触性超敏反应即吸入或食入真菌孢子或菌丝而引起的超敏反应，分别属于Ⅰ-Ⅳ型超敏反应(二)真菌性超敏反应842.部位分为：

*皮肤超敏反应主要表现有过敏性皮炎、湿疹、荨麻疹、瘙痒症等*呼吸道超敏反应最主要的是支气管哮喘以及过敏性鼻炎。农民肺是由于吸入含真菌孢子的霉草尘而引起的，以呼吸困难、咳嗽、发热、不适、紫绀等为特征的一种综合病症*消化道超敏反应与真菌有一定关系，多由于食物中混入真菌所致

2.部位分为：85

(三)真菌毒素中毒真菌毒素是由生长在农作物、食物或饲料上的真菌在其代谢过程中产生的。人类则因食入含有真菌的食物而引起急、慢性中毒。真菌毒素中毒极易引起肝、肾、神经系统功能障碍以及造血机能损伤。几年前，发生在河北及河南两者的霉甘蔗中毒即是由节菱孢菌等引起，毒素作用于脑，引起抽搐、昏迷、死亡率达20%(三)真菌毒素中毒86另外，有些真菌的毒素与致癌有关。已证明黄曲霉所产生的黄曲霉毒素有致癌作用。还有一些曲霉也可以产生类似黄曲霉毒素的致癌物质，如黑曲霉、红曲霉、棒状曲霉、烟曲霉、棕曲霉、文氏曲霉以及杂色曲霉等另外，有些真菌的毒87二、免疫性

真菌在自然界分布广泛，但真菌病的发病率较低，说明人体对真菌有较高的非特异性免疫力。在感染过程中，也可产生特异性细胞免疫和体液免疫。但一般说来，免疫力不强二、免疫性88(一)天然免疫构成机体天然抗真菌免疫因素主要有：1.机体的屏障作用和正常菌群的拮抗作用健康的皮肤粘膜对皮肤癣菌具有一定的屏障作用。皮脂腺分泌的不饱和脂肪酸有杀真菌作用。例如，学龄前儿童皮脂腺发育不够完善，头皮分泌的不饱和脂肪酸较成人少，因而儿童易感染头癣；成人的趾间和足底无皮脂腺，也是易发生足癣的原因之一(一)天然免疫构成机体天然抗真菌免疫因素主要有：89白色念珠菌是口腔、阴道、肠道的正常菌群成员。正常情况下与其他肠道菌构成拮抗关系。如大肠埃希菌类能产生细菌素，可抑制其大量繁殖。但长期应用广谱抗生素破坏菌群间的拮抗关系，则可引起继发性白色念珠菌感内分泌失调也是促使某种真菌感染的一种因素。铁浓度过高有助于细菌和真菌的感染

白色念珠菌是口腔、阴道、肠道的正常菌群成员。正常情况902.