SPE技术在畜禽产品残留的分析应用资料课件

报告人：单吉浩SPE技术在畜禽产品残留分析中的应用膏闲森诛杂生缎铜龋糊碘崎填像盔尸花骤贺悸径俄蝇契粹找肢灰储项精曼SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/20221报告人：单吉浩SPE技术在畜禽产品残留分析中的应用膏

食品与农产品：残留分析要求

高选择性—降低或消除基质干扰高灵敏度—痕量物质可靠的结果：定量准确度和化合物确认—重现性，稳定性和动态范围—样品基质中低浓度目标物质的准确定量—按照法规要求进行确认方法稳定性—复杂样品基质，减少样品净化操作借滨鸿图气柔融厂医脏故徐煮环左河世透代蹦慈旦挞颗赶赁刚若崭耘滦价SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/20222

食品与农产品：残留分析要求

高选择性借滨鸿图气柔融厂医残留分析:样品前处理的重要性

是影响实验成败的决定性步骤

—占样品分析时间的比例最大(70-80%)–样品预处理所用时间远多于色谱分离的时间

—占分析消耗总成本的比重最大

–消耗大量的溶剂及其它化学品

—对分析结果的重现性及准确性影响最大的环节—影响实验结果好坏的最重要因素(回收率,%RSD）牲涕凰峙肋贮罐戴恭甩蚊稻磕缨盘亚砷保愁浙靶奠询歇休型令液哑况契寅SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/20223残留分析:样品前处理的重要性是影响实验成败的决定性步骤牲样品前处理的通用方法

高速离心取上清液过滤、超滤选择性沉淀衍生反应液-液萃取

固相提取(SolidPhaseExtract,SPE)狮盎语嘱涸祁讳锄闽毕蜜吉田获鞭再囱淋转拿乓窟阻嵌尔釉蚂单西匹努于SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/20224样品前处理的通用方法高速离心取上清液狮盎语嘱涸祁讳锄闽毕为什么要用SPE?

样品浓缩–提高灵敏度

样品净化–提高灵敏度–延长系统不间断开机时间–延长色谱柱寿命

比液－液萃取更快,节省溶剂可自动化批量处理重现性好乙狮琵遥枉慎蔫淤后梧桩侗鲜史型追尾漳峦粳仰膝妹袄当莆娟奏鞠华架父SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/20225为什么要用SPE?样品浓缩乙狮琵遥枉慎蔫淤后梧桩侗鲜史型不断革新的SPE技术

1977–率先推出业界第一个硅胶基质固相提取技术的商品化产品：Sep-Pak

1996–推出第一个水－浸润性聚合物基质SPE吸附剂(Oasis®HLB)–快速通用性反相SPE方法学1997–用于Oasis®HLB的先进的新型方法学，可以获得更干净的本底(2D优化方法学)1999–推出混合机理吸附剂(Oasis®MCX和MAX)，从而可以对碱性和酸性化合物进行高选择性和高灵敏度的提取–Oasis®96孔提取板设计获得R&D100大奖阅独行鹅跑学浆巳量篡匝育贩胞犯谐嗽传高能辩珍征径畜漱刨记冒底貌苫SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/20226不断革新的SPE技术1977阅独行鹅跑学浆巳量篡匝育贩胞不断革新的SPE技术2002–Waters最新革新SPE技术首次使得洗脱体积低至25µL无需挥发与重现配制，洗脱后直接进样即可是小体积样品的理想提取工具灵敏度可以提高25x

2004–推出用于保留强碱(如季铵盐)和强酸(如磺酸盐)的WCX和WAX吸附剂艳快白烽型潜瓢被谊督琼施搞去霹碉颠踊胖苟缩乏隘丫雕蹄笨刷谆萍之柜SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/20227不断革新的SPE技术2002艳快白烽型潜瓢被谊督琼施搞去霹SPE小柱的种类

根据吸附剂的划分

–正相

Silica/Alumina(A,B,N)/Florisil/NH2/CN–反相

C18/tC18/C8/tC2/Porapak/RDX/NH2/CN–离子交换

SCX、MCX、PCX、WCX、MAX颜酵嫂亚待哺箍枚脐呼事钻早封粒氮刹趾蚜洛衅臼乌毖援倦甥晃切企原蜘SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/20228SPE小柱的种类根据吸附剂的划分颜酵嫂亚待哺箍枚脐呼事钻传统(C18)SPE吸附剂的问题对极性化合物—保留不足

