PT标准操作流程

凝血酶原分析标准操作流程目录1目的2测试原理3产品信息4试剂保存和稳定性5预防和警告6样本收集和准备7检测需要但试剂盒中未提供的耗材8定标9质量控制10操作流程11结果12结果解释13参考范围14治疗范围15性能特征16参考文献1目的此程序提供在ACL™8000，ACL™9000（软件版本2.0-2.6）上，执行凝血酶原时间（PT）测试的指导。该测试用于外源性凝血途径的评估和口服抗凝剂治疗（OAT）的监测。2测试原理过量的组织促凝血酶原激酶和钙离子（PT试剂）加入病人血浆中，激活外源凝血途径，导致纤维蛋白原转化为纤维蛋白，形成固体胶状物，仪器检测凝固形成所需要的时间。3产品信息下列任何产品均可用于该测试程序：1)HemosIL™RecombiPlasTin,，8mL，P/N20002900；和HemosILRecombiPlasTin，20mL，P/N20003000，包含冻干的试剂和液体的稀释剂。2)HemosILPT-FibrinogenHS，8mL，P/N8468210，包含冻干的试剂。请参考试剂包装说明书以获得更多信息。4试剂保存和稳定性未开封的试剂和定标血浆可于2-8oC稳定至试剂瓶上标注的有效期。为了最佳试剂保存，建议不使用时，将试剂和定标血浆从仪器系统取出，使用原瓶，保存于2-8oC。复溶后稳定性HemosILRecombiPlasTin:2-8°C稳定10天，15-25°C原瓶稳定5天，或者15°C环境下，在ACL8000-10000仪器上，使用含特氟纶包被的搅拌磁珠持续搅拌下稳定10天。HemosILPT-FibrinogenHS:2-8˚C原瓶稳定3天，或者15˚C持续搅拌在ACL8000-10000仪器上稳定8小时。5预防和警告吞入有害(R22)。1避免与皮肤和眼睛接触(S24/25)。不可倒入排水沟(S29)。需穿着相应的防护服(S36)。HemosILRecombiPlasTin缓冲液内所含的叠氮钠，在含铅的金属管中可能形成易爆的叠氮化物，请安全处理废弃物。本产品仅用于体外诊断。6样本收集和准备9份新鲜静脉血加入1份枸掾酸三钠抗凝剂中混匀。有关样本采集，处理和贮存的详细说明请参阅临床和实验室标准委员会CLSI(前NCCLS)H21-A4文件。7检测需要但试剂盒中未提供的耗材以下耗材未包含在试剂盒内，但为检测所需，需要另外购买。HemosILCalibrationPlasma（定标血浆）20003700HemosILNormalControlAssayed（定值正常质控）20003110HemosILLowAbnormalControlAssayed（定值异常低值质控）20003210HemosILHighAbnormalControlAssayed（定值异常高值质控）20003310HemosILFactorDiluent（因子稀释液）8定标9757600为了报告PT的活动度（%）和PT衍生的纤维蛋白原，需要定标。INR的获得不需要定标，但是INR的计算需要对每个批号进行正确的设置。重要提示:1.如果INR的计算设置不妥，则可能得出错误的病人结果。2.如果试剂的批号发生变化，则需要输入试剂盒内新ISI值，并且正常平均值也需要重新确认和修正。不管屏幕显示还是打印输出，均应当分别设置显示或报告比率和/或INR单位。请参考ACL8000/9000上INR计算程序(P/NV&P00008)和PT衍生纤维蛋白原（PT-FIB）定标程序(P/NV&P00016)。9质量控制推荐使用两个水平的质控进行完整的质量控制过程。目录7中所列HemosIL质控品可用于该质控程序。每个实验室应当建立自己的平均值和标准差，以及整套质控程序用来监测实验测试。依据良好的实验室规范，质控应当每8小时运行一次。请参阅Westgardetal文献判别质控出控并获得相应的解决办法。10操作流程1.如需要，确认适当的PT，PTd，PTe和PTed测试项目被活化（操作手册第4章节）。2.如需要，定义液体设置（操作手册第4章节）。3.如需要，设置组合，包含PT，PTd，PTe和PTed。如使用单测试/组合测试，使用或不使用条码运行样本，请参阅手册（操作手册第4章节）。4.如需要，建立质控文件（操作手册第3章节）。5.在样本盘上装载原始试管，样本杯和/或质控。确保条码管上的条码朝向样本盘外壁。6.选择Analysis，选择ProfileSession。在当前组合下选择下拉图标，选择含有PT测试的组合。这将允许PT，PTd和/或PTe，PTed在同一批次内完成测试。7.选择ReadBarCodes图标，不含条码的样本。比如质控样本将会触发样本识别错误报警。选择OK，并通过选择Enter/EditSampleID图标输入样本编号，或者选择AddQC添加质控编号。如需要，请重复以上操作。8.如果LIS为非选项，对没有测试请求的样本选择OrderTest图标。使用箭头键选择一个测试，选择ProgramTests图标添加项目测试请求。按Confirm图标保存设置并关闭窗口。9.在状态栏内（待测）确保所有测试均提示“P”。10.选择MaterialsMap图标。检查试剂耗材位置，更新耗材量，检查批号，反应盘等等。11.选择START图标。12.仪器将确认可用的反应孔，并且提示操作者输入反应盘上第一和最后一个孔的位置。11结果凝血酶原时间PT结果可以秒数，活动度（％），比值和/或国际标准化比率（INR）形式报告。如有任何的提示和报警信息存在，或者需要更多详情请参考仪器操作手册，故障排除章节。12结果解释该项目特别适合口服抗凝剂（OAT）治疗的监测，以及外源性凝血因子缺乏的筛查。13参考范围请参阅试剂盒内说明书，IL公司关于确定参考范围的例子。参考范围的确定是使用特定批号的试剂获得的。由于许多不同的因素均可影响凝固时间，每个实验室应当建立自己实验室的参考范围。当前实验室的PT参考范围（ACL）____________________使用试剂（批号）_________________________范围平均值标准差运行日期/启用日期14治疗范围请参考当地口服抗凝药治疗和监测方案。15性能特征精密度:批内和总的（每次和每天累计)精密度是使用包括正常和异常的质控样本多次测定来进行评估的。精密度结果为使用特定批号的试剂和质控品而获得的。16参考文献1.HemosILRecombiPlasTinpackageinsertissued02/2005,InstrumentationLaboratory.2.ACL™8000/9000/10000Operator’sManual,P/N190854-68,Rev.1,Feb2004,InstrumentationLaboratory.3.ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute(formerlyNCCLS).Collection,Transport,andPreparationofBloodSpecimensforCoagulationTestingandPerformanceofCoagulationAssays–4thEdition;ApprovedGuideline.NCCLSdocumentH21-A4,Vol.23,No.352003.4.HemosIL™PT-FibrinogenRecombinantpackageinsertissued12/2004,InstrumentationLaboratory.5.HemosIL™PT-FibrinogenHSPLUSpackageinsertissued12/2004,InstrumentationLaboratory.6.HemosIL™PT-FibrinogenHSpackageinsert,issued11/2004,InstrumentationLaboratory.7.HemosIL™PT-Fibrinogenpackageinsert,issued11/2004,InstrumentationLaboratory.8.ProductInformationNo.402US,May2005,InstrumentationLaboratory.9.ACL™9000TechnicalBulletinImportantNotice,P/N1908331-18R0,InstrumentationLaboratory.10.Verification&PerformanceProcedure