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(共16套)最新人教版高中生物选修1(全册)配套PPT课件汇总如果暂时不需要,请您把我收藏一下。因为一旦关闭本页,可能就永远失去我了哦!请别问我是怎么知道的!一次小下载安逸一整年!小魔方站作品盗版必究目录2■高中生物课件(人教课标版)课题1:果酒和果醋的制作凉州词
唐朝——王翰葡萄美酒夜光杯,欲饮琵琶马上催。醉卧沙场君莫笑,古来征战几人回。
果酒果醋在酿造过程中,水果中富含的维生素、矿物质、氨基酸等被很好地保存,大大提高了原醋液的营养价值。实验表明,果醋中的醋酸、乳酸、氨基酸甘油和醛类化合物,对人的皮肤有柔和的刺激作用,能使血管扩张,增加血液循环,从而起到延缓衰老的作用。
以苹果、葡萄、山楂等为原料生产的果酒果醋饮料迎合了现代都市人绿色、健康的消费理念,也同时满足了现代都市女性保健、美容的需求。
学习目标1、说明果酒和果醋的制作原理2、设计果酒和果醋的发酵装置3、了解制作果酒和果醋的过程1、果酒的制作原理(1)果酒制作的原理是什么?写出反应式。(2)制作果酒的原料是什么?如果制作葡萄酒,取材时你认为应先冲洗还是先除去枝梗?(3)制作葡萄酒的酵母菌主要来源于哪里?其它杂菌会不会引起发酵液的污染?你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染?(4)果酒制作时应给予怎样的温度、空气条件?(5)关于酵母菌的生物学特性你知道哪些?一、基础知识分析1、果酒的制作原理(1)果酒制作的原理是什么?写出反应式。
酵母是兼性厌氧微生物,有氧时进行有氧呼吸;在厌氧条件下,将双糖或单糖进行糖酵解,并进行乙醇发酵,产生乙醇。条件:酶和温度
C6H12O6
+6O2CO2+6H2OC6H12O62CH3CH2OH+2CO21、果酒的制作原理(2)制作果酒的原料是什么?如果制作葡萄酒,取材时你认为应先冲洗还是先除去枝梗?一、基础知识分析制作果酒的原料是鲜果。制作葡萄酒时,应先冲洗葡萄,然后再除去枝梗,从而避免除去枝梗时,引起葡萄损坏,增加被杂菌感染的机会。1、果酒的制作原理(3)制作葡萄酒的酵母菌主要来源于哪里?其它杂菌会不会引起发酵液的污染?你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染?
制作葡萄酒的酵母菌来源于附着在葡萄皮上的野生酵母菌。杂菌不会引起发酵液的污染,因为首先,葡萄在榨汁前要清洗;其次,在缺氧、酸性的发酵液中,绝大多数微生物无法适应环境而被抑制。对发酵瓶、纱布、榨汁器等用具进行清洗并消毒。每次排气时只要拧松瓶盖,不要完全揭开瓶盖等。1、果酒的制作原理(4)果酒制作时应给予怎样的时间、温度、空气条件?思考时间:10-12天温度:18-25℃空气:缺氧厌氧制酒
1、果酒的制作原理(5)关于酵母菌的生物学特性你知道哪些?同化作用类型:异养异化作用类型:兼性厌氧型主要分布:土壤结构:单细胞分类:真核生物生殖(主要方式):出芽生殖2、果醋的制作原理(1)果醋制作的原理是什么?写出反应式。(2)制作果醋的原料是什么?如果制作葡萄醋应先如何处理鲜葡萄?为什么要加入果胶酶?(3)制作葡萄醋的醋酸菌主要来源于哪里?(4)果醋制作时应给予怎样的时间、温度、空气等条件?(5)关于醋酸菌的生物学特性你知道哪些?一、基础知识分析2、果醋的制作原理(1)果醋制作的原理是什么?写出反应式。
乙醇转变成乙酸的氧化过程是由醋酸杆菌完成的,这一过程是需氧过程。条件:酶和温度C2H5OH+O2CH3COOH+H2O2、果醋的制作原理(2)制作果醋的原料是什么?如果制作葡萄醋应先如何处理鲜葡萄?为什么要加入果胶酶?将葡萄洗净、蒸煮、榨汁,并加入一些果胶酶使细胞壁溶解,获取更多的果汁。2、果醋的制作原理(3)制作葡萄醋的醋酸菌主要来源于哪里?
制作葡萄醋的醋酸菌可以直接购买,或用选择培养基培养2、果醋的制作原理(4)果醋制作时应给予怎样的时间、温度、空气等条件?时间:7-8天温度:30-35℃空气:充足的氧有氧制醋
2、果醋的制作原理(5)关于醋酸菌的生物学特性你知道哪些?同化作用类型:异养异化作用类型:需氧主要分布:酸性环境结构:单细胞分类:原核生物生殖:分裂生殖二、果酒和果醋的发酵装置(1)实验室制作果酒、果醋的基本装置是什么?排气口、冲气口、出料口各有什么作用?(2)为什么排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接?(3)如果进行大规模生产果酒、果醋时,需要解决哪些问题?探究(1)实验室制作果酒、果醋的基本装置是什么?排气口、冲气口、出料口各有什么作用?(2)为什么排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接?排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接,其目的是防止空气中的微生物污染。思考(3)如果进行大规模生产果酒、果醋时,需要解决哪些问题?大规模生产果酒、果醋时,需要解决全面考虑,如:a:原料的来源和选择b:菌种的培养c:发酵设备、发酵条件的自动化控制d:严格控制杂菌污染等e:实际生产中还要考虑沉淀、消毒包装、保存,风味色泽等左:葡萄酒窖;中:啤酒酒窖;右:白酒酒窖
大规模生产果酒的发酵和保存三、了解制作果酒和果醋的过程(1)简述果酒、果醋制作的基本过程。(2)如何检验果酒、果醋的制作是否成功?(1)简述果酒、果醋制作的基本过程。1.对发酵瓶、纱布、榨汁器等用具进行清洗并消毒。2.取葡萄500g,去除枝梗和腐烂的叶子。3.用清水冲洗葡萄1-2次除去污物。(注意冲洗次数不宜太多)4.榨汁后装入发酵瓶。5.将发酵瓶置于适宜的温度(18-25℃)下发酵。6.简易装置2-4天排气一次。(拧松瓶盖)7.10天后,取样检验。8.加入醋酸菌或醋曲,然后移至30-35℃条件下发酵,适时充气。(2)如何检验果酒、果醋的制作是否成功?果酒的制作是否成功的鉴定方法是:嗅味和品尝、显微镜观察、用重铬酸钾检验酒精的存在果醋的制作是否成功的鉴定方法是:观察菌膜的形成、嗅味和品尝、比较发酵前后的PH值显微镜观察巩固练习1.下列关于果醋的制作,错误的是()A.果醋的制作需用醋酸菌,醋酸菌是一种好氧菌,所以在制作过程中需通氧气B.醋酸菌是一种嗜温菌,温度要求较高,一般在50℃左右C.醋酸菌能将果酒变成果醋D.当氧气、糖源充足时,醋酸菌可将葡萄中的糖分解成醋酸2.在制作果酒时如果一直往发酵罐中通入充足的氧气,会发生何种现象?()A酵母菌死亡,不产生酒精B酵母菌大量繁殖,长生较多酒精C酵母菌大量繁殖,不产生酒精D酵母菌数目较少,不长生酒精3.下列微生物属于严格厌氧的是:()酵母菌B.醋酸杆菌C.乳酸菌D.曲霉4.酵母菌在氧气充足的条件下,主要的生殖方式为()A出芽生殖B分裂生殖C孢子生殖D卵式生殖5.在酿酒的过程中,温度对酒精的发酵过程起到重要的作用,应把发酵温度控制在()A0-10℃B25-35℃C18-25℃D40℃以上6.在酿酒和酿醋的过程中都要涉及各种微生物,在上述两个过程中所涉及的微生物在结构上有什么本质区别?A前者有细胞结构,后者没有细胞结构B前者没有细胞结构,后者有细胞结构C前者有成形的细胞核,后者没有成形细胞核D前者没有成形的细胞核,后者有成形细胞核7.在制造葡萄醋时为什么要适时通过充气口充气A醋酸菌的新陈代谢类型为自养需氧型B醋酸菌的新陈代谢类型为异养需氧型C醋酸菌的新陈代谢类型为自养厌氧型D醋酸菌的新陈代谢类型为异养厌氧型8.在果酒制作实验结束时我们要检测试验是否成功,通常用重铬酸钾来检测酒精的有无,原理是在酸性条件下,重铬酸钾与酒精反应是()A蓝色B砖红色C灰绿色D深紫并带金属光泽