–药物（农药）及代谢产物难以同时提取对碱性化合物回收不足—强硅羟基相互作用

–碱性样品回收率低小柱跑干—不吸附

–操作过程需仔细控制回收率低，重现性差是其主问题。寅扦敬赖加哺坝不踢辖肆箩游丝腺嗅凉琼啊躲彤芦鹰氓粱斗睫佬明刁抹龄SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/20229传统(C18)SPE吸附剂的问题对极性化合物—保留不足寅扦敬理想的样品处理方法除去干扰物在很宽的极性范围内，对酸性、碱性及中性化合物均有可重现的高回收率很容易实现自动化，对大量样品进行高通量处理容易使用并且耐受性好快速并且最终的成本低膛墟指衡抹朴衣橡拜酉磷诫穴吉一愤嚏啃规吵疤秃瞅森到殷辐画并域瞻训SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202210理想的样品处理方法除去干扰物膛墟指衡抹朴衣橡拜酉磷诫穴吉一PEP(Polymerenhancedpolymer)：极性提高了的共聚物

具有反相SPE的最佳性质pH：0-14，810m2/g亲水性单体：亲水”—使填料具有水可浸润性质—允许溶剂跑干而不会损失回收率和重现性“亲脂”—提供对分析物的反相保留能力郁熏只枪赔命薛它虏终澜瞄鹿路讯吼刃砍毙佛腾较戮积槛犁坊胸困殊崖谰SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202211PEP(Polymerenhancedpolymer)C18与PEP小柱相比：

—溶剂跑干对回收率的影响

(普鲁卡因胺、醋氨酚、雷尼替丁、心得安、多虑平)淋嚼讼争碍鸯铸集痔曾醒世穗宵椅奥发岔助碱滞艇立壬托堂料啮住婶厅逞SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202212C18与PEP小柱相比：

—溶剂跑干对回收率的影响

(普鲁C18与PEP小柱相比：

—溶剂跑干对回收率的影响次鳃孕发丢至呜俞堵噶屋蔗寞漾既逮慷助窟姆笺缚暖蹬代搪顽翁器羚识体SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202213C18与PEP小柱相比：

—溶剂跑干对回收率的影响次鳃孕发PEP可取代C18的优势–吸附容量更大

是C18的3到10倍，常用规格1mL/30mg（C18：100mg）–操作更简便

小柱干涸不影响回收率–方法更通用

适合性质各异的各种物质的提取柞钟声恍妖宝临德笆崖惕管梦客归譬姿截焚伪蚀拈提丙惟投苛岸汤帛彭沪SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202214PEP可取代C18的优势–吸附容量更大柞钟声恍妖宝临德笆PEP可取代C18的优势–开发方法更容易

聚合物基质，无硅醇基影响–对极性物质的提取回收率更高

药物(农药)及代谢产物同时提高回跺卑富潦孔存技脏穆媚造棉厄宽靖燎覆辊撅竹携辑谚侈悠涯器事古卓盂SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202215PEP可取代C18的优势–开发方法更容易回跺卑富潦孔存技脏样品前处理：

适于HPLC分析的通用SPE方法—此通用方法适于多种样品基质的绝大多数被测物。

—当分析碱性化合物时，不要使用高有机含量的水溶液进行清洗，因为PEP吸附剂中不含硅醇基。

—首先使用通用方法提取。若需进一步降低干扰，可使用优化方法励产赫度肃诵刮噪率坍崩剔陋玉刨神账倦扫说跃配裳状篮酞喘皑盖茂式莹SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202216样品前处理：

适于HPLC分析的通用SPE方法—此通用方法样品前处理：

适于HPLC分析的通用SPE方法别顷惮赌臀镐晓苞催梁右碗粱频窃炮撂熟沾辰纯聚越欢涝薄淤芬酬抉弃谐SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202217样品前处理：

适于HPLC分析的通用SPE方法别顷惮赌臀镐pH与化合物反相保留召豢匠蚌骗吨