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文档简介
唐氏征产前筛查腾程孕期胎儿软件操作规程本文档提示医院从孕妇初次到医院抽血筛查直至最后孕妇妊娠结局,孕妇、检验科、产科涉及其它相关部门需要注意的一些步骤、过程以及其他注意事项。各医院可以结合自身流程融入这些步骤。孕妇告知书:在孕妇进行唐氏征产前筛查之前,医院有义务告知孕妇“什么是筛查”,“产前筛查是做什么的”“筛查报告的结果和意义”,需要提到存在假阳性和假阴性的可能。在孕妇知情并签字同意后才能进行筛查。告知书的内容可以参考另一文档。通常情况下,孕妇告知书可以和孕妇资料收集同时进行。需要注意的是孕中期唐氏筛查的最佳时间是孕15周0天到18周0天,本软件可以筛查的孕周时间是 14周0天到21周6天。由于唐氏筛查是为随后可能需要的诊断测试服务,而目前很多地方做产前诊断需要排很长时间的队,这很可能耽误后续措施实施的最佳时间。医院可以根据这个情况,适当缩短可以筛查的时间范围,并在孕妇告知书里注明这个原因。孕妇资料收集:知情书经孕妇本人签字后,孕妇还需如实提供一些筛查必须数据,并提供一些筛查相关数据。筛查必须数据包括:姓名、出生日期、末次月经信息、 B超信息、体重、糖尿病史、人种、吸烟史。相关数据包括夫妇的遗传病史和孕妇的孕产史。其中筛查必须数据一定要准确录入唐氏软件,如果孕妇在唐筛之前还没有做过 B超,医生可以建议孕妇在唐筛的同时做第一次 B超。其它一些便于医院统计的数据可以根据需要决定是否录入唐氏软件,包括住院号、门诊号、有效联络方式等,软件可以提供大部分信息导出的文件,可用 Excel打开。另外,为了表明医院尽到告知义务,如果孕妇不原意做唐筛,最好也让她签字“不筛查”,医院也留一份底。检验申请单 :医生开具检验申请单,并附上孕妇告知书和孕妇资料。采样:检验科医生根据检验申请单采集孕妇静脉全血样本,并在检验申请单中注明采样日期。采集全血样本不少于5ml。唐氏筛查的采血无需空腹,同时也不宜吃太刺激油腻的食物。根据对一些大型医院操作流程的观察,我们发现:如果是每天都做唐氏筛查样本,全血可在 4℃冰箱内保存一天。如静置半小时到两小时后离心,分离吸出血清后,血清可在 4℃冰箱内保存 6天。在吸去上样的血清后,还需要吸取 1ml左右的血清保存于 -70℃冰箱,具体保存时间根据各地不同规范在 1-3年之间。如果发现全血有肉眼可见脂肪或者溶血现象,请参照贝克曼试剂盒上相关操作处理。软件信息输入 :操作医生需要在腾程孕期胎儿唐氏征产前筛查软件中准确输入孕妇用于筛查的信息。满足仪器操作要求,保证仪器数据质量 :用于测试的仪器必须满足仪器所有要求。贝克曼公司的免疫系列分析仪器必须严格按照贝克曼库尔特公司提出的仪器使用规章,仪器保养程序要求,保证仪器的良好性能。仪器性能的维护, 详见设备装机时随机配备的仪器操作手册 (详见仪器操作手册第 8章)。同时必须严格按照(hCGuE3和AFP:B个项目的试剂说明书来使用试剂,并按照相关定标、质控要求,保证试剂的稳定性,从而确保检测结果的真实可靠。 (详见仪器操作手册第六、第七章和试剂说明书 )。这里特别需要指出的是质控的一些问题:目前国内没有关于唐氏筛查的统一质控规定,只有按照三个单项来操作。由于唐氏筛查风险计算的敏感性,需要执行较为严格的质控标准,CVS要控制在+/-5%。同时在开展唐氏筛查之前,要在一到两周时间内预先做高中低三个标准各 20-30个的质控品来确定靶值,不能以质控品盒上的值作为靶值。需要注意的是,每次质控时,质控品从冰箱取出后放置于常温下的时间最好相当,保证质控结果的稳定。软件操作要求 ;仪器测试结果可以直接传输到腾程孕期胎儿唐氏征产前筛查软件中并显示在“唐氏筛查”界面。当然也可以手动录入,通过综合计算唐氏征的影响因素后可得到该孕妇的唐氏风险度。软件的操作和使用必须严格按照用户手册使用。AFP、HCG、uE3三联检测的结果运算 :正常孕妇和唐氏征儿孕妇三指标血液浓度的分布经过大样本调查, 求得正常孕妇在孕中期(第14~21周)各周的 AFP,hCG和uE3的血清浓度。各孕妇的血液浓度测定结果会有所不同。若以该孕周正常孕妇的中位值为基准作分母,各孕妇实际测定值作分子,其比值---中位值的倍数(MultiplesofMedian,简称MoM必然呈现关于1的两侧对称的正态分布。以MoM的对数值作横坐标,以相应的频率(该浓度的孕妇例数)作纵坐标,即可绘制成一条分布曲线,即正常孕妇的相应分布曲线。计算MoM实际是将妊娠各周的三个指标运算进行了归一化。九、计算各指标测值的唐氏儿发生的似真率 (Likelihoodratio,简称LR)孕妇的唐氏风险是由两部分组成,孕妇年龄风险和三个筛查指标得到拟真率。孕妇的每个测试结果都会除以该孕周的中位数,得到 MoM®,然后在根据一些诸如体重、人种、是否多胎、是否糖尿病等因素进行矫正, (矫正也可理解为对中位数进行矫正然后再把测试结果除以矫正后的中位数,当然结果是一样的 )得到的是矫正后的中位数。这三个矫正后的中位数就是带入统计分布中的数据,得到一个三个指标的拟真率。拟真率的范围也在1的两边,例如一个很明显的唐氏高危指标指标 AFP0.5MoM,hCG2.0MoM,uE30.5MoM具三个指标的拟真率大约为27,乘以一个1/1000左右的年龄(对照前面年龄风险表格大约为 29岁的年龄 ),最终的怀有唐氏儿的风险在 1/35左右,肯定是筛查高风险范围内。例如一个很明显的唐氏低危指标AFP1.0MoMhCG1.0MoMu£1.0MoM其三个指标的拟真率大约为 1/8,乘以一个 1/250左右的年龄 (对照前面年龄风险表格大约为 37岁的年龄 ),最终的怀有唐氏儿的风险在 1/2000左右,肯定是筛查低风险范围内。十、筛查程序:十一、发报告前复核要求 :报告单交付孕妇前必须复核,建议复核内容包括测试结果和孕妇个人信息,如有问题及时纠正,完全正确后核对者签名。如果孕妇在拿到报告后对孕周有疑义,医生应该在和孕妇沟通的情况的同时,计算另一孕周的结果,最后发哪张报告由医生根据 2个孕周的可信程度判定。若筛查结果为唐氏风险度高人群应及时召回,进行遗传咨询。十二、 数据回访以及高风险度报告的处理 :临床医生对唐氏和 18三体高风险的孕妇必须建议羊水穿刺,开放性脊柱裂则通过后面的 B超(彩超)做进一步的观察。医院需要对在本院做唐氏筛查的孕妇的最终妊娠结局进行跟踪,如果是本院羊水穿刺或出生的,则与产科沟通得到结果,如果去了别的医院,则希望通过电话回访的手段,得到结果。结果可以录入软件,也可以单独记录真阳性和假阴性。由于目前唐氏筛查开展的医院比较广泛,而能够进行产前诊断的医院比较少,希望那些只能开展产前筛查的医院能有一家固定转诊的产前诊断中心,同时与诊断中心保持一定的联系和沟通。十三、假阴性情况的处理 :假阴性情况极为少见,但并不代表不会发生。如果出现假阴性,医院首先要检查该孕妇筛查时,自身流程是否有问题。医院需要保留筛查过程中的文件包括告知书、孕妇信息采集、检验申请单、筛查结果、当次筛查的质控,保存的样本等。 -70℃保存时间根据各地规范需超过该孕妇的婴儿出生时间 1-3年。同时请把该样本的分析结果发送给软件供应商。以上十三项注意 事项必须严格遵守,不遵守此操作规范的部门或个人将承担所有后果及责任。贝克曼ACCESS2化学发光仪产筛项目操作规程一.激活项目:对于新开展的项目,首先要“激活项目” :主屏幕——F8设置——F2测试——把要激活的项目打勾——退出二.