在酒的制作中,依种类分大体上可有白酒、果酒、啤酒和黄酒四类。制作方法各不相同,但相同部分是它们都是由酵母完成的。酵母在自然界中广泛分布,已知有几百种之多,也是应用最广的一类微生物。如面包制作、酒精制造、药用酵母片、酿酒等。酒的种类“干”是葡萄酒中的糖分要在一定的水平之下(低于4g/升),几乎全部被降解发酵,甜葡萄酒(每升总糖50g以上)。
干红与干白都可以是由红色葡萄制作的,但白葡萄酒在葡萄榨汁时,不使皮和子中的色素出来,因此得白葡萄酒,而红葡萄酒是将皮和子部分捣碎,有了红色素而得红葡萄酒,红葡萄酒和白葡萄酒思考制作葡萄酒和葡萄醋的过程中,发酵液分别有哪些变化?其中最明显的变化发生在发酵后多少天?你能分析引起变化的原因吗?葡萄酒制作图片学习知识动手实践收获美酒体会乐趣美味美妙享受生活谢谢大家■高中生物课件(人教课标版)
腐乳作为一种发酵的大豆食品,它的制作工艺在我国有着悠远的历史。腐乳根据颜色,可分为青方、红方和白方三类。导入新课红方腐乳白方腐乳青方腐乳课题2:腐乳的制作
以制作腐乳为例了解传统发酵技术的应用,说明腐乳制作过程的科学原理,设计并完成腐乳的制作,分析影响腐乳品质的条件。教学目标
课题重点:说明腐乳制作过程的科学原理,设计并完成腐乳的制作。
课题难点:在实践中摸索影响腐乳品质的条件。重点与难点一、基础知识
据史料记载,早在公元5世纪魏代古籍中,就有腐乳生产工艺的记载,到了明代我国就大量加工腐乳,而今腐乳已成长为具现代化工艺的发酵食品。小资料1.你能利用所学的知识,解释豆腐长白毛是怎么一回事吗?想一想2.王致和为什么要撒许多盐,将长毛的豆腐腌起来?答:豆腐上生长的白毛是毛霉的白色菌丝。严格地说是直立菌丝,在豆腐中还有匍匐菌丝。答:盐能防止杂菌污染,避免豆腐腐败。腐乳制作的原理1、参与腐乳制作的主要微生物主要作用青霉曲霉酵母毛霉1、关于毛霉:(1)毛霉是一种丝状真菌。繁殖方式为孢子生殖,新陈代谢类型为异养需氧型。(2)毛霉在腐乳制作中的作用:在豆腐的发酵过程中,毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸,脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸.在多种微生物的协同作用下,普通的豆腐转变成我们爱吃的腐乳.发酵的温度为15~18℃。毛霉菌落形态总状毛霉菌落形态思考题1.我们平常吃的豆腐,哪种适合用来做腐乳?答:含水量为70%左右的豆腐适于作腐乳。用含水量过高的豆腐制腐乳,不易成形。2.吃腐乳时,你会发现腐乳外部有一层致密的“皮”。这层“皮”是怎样形成的呢?它对人体有害吗?它的作用是什么?答:“皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝(匍匐菌丝),它能形成腐乳的“体”,使腐乳成形。“皮”对人体无害。2、微生物的作用机理
酿造腐乳的主要工序是将豆腐进行前期发酵和后期发酵。
前期发酵过程中,毛霉在豆腐(毛坯)上生长。毛霉生长大约5天后使白坯变成毛坯。豆腐表面被一层菌膜包住,形成腐乳的“体”。同时毛霉分解以蛋白质为主的蛋白酶,将豆腐所含有的蛋白质分解为各种氨基酸。
在后期发酵过程中,酶与微生物协同作用,通过研制并配入各种辅料(红曲、面曲、酒酿),是蛋白酶作用缓慢,促进其他生化作用,生成腐乳的香气。二、实验设计让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制温度保持在15-18℃;豆腐水分控制在70%左右。逐层加盐,随层数的加高而增加盐量,腌制大约8天左右。卤汤由酒及各种香辛料配制而成。封瓶时瓶口通过酒精灯火焰防止瓶口污染。腐乳制作的具体操作步骤:将豆腐切成3cm×3cm×1cm的若干块;将豆腐块平放在铺有干粽叶的盘内,粽叶可以提供菌种,并能起到保温的作用,每块豆腐等距离排放,周围留有一定距离,豆腐上面再铺上干净的粽叶;将平盘放入温度保持在15-18℃的地方;4.当毛霉生长旺盛,并呈淡黄色时,去除包裹平盘的保鲜膜以及扑在上面的粽叶,使豆腐块的热量和水分能够迅速散失,同时散去霉味;5.当豆腐凉透后,将豆腐块间连接在一起的菌丝拉断,并整齐排列在容器内,准备腌制;6.长满毛霉的毛坯与盐的质量分数比为5:1,分层加盐,在瓶口表面盐要铺厚些,大约腌制8天;7.将黄酒、米酒和糖,按口味不同而配以各种香辛料(如胡椒、花椒、八角茴香、桂皮、姜、辣椒等)混合制成卤汤;8.将广口玻璃瓶洗净,用高压锅在100℃蒸气灭菌,将腐乳咸坯摆入瓶中,加入卤汤和辅料,密封放置,常温六个月可以成熟。三、操作提示1、控制好材料的用量
腌制时注意控制盐的用量
盐的浓度过低不足以抑制微生物生长,可能导致豆腐腐败变质;浓度过高会影响腐乳的口味。卤汤中酒的含量应控制在12%左右
酒精含量过高将会延长腐乳成熟的时间;含量过低不足以抑制微生物生长,可能导致豆腐腐败。2、防止杂菌污染用来腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干净后要用沸水消毒。装瓶时,操作要迅速小心。封瓶时,最好将瓶口通过酒精灯的火焰,防止瓶口被污染。四、结果分析与评价A是否完成腐乳的制作
能够合理的选择实验材料与用具;
前期发酵后豆腐的表面长有菌丝,后期发酵制作基本没有杂菌的污染。B腐乳质量的评价成功的腐乳应具有以下特点:
色泽基本一致、味道鲜美、咸淡适口、无异味、块形整齐、厚薄均匀、质地细腻、无杂质。C能否总结不同条件对腐乳风味和质量的影响
从盐、酒的用量、发酵的温度、发酵时间的长短、以及香辛料等因素中的某一因素说明其对腐乳风味或质量的影响。
腐乳的制作根据发酵类型不同可以分为四种:腌制腐乳毛霉腐乳根霉腐乳细菌腐乳五、相关链接
根霉型腐乳:
采用耐高温的根霉菌,经纯菌培养,人工接种,在夏季高温季节也能生产腐乳,但根霉菌丝稀疏,浅灰色,蛋白酶和肽酶活性低,生产的腐乳,其形状、色泽、风味及理化质量都不如毛霉腐乳。
腌制腐乳:
