实验十七蠕虫学剖检一

实验十七蠕虫学剖检(一)在畜禽疫病防治工作中,对疾病的准确诊断是非常重要的。尤其对很多外表不显特异症状的寄生虫病来说，更有它特殊的意义。通过剖检可以发现动物一切器官和组织内所有的寄生虫（包括雄虫和不成熟的虫体）。有些雌虫，它们排出的卵或幼虫并不达消化道。因此，粪便检查无法证明其存在与否。单纯使用粪便检查法也不能准确的查明畜禽体内究竟有多少种寄生虫及它们的数量。一、内容1.猪体的蠕虫学剖检及虫体的采集2.羊体的蠕虫学剖检及虫体的采集3.寄生虫标本的保存4.蠕虫学剖检记录和标签的书写二、参考资料1.猪体的蠕虫学剖检和虫体采集1)体外寄生虫的采集猪虱寄生虫在猪皮肤上,易于采集,将采集的猪虱放在空瓶内,饥饿1-2天,然后加入保存液保存。猪虱卵的采集应连毛拨下,放在空瓶内,密闭保存。疥螨的采集,用小刀刮皮肤患部的干硬痂皮,再刮取病部与健康皮肤交界处的皮屑,至微出血为止,将此皮屑放在空瓶内或保存液(甘油酒精液)内保存。蠕形螨的采集:由于这种寄生虫在毛囊内,常在皮下形成米粒大小的结节,可将结节切开取其内容物涂片镜检,或者连皮肤切下,放在10%福尔马林或70%酒精内固定保存。有时,在皮下还可见到一种灰白色的裂头蚴小囊。用小刀轻轻切开,将虫体取出保存。2)体内各部位寄生虫采集体表观察后,剥下皮肤，观察皮下组织,然后剖开胸、腹腔,将各器官依次取出并检查之。采脏器时可以将肺、气管和心脏一起取出,将食道和直肠末端用绳扎好,然后将消化道一起取出,再取出肝、肾等。肺脏:首先观察外部的色泽和形状,在肺脏边缘有无由于肺线虫寄生而造成的白色气肿区。有无囊包和硬结,如有细颈囊尾蚴,可切开包膜取出,但外膜较厚的棘球蚴包囊切勿随意切开,应将包囊完整地剥离下来,不要弄破,以防工作人员感染棘球砂。如有红的肺吸虫包囊,用刀小心切开,取出虫体,放在生理盐水内洗净后保存。肺脏内部检查,应从喉头起用剪刀把气管、支气管及细支气管剪开观察有无白色线状的肺线虫,将发现的虫体用针挑出,或用眼科镊子取下,放入0.85-1%盐水内洗净保存,但不宜在盐水内放置过久,以防虫体表皮破裂。将检查过的肺脏剪成小块,放在水内浸泡,可使遗漏的肺线虫钻出来.心脏:先用肉眼观察外表有无猪囊虫及寄生在冠沟、纵沟处的淋巴管内的猪浆膜丝虫,这种丝虫,可在放大镜下,用解剖针挑破淋巴管,取出保存。将心肌切开检查有无囊虫,并将心肌剪成许多麦粒大小的肉块,夹在两玻片间镜检,检查有无旋毛虫及住肉孢子虫,若有可连肌肉保存。四肢肌肉、背最长肌、肋间肌、咬肌及舌肌:切开检查有无猪囊虫、裂头蚴及旋毛虫幼虫,若有可连肌肉保存,或者把虫体分离保存。横膈肌:撕去肌膜,在横膈肌脚部,剪取24块麦粒大小的肌肉,压片镜检有无旋毛幼虫及住肉孢子虫。肝脏:先把胆囊取下,放在小杯内,剪开观察有无寄生虫.再检查肝表面有无细颈囊尾蚴及棘球蚴,若有,采集方法同肺脏。用剪刀剪开胆管,检查有无肝片吸虫、华枝睾吸虫、矛形双腔吸虫、截形微口吸虫、蛔虫幼虫、肾虫幼虫,再剪开肝门静脉,检查有无白色纤细的血吸虫,然后把肝脏切成2-3cm厚片状,放在盆内加水浸泡并压挤肝块,使残余的虫体钻出沉在水底,捞去肝块,倒去上部液体,保留沉渣,如此加水反复洗涤数次,再在底部沉渣中寻找寄生虫,放在1%盐水内洗净后保存。脾脏:寄生虫少见,偶尔见有棘球蚴,在血吸虫病流行区,还可以在脾静脉内找到日本血吸虫。