装载消耗品装载试剂: 主屏幕——F3消耗品——F1装载试剂——扫描试剂条码——打开试剂仓盖后放入试剂盒——F1完成卸载试剂:主屏幕一一F3消耗品一一F2卸载试剂一一打开试剂仓盖后取出试剂盒一一 F1完成装载反应管:主屏幕一一F3消耗品一一F4装载RV———打开反应管仓盖一一放入整包的RV———关上黑色仓盖,往下压一一打开黑色仓盖,取出支架一一关上仓盖一一 F1完成更换废物袋:主屏幕一一F3消耗品一一F6卸换废物袋一一取出废物袋,换上新的袋子一卸F1完成更换发光底物:主屏幕一一F3消耗品一一F5更换发光底物一一扫描底物的条码信息一一换上新的试剂盒卸卸 F1完成三.定标定标液信息输入:主屏幕一一F5定标一一F5定标液设置一一F1添加定标液一一逐条扫描定标液条码卸卸 F1完成定标步骤:主屏幕一一F1样本管理一一输入架子号一一F3测试请求一一F6请求定标一一选取所需定标液主主 F1完成主主F1装载架子主主放入架子主主等待样本架扫描确认后,点击“运行”查看定标结果:主屏幕一一F5定标一一选取要查看的项目一一F2查看结果四.样本编程单个样本编程:主屏幕一一F1样本管理一一输入架子号一一F3测试请求一一输入相应的标本号主主选取要做的项目主主 F1装载样本架主主放入架子主主等待样本架扫描确认后,点击“运行”批量样本编程:测屏幕一一51主本管理一一输入架子号一一F3测试请求一一输入相应的标本号一一选取要做的项目一一光标移到下一个位置一一F8主多选项一一F1启动批量生成自动生成样本 ID号:主屏幕主主 F1样本管理主主输入架子号主主 F3测试请求主主输入相应的标本号一一选取要做的项目一一光标移到下一个位置一一 F8主多选项一一F2启动自动ID生成结果查询主屏幕一一F2结果查询清除标本机上架子清除:主屏幕一一F1样本管理一一选取需要取出的架子一一F6处理一一扫描完成后一一取出架子一一F1清除(F2不清除,仅移到机外)机外架子清除:主屏幕一一F1标本管理一一选取需要取出的架子一一F7清除七.日清洗:主屏幕一一F1样本管理一一输入架子号一一F4保养请求一一选取“日清洁”——F1完成一一按要求放入清洗液后,按F1装载样本架一一放入架子一一等待样本架扫描确认后,点击“运行”特殊清洗:—屏幕一一F1样本管理一一输入架子号一一F4—养请求一一选取“特殊清洁”一一F1完成一一按要求放入清洗液后,F1装载样本架一一放入架子一一等待样本架确认后,点击“运行”系统检测:主屏幕一一F1样本管理一一输入架子号一一F4保养请求一一选取“系统检测”——F1完成一一按要求放入检测液后,F1装载样本架一一放入架子一一等待样本架确认后,点击“运行”地贫血常规筛查检验标准操作规程(1)标本用EDTA-K0.2ul抗凝静脉血1ml。门诊血标本检测用SYSMEXS-800I和SYSMEXXT-4000I,病房血标本检测用SYSMEXXE-2100血球分析仪。(2)试剂及仪器SYSMEXXS-800近分类血球分析仪及配套试剂,质控用SYSMEX(装全血质控品,SYSMEXT-4000I五分类血分析仪及配套试剂,质控用SYSMEX装全血质控品。SYSMEXE-2100I五分类血分析仪及配套试剂,质控用SYSMEX装全血质控品。(3)操作1)门诊:a)收到血常规标本后,查看核对检验项目,姓名和条码号,立即编号。b)血标本在XS-800I和XT-4000I上检测。c)对于中间细胞比较多的应当手工涂片染色分类,对于血小板等图形不好或结果异常较大的应手工复查。d)结果核对后,在半小时内报告。2)病房:a)采集血常规标本后,立即编号,试管加盖后放于专用试管架上放入仪器进样区域。b)血标本在SYSMEXXE-2100止机检测。c)对于分类图形不好的结果应当手工涂片染色分类,对于血小板等结果图形不好或结果异常较大的应手工复查。(复查条件)结果核对后,签发报告单。(4)结果分析地贫筛查阳性结果判断:MCV<82fl,MCH<27pg地贫血常规筛查阳性,需要做血红蛋白电泳进一步确认。SYSMEXXT-4000i血液分析仪标准操作规程.分析参数和方法学名称SysmexXT-4000i提供40项可报告参数的结果,各检测参数和方法见表 1。表1.SysmexXT-4000i各检测参数和方法参数首字母缩写检测方法白细胞WBC:流式细胞计数红细胞RBC鞘流DC检测方法血红蛋白HGB;SLS血红蛋白检测法红细胞比积HCTrRBCK积脉冲高度检测法平均红细胞体积MCV由RBCf口HCTB出平均红细胞血红蛋白量MCHr由RBCf口HGB#出平均红细胞血红蛋白浓度MCHC由HE口HGB#出
血小板PLT1相流DC检测方法中性粒细胞百分比NEUT%流式细胞计数淋巴细胞百分比LYMPH%单核细胞百分比MONO%嗜酸性粒细胞百分比EO%嗜碱性粒细胞百分比BASO%中性粒细胞数NEUT#淋巴细胞数LYMPH#单核细胞数MONO#嗜酸性粒细胞数EO#嗜碱性粒细胞数BASO#红细胞分布宽度-标准差 一RDW-SD:根据红细胞直方图算出红细胞分布宽度-变异系数RDW-CV根据红细胞直方图算出血小板分布宽度PDW根据血小板直方图算出平均血小板体积MPVr根据血小板直方图和plt算出1大血小板比率P-LCR根据血小板直方图算出血小板压积PCT根据血小板直方图算出网织红细胞百分比 1RET%流式细胞计数网织红细胞数RET#幼稚网织红细胞比率IRF低荧光强度网织红细胞比率 1LFR中荧光强度网织红细胞比率一MFR高荧光强度网织红细胞比率HFR光学血小板计数PLT-O网织红细胞血红蛋白含量RET-He未成熟粒细胞百分比IG%未成熟粒细胞数IG#白细胞数一体液WBCBF流式细胞计数红细胞数-体液RBC-BF单个核细胞比例-体液M*单个核细胞数-体液Mh#多个核细胞比例一体液PMI%单个核细胞数-体液PMM.试剂稀释液(CELLPAQK白细胞分类溶血素(STROMATOLYSER-4DL白细胞分类染液(STROMATOLYSER-4DS血红蛋白溶血素(SULFOLYSER清洁齐1J(CELLCLEA)N网织红细胞稀释液(RETSEARCH-IIDilution).操作步骤开机:按以下顺序打开电源:1)打印机,2)信息处理装置(IPU),3)主机(信息处理装置程序的登录屏幕出现以后) 。开启信息处理装置( IPU)。WindowsVista(操作系统)启动。以“XT'用户自动登录到WindowsVista系统。显示XT-4000i应用程序登录对话框。输入用户名及密码,然后点击“确定”。主机电源打开后,按以下顺序执行操作:自检、主机控制程序下载、机械部件和液流部件初始化、流动池清洗、等待温度稳定和本底检查。本底检查通过后即可进入检测。开机后先做质控,质控通过后进行样本检测。以进样架模式进行样本分析确保仪器处于准备就绪状态。READYLE廊点亮。双击菜单屏幕上的“控制器”图标。显示控制器菜单。双击控制器菜单上的“进样器标本号”图标,或点击工具栏的“进样器”按钮。输入标本 ID编号,或使用条码扫描自动读 ID号。核查第一个管架编号和标本管位置号。 如果需要更改, 点击需要更改的项目然后输入数值。检查随选设置。如果需要更改设置,点击相应的“ Discrete”进行设置。将标本管放入标本架, 然后将标本架放在进样器右侧的架槽中。 可以一次性装载多达5个标本架在进样器中放置标本架后,点击进样器标本编号对话框中的“启动进样器”核查管架编号 /试管位置确认对话框中的管架编号和试管位置号。然后点击“确定”当所有的标本管已移至进样器左侧的架槽时, READYLED(亮。将标本架放置于进样器右侧架槽的分析通道的最右侧的位置。 按START启动)开关开始分析。标本检测: 为了验证手动与自动模式, 每日随机取 2份新鲜血标本进行 close与open模式结果比对,以close为靶值(close-open)/close来计算偏移(CV%符合比对要求,以上检测通过后进行病人样本检测。