豆腐坯加水煮沸后,加盐腌制,装坛加入辅料,发酵成腐乳。特点:豆腐坯不经前期发酵,直接装坛,进行后发酵,依靠辅料中带入的微生物而成熟。缺点:蛋白酶不足,后期发酵时间长,氨基酸含量低,色香味欠佳。制作原理实验设计主要微生物根霉酵母结果分析与评价毛霉蛋白酶蛋白质小分子肽和氨基酸腐乳的制作曲霉机理脂肪酶脂肪甘油和脂肪酸让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制操作提示控制盐酒的用量防止杂菌污染课堂小结1.使腐乳味道鲜美,易于消化、吸收的营养成分主要是()A.多肽、氨基酸、甘油和脂肪酸
B.NaCl、水、蛋白质C.蛋白质、脂肪、NaCl、水
D.无机盐、维生素
答案:A课堂练习2.食盐在豆腐坯腌制中起到的作用是()①渗透盐分,析出水分②给腐乳以必要的咸味③防止毛霉继续生长和污染的杂菌繁殖④浸提毛霉菌丝上的蛋白酶A.①②③
B.③④C.①②③④
D.①③
答案:C3.卤汤中香辛料的作用是()①调味②促进发酵③杀菌防腐A.①②
B.①②③C.②③
D.①③答案:B1.答:越接近瓶口,杂菌污染的可能性越大,因此要随着豆腐层的加高增加盐的用量,在接近瓶口的表面,盐要铺厚一些,以有效防止杂菌污染。习题答案■高中生物课件(人教课标版)课题3:制作泡菜并检测亚硝酸盐含量
泡菜是一种以发酵加工制成的浸制品,为泡酸菜类的一种。泡菜制作容易,成本低廉,营养卫生,风味可口,利于贮存。在我国四川、东北、湖南、湖北、河南、广东、广西等地民间均有自制泡菜的习惯。目前较受欢迎的是川味和韩味泡菜,在许多风味餐馆里,都有其踪影,它鲜嫩清脆,可以增进食欲,帮助消化与吸收。如果自己在家也做一些这样的泡菜,做为每天饭前小菜,或以它配菜,烹成各种菜肴,不失为一件美事。但是泡菜含亚硝酸盐具致癌作用危害身体健康,所以不易多吃一、课题目标尝试制作泡菜,并尝试用比色法测定泡菜中亚硝酸盐含量的变化。讨论与此相关的食品安全问题。二、课题重点与难点课题重点:制作泡菜并测定泡菜中亚硝酸盐含量。课题难点:泡菜中亚硝酸盐含量的测定。乳酸链球菌1、泡菜制作基础知识(1)乳酸菌
种类:常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌,乳酸杆菌常用于制作酸奶。乳酸杆菌一、泡菜的制作分布:空气、土壤、植物体表、人或动物肠道代谢类型及产物(发酵原理):乳酸菌是异养厌氧型细菌,在无氧条件下,将葡萄糖分解成乳酸。C6H12O62C3H6O3酶+能量制作泡菜制作酸奶含有抗生素的牛奶能不能发酵成酸奶?为什么?不能。因为酸奶的制作依靠的是乳酸菌的发酵作用。抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长,因此含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶。(2)亚硝酸盐蔬菜
性质:在食品生产中的作用:分布在蔬菜、咸菜和豆粉中的含量如何?
我国食品卫生标准规定的亚硝酸盐含量标准:亚硝酸盐(包括亚硝酸钾和亚硝酸钠)为白色粉末,易溶于水。当人体摄入的亚硝酸盐总量达到0.3~0.5g时,会引起中毒,达3g时会引起死亡。豆粉中的平均含量可以达到10毫克/千克,而咸菜中的平均含量也在7毫克/千克以上。蔬菜中平均含量为4毫克/千克50毫克/千克泡菜优点制作容易成本低廉营养卫生利于贮存风味可口鲜嫩清脆增进食欲容易消化
膳食中的绝大多数亚硝酸盐在人体内以“过客”的形式随尿排出,只有在特定的条件下(适宜的PH、温度和一定的微生物作用),才会转变成致癌物——亚硝胺。大量动物实验表明,亚硝胺具有致癌作用,同时对动物具有致畸和致突变作用。研究表明,人类的某些癌症可能与亚硝胺有关。
泡菜中的亚硝酸盐怎样生成的?发酵初期,泡菜中的微生物生长很快,微生物将蔬菜中的硝酸盐还原成亚硝酸盐,与此同时,蔬菜中的酚类物质和维生素C等物质也会将亚硝酸盐氧化,但总体来说,生成的亚硝酸盐大于被还原的亚硝酸盐,亚硝化细菌可将发酵过程产生的氨氧化成亚硝酸,其与金属离子生成亚硝酸盐,因此,随着发酵时间的进行,亚硝酸盐的含量会逐步上升。随着微生物代谢活动的持续,氧气被消耗殆尽,泡菜坛中的环境不利于除乳酸菌以外的其他微生物的生长。与此同时,蔬菜中的亚硝酸盐含量由于被氧化而减少,因此,亚硝酸盐的含量会逐渐下降并趋于一个相对稳定的数值。问题:亚硝酸盐是由乳酸菌产生的吗?只有泡菜中有亚硝酸盐,其他的酱菜中含有亚硝酸盐吗?硝酸盐亚硝酸盐还原氧化细菌等微生物维生素C、E和酚类物质亚硝胺
一、基本原理
1.制作泡菜的原理。利用乳酸菌在无氧的环境下大量繁殖制作泡菜。
根据微生物的活动情况和乳酸积累量,可以将泡菜发酵过程分为三个阶段:
发酵初期:大肠杆菌和酵母菌较为活跃,它们进行同型乳酸发酵和微弱的酒精发酵,发酵产物为乳酸、乙醇、醋酸和二氧化碳,一方面消耗掉坛中的氧气,另一方面产生较多的二氧化碳,产生厌氧环境。乳酸菌和乳酸的量都较少,而由于硝酸盐还原菌的活动,亚硝酸盐含量有所增加。此时为泡菜初熟阶段,菜质咸而不酸、有生味。
发酵中期:由于乳酸不断积累和缺氧的形成,乳酸杆菌开始活跃,并进行同型乳酸发酵(产物只有两分子乳酸)这时乳酸的积累量可达0.6%-0.8%,PH为3.5-3.8,其他的微生物的活动受到抑制,这时泡菜完全成熟,菜有酸味而清香。发酵后期:乳酸含量继续增加,可达1.0%以上,当超过1.2%以上时,乳酸菌的活性受到抑制,发酵速度变缓甚至停止,此时泡菜酸度过高、风味不协调。泡菜的制作过程中,许多乳酸菌产生大量乳酸,共同抑制其它菌的生长,乳酸积累过多,又会抑制乳酸菌自身的生长,以上体现出的生物关系依次是A.种内互助、种内斗争、种间斗争
B.种内互助、种间斗争、种内斗争
C.种内斗争、种间斗争、种内互助
D.种间斗争、种内斗争、种内互助答案B制作泡菜的流程?需要的原料?泡菜坛应具备的条件?如何检测泡菜坛是否合格?使用不合格泡菜坛有什么后果?盐水应该按什么比例配制才较好?为什么要将盐水煮沸后又冷却?加盐有何作用?哪些因素会导致泡菜腌制过程中的亚硝酸盐含量?测定原理及其步骤?(2)添加的调味品,如花椒、八角等。(3)白酒。(4)食盐和糖。(1)各种蔬菜均可,一般用白菜、洋白菜、黄瓜、柿子椒、胡萝卜、白萝卜等。原料①观型体:
以火候老、釉质好、无裂纹、无砂眼、形体美观的为佳。②看内壁:
将坛压在水内,看内壁,以无砂眼、无裂纹、无渗水现象的为佳。④听声音:
用手击坛,听其声,钢音的质量则好,空响、砂响、音破的质次。
腌制条件
腌制过程中,要注意控制腌制的时间、温度和食盐的用量。温度过高、食盐用量不足10%、腌制时间过短,容易造成细菌大量繁殖,亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10天后,亚硝酸盐的含量开始下降。结球甘蓝(简称甘蓝),别名洋白菜、圆白菜、包心菜、莲花白菜等,在上海地区又叫卷心菜。
步骤
(1)各种菜洗净并切成3~4cm长的小块。(2)将泡菜坛洗净,并用热水洗坛内壁两次。(3)将各种蔬菜、盐水、糖及调味品放入坛,混合均匀。如果希望发酵快些,可将蔬菜在开水中浸1分钟后入坛,再加上一些白酒。(4)将坛口用水封好,防止外界空气进入。(5)泡菜发酵①准备白菜、萝卜、葱、辣椒、蒜等材料。