网膜:网膜上常见细颈囊尾蚴寄生。肾脏、输尿管、膀胱以及周围脂肪组织:主要检查有无猪肾虫、裂头蚴、细颈囊尾蚴及膨结线虫寄生,若有寄生,应小心将包囊切开,取出虫体,用1%盐水洗净后保存。胰脏:猪胰脏内寄生虫很少.个别的在胰管内找到胰阔盘吸虫。检查方法同肝脏。食道:沿长轴剪开,检查粘膜上有无白色弯曲细长的美丽筒线虫,若有寄生,用针挑破粘膜把虫体取出,放在1%盐水内洗净后保存。另外,再检查食道肌肉内有无旋毛虫及住肉孢子虫,进行压片镜检。胃:沿大弯剪开,将胃内容物倒在盆内,用水洗沉淀法反复洗涤,把虫体检出放在1%盐水内洗净后保存。把剪开的胃平放在搪瓷盘内,粘膜向上,在胃底部,幽门部及贲门部观察有无颚口线虫、螺咽胃虫、环咽线虫、西蒙线虫以及红色猪圆线虫,如有,可用眼科镊子取下,放在1%盐水内洗净后保存。小肠:沿肠系膜对侧长轴剪开肠壁,先从十二指肠开始,边剪开边检查,并把肠内容物接到搪瓷盘内,如有寄生虫,用镊子夹到1%盐水内,在小肠内常见的寄生虫有:蛔虫、巨吻棘头虫、绦虫、姜片吸虫、球首线虫等。将收集到的虫体用1%盐水洗净后保存,寄生在十二指肠及空肠的类圆线虫很少,用肉眼不易检查,可用小刀刮取上述部位的肠粘膜,夹在两载玻片间用放大镜或低倍显微镜检查,若发现虫体时用解剖针分离,放在1%盐水内洗净后固定。肠内容物可反复水洗沉淀,采集沉渣中的虫体保存。大肠:检查方法同小肠。沿肠系膜对侧剪开盲肠、结肠及直肠,边剪边检查。盲肠内寄生的有猪毛首线虫(其纤细的头部钻透肠粘膜内),寄生在结肠内的有食道口线虫,发现这些虫体,用镊子取下,放入1%盐水中洗净后保存。此外,还应注意检查肠壁上有无粟粒大的由食道口线虫形成的结节.直肠内的寄生虫很少,但在鞭虫严重感染时,也可在直肠内寄生。血吸虫病流行区,应当注意直肠壁上有无日本血吸虫卵结节,可刮取粘膜压片检查,大肠内容物的处理同胃及小肠。脑:猪感染囊虫严重时,可在脑实质内发现猪囊虫。2.羊体的蠕虫学剖检和虫体采集1)体外寄生虫的采集在羊的体表注意检查有无毛虱、颚虱、虱蝇、蠕形蚤等。将采集到的虫体放于瓶内,加入保存液保存,虱卵应连毛取下放于瓶内或保存液内保存。疥螨、足螨及蠕形螨的检查方法与猪体外寄生虫采集方法相同。2)体内寄生虫的采集体表观察后,放血剥皮,注意观察皮下是否有寄生虫,然后剖开腹腔、胸腔,取出脏器,采脏器时可将肺、气管和心脏一起取出,而后将小肠和胃相连的地方切断用绳扎好,将胃和食道一起取出,再将小肠大肠一起取出,最后将肝脏、膀胱、肾脏取出,并逐一进行检查。①首先打开鼻腔检查是否有羊狂蝇蚴,再打开头骨检查脑内是否有脑包虫(多头蚴),然后检查食道的正反面,是否有美丽筒线虫及住肉孢子虫,除食道外,还应对横膈膜、心脏等作详细检查,如果发现有狂蝇蚴或脑包虫时,可用解剖针挑出放在巴氏液中保存,住肉孢子虫可连同被寄生的组织一起剪下,保存于巴氏液中。②肺脏:首先剪开支气管及大支气管,检查是否有大型肺线虫(网尾线虫)，然后检查小支气管或细致地撕开肺的边缘部分看是否有小型肺线虫(原圆线虫、缪勒线虫等)。将采集检查吸附在胃粘膜到的虫体放于保存液中,肺脏表面还应注意观察是否有细粒棘球蚴的寄生。如有则应连同肺组织一起剪下放于保存液中。