操作中注意个人安全, 如标本需打开盖子, 应戴好防护镜口罩或在有机玻璃挡板后打开。每日保养:正常开机、压缩机防逆流瓶液体检查、背景检测通过、温度报警、工作时间( h)、使用情况、关机正常记录在 XT-4000i使用维护记录。关机程序:双击菜单屏幕上的“控制器”图标。显示控制器菜单。双击控制器菜单的“关机”图标。显示关机对话框。将CELLCLEAN在手动取样针上;然后在该状态按START启动)开关。READIED闪烁,并且蜂鸣器发出响声,表示正在吸入中。此时,不可移开 CELLCLEAN器。当READYLED!灭,并且蜂鸣声停止时,取出CELLCLEAN开始执行主机关机程序。主机关机程序结束后,关机对话框关闭,关机对话框中将出现“请关闭仪器电源”信息。月保养或需要时进行的维护(根据操作说明书部分由维护工程师完成)清洗标本旋转阀。清洗手动冲洗杯。清洗标本旋转阀托盘。清洗穿刺进样器托盘洗RBC佥测器孔。去除光检测器盒中流动池内的空泡。清洗光检测器盒中的流动池。.质控质控品:Sysmex(高、中、低值3个水平)储存条件:2c〜8c(每日须复核一次冰箱温度)。使用期限:质控开瓶后 20天。质控频率:每天开机后在标本检测前进行一次质控品的分析(每种质控品均做) 。质控频度验证每年一次,由岗位操作员完成。质控操作: 从冰箱中取出质控品,使用前检查有效期及状况 (如极度溶血或失效,应及时更换),在室温环境下(18〜30C)静置25分钟。保持瓶子直立状态在双掌中轻轻滚动10次,将其颠倒再滚动 10次,再将质控品上下颠倒 10次混匀至红细胞完全混合,在质控模式下进行检测。失控时应采取的措施:质控结果超出期望值时,需查找原因,检查质控品是否在有效期内, 过期或近过期需更换新的质控品 ,检查试剂情况,是否需更换。再检查仪器的各项参数是否在控,如各项检查操作后质控仍失控则联系工程师,责任人需通知组长。与此同时联系急症病人相关医生,如为急诊标本及时送往门急诊化验室检测。直至质控通过,开始做标本。每次失控必须分析原因, 记录处理过程并签名。 失控记录夹入指定的文件夹内保存,保存期为二年。更换批号后靶值设定:取开始20次QCg果,计算均值,为靶值,靶值应落在厂商提供的范围内,以累计6个月CV啕值(或近两个月CV%!大值),通过均值乘以CV%=1SD,质控范围设定为 2.7SD。由组长或组长指定人员负责计算。 定期打印质控曲线, 曲线上注明使用质控品的批号和效期 .所有室内质控打印及记录夹入指定的文件夹内保存, 保存期为二年。西比亚毛细管血红蛋白电泳操作规程项目名称——血红蛋白毛细管电泳(CAPILLARYSHEMOGLOUBIN(E)检验方法名称――流动液体毛细管高压液相电泳。方法学原理CAPILLARY系统运用毛细管中液相电泳的原理,带电分子在具有特殊 PHffl的碱性缓冲液中通过其电泳迁移率而被分离开,这个分离也要依赖于电解质的 PH和电渗流。CAPILLARYS(统可同时进行7个标本的血红蛋白量化分析,标本的溶血稀释和注入通过在毛细管阳极末端吸入完成, 接着在高电压下蛋白质进行分离, 并在毛细管的阴极端于415nm吸光率下直接检测血红蛋白。四.方法学溯源自1930年由Tiselius发现了移界电泳( movingboundaryeectrophoresis),而后,这种技术的各种局限性已逐渐被区带电泳( zoneelecrrophoresis)所克服,CAPILLARY系统已经发展到将该项技术完全自动化,并具有快速分离和良好的分辩性。目前该方法已被大多数人认为是介于传统的区带电泳和液相色谱之间的技术方法。五.仪器型号:SEBIACAPILLARYS(PN1220IEPN1222分析和计算参数:处理量: 80-100个样本/小时所需样本量: 100ul检验时间: 20分钟重复性:有良好的重复性电泳参数:电压 3.5-9000V电流3.5-200mA功率0-90W六.准备蒸馏水或去离子水在SEBIACAPILLARYS勺全自动系统中进行毛细管电泳时冲洗毛细管用。建议在使用前先用0.45 的过滤器将蒸储水或去离子水过滤一次。为了防止微生物的繁殖,请每天更换蒸储水或去离子水。如需要长期保存,可加入3.5^/dl的ProClin300。注意:当充填水罐时,建议先用大量的蒸馏水或去离子水冲洗罐。缓冲液(含碱性缓冲液 PH9.4)若缓冲液是储藏在 2至8℃,建议在使用前将试剂放置于室温下, 一旦缓冲液瓶打开并安置在CAPILLARY系统上时,缓冲液可彳^持稳定状态最多 2个月。浓缩的冲洗液必须用蒸储水或去离子水稀释成 700ml。在做血红蛋白电泳之前和之后冲洗毛细管。分别将一个过滤器转动固定到缓冲液、 冲洗液、蒸馏水或去离子水瓶的管子末端的连接器上, 用蒸馏水或去离子水冲洗连接器和管子。 使用过的过滤器必须用清水冲洗过后才能丢弃。样本的采集和保存使用抗凝血的新鲜标本来进行分析,采血应按照临床实验检测要求进行。将红细胞在2〜8c下静置沉淀数小时或将血标本离心5000转/分,5分钟。小心尽可能地弃去血浆。不要使用覆盖在红细胞上厚度超过3mmfc浆的标本,若试管中的血浆厚度超过3mm等会影响到分析结果。注意:X标本置于冰箱内(2〜8C)可保存一周。若需要长时间保存,则依照以下程序在采集8小时内清洗红细胞, 并将标本冷冻在 -80℃环境中,可保持稳定最长 3个月时间。具体程序:抗凝血离心 5000转/分,5分钟,弃去血浆,用 10倍体积的生理盐水洗涤红细胞两次(每次洗涤后均要离心处理),冰冻前去除红细胞上层多余的生理盐水并震荡混匀。X血红蛋白(Hb)在2〜8c下可发生降解反应。当在2〜8c下保存超过7天,在电泳图谱将会出现一个比HbA更阳极端的被称之为HbA3的额外片段,在靠近HbS带附近会出现一个微弱的片段,并且如果出现 HbC则在HbA2更阳极端可出现不会干扰到 A2的一个片段。当保存超过 10天,可在红细胞中观察到聚集的粘状物,在分析前必须弃去这些粘状物。操作步骤开机,启动CAPILLARY吼器和电脑。启动“PHORESY球件,输入用户名和密码后,按确定(电脑自动向其加载和交换信息,并运行自检, 初始化程序。 )联机成功, 进入待工作状态, 显示“READ”Y。可开始电泳操作。在仪器提示,按其要求填写试剂有效期、代码(冲洗液的有关信息在 70ml浓缩试剂瓶标签上可以查到),并调整图象中液位高度。CAPILLARY系统具有试剂自动监控功能, 当需要更换某种试剂时, 系统将有信息提示。 更换试剂时要注意罐和接口的色码相符。请仔细阅读CAPILLARYSZ器操作手册。选择好“HEMOGLOBIN(E历析程序,然后将CAPILLARYSHEMOGLOBIN(E)冲液瓶放置在仪器上。标本架有 8个标本试管位置, 在每个标本架上放好 7个打开了的不含血浆的标本管,若待分析的标本管少于 7个,则用含有蒸馏水或去离子水的管补足。 放好管的标本架上的每个试管的条形码必须能被看到。在标本架8号位上的试管中加入4mlCAPILLARYSHEMOGLOB1性)溶血液,避免产生气泡。在每个标本架上放一排新的稀释杯。若忘记放稀释杯,系统将会有信息提示。将准备好的标本架从仪器中部的敞口处滑入 CAPILLARY系统中,可连续送入13个标本架。使用NO.0标本架来进行质控血标本的分析。设置仪器开始运转。自动化步骤的描述:条形码阅读器对每个标本管及标本架进行阅读。标本在溶血液中稀释, 每完成一个标本的溶血稀释, 都会对稀释针进行清洗。冲洗毛细管。稀释好的标本被注入到毛细管中。在恒定的电压下电泳 8分钟,帕尔贴软件控制温度。血红蛋白在415mm吸光率下直接检测,同时在系统屏幕上显示出电泳剖象。注:上述描述的这些自动步骤适用于第一次传入的标本架。从分析程序开始大约20分钟后可出现电泳图谱。