②切好萝卜、葱、蒜泥、辣椒末等,准备往白菜芯里放。
③白菜切成两半后,放在盐里(水盐比4:1)一夜,第二天,用流动的水清洗,再甩干水分。⑤用外层的白菜叶子包好里面的,放上一周。
④往盐腌过的白菜里添加第2项的材料,要均匀涂抹。⑥切开发酵的泡菜,放在盘子里。
原料加工修整、洗涤、晾晒、切分成条状或片状加调味料装坛加盐盐水冷却泡菜盐水发酵成品测亚硝酸盐含量制作泡菜实验操作过程如果加入一些已经腌制过的泡菜汁更好,这相当于接种已经扩增的发酵菌,可减少腌制时间。1、加入白酒有什么作用?白酒可抑制泡菜表面杂菌的生长,它也是一种调味剂,可增加醇香感。思考:2、用水封闭坛口起什么作用?不封闭有什么结果?水封闭坛口起着使坛内与坛外空气隔绝的作用,空气中21%是氧气,这是最简易的造成无氧环境的方法。这样,坛内可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌进行乳酸发酵。如不封闭,则会有许多需氧菌生长,蔬菜会腐烂。
3、为什么泡菜坛内有时会长一层白膜,这层白膜是怎么形成的?形成白膜是由于产膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厌氧微生物,泡菜发酵液营养丰富,其表面氧气含量也很丰富,适合酵母菌的繁殖。
4、为什么日常生活中要多吃新鲜蔬菜,不吃存放时间过长、变质的蔬菜?有些蔬菜,如小白菜和萝卜等含有丰富的硝酸盐。当这些蔬菜放置过久时发生变质(发黄、腐烂)或者煮熟后存放太久时,蔬菜中的硝酸盐会被微生物还原成亚硝酸盐,危害人体健康。二、亚硝酸盐含量的测定1、测定亚硝酸盐含量的原理亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,这一反应物再与N-1-萘基乙二胺偶联,结合生紫色产物。将经过反应显色后的待测样品与标准液比色,即可计算出样品中的亚硝酸盐含量。
测定亚硝酸盐含量的原理和比色的原理。
(2)重氮反应形成的产物与N—1—萘基乙二胺结合形成紫红色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。(也可使用比色仪)(1)在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮反应偶联
(2)配制标准液
用移液管吸取0.20ml、0.40ml、0.60ml、0.80ml、1.00ml、1.50ml亚硝酸钠溶液,分别置于50ml比色管中,再取1支比色管作为空白对照。并分别加入2.0ml对氨基苯磺酸溶液,混匀,静置3~5分钟后,再分别加入1.0mlN-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液,加蒸馏水至50ml,混匀,观察亚硝酸钠溶液颜色的梯度变化。提取剂:分别称取50克氯化镉、氯化钡,溶解于1000ml蒸馏水中,用盐酸调节pH至1。氢氧化铝乳液和2.5mol/l的氢氧化钠溶液。
(3)制备样品处理液
将3坛样品做好标记后,分别称取0.4千克泡菜,榨汁过滤得200ml汁液。取其中100ml至500ml容量瓶中,加200ml蒸馏水、100ml提取剂,混匀,再加入40ml氢氧化钠溶液,用蒸馏水定容至500ml后,立即过滤。将60ml滤液转移至100ml容量瓶中,加入氢氧化铝(吸附脱色)乳液,定容至100ml,过滤。(4)比色
吸取40ml透明澄清的滤液,转移到50ml比色管中,将比色管做好标记。按步骤2的方法分别加入对氨基苯磺酸溶液和N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液,并定容至50ml,混匀,静置15分钟。
观察样品颜色的变化,并与标准显色液比较,找出与标准液最相近的颜色,记录对应的亚硝酸钠含量,并计算。每隔2天测一次,将结果记录下来。计算:如测试液与标准比色液的3微克相当,则亚硝酸盐的含量计算为3/1000/0.00960.4千克x100/200x60/500x40/100=0.0096取材得滤液200毫升取100毫升500毫升取60毫升100毫升取40毫升3.无机大分子颗粒吸附有机杂质的原理和方法。
提取剂:氯化镉和氯化钡作为提取剂的作用是提取样品处理液中的大分子有机杂质,增加亚硝酸盐溶解度(1)提取剂在配制时为什么要加入浓盐酸调节PH至1?氢氧化铝乳液:吸附泡菜汁液中的杂质,使泡菜汁透明澄清,以便进行显色反应(2)为什么需要用处理样品与提取剂在摇床上振荡提取1小时?(3)为什么振荡后还需要加入氢氧化钠溶液?防止形成氢氧化铝氢氧化铬沉淀为使沉淀沉在容器底部中和乳酸和其他酸(4)为什么加氢氧化铝?2001年1月4日(封坛前)2001年1月8日2001年1月12日2001年1月15日2001年1月19日0.15
0.600.200.100.101号坛2号坛0.15
0.200.100.050.053号坛0.15
0.800.600.200.20泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量的变化每隔2天测一次,将结果记录下来。三、问题讨论:计算:P57亚硝酸盐含量发酵时间(d)
(1)亚硝酸盐含量在第
4天达到最高峰。(2)亚硝酸盐含量升高的原因是蔬菜组织和细菌内的
硝酸还原酶的活性增强,将硝酸盐还原为亚硝酸。(3)亚硝酸盐含量降低的原因是蔬菜组织和细菌内的硝酸还原酶的活性减弱,硝酸盐还原减少
例:泡菜是人们日常生活中比较喜欢的一种食品,但是泡菜中却含有亚硝酸盐。当人体摄入的亚硝酸盐总量达到0.3g—0.5g时,会引起中毒;达到3g时,会引起死亡。我国卫生标准规定,亚硝酸盐的残留量在酱菜中不得超过20mg/kg。膳食中的绝大部分亚硝酸盐在人体内以“过客”的形式随尿液排出,只有在特定的条件下才会转变成致癌物——亚硝胺。针对泡菜在发酵过程中会产生亚硝酸盐的事实,某中学生物活动小组设计实验,探究不同食盐浓度和发酵时间对亚硝酸盐含量变化的影响。(1)请补充实验设计的空缺内容:①制作泡菜的原理:
。②测量指标及方法:亚硝酸盐与某些化学物质发生反应后形成玫瑰红色染料。先使泡菜样品及一系列已知浓度的亚硝酸盐溶液分别与化学物质发生显色反应,然后对比颜色,可以估测出泡菜液样品中亚硝酸盐的含量。③确定浓度梯度:经过查找资料和初步实验,发现当食盐浓度为3%以下时,制作的泡菜容易发生腐败,而当食盐浓度在8%以上时,制作的泡菜又容易成为咸腌菜。因此,分别设计了3%、5%、7%的食盐浓度梯度来制作泡菜。利用乳酸菌在无氧的环境下大量繁殖制作泡菜④选择实验材料:红萝卜和白萝卜,哪种更适合于用做实验材料?白萝卜
。其原因是:避免植物中的色素对显色反应的干扰
⑤制作泡菜:将实验材料分成3组制作泡菜,除了实验材料的重量相同外,还要保证每组泡菜的制作(或培养、发酵)条件
