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如何活化菌种高中生物学选择性必修3教材微生物发酵的基本过程中出现了菌种的活化(如下图所示),但没有具体的菌种如何活化的方法。那么,菌种如何活化?菌种的活化是相当于复苏,就是让菌种恢复活性,前提是,此菌种本身有活性,只是在休眠而已。菌种的复壮是这批菌种已经有点衰退了,本身就不太好了,要通过某些方法提高其活力。菌种活化就是将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养,逐级扩大培养是为了得到纯而壮的培养物,即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。菌种发酵有一般需要2-3代的复壮过程(提高活性),因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同,所以要活化,让菌种逐渐适应培养环境。要明白菌种活化的情况就需要了解菌种保藏的方式和方法。目前国际国内常用的菌种保存方法包括:定期移植法、液体石蜡法、沙土管法、真空冷冻干燥法、-80℃冰箱冻结法、液氮超低温冻结法。对于不同的保存方式活化的方式也不同:(1)定期移植法的菌种复苏较简单,直接转接即可;(2)液体石蜡法保存的菌种在复苏时,挑取少量菌体转接在适宜的新鲜培养基上,生长繁殖后,再重新转接一次;(3)沙土管法保存菌种在复苏时,在无菌条件下打开沙土管,取部分沙土粒于适宜的斜面培养基上,长出菌落后再转接一次。或取沙土粒于适宜的液体培养基中,增殖培养后再转接斜面;(4)真空冷冻干燥法保存菌种在复苏时先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部,将安瓿管顶部烧热,用无菌棉签沾冷水,在顶部擦一圈,顶部出现裂纹,用挫刀或镊子颈部轻叩一下,敲下已开裂的安瓿管的顶端,用无菌水或培养液溶解菌块,使用无菌吸管移入新鲜培养基上,进行适温培养;(5)-80℃冰箱冻结法保存菌种复苏时,从冰箱中取出安瓿管或塑料冻存管,应立即放置38℃-40℃水浴中快速复苏并适当快速摇动。直到内部结冰全部溶解为止,约需50秒-100秒。开启安瓿管或塑料冻存管,将内容物移至适宜的培养基上进行培养;(6)液氮超低温冻结法保存菌种复苏与-80℃冰箱冻结法保存菌种复苏相似,从液氮罐中取出安瓿管或塑料冻存管,应立即放置在38℃-40℃水浴中快速复苏并适当摇动。直到内部结冰全部溶解为止,一般约需50秒-100秒。开启安瓿管或塑料冻存管,将内容物移至适宜的培养基上进行培养。总结:第一、配置菌种适宜生长的培养基。第二、将菌种从保藏状态恢复到室温状态,比如将冷冻的菌种解冻。第三、将通过操作将保藏的菌种接种到培养基中培养,此步骤称为菌种复壮。第四步挑选培养基茁壮的菌落,挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养,重复此步骤2-3次,从而得到生长良好的菌落。例、红曲霉合成的红曲色素是可食用的天然色素,具有防腐、降脂等功能。研究者进行了红曲色素的提取及红色素的含量测定实验,流程如下:(1)取红曲霉菌种斜面,加适量
洗下菌苔。制成菌悬液并培养,解除休眠获得
菌种。经液体发酵,收集红曲霉菌丝体,红曲霉菌丝体与70%乙醇溶液混合,经浸提、
,获得的上清液即
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