接下来分析的标本架,在上一个标本架进行分析的同时都会进行头两个步骤(条形码阅读和标本稀释) 。结果分析在程序分析的最后, 每个血红蛋白片段的相对值自动显示出来, 并对剖象进行分析。可自动识别血红蛋白A(HbA片段,同时在回顾窗口的中间对其进行调整。可直观的在视觉上对电泳图谱的异常图像进行评估。CAPILLARYS系统可忽略降解产物而计算出每个血红蛋白片段的浓度。图谱可自动校正HbA片段以便分析解释:当缺乏HbA(黄色警示),将通过之前相同毛细管电泳获得的电泳剖象中 HbA的位置对其进行修正。当无法进行调整进,将出现红色的警示。当血标本中出现血红蛋白C时可能会导致血红蛋白A2低于参考值。当每个分析循环结束,操作者必须启动 CAPILLARY系统的“待命”或“关闭”程序,以便保存当前状态的毛细管电泳结果。十.关机电泳全部结束,在状态窗口显示“ READY下,执行关机程序“SHUTDOWNINSTRUMEN”,仪器自行冲洗,排气,复位等。T约15分钟屏幕显示 “Offline”,此时可关闭毛细管电泳仪电源, 然后关闭电脑。打开电泳仪左盖,取出全部试剂架。关闭仪器总电源开关,按每日保养要求对仪器进行保养。用仪器防尘罩盖好仪器。如果仪器如较长期(超过一周)停用,请用蒸馏水代替试剂,使用特别关机程序。CapillarysfSpecialcyclesfShutdownwithrinsingofthehydraulicswithH2O仪器如须更址 ,运输,一定要进行特殊打包运输关机程序处理。CapillarysfSpecialcyclesfshutdownandpreparationforshipment如果运用特别关机或打包运输关机程序后再次开机,一定要在开机输入密码后选择First-washonly然后“确定” 。进入待机状态后,激活毛细管,然后可正常进行工作。十一. 参考范围HbA>96.8%HbF<0.5%(*)HbA22.2〜3.2%之间十二. 临床意义使用CAPILLARYSHEMOGLOBIN试剂可鉴别血红蛋白病和地中海贫血等遗传性疾病。十三.电泳阳性结果处理:电泳阳性标本需要召回做地贫基因诊断。Bio-RadVARIANTII血红蛋白分析仪标准操作程序1.目的:VARIANTII(VII)血红蛋白分析仪用于报告个体EDTA抗凝静脉全血样本的血红蛋白F、A2的实验结果,用于个体筛查B地中海贫血。2.原理:VARIANT血红蛋白测试系统是一台全自动化的、高吞吐量的血红蛋白分析仪。它由两个模块构成——VARIANT层析站(VCS和VARIANT取样站(VSS。另外,该系统利用一台个人计算机和临床数据管理(CDM软件来进行系统控制。VARIANTII血红蛋白分析仪应用高效液相色谱法(HPLC对人全血血红蛋白F、A2的自动化和准确的测定。标本在 VARIANTII取样站(VSS)自动混合并稀释,之后注入分析柱。VARIANTII层析站的双泵将预先编程设置的由低到高离子浓度的缓冲液注入系统,在这一过程中,血红蛋白经和柱中物质离子反应后达到分离。处理好的样本自动被注入分析通路,分离的血红蛋白随后在流经光感测量计时,测量其在 415nm光波吸收情况;由690nm进行校正。VARIANTII临床数据处理软件(CDM)将每次分析过程中收集到的数据还原。中间要经过两个水平的计算,用来校正血红蛋白的计算数值。然后 CDM丁印出分析结果和分析谱图,F、A2的峰被标注,该面积计算使用了指数模式的高斯对数,这样计算已经排除了可变F、A2的影响。VARIAITII血红蛋白分析仪可从全血管中自动吸取标本,随后进行稀释和分析,每个样本在3分钟内即可完成测定。3.仪器使用环境:1.无尘、换气良好的环境。2.避免阳光直接照射。3.室内相对湿度 20~80%4.电源电压变动在220V±10V之内5.有保护性接地4.安全条款:1.使用对人体有危险或发生感染的样品时,请使用橡胶手套,不要直接接触。如操作人员直接被污染时,用大量的水冲洗、消毒,必要时应及时看医生。仪器
污染时应随时清洗干净且消毒.仪器上面和周围不要放置或使用易燃、易爆物品,避免引起火灾、爆炸.仪器的操作、保养按规定程序进行。5.标准操作过程开机程序:1)2)3)确认试剂量充足,废液桶倒空依次开启1)2)3)确认试剂量充足,废液桶倒空依次开启VSSVCS电脑电源(注意:必须按此顺序开启电源)待VSSVCS自检结束后,双击BlQFnCi启动VariantII 应用程序4)双击左上侧#1的二』,选择ReturntoReady,仪器连接完成后,系统显示‘Ready'在Maintain/Instrument 菜单中从ExecuteCommands^选择'DoStartupactions'选项,按下Start运行一次Startup程序6)运行Startup程序时,观察屏幕下方显示的仪器压力是否稳定。关机程序Maintain/Instrument 菜单中从ExecuteCommands^选择'Doshutdownactions'选项,按下Start运行shutdown程序shutdown完成后,选择————|将仪器状态转换为Inactive3)关闭应用程序软件,关闭计算机、 VCSVSS电源开关注:建议仪器在不使用时保持inactive状态,并且尽量避免在Running状态突然关下列情况建议关机:?当更换系统零件时当需要将系统移动到新位置时当实验室要断电时常规样本实验VariantII 常规样本采用EDT刖凝真空采血管,采血量2ml。1)运行前检查记录分析柱的批号和注入次数在SETUP/Test界面选择Cartridges按纽,如果分析柱的注入次数超过250,需要更换新的分析柱。检查缓冲液和洗液瓶的液面高度有无漏液现象-检查泵头连接塑料管道中有无液体(必要时进行活塞 /密封圈清洗)-废液桶的液面高度2)样本顺序1.Prime(引物)2.Blank(空白,去离子水)3.Blank,4.Calibrator(校准物)5.Calibrator6.LowLevelControl (低值质控品)7.HighLevelControl (图包质控品)8toN*病人样本N+1质控品,Level1(可不用)N+2质控品,Level2(可不用)N+3STOP管*N指操作中最后病人的样本号。3)工作表建立及开始实验将仪器转换到Ready状态,将排好样本的样本架放到自动进样架上(注意样品管的条形码方向) ,在RUN/Worklist界面的下方点击 Start/Stop按纽,显示对话框点击Start开始实验。使用工作表控制( WorklistControl)对话框,工作表可被暂停(Pause)和继续(Continue),停止(Stop)。运行时可从RUN/Graph屏幕中监测当前正在分析样本的图谱。刚开始运行时建议从屏幕下方监测系统压力稳定,质控通过后再离开。4)样品 ID号的解释和编辑工作表中会显示样品ID号的类型之一:Prime(引物),Blank(空白),Blank(空白),Cal(校准),Cal(校准),CTRL(低质控),CTRH%质控),和Unknown*(病人样本)。如样品号需要编辑, 当该样品实验完成后, 可使用滚动条到要编辑的样品。 双击编辑区并输入纠正。先前的内容被覆盖(此编辑操作只能执行一次) 。5.4安装新试剂和分析柱5.4.1更换试剂在缓冲液和稀释液使用前应使之达到室温,液体与室温温差在 4°C以内,防止产生气泡。1)当屏幕左下角的3种试剂瓶显示液面低时,证实系统处于inactive或manual状态,从试剂瓶上松开瓶帽并小心地将试剂管线垂直拿出试剂瓶。 不要在Running状态换试剂。2)撤出空瓶并将其放在一边。3)去除新试剂瓶的瓶帽。将帽拧紧在空瓶上并将空瓶合适地处理。