相同。(2)下图是该生物活动小组记录的三种食盐浓度的泡菜中的亚硝酸盐含量与发酵天数的关系图。根据此图实验结果,请你给出制作和食用泡菜的最佳指导建议:用5%的食盐浓度制作泡菜比较适合食用(1分),但要在发酵时间达11天(或9天)以后食用才比较适宜(1分)。
⑥从第三天开始,定期测定泡菜中的亚硝酸盐含量。请帮该小组设计一个用于实验记录的表格。你给出此建议的理由是:食盐浓度为3%的泡菜中亚硝酸盐含量总体上是3坛泡菜中最高;食盐浓度为5%的泡菜中亚硝酸盐含量变化最快,它的最高值是三坛中最高的,说明乳酸菌代谢最旺盛,但从发酵11天后亚硝酸盐降到最低值;而食盐浓度为7%的泡菜中亚硝酸盐含量变化不大,虽一直处于较低数值,但容易成为咸腌菜。(3分)果酒果醋腐乳泡菜微生物类型原理反应条件检测方法酵母菌,真菌,兼性厌氧醋酸菌,细菌,好氧菌毛霉,真菌,兼性厌氧乳酸菌,细菌,厌氧菌酵母菌的无氧呼吸产生酒精20℃无氧重铬酸钾与其反应呈灰绿色醋酸菌的有氧呼吸产生醋酸30~35℃通入氧气品尝、pH试纸检测毛霉产生蛋白酶和脂肪酶15~18℃接种,酒精含量控制在12%左右乳酸菌无氧呼吸产生乳酸常温,无氧条件■高中生物课件(人教课标版)专题2:微生物的培养与应用课题2:
微生物的实验室培养特点:结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到,有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用.微生物包括哪五类:病毒细菌放线菌真菌原生动物
原核生物界
原生生物界真菌界病毒界一、基础知识:
(一)微生物:是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称.病毒的结构病毒
SARS冠状病毒、禽流感病毒朊病毒(蛋白质病毒)病毒的增殖:细菌的外形与大小图1-1常见的三种细菌典型形态A.球菌
B.杆菌C.弧菌芽孢
有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠体,叫做芽孢。芽孢的壁很厚,对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如,有的细菌的芽孢,煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻,可以随风飘散。当环境适宜(如温度、水分适宜)的时候,芽孢又可以萌发,形成一个细菌.菌落:单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,就会形成一个肉眼可见的,具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。细菌的营养类型根据细菌所利用的能源和碳源的不同,将细菌分为两大营养类型。自养菌:分类,举例?异养菌:腐生菌寄生菌大部分病原菌光合自养型:光合细菌化能自养型:硝化细菌,铁细菌,硫细菌菌落细菌的菌落特征因种而异放线菌1、结构:单细胞原核分支状的菌丝(基内菌丝、气生菌丝)链霉素、土霉素、四环素、氯霉素、红霉素、庆大霉素
微生物中发现了几千种抗生素,其中2/3是由放线菌产生的
应用:真菌如图是酵母菌电子显微镜下的形态结构酵母菌和霉菌青霉生殖直立菌丝营养菌丝腐生生活孢子生殖(二)培养基
培养基(培养液)是由人工方法配制而成的,专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。(1)按物理状态分:固体培养基和液体培养基、半固体培养基。(2)按功能分:选择培养基和鉴别培养基。(3)按成分分:天然培养基和合成培养基。1.培养基的类型固体培养基:菌落液体培养基:表面生长均匀混浊生长沉淀生长半固体培养基:无动力有动力(弥散)2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方3.不管哪种培养基,一般都含有水、碳源、和氮源、无机盐、等营养物质,另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求.4.培养基的用途液体培养基:增菌、工业生产固体培养基:纯化(分离),鉴定、活菌计数、保藏菌种半固体培养基:动力检测(三)无菌技术1.无菌技术的概念
无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。成功地培养微生物的关键。(1)消毒定义:2.消毒与灭菌的概念及两者的区别
(2)灭菌的定义:3.常用的消毒与灭菌的方法1、灼烧灭菌灭菌的方法:2、干热灭菌:160-170℃下加热1-2h。3、高压蒸气灭菌:100kPa、121℃下维持15-30min.1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。(1)培养细菌用的培养基与培养皿(2)玻棒、试管、烧瓶和吸管(3)实验操作者的双手答:无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。答:(1)、(2)需要灭菌;(3)需要消毒。旁栏思考微生物实验室培养的基本操作程序1、器具的灭菌2、培养基的配制3、培养基的灭菌4、倒平板5、微生物接种6、恒温箱中培养7、菌种的保存三、实验操作
(一)制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于培养细菌)1.计算、称量2.溶化3.调pH:pH7.6
4.过滤:这一步可以省去。5.分装:分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。6.加塞7.包扎操作步骤8.灭菌:
将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中,塞上棉花塞,包上牛皮纸,再放入高压蒸气灭菌锅,在压力为100kPa、温度为121℃,灭菌15~30min。将培养基用旧报纸包裹,放入干热灭菌箱内,在160~170℃下灭菌2h。
9.倒平板:
待培养基冷却到50℃左右时,在酒精灯附近倒平板。(倒平板操作见课本)2d后观察平板,无杂菌污染才可用来接种.10.无菌检查:将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时,以检查灭菌是否彻底。(二)纯化大肠杆菌接种方法有:平板划线法和稀释涂布平板法微生物的接种技术:
平板划线的操作方法交叉划线法连续划线法
平板划线的操作一旦划破,会造成划线不均匀,难以达到分离单菌落的目的;二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落,菌落会沿着划破处生长,会形成一个条状的菌落。问题讨论
1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?
