双歧杆菌和嗜酸乳杆菌二联活菌微胶囊的研制(全文)

--PAGE9-双歧杆菌和嗜酸乳杆菌二联活菌微胶囊的研制(全文)AXX：1672979X(2021)07001106将固体、液体甚至是气体的微小颗粒包裹在直径从小于1m至5000的半透性或密封囊膜的微型胶囊内存活率和常温下的保存期。材料菌种(Bifitdobacteriumlongum，简称BLCICC6068)(Lactobacillusacidophils简称LACICC6005)ZG工业微生物菌种保藏中心。培养基长双歧杆菌大豆蛋白胨0.5g胰蛋白胨0.5g酵母粉g葡萄糖1.0g低聚木糖0.5g无机盐溶液4mL蒸馏水100mL，盐酸半胱氨酸0.05g(培养基热沸后加入调pH7.0，121℃灭菌15min。固体斜面加琼脂1.5～2.0g。上述无机盐溶液：CaCl20.2g，MgSO4 7H2O0.48g ，K2HPO41.0g ，KH2PO41.0g，CaCl2和MgSO4300mL500mL，边搅拌边缓慢加200mL混匀。嗜酸乳杆菌：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母膏5g，柠檬酸氢二铵2g，葡萄糖20g，吐温801mL，CH3COONa3H2O5g，K2HPO4 3H2O2g，MgSO4 7H2O0.58gMnSO4 H2O0.25g1000mLpH6.215min15～18g试剂海藻糖：纯度>99(HA)Mr=2.020210516(仪器YQXII冷冻Labconco公司)HITACHI恒公司)。方法冻干菌粉的制备374℃、5000r/min离心10min收集菌体，湿菌体与保护剂和双歧杆菌增生促进剂低聚木糖溶液混和均匀，得菌悬液，2和20101011131菌落计数样品经适当稀释后涂布于固体培养基上，每个稀释度做4个重复，37℃厌氧培养20h后菌落计数。囊材液的配制95备用。空气悬浮法制备微胶囊人工胃液和人工肠液的配制人工胃液：取稀盐酸16.4mL，加水约800mL及胃蛋白酶10g，搅匀后加水定容至1000mL即得。6.8g500mL。用pH至10g1000mL即得。无菌微孔滤膜过滤除菌。微胶囊在人工胃液中的溶出测定方法1g50mL人工胃液(pH1.2再置于150r/min0，20600nm的工胃液中微胶囊的溶出情况。微胶囊在人工肠液中的崩解测定方法1g50mL人工肠液(pH6.8再置于150r/min0，10600nm的透光率。微胶囊包衣处方的设计以微囊增重、增塑剂邻苯二甲酸二乙酯DEP)2h1。1微胶囊包囊产率和包囊效率的测定产品中活菌数的测定：取微胶囊1g左右，置于50mL人工2.745min加入的活菌数测定：根据微胶囊较菌粉增重计算，取与1g微胶囊相当的菌粉，适当稀释后活菌计数。微胶囊中的活菌数=产品中的活菌数－微胶囊表面的活菌数1g50mL、pH5.02.645min稀释后活菌计数。微胶囊稳定性实验60～65373粉作对比实验。结果与分析微胶囊化操作条件的确定速度、空气流量、进风温度和物料处理量等。尽量加大喷液速度，以缩短包衣时间。粘结。空气流量的大小决定物料通过包衣区的速度和物料的流化综合考虑上述因素，经过反复实验，确定流化床微胶囊化操0.2MPa10～12m3/min；流化床进气温度35～451mL/min5～10g囊液浓度的确定956％，8％，10％36％囊液黏度小，喷射时呈雾区高，单位体积囊材少，溶剂蒸发较慢；1088％聚丙烯酸树脂Ⅱ。微胶囊包衣处方优化结果2、3正交试验3个因素对微胶囊在人工肠液中崩解性的影响顺>DEP用量，最佳组合为：A1B1C3或A2B1C3择A2B1C320102L9(33)正交试验方案与结果(n=5)3微胶囊在人工胃液中的耐酸性2h22h44(n=5)2h54.0840min1。40min2h人工胃液中基本不发生泄漏，耐酸性良好。1(n=5)5。微胶囊在人工肠液中逐渐溶解，处理至30min时，透光率降至最低值，且人工肠液中未见固体颗粒，30min后透光率和释放率基本稳定，表明微胶囊已完全崩解，见图2。由此推断，该法制备的微胶囊具有良好的肠溶性。微胶囊包囊产率和包囊效率测得微胶囊产品中的活菌数为9.56×109CFU/g，微胶囊表--面的活菌数为，则微胶囊中的活菌数=9.561091.2201g微囊含菌粉0.83g1010CFU/g微囊。微胶囊贮存稳定性实验6。3760～653310室温下贮存1能够较好地解决微生态活菌制剂贮存稳定性问题。微胶囊形态与大小3400～5004结论空气悬浮法制备长双歧杆菌和嗜酸乳杆菌二联活菌微胶囊的0.2MPa10～12m3/h流化床进气温度：35～451mL/min；物料处理5～10g810DEP