4)将新瓶放在试剂瓶隔间。将试剂管线放入新瓶。拧紧试剂瓶帽。更换新的分析柱和过滤片每250人份需更换一个新的分析柱。1)打开层析站的白门。找到位于层析站中央的分析柱电热模块。拧松蝶形螺钉,把盖子打开。2)从电热模块上取出分析柱筒座。逆时针方向旋开,取出旧的分析柱。3)把新分析柱的两端的绿色保护套去掉。 把分析柱按流向的箭头方向向上放置 。把分析柱用力推入筒座的下端直至稳定地嵌入分析柱座中。 把筒座的另一端盖上, 顺时针方向旋紧。4)把分析柱筒座放到电热模块上,注意应把上端的管路放入槽中。把住上方管路,关闭电热模块的盖子。按顺时针锁紧蝶形螺丝。松开下方预过滤器的外壳。拿掉旧的预过滤片。 装上新的预过滤片。 注意要旋紧 。试剂信息更新:1.整套试剂的信息更新选择SETUP/Test界面有一个UpdateKit按钮,在CDMUpdateKit界面显示之后,把分析参数光盘插入合适的光驱驱动器中。选择合适的驱动器( 光驱)和文件名(*tss),然后点击OK按钮。所有的试剂(不包括质控信息)和分析柱的信息将被载入。退出光盘。2.单独更换分析柱1)在SETUP/Test界面选择Cartridges按钮。2)在“InUse”框中,将用完的分析柱的“Yes”改为“NO;3)上方新出现的空格中输入新分析柱的批号。在“InUse”框中,选择“Yes”;4)当使用一个新分析柱时,注射数是“0”。在使用过程中注射数将会增加。一旦注射计数达到为每个分析柱规定的预定限制 250时,软件会提醒使用者更换新分析柱。试剂复溶全血Primer的复溶:加入1ml蒸储水,室温静置10分钟后轻轻混匀后使用。溶好的全血Primer4CM保存21天。VariantII需复溶两支。校正品的复溶:加入10ml冷的校正稀释液/水平,室温静置10分钟后轻轻混匀后使用。溶好的校正品4C可保存1周。质控品的复溶:加入1ml蒸储水/水平,室温静置10分钟后轻轻混匀后分装。20ul/支,-20CC可保存3个月。使用时取5ul用1mlwash液稀释在紫盖小样品管中。分析柱的灌注所邛勺新挪怦旅州邮轮您柱)安装后都要进行其加热器温度调节和双灌注,此后其他用彳需再调节,在与磕彳Prime进行灌注全血Prime蒸储水蒸储水校准物校准物STOP管2.将仪器转换到Ready状态,将排好样本的样本架放到自动进样架上(注意样品管的条形码方向),在RUN/Worklist界面的下方点击Start/Stop按纽,显示对话框点击Start开始灌注实验。3.运行结束后,注意第二个校准液管(6号管)的血红蛋白HbA2的滞留时间。最佳时间是3.65分钟。若HbA2的滞留时间测量值的变化幅度超过0.05分钟,建议进行温度调节。选择Setup/Test/Cartridge中的温度设定(滞留时间提前则降温,滞留时间延后则升温)。5.4.6分析柱的校正和样本实验按如下顺序放置样品:Prime( 引物)Blank( 空白,去离子水)Blank,Calibrator (校准物)CalibratorLowLevelControl (低值质控品)HighLevelControl (高值质控品)8toN* 病人样本N+1质控品,Level1(可不用)N+2 质控品,Level2( 可不用)N+3STOP管*N指操作中最后病人的样本号。2.确认仪器在Ready状态,将排好样本的样本架放到自动进样架上(注意样品管的条形码方向) ,在RUN/Worklist界面的下方点击 Start/Stop按纽,显示对话框点击Start开始实验。数据管理数据(Data)界面允许查看或打印保存在数据库中的样本信息。DATA/Select界面可设定查看条件,以选择查看所有、特定日期或特定运行内的运行和样品信息。DATA/ViewRur#面允许显示和打印当前保存在数据库中的任何满足于 DATA/Select界面运行设定条件的运行。选才?Print按纽去打印当前被选择的运行的报告摘要(只有 HbRA2%:无图谱)。DATA/ViewSample界面显示样本在选择的ViewRun界面下设定运行的带图谱的样本结果。选择Print可打印选中的样本的完整报告。4.质控数据的查询DATA/QCData界面,选择要观看的QCdata(按照日期或运行等方式),StartQuery。在查询完成后,一个 QCData界面被显示在主屏上(包括 Levey-Jennings图,平均值和变异系数等) 。从这个界面上使用者可通过点击低或高质控按纽来选择质控水平。数据库的备份和恢复CDM数据库容量.CDM1R据库的最大容量是350MB当数据库达到最大容量时,软件将会提示:“Thereisnotsufficientdiskspacetobeginthisrun,thesystemwilldeletetheoldestrunsuntilsufficientdiskspaceexists ”(没有足够的磁盘空间开始本次运行。系统将会删除最老的运行直到充足的磁盘空间存在。 ).如果希望软件删除最早的运行数据,请选择“OK,软件将提示你哪些运行数据将被删除并返回Ready状态。3.如果不希望软件删除最早的运行数据并备份它们,选择“ Cancel”。数据库的备份注意:做完数据库备份后,一定要重新做校正第一种备份方式将数据备份在光盘上,首先进行光盘格式化在备份前可能需要对光盘进行格式化,CD-R或CD-RW6盘(推荐使用CD-R1)如果计算机安装的是HP的刻录光驱,请按照以下说明操作-插入空白 CD-在“CreateaCD”窗口,选择DirectCD—在下一个窗口,选择CD类型(推荐使用CD-R),选择OK一在Welcome窗口,Next,-在Driverinformation(驱动器信息 )窗口,Next-在FormatDisc(格式化光盘 )窗口,Next-在NameyourDisc(为光盘命名 )窗口,为光盘命名, Finish-将显示正在格式化( FormattingDisc),当完成后,点击 OK如果计算机安装的是 Plextor的刻录光驱,请按照以下说明操作-插入空白 CD-在“SelectaProject”窗口,选择” MakeadataCD”-在下一个窗口,选择” FormatCD”-为光盘命名-选择“StartFormat”-将显示正在格式化( FormattingDisc),当完成后,点击 OK将数据库备份到光盘上1)首先确认有一个空白的已经被格式化的 CD-R或CD-RW6盘(推荐使用CD-R2)确认仪器在 Inactive状态(如果没有第二台 VII仪器与电脑连接,左上角的 Instrument#2必需在Inactive状态)3)在Setup/Configuration窗口,选择右上角的“BackupDatabase”按钮选择“Backupandclear”点击OK推荐Backupandclear。CD陶口将会关闭,DBBackup®口将会出现,通过下箭头去选择光驱,不需要改变默认的文件名,数据库文件名将为 *zephyr.db(或类似的 )6)单击OK将开始备份,依据数据库的大小不同而时间长短不一,大概持续 15分钟。7)备份完成后,需要重新做一次校正。第二种备份方式将数据库备份到电脑硬盘上确认仪器在 Inactive状态(如果没有第二台 VII仪器与电脑连接,左上角的 Instrument#2必需在Inactive状态)1)在Setup/Configuration窗口,选择右上角的“BackupDatabase”按钮选择“Backupandclear”点击OK推荐Backupandclear。