答:操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。2.在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?答:以免接种环温度太高,杀死菌种。3.在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?
答:划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。稀释涂布平板法问题讨论涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,想一想,第2步应如何进行无菌操作?
应从操作的各个细节保证“无菌”。例如,酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。微生物的恒温培养微生物的恒温培养微生物的恒温培养菌种的保存1、临时保藏:接种到固体斜面培养基,菌落长成后置于4℃冰箱保存。2、长期保存:甘油冷冻管藏法本课题知识小结:四、课题成果评价
(一)培养基的制作是否合格如果未接种的培养基在恒温箱中保温1~2d后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。(二)接种操作是否符合无菌要求如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致,并符合大肠杆菌菌落的特点,则说明接种操作是符合要求的;如果培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中,无菌操作还未达到要求,需要分析原因,再次练习。(三)是否进行了及时细致的观察与记录培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同,及时观察记录的同学会发现这一点,并能观察到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生良好的科学态度与习惯。【典例解析】
例1.关微生物营养物质的叙述中,正确的A.是碳源的物质不可能同时是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外的无机物只提供无机盐D.无机氮源也能提供能量
解析:不同的微生物,所需营养物质有较大差别,要针对微生物的具体情况分析。对于A、B选项,它的表达是不完整的。有的碳源只能是碳源,如二氧化碳;有的碳源可同时是氮源,如NH4HCO3;有的碳源同时是能源,如葡萄糖;有的碳源同时是氮源,也是能源,如蛋白胨。对于C选项,除水以外的无机物种类繁多,功能也多样。如二氧化碳,可作为自养型微生物的碳源;NaHCO3,可作为自养型微生物的碳源和无机盐;而NaCl则只能提供无机盐。对于D选项,无机氮源提供能量的情况还是存在的,如NH3可为硝化细菌提供能量和氮源。答案:D例2.下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是A.防止杂菌污染B.消灭杂菌C.培养基和发酵设备都必须灭菌D.灭菌必须在接种前答案:B
解析:灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。A说的是灭菌的目的,因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种,整个发酵过程不能混入其他微生物(杂菌),所以是正确的;B是错误的,因为灭菌的目的是防止杂菌污染,但实际操作中不可能只消灭杂菌,而是消灭全部微生物。C是正确的,因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌;发酵所用的微生物是灭菌后专门接种的,灭菌必须在接种前,如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。编号成分含量①粉状硫10g②(NH4)2SO40.4g③K2HPO44.0g④MgSO49.25g⑤FeSO40.5g⑥CaCl20.5g⑦H2O100ml例3.右表是某微生物培养基成分,请据此回答:(1)右表培养基可培养的微生物类型是
。(2)若不慎将过量NaCl加入培养基中。如不想浪费此培养基,可再加入
.自养型微生物
含碳有机物
(3)若除去成分②,加入(CH2O),该培养基可用于培养
。(4)表中营养成分共有
类。(5)不论何种培养基,在各种成分都溶化后分装前,要进行的是
。(6)右表中各成分重量确定的原则是
。(7)若右表培养基用于菌种鉴定,应该增加的成分
。固氮微生物
3调整pH
依微生物的生长需要确定
琼脂(或凝固剂)
了解有关微生物及培养基的基础知识,进行无菌技术的操作,进行微生物的培养。
一、课题目标:
掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术,熟练、规范地进行无菌操作,成功地培养微生物。
无菌技术的操作。二、课题重点和难点:三、技能目标:倒平板技术1.培养基灭菌后,需要冷却到50℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?问题讨论
答:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?
答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置?4.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?
答:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。
答:空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此最好不要用这个平板培养微生物。■高中生物课件(人教课标版)专题2微生物的培养与应用课题2
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课题背景
尿素是一种重要的农业氮肥。但是尿素并不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将尿素分解成氮之后,才能被植物利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成脲酶。尿素最初是从人的尿液中发现的。
1828年,德国化学家维勒成功地通过无机物的化学反映合成了尿素,揭开了历史上人工合成有机物的新篇章。尿素研究思路
筛选菌株
PCR的自动化需要耐高温的DNA聚合酶,这种酶要能忍受93℃左右的高温。科学家从水生耐热细菌Taq中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶。为什么Taq细菌能从热泉中被筛选出来呢?因为热泉70--80℃的高温条件淘汰了绝大多数微生物,而使耐高温的Taq细菌脱颖而出。实验室微生物的筛选原理
应用筛选Taq细菌的原理,人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。统计菌落数目
常用稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目。样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。为保证结果准确,一般选择菌落数30—300的平板计数。培养基上的菌落设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。实验设计结合课本上给出的资料与实验流程示意图,思考有关问题,然后进行实验设计,并且些出详细的实验方案。资料一土壤取样资料二样品的稀释资料三微生物的培养与观察操作提示无菌操作
1.取土样的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要灭菌。
2.应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入烧瓶中,塞好棉塞。
3.在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在火焰旁操作。做好标记本实验使用的平板和试管比较多。为避免混淆,最好在使用前就做好标记。例如:在标记培养皿时,应注明培养基种类、培养日期以及平板上培养样品的稀释度。
规划时间对于耗时较长的生物实验,我们需要实现规划时间,以便提高工作效率,在操作时更加有条不紊。结果分析与评价结合对照,分析培养物总共是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出一些菌落?是否获得了某一稀释度下,菌落数目在30—300的平板。在这一稀释度下,是否至少有两个平板的菌落数相接近?你统计的每克土壤中含有能分解尿素的细菌的菌落数是多少?与其他同学的结果接近吗?如果差异很大,可能是什么原因引起的?课题延伸本课题对能分解尿素的细菌进行了初步的筛选,这只是纯化菌种的第一步。对分离菌种作进一步的鉴定,还需要借助生物化学的方法。我们可以通过检测培养基pH的变化来判断细菌是否分解尿素的化学反应是否发生。指示剂也可以帮助我们准确地鉴定该种细菌能否分解尿素。相关链接活菌计数技术广泛应用于土壤含菌亮的测定、食品卫生和水源污染度的检验等方面。如果你赶兴趣,可以从下列项目中选做一个。空气中微生物总数的检测水中细菌总数的检测牛奶中细菌的分离与计数土壤中真菌(或放线菌)的分离与计数■高中生物课件(人教课标版)课题3:
分解纤维素的
微生物的分离教学目标:1、知道纤维素酶的种类及作用2、初步掌握从土壤中分离出分解纤维素的微生物的实验方法阅读课本27页基础知识部分第一、二段,回答下列问题:1、纤维素在生物圈的分布状况?2、纤维素酶的组成及作用?纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即CX酶、
C1酶和葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。一、纤维素和纤维素酶二、纤维素分解菌的筛选阅读课本课本28页相关部分,回答下列问题:1、纤维素分解菌的筛选方法2、纤维素分解菌的筛选方法的原理刚果红染色法:这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选刚果红是一种染料,它可以与纤维素形成红色复合物,但并不和纤维二糖、葡萄糖发生这种反应。当纤维素被纤维素酶分解后刚果红—纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解为中心的。这样我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌透明圈
练一练:1、下列关于纤维素酶的说法,错误的是A、纤维素酶是一种复合酶,至少包括三种B、纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C、纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D、葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖2、利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌,下列说法错误的是A、刚果红能与纤维素形成红色复合物B、刚果红能与纤维二糖形成红色复合物C、刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D、若培养基上产生了透明圈,则说明已筛选出了纤维素分解菌三、实验操作土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落土壤取样取样的环境是怎样的,作出这种选择的理由是什么?选择纤维素丰富的环境,如树林中多年落叶形成的腐殖土,多年积累的枯枝败叶等等。生物与环境的互相依存关系,在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高,因此从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境选择培养1、选择培养的目的:增加纤维素分解菌的浓度,以确保能够从样品中分离到所需要的微生物2、制备选择培养基参照课本29页旁栏中的比例配置,回答下列问题a、旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基?为什么?b、这个培养基对微生物是否具有选择作用?如果具有,是如何进行选择的?
c、你能否设计一个对照实验,说明选择培养基的作用是液体培养基,原因是配方中无凝固剂有选择作用,本配方中的碳源是纤维素,所以能分解纤维素的微生物可以大量繁殖用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照3、操作方法:将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中,将锥形瓶固定在摇床上,在一定温度下震荡培养1~2天,直至培养液变浑浊。也可重复选择培养思考:为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物?在选择培养的条件下,可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖,而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“浓缩”的作用梯度稀释按照课题1的稀释操作方法,将选择培养后的培养基进行等比稀释,稀释最大倍数到106将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上1、制备培养基:参照旁栏中的比例2、涂布平板:将稀释度为104~106的菌悬液各取0.1ml涂布在培养基上,30℃倒置培养挑选产生透明圈的菌落参照课本刚果红染色法,挑选产生透明圈的菌落,一般即为分解纤维素的菌落刚果红染色法方法一:先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应方法二:在倒平板时就加入刚果红思考:这两种方法各有哪些优点与不足方法一缺点是操作烦琐,加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂;优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用方法二优点是操作简便,不存在菌落混杂问题缺点一是由于培养基中还含有淀粉类物质,可以使能产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应;缺点二有些微生物具有降解色素的能力,它们在长时间培养过程中会降解刚果红,形成明显的透明圈,与纤维素分解菌不易区分练一练1、在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌,符合下列哪一生物学观点?()A、生物结构与功能相适应的观点B、生物结构与功能整体性观点C、生物与环境相适应的观点D、生物发展进化的观点2、从土壤中分离获得某种微生物的步骤是()①土壤取样②梯度稀释③选择培养④菌悬液涂布平板⑤挑选出单个菌落A、①②③④⑤B、①③②④⑤C、①②④③⑤D、①④②③⑤3、有关选择培养正确的叙述是()A、可以增加纤维素分解菌的浓度B、可以减少纤维素分解菌的浓度C、所用培养基是固体培养基D、所用培养基是平板培养基CBA四、结果分析与评价(一)培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落(二)分离的结果是否一致设置对照,若对照的培养基在培养过程中无菌落生长则说明培养基制作合格。如果观察到产生透明圈的菌落,则说明可能获得了分解纤维素的微生物。如果不同,分析产生不同结果的原因。五、课题延伸本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选,但是这只是分离纯化的第一步。为确定得到的是纤维素分解菌,还需要进行发酵产纤维素酶的实验,纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。作业:完成基础训练19-22页相关题目■高中生物课件(人教课标版)
组织培养营养繁殖扦插嫁接压条
课题1菊花的组织培养活动1:什么是细胞分化?细胞分化的原因和结果?愈伤组织是怎样形成的?有什么特点?组织培养的过程?以及组织培养的理论基础?脱分化、再分化?影响组织培养的因素?菊花组织培养的过程,及注意的问题?
是指在人工培养基上,离体培养植物的器官、组织、细胞,并使其生长、增殖、分化以及再生长成植株的技术。组织培养1、细胞分化的原因是什么?在特定的时间和空间条件下,基因的选择性表达。思考:(一)植物组织培养的基本过程细胞分化个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程植物组织培养过程示意图2、上面的示意图中还有什么地方不够完善的?没有进行灭菌处理,试管也没有做密封等。离体的植物器官、组织、细胞脱分化愈伤组织再分化根芽植物体植物组织培养的基本过程愈伤组织愈伤组织是通过细胞分裂形成的,其细胞排列疏松而无规则,高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。(二)影响植物组织培养的因素
材料的选择、营养成分、激素、一定的外界因素(温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等)。MS固体培养基成分及比例同微生物培养基相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同?
微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同,MS培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。阅读课文,思考以下问题1.同微生物培养基相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同?2、你认为组织培养过程中,成功的关键有哪些?这些步骤的适宜条件是什么?