③肝脏:先检查是否有细粒棘球蚴,然后去掉胆囊,检查内部,并切开胆管,检查有否肝片吸虫或矛形双腔吸虫的寄生,然后将肝撕成小块用清水反复冲洗至上部液体清亮为止,倒去上清液,将沉渣倒入盘内检查有无虫体。④胰脏和检查肝脏的方法相同,检查有否胰阔盘吸虫。⑤肠系膜：检查肠系膜血管是否有血吸虫,并将肠系膜淋巴结切开检查有无舌形虫的幼虫,注意肠系膜上是否有细颈囊尾蚴的寄生,如有,可取下放于70%酒精或巴氏液中。⑥胃:将胃分离,首先切开第一胃(瘤胃)倒出内容物,检查吸附在胃粘膜上的前后盘吸虫。然后将第四胃(皱胃)的内容物倒入瓷盆内,将其翻过来用生理盐水充分洗净,再用生理盐水反复冲洗,最后将沉渣倒入大培养皿内检查是否有捻转血矛线虫、奥斯特线虫、马歇尔线虫以及古柏线虫等,如发现虫体,可用解剖针挑出放于保存液中。⑦小肠：检查方法与猪小肠的检查方法相同,在羊小肠内可以发现:羊斯克里亚宾吸虫、莫尼斯绦虫、无卵黄腺绦虫、曲子宫绦虫、仰口线虫、类圆线虫、毛细线虫、古柏线虫、细颈线虫、奥斯特线虫、毛圆线虫等。当发现有绦虫时,应轻轻的用剪刀尖紧贴肠壁,避免剪断虫体。其次应留心前端细小的头节不可拉断或失去,要小心的刮下完整头节,如果有头节牢固吸着宿主肠壁则须连同肠壁组织一起取下,一般不超过5分钟。(时间过久水分渗入虫体内,就破坏了内部组织器官,影响鉴定)。洗净的虫体放于70%酒精或巴氏液固定保存。⑧大肠:将大肠的内容物倒入桶中,翻转大肠,用水冲净,再将内容物反复冲洗,然后将沉渣倒入玻璃盘内检查,在大肠中主要有毛首线虫、夏伯特线虫、食道口线虫等寄生,另外还应注意检查肠壁上有无粟粒大至豌豆大的结节(食道口线虫引起的结节)。将采集到的虫体组织浸于70%酒精或巴氏液中保存。此外,尚可对肾、心脏、膀胱等加以检查。3.寄生虫标本的保存用蠕虫学剖检法采集的虫体上,附有杂物时,可将虫体装入盛有生理盐水的广口瓶内,加以摇荡将虫体洗净然后后放入固定液中。线虫通常是用巴尔巴卡罗氏液(简称巴氏液)固定保存,配方如下:福尔马林液30毫升,食盐7.5克,水1000毫升,吸虫、绦虫和棘头虫则常用70%酒精固定保存。在固定保存吸虫和绦虫之前,应先将虫体浸入常水中(或冰箱中12小时)，使之死亡。这样可使虫体的组织松弛。为了使虫体较快的松弛,还可以把它们放入薄荷脑溶液中。薄荷脑溶液的配制:薄荷脑(Menthol)24g,溶于95%酒精10ml中,使用时将此液一滴,加入100ml水中即可。需要制片时,可将虫体平放于载玻片上,加盖一张载玻片,并稍加压力把虫体压平至适当薄度后(依虫体的大小薄厚而定),放在培养皿内,加入10%福尔马林液固定之。一般固定数小时,较大型的虫体要在一天以上。固定后,翻开盖在上面的玻璃片把虫体标本慢慢取下,置于盛有5%福尔马林的玻璃瓶中固定保存。绦虫的幼虫可固定保存于巴氏液中。在固定棘头虫时,如果他们的吻突缩在吻囊里,则须用手轻压,使吻伸出以后,再用70%酒精固定,也可用巴氏液固定保存。小型线虫一般比较弯曲,可把虫体逐条放入40-50℃热生理盐水内,使虫体伸直,便于鉴定,然后把虫体移入固定液内4.蠕虫学剖检记录和标签的书写进行蠕虫剖检时,为了避免产生混乱和错误,应及时用铅笔在白色硬纸制成的标签上注明动物的种、剖解编号和器官名称,并将写好的标签投入盛有该器官的器皿中。搜集到的虫体,在已固定装瓶,但还没有经过鉴定的时候,应当向瓶内放入标签,标签正面说明动物的种、性别、年龄、解