CD陶口将会关闭,DBBackup®口将会出现,通过下箭头去选择硬盘,不需要改TOC\o"1-5"\h\z变默认的文件名,数据库文件名将为 *zephyr.db(或类似的 )4)单击OK将开始备份,依据数据库的大小不同而时间长短不一,大概持续 15分钟。5)备份完成后,需要重新做一次校正。6.仪器保养 (详细内容请看仪器说明书)每日保养 :检查每瓶试剂和废液瓶的液面:必要时更换和倒空清洁样品架实验后,用蒸馏水冲洗活塞 /密封圈清洗端口:在注射器中注入 10毫升蒸馏水,然后把注射器插入活塞 /密封圈清洗端口。缓慢压下注射器的柱塞,直到注射器中的全部液体注入清洗端口。拔掉空注射器。每月保养:1.外表面的清洁使用沾湿的布或海绵擦拭仪器的外表面。不要使用带有腐蚀性的清洁剂。必要时,可以使用稀释的肥皂液清洗表面,然后使用湿布或海绵擦掉肥皂残留。2.内表面的清洁使用柔软的一次性毛巾或织物擦掉内表面上的液体。注意,应该按照由下到上的顺序擦拭。拧紧任何泄漏的接头。3.清洁传送带在“MAINTAIN/Instrument”屏幕上选择“ExecuteCommands框中选择“Cleaningbelts”)来启动取样站传送带。使用软布或海绵沾水擦拭传送带。4.消毒加样通路1)将分析柱换为假柱(灰色塑料柱)。2)从“Setup/Test”屏幕中选择"V2_DEC。N1序TestReagentV2_DECONDefault3)在“Test”对话框中单击“确定”按钮。4)在样品架的前5个位置放盛有5批氯酸钠的5支样品管,后5个位置上放盛有蒸储水的5个样品管。5)把“Stop”管放到第二个样品架上,把两个样品架放到取样站上。开始工作单6)当仪器的状态返回到“Read,时,拿掉塑料假柱,使用棉签沾少许脱离子水再次擦拭分析柱座,然后重新安装好分析柱。7)从“Setup/Test”屏幕中选择“V2_F、A2'程序。8)重新做一次校正。.清洁条形码读取器应每月对条形码读取器清洁一次。从取样站上将前方的黑色罩门取下。使用一块软棉布轻轻擦拭条形码读取器的读取屏。注意不要划伤读取屏。.清洁稀释池应每月对取样站上的稀释池进行一次清洗。1)关闭VARIANTH取样站(VSS的电源。2)拿掉黑色罩门。3)把针架向后推,使用棉签沾少许蒸储水擦拭稀释池。向稀释池中加一些蒸储水,冲掉其中可能残留的颗粒,然后使用棉签擦拭并去掉残存的颗粒。4)重新装上黑色罩门。5)为取样站通电,等待取样器完成初始化和冲洗循环过程。6)在电脑上提示的CDMS信错误、取样器复位和架子复位,均单击“确定”按钮。7.清洁加样针)在“MAINTAIN/Instrument”屏幕上选择ReplaceNeedle。)等待加样臂移动完,将取样站(VSS前方的黑色罩门拿掉。)用酒精棉签擦拭加样针。)在“MAINTAIN/Instrument”屏幕上选择MoveNeedleHome)屏幕出现提示是否冲洗加样针的信息,选择Yes。6.3每季度保养:比色池清洗维护1)订购专用的比色池清洗溶液及配套工具(注射器、清洗液和连接管) ;比色池清洗溶液及配套工具,订货号270-01972)用一个干净的小烧杯,按照3份比色池清洗溶液+7份蒸储水稀释,总量20ml;3)VariantII在Ready状态,打开层析站的门,将连接上部比色池的进口接头旋开。4)将连接管与比色池的进口连接;5)用注射器从进口打入20ml稀释好的清洗液,等待20min;必要时可重复一次用注射器打入至少 40ml蒸馏水来冲洗比色池,可重复一次。重新连接好比色池的进口接头。7.常见故障的解决办法系统压力低从MAINTAIN/Instrument界面,缓冲液 2设为 0%,流速为 2ml/min;按<StartPump救纽。监测A泵压力3到4分钟,Stoppum冰关闭A泵。冉将缓冲液2设为100%流速为2ml/min;按<$12寸Pump救纽,监测B泵压力3到4分钟,Stoppump来关闭B泵。确定是A泵还是B泵压力不稳定。可通过手动排气泡来排除此故障。1)取50mL注射器并将其放入A或B泵下部的插口中。逆时针转一圈半打开插口。慢慢的回抽注射器抽出大约20mL的缓冲液。将插口顺时针旋紧,从插口中取出注射器并赶出空气。重新将注射器放回插口并逆时针转一圈半打开插口,同时用扳手将泵顶端的两个螺丝旋松。缓慢的推注射器使试剂从顶端流出,大约要从注射器中推出10mL的溶液。不要使用注射器中最后几毫升的溶液以免重新加入额外的气泡。2)关闭泵插口并取出注射器。重新连接顶端的连接,用扳手拧紧,不要拧过紧。从MAINTAI邮面重复步骤1。监测压力输出和监测器记录值5分钟。在这5分钟内,检查泵连接以察看是否有漏液。3)假如压力波动超过 5%,重复上述步骤。假如压力继续波动,请联系技术服务部门寻求技术支持。系统压力高-更换一个新的分析柱或新的过滤片-检查废液桶的管路是否被挤压。7.3运行中电源故障导致运行中断关闭取样站和层析站的电源重启电脑,等待自检通过按“ Ctrl+Alt+Del”去登录按“ Enter”键进入 Windows打开CDM^C件,将提示“Communicationerror”的信息,OK打开VSS?口VCS等待3分钟自检通过在RUN/Worklist界面的下方点击 Start/Stop按纽,如果运行进入“ Endofgradient”状态,等待该状态完成并从下一个样本(从Data/ViewRun界面查看)开始一个新的运行,否则可点击 Continue重新开始运行。染色体分析系统标准操作程序一.目的:染色体分析系统是外周血、羊水细胞、绒毛组织的染色体进行阅读的基本条件。二.使用范围:外周血、羊水细胞和绒毛组织的染色体的阅读。三.原理:外周血、羊水细胞、绒毛组织的阅读条件要求极高。要求具有高清晰的分辨率。将干燥固定后的外周血染色体、羊水染色体、绒毛组织染色体在体外经吉姆萨等试剂染色后, 制成的染色体标本, 最后由染色体分析系统进行分类、分析和结果保存。四、标准操作程序(一)开始1、不可移动相机方向 ,不可卸下物镜 ,不可更改聚光镜位置 ,如以下硬件方向及位置意外更改,系统必须重新校正 !2、开启显微镜电源 (白色电源),开启显微镜开关 (显微镜左下方的开关 ),开启电脑,L左键单击桌面上 Metafer4捷径。3、以下安全步骤必须在每次进行扫描前执行 !先转换到一个空的物镜位置, 把一个玻片架放到载物台上 ,插入样本玻片到第一个玻片位置, 在Metafer中,L左键单击第一个玻片位置,左键单击Stage-MovetoFocusPlane命令,手动转换到20x物镜位置 (请不要使用自动物镜转换功能转换物镜以防止物镜与玻片发生碰撞 ),在软件的实时窗口中进行对焦, 左键单击0幽认。(二)MSearch-低倍寻找中期1、全自动方法设定扫描左键单击Setup,左键单击在Frame旁边的▲/▼按钮选择玻片架,左键单击No下的玻片位置编号(或X-代表激活在该玻片架上的所有位置),输入描设定:Name,Mode,Classifier,SearchWindow。自动低倍寻找中期 +自动高倍采图 :Mode选MSearchTL;Classifier选LY-Auto;Sensitivity选6或以上;SearchWindow选WholeSlide。左键单击 OK按钮储存设定 ,左键单击 Search按钮,在实时窗口中对焦样本 .左键单击 OK按钮确认对焦位置 。2、半自动方法设定扫描左键单击Setup,左键单击在Frame旁边的▲/▼按钮选择玻片架,左键单击No下的玻片位置编号(或X-代表激活在该玻片架上的所有位置),输入扫描设定:Name,Mode,Classifier,SearchWindow。自动低倍寻找中期 +自动高倍采图 :Mode选MSearchTL;Classifier选LY;Sensitivity选6或以上;SearchWindow选WholeSlide。