组织的脱分化及愈伤组织的再分化。
植物组织培养过程中,影响植物细胞脱分化、再分化的最重要因素是植物激素。激素配比对组织培养的影响在培养基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素,其浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都影响结果。
高利于根分化、抑制芽的形成生长素/细胞分裂素低利于芽的形成适中利于愈伤组织的形成
活动2:用自己的话把菊花组织培养的操作流程给描述出来?(提示:怎样配制MS培养基?外植体消毒应如何进行?接种、培养、移栽时应注意什么问题?)1、外植体带菌2、培养基及接种器具灭菌不彻底3、接种操作时带入4、环境不清洁结合录像外植体灭菌与接种操作,谈谈组织培养污染的主要途径及怎样预防污染?污染的预防措施(一)防止外植体带菌(二)保证培养基及接种器具彻底灭菌(三)操作人员严格遵守无菌操作规程(四)保证接种与培养环境清洁试评价下列操作正确与否本课题内容小结菊花组织培养基础知识实验操作植物体的组织培养影响组织培养的因素细胞分化细胞全能性组织培养过程营养激素环境条件MS固体培养基制备外植体消毒接种培养移栽栽培■高中生物课件(人教课标版)课题2:
月季的花药培养一、课题目标说出被子植物花粉发育的过程及花药培养产生花粉植株的两种途径,说出影响花药培养的因素,学习花药培养的基本技术,尝试用月季或其他植物的花药进行培养。二、课题重点与难点课题重点:选取适宜的培养材料和培养基。课题难点:选取适宜的培养材料和培养基。(一)被子植物的花粉发育被子植物的花的结构是怎样的?观察下图,和减数分裂比较,你能指出对应的时期吗?又有何特点?雌蕊:花丝花药:囊状结构,内有很多花粉粒花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的,因此,花粉是单倍体的生殖细胞。花粉的发育要经历:四分体时期、单核期、双核期注意:①二核花粉粒:成熟的花粉粒中,只含花粉管细胞核和生殖细胞核。(精子在花粉管中形成)②三核花粉粒:有些植物的花粉,在成熟前,生殖细胞进行一次有丝分裂,形成两个精子,这样的花粉在成熟时,含有一个营养核和两个精子。③两个精子和一个营养核的基因型相同。④1花粉母细胞4个小孢子减分有分4个花粉管细胞核4个生殖细胞核有分8个精子又称人造种子、合成种子或无性种子,就是将组织培养所产生的体细胞胚、不定芽、顶芽、腋芽或小鳞茎等繁殖体,包裹在能提供营养的胶囊(人造胚乳)里,再在外面包上一层具有保护功能和防止机械损伤的外膜(人造种皮),造成一种类似种子的结构,能在一定的条件下萌发生长,形成完整植株。(二)产生花粉植株的两种途径有哪两种途径?原因是什么?花药中的花粉花药中的花粉胚状体愈伤组织丛芽丛芽生根移栽花药培养产生花粉植株的两种途径(三)影响花药培养的因素1、材料的选择不同植物同一植物的不同生理状况(花期早期-初花期)合适的花粉发育期(单核居中期与靠边期之间)此外,植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等2、培养基的组成材料的选择:花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。一般,月季的花药培养时间选在五月初到五月中旬,即月季的初花期。选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素。一般来说,在单核期,细胞核由中央移向细胞一侧的时期,花药培养成功率最高。为了挑选到单核期的花药,通常选择完全未开放的花蕾。为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难?答:花瓣松动后,微生物就可能侵入到花药,给材料的消毒带来困难。(一)材料的选取染色镜检(二)材料的消毒酒精、氯化汞、次氯酸钙(三)接种和培养结果分析与评价
选择花药时,一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。最常用的方法有醋酸洋红法。但是,某些植物的花粉细胞核不易着色,需采用焙花青-铬矾法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。1、花蕾用V/V为70%的酒精浸泡30秒2、无菌水清洗3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2~4分钟(也可质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液)5、无菌水冲洗3~5次用于培养花药,实际上多数未熟,由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护,通常处于无菌状态,所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。
灭菌后花蕾,要在无菌条件下除去萼片和花瓣,并立即将花药接种到培养基上。在剥离花药时,要尽量不损伤花药(否则接种后,容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织),同时还要彻底去除花丝,因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。通常每瓶接种花药7-10个,温度控制在25℃左右,不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。一般经过20-30天培养后,会发现花药开裂,长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上,以便进一步分化出再生植株。
如果花药开裂释放出胚状体,则一个花药内就会产生大量幼小植株,必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开,分别移植到新的培养基上,否则这些植株将很难分开。在花药培养中,特别是通过愈伤组织形成的花粉植株,常常会出现染色体倍性的变化。(主要原因是营养核和生殖核融合造成的。)植物组织培养技术与花药培养技术的异同点项目相同点不同点植物组织培养技术离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织,再分化成丛芽,诱导出根,然后进行移栽。外植体为体细胞,染色体数无需加倍。花药培养技术取材为花药,培养的为单倍体幼苗,植株弱小,高度不育,必须用秋水仙素处理,使染色体加倍,恢复正常植株的染色体数,而且为纯种。三、课题背景分析课题背景介绍了花药培养的历史以及花药培养在育种工作上的意义。有条件的话可以尝试某种植物的花药培养。被子植物的花粉发育知识要点:1.花粉是单倍体生殖细胞;2.花粉的发育要经历不同的时期。产生花粉植株的两种途径知识要点:花药培养产生花粉植株的两种途径。影响花药培养的因素知识要点:选取适宜的材料和培养基组成是花粉植株诱导成功的关键。练习1.答:F2代紫色甜玉米的基因型组成可能为Aasusu或AAsusu。如果运用常规育种方法,将F2代中的紫色甜玉米与白色甜玉米(aasusu)进行测交,可以选择出基因型为AAsusu纯种紫色甜玉米。但这种方法比较繁琐,耗时也较长,需要至少三年的选种和育种时间。如果利用花药培养的技术,在F1代产生的花粉中就可能有Asu的组合,再将花粉植株进行染色体加倍,就可以直接得到紫色甜玉米的纯合体(AAsusu)。这种方法可以大大缩短育种周期。■高中生物课件(人教课标版)+课题1:果胶酶在果汁生产中的应用酶普遍存在于动、植物和微生物中,将酶从生物组织或细胞以及发酵液中提取出来,可加工成具有一定纯度标准的生化酶制剂。
思考讨论
酶具有哪些独特的优点其本质和作用场所是什么?
●催化效率●专一性强●作用条件温和
酶的本质主要是蛋白质,少数是RNA.在生物体内外均可发挥作用一.果肉的出汁率低,耗时长.二.榨取的果汁浑浊,黏度高,易发生沉淀.为什么能够提高水果的出汁率并使果汁变得澄清?果胶酶有什么作用?1.果胶是植物组织的组成成分之一,它主要存在于植物组织的哪一部分?()A.细胞核B.细胞质C.细胞间隙D.细胞壁及胞间层2.果胶酶能将植物组织内的果胶分解成()A.透明果汁B.半乳糖醛酸C.丙酮酸D.酶制剂3.果胶酶是分解果胶的一类酶的总称,它不包括()A.多聚半乳糖醛酸酶
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