左键单击 OK按钮储存设定 ;左键单击 Search按钮;在实时窗口中对焦样本 ;左键单击 OK按钮确认对焦位置。(三)、选择要执行高倍采集的细胞左键双击玻片位置打开低倍扫描数据 (如没有转换样本的位置 ),或右键单击玻片位置打开低倍扫描数据 (如已转换样本的位置 ),左键单击 Gallery按钮,左键单击 MarkCell按钮(绿色勾按钮 ),左键单击要执行高倍采集的细胞 ,左键单击 Close按钮关闭Gallery。设定扫描:左键单击Setup,左键单击在Frame旁边的▲/▼按钮选择玻片架左键单击 No下的玻片位置编号X-代表激活在该玻片架上的所有位置),输入扫描设定 :Mode,Classifier高倍采图 :Mode选AutoCapt;Classifier选CaptMetaTL。左键单击OK按钮储存设定,在玻片上手动加上镜油,L击Search按钮,在实时窗口中对焦样本 ,左键单击 OK按钮确认对焦位置。(四)使用 Ikaros手动补拍中期细胞方法一(需开启Metafer)在Metafer中左键单击玻片位置打开低倍扫描数据(如没有转换样本的位置),或R-玻片位置打开低倍扫描数据 (如已转换样本的位置 ),在Metafer中左键单击 Ikaros按钮打开Ikaros,在Ikaros中选择要补拍的中期图像 ,右键单击图像编号 ,左键单击重定位当前细胞命令 ,左键单击图像采集命令 ,按[F]激活对焦工具 ,在实时窗口中慢慢为中期细胞进行对焦,按 [Enter]进行采图 。方法二(需开启MMCCiIkaros不需开启Metafer)开启 MMC, 开启Ikaros,在Ikaros打开要重拍或补拍的中期细胞 把显示在细胞下的MetaferRelative 坐标分别输入到MMCt的TargetXY位置,然后左键单击Move进行细胞重定位 (UseRelativeCoordinates?选项必须勾上 )。(五)使用 Ikaros进行核型分析开启Ikaros,左键双击桌面上 Ikaros捷径寻找事件:左键双击事件名域 ,在目录中左键双击要打开的事件名 .寻找中期图像: 在中期图像版面中左键双击图像编号域 ,在目录中左键双击要打开的中期图 。寻找核型图像 ,在核型图像版面中左键双击图像编号域 ,在目录中左键双击要打开的核型图。中期图像处理 :左键单击屏敝中期按钮屏敝 ,连续左键单击定义感兴趣区域,右键单击确认感兴趣区域, 左键单击对象阈值按钮 ,向右移动鼠标 (减少阈值)或向左移动鼠标 (增加阈值 ),右键单击确认阈值设定, 按[M放大中期 ,按[N]平均化信号,按[F5]增强带型。分隔染色体 :左键单击分隔按钮, 按[A]进行自动分隔功能,左键单击在轻微触撞的染色体上进行分隔, 连续左键单击画分隔线, 左键单击在重叠的 (90°)染色体上进行分隔。左键双击在染色体簇上开启动分离簇功能 .左键单击在第一条染色体上涂第一条染色体的范围 (按[+]放大工具 ;按[-]收小工具 ).右键单击确认范围 .左键单击在第二条染色体上涂第二条染色体的范围 ...直至完成所有染色体 .再次右键单击退出功能,左键单击对象校对按钮检查是否完成所有分隔对象校对 (在对象校对中也可进行分隔功能 )。核型分析 :左键单击右上角的核型表 ,左键单击染色体选择染色体, 左键单击染色体类别编号可插入染色体, 左键单击第一条染色体再左键单击第二条染色体可交换位置, 左键单击染色体旋转 180°,同时按[Shift]+L击染色体旋转 90°,中健单击染色体旋转 X°,左键双击染色体上下移动染色体位置 ,向右移动鼠标 (向上 )或向左TOC\o"1-5"\h\z移动鼠标 (向下).右键单击确认位置 。插入表意:左键单击插入表意按钮,按 [A]插入所有表意 (按[删除]删除所有表意 ),或左键单击在染色体类别上插入个别表意,右键单击退出插入表意功能。病人资料 :右键单击事件名域 ,左键单击事件数据命令 ,输入病人资料 ,左键单击关闭按钮储存更改 .样本接收 :左键单击 MetaClient上的新增事件按钮 ,输入新建 6人事件名,选择目录及要执行的行动 ,左键单击 OK,打开事件数据输入病人资料 ,重复步骤 1-4输入其他样本 .打印当天输入的样本接收单:左键单击详细页,在时期位置中选择From-To,左键单击在From旁的▼按钮,然后左键单击Today.按[Ctrl]+[A]键盘键选择所有,左键单击(打印机图标) 按钮,在Report中选择合适的报告格式 ,AF-receive=羊水样本接收报告 ,ALL-receive=所有样本接收报告 ,CB-receive=脐血样本接收报告,LY-receive= 外周血样本接收报告,左键单击OK丁印.打印非当天输入的样本接收单 :左键单击详细页 ,在时期位置中选择 Any,在过滤位置中选择送检时间 ,在值位置中输入要搜索的日期 (日期格式必须统一为:YYYY/MM/DD),按[Ctrl]+[A]键盘键选择所有 ,左键单击(打印机图标)按钮 ,在Report中选择合适的报告格式 ,AF-receive=羊水样本接收报告 ,ALL-receive=所有样本接收报告 ,CB-receive=脐血样本接收报告 ,LY-receive=外周血样本接收报告 ,左键单击OK丁印.打印样本月结单 :左键单击详细页 ,在时期位置中选择 Any,在过滤位置中选择送检时间 ,在值位置中输入要搜索的日期 (日期格式必须统一为 :YYYY/MM*),按[Ctrl]+[A]键盘键选择所有 ,左键单击(打印机图标) 按钮,在Report中选择合适的报告格式 ,AF-result=羊水样本结果报告 ,ALL-result=所有样本结果报告 ,CB-result=脐血样本结果报告,LY-result=外周血样本结果报告,左键单击OK丁印.统计核型/阳性率:左键单击统计统计统计统计页 ,在查询位置中选择要进行的统计,左键单击执行 ,在窗口位置中输入要搜索的日期 (日期格式必须统一为YYYY/MM*),左键单击 OK.关闭系统 :关闭软件 ,关闭电脑,关闭显微镜电源 .CX31/41/51光学显微镜标准操作程序目的:CX31/41/51光学显微镜是外周血、羊水细胞、绒毛组织的染色体进行读片的基本条件。适用范围:外周血、羊水细胞和绒毛组织的染色体读片。原理:外周血、羊水细胞、绒毛组织的读片条件要求极为高。要求具有高清晰的分辨率。将干燥固定后的外周血染色体、羊水染色体、绒毛组织染色体在体外经吉姆萨等试剂染色后,制成的染色体标本,最后通过显微镜进行分析检查。标准操作程序显微镜操作程序,打开灯泡。将主开关拨到“ I”(开) 。沿箭头方向,顺时针转动光强调节钮使照明更亮,逆时针转动则使照明变暗。旋钮周边的数字表示参考电压值。视场光阑使用视场光阑环,根据物镜放大倍率调节视场直径,直到正好外切视场。当视场光阑缩小到外切视场时,能够排除外来光线,改善视场中图象的反差。使用100X物镜时,视场中可能会看不到视场光阑图象。因此,应该将光阑缩小到最小直径。模型滑块随显微镜镜架提供的模型滑块能够用于适应可选的透射光检偏器 (U-AN)。准备好透射光起偏器(U-POT)和偏光聚光镜(CH3-CDP)后,就可以进行简易偏光观察。调节粗调焦旋钮张力: *使用粗调焦旋钮张力调节环调节粗调焦旋钮的张力。粗调焦旋钮张力已经预先调好,易于使用。但是如果必要,还可以使用粗调焦旋钮张力调节环,改变粗调焦旋钮的张力。使用一个大的平头改锥插入张力调节环周边的任一凹槽,顺时针 (沿箭头方向 )转动粗调焦旋钮张力调节环,增加张力;反方向转动则减小张力。如果载物台自行滑下,或者,使用微调焦旋钮⑧聚焦后迅速离焦,就是张力太小了。在这种情况下,就要沿箭头方向转动粗调焦旋钮张力调节环,增加张力。粗调焦限位杆这种装置能够确保物镜不碰撞样品,简化聚焦。使用粗调焦旋钮聚焦样品后,顺时针 (箭头方向 )拨动这个粗调焦限位杆并锁定;粗调焦的上限就固定在锁定位置。使用微调焦旋钮进行聚焦不受粗调焦限位杆影响。因此,用粗调焦旋钮降低载物台,改变样品或滴加浸油 (请见 3—6节)后,再将粗调焦旋钮转动到限位位置,就很容易重新聚焦,然后再使用微调焦旋钮进行精细聚焦。如果不需要使用这种装置时,不要锁定粗调焦限位杆。使用油镜一定要使用所提供的Olympus浸油。使用其它浸油时,有可能损伤聚光镜上透镜的表面。从最低倍物镜到最高倍物镜轮换聚焦样品。将物镜移进光路前,把一滴与100X组合模块同时提供的浸油滴在样品的待观察区域上。转动物镜转换器把油镜移进光路,然后用微调焦旋钮聚焦。因为浸油中的任何气泡都会影响图象质量,应确保浸油中没有气泡。如要检查气泡,移去目镜,完全打开视场光阑和孔径光阑,然后观察观察筒内物镜的外缘 (它看起来应该圆而亮 )。如要除去气泡,转动物镜转换器,把油镜重复移进移出几次。⑥如果聚光镜标志显示数值孔径<NA)为1.0或更大,这些数字只有在载玻片和聚光镜的上表面之间有浸油时才能用。没有浸油时,数值孔径值大约是 0.9。使用后,用纱布蘸少量乙醚 (70%)/酒精(30%)混合溶液,小心地擦拭物镜的前透镜,除去浸油。如果聚光镜标志显示数值孔径(NA)为1.0或更大,这些数字只有在载玻片和聚光镜的上表面之间有浸油时才能用。没有浸油时, 数值孔径值大约是0.9。使用后,用纱布蘸少量乙醚 (70%)/酒精(30%)混合溶液,小心地擦拭物镜的前透镜,除去浸油。 4.6.8使用浸油注意事项:如果浸油进入眼睛或接触皮肤,要立即进行如下处理。进入眼睛;用清水冲洗 (15分钟以上)。接触皮肤:用水和肥皂冲洗。如果眼睛和皮肤的外观有变化或者疼痛持续,请立即到医院检查。支持性文件及程序:CX31/41倒置光学显微镜标准操作程序目的:CX31/41倒置光学显微镜是羊水细胞、绒毛组织的染色体细胞培养过程进行细胞生长状况观察的基本条件。适用范围:外周血、羊水细胞和绒毛组织的染色体细胞培养过程进行细胞生长状况观察。原理:羊水细胞、绒毛组织的染色体细胞培养过程进行细胞生长状况观察条件要求极为高,要求具有高清晰、高分辨率和较广阔的视野。将接种后的羊水细胞、绒毛组织细胞在体外经含二氧化碳的培养箱孵育后,形成细胞染色体分裂相期,需由倒置光学显微镜进行观察、分析后,制成标准的染色体标本,最后通过显微镜进行分析检查。标准操作程序使用调节装置打开电源:将显微镜镜架侧面板上的主开关拨到“ I”。调节亮度:顺时针转动光强调节钮,提高电压,使照明更亮。逆时针转动则降低电压,使照明变暗。在低电压状态下使用灯泡能够延长灯泡使用寿命。调节粗调焦旋钮张力。一定要使用粗调焦旋钮张力调节环,调节粗调焦旋钮的张力。请使用手指或平头改锥转动张力调节环。沿箭头方向转动粗调焦旋钮张力调节环,增加张力;反方向转动则减小张力。如果物镜转换器自行滑下,或者,使用微调焦旋钮聚焦后迅速离焦,就是张力太小了。在这种情况下,就要沿箭头方向转动粗调焦旋钮张力调节环,增加张力。观察步骤概述将主开关拨到“ I”,转动亮度调节旋钮,调节到合适亮度。使用U-TR30-2三日观察筒时,推进光路选择钮,选择 100%22目观察筒光路。将样品放到载物台上。转动物镜转换器,让10X物镜进入光路并对样品聚焦。一定要让物镜转换器停到能听见喀嚓声的位置。调节目镜瞳间距。调节目镜屈光度。将所需物镜转进光路,对样品聚焦。使用带校正环的40X物镜时,请根据培养皿底部的厚度设置校正环上的刻度进行相衬观察。明场中观察未染色样品时,关小孔径光阑。相衬观察中,打开孔径光阑。将所需滤色片移进光路。明场观察中,使用LBD滤色片。相衬观察中,根据需要,使用IF550绿色滤色片。显微照相中,建议使用45HA吸热滤色片。载物台放置样品:将样品放到载物台中央。对于 CKX41>微镜,在载物台上使用标准载物台中心板,可以直接放置一个 35mitt培养皿。对于CKX3湿微镜,将所提供的35mm©养皿固定器放到载物台上,然后将一个35mms养皿装在中央的开口上。如果要移动培养皿,请整体滑动固定器。使用96位或24位微量滴定盘时,请拉长样品架,直接夹住微量滴定盘。如果要使用其它类型的微量滴定盘, 请将所提供的下列固定器之一与机械式载物台组合使用。Terasaki固定器(AB4488):用于Terasaki滴定盘、35mm?养皿固定器或65mmi培养皿。载波片固定器(AB4489):用于载波片和54mn®养皿。血液细胞测试板固定器IX2-BCTP(选贝件):用于血液细胞测试板,或用于细菌和嗜曙红细胞的记数板的固定,但是要求带有安装部位,尺寸符合mm或者用于60mm培养皿。转动X轴旋钮和 Y轴旋钮,就可以将样品移动到所需位置。 (行程:X轴方向120mlTI。;Y轴方向78mm)移动样品:转动机械式载物台的 X轴旋钮和Y轴旋钮,或者直接用手移动样品。改变物镜时要小心。在使用短工作距离物镜样品后改变物镜时,新选用的物镜可能会与载物台中心板或培养皿架冲突。在使用CKX41显微镜时,IX-CP50载物台中心板有着广泛的无冲突使用范围观察筒调节瞳间距通过目镜观察时,调节双目镜简直到左右视场完全吻合。调节到两个指示点, 保持水平。 如果要使两个指示点的连线保持水平, 调节时,使两个指示点对准枢纽上的水平线的延线。如果瞳间距不是 50、60、70牙口 75,调节时,使两个指示点的连线平行于枢纽上的水平线。记下你的瞳间距,以便再用。使用U-CBI30-2或U-CTR30-2观察筒时,步骤与CKX31显微镜完全一样。使用U-B130-2、U-TR30-2、CKX-TBI或U-TBI3观察筒时,指示点只有一个。通过目镜观察时, 调节双目镜筒直到左右视场完全吻合。 指示点“.”的位置表明瞳间距。记下你的瞳间距,以便再用。调节屈光度:使用左眼通过左目镜观察,转动粗、微调焦旋钮对样品聚焦。使用右眼通过右目镜观察,只转动屈光度校正环,对样品聚焦。使用右眼通过右目镜观察,转动粗、微调焦旋钮对样品聚焦。使用左眼通过左目镜观察,只转动屈光度校正环,对样品聚焦。将取景目镜插入U-n(30-2三目观察筒的右目镜筒。使用右眼通过右目镜观察,转动目镜上端的环,直到双十字线在视场中清晰可见。使用右眼通过右目镜观察,转动粗、微调焦旋钮对样品和双十字线同时聚焦。使用左眼通过左目镜观察,只转动屈光度校正环,改变物镜时要小心。在使用短工作距离物镜样品后改变物镜时,新选用的物镜可能会与载物台。对样品聚焦。目镜测微尺可以插入WH10X-H域WH10X)目镜。使用24毫米(直径)X1.5毫米 (厚度 )目镜测微尺。 从目镜上拧下测微尺架, 把测微尺放入架中。让测微尺有刻度的一面向下进入测微尺架。把测微尺架再拧进原来位置。U-CTR30-2三目观察筒没有光路选择钮, 它的光强分配比固定为 50%用于双筒目镜, 50%用于视频观察湿微照相。 使用CKX-TBI和U-TBl3观察筒时,可以把观察镜筒的高度和倾角调节到最舒适的观察位置。用两手抓住双筒部分,把它升高到或降低到所需位置。•CKX-TB30至I/60':•U-TB13:5至J35工不要试图强制让双筒目镜越过上面或下面的停止限位, 用力过大就会破坏限位装置。可用目镜只能是WHB10XE者是只适合于U-TB13的CXK-TBI和WH10X如果使用其它任何目镜,都会使视场周边照明不足。使用PMlRPM20tPM3O微照相系统时,请使用45HA吸热滤色片。请注意摄象机的尺寸和重量,选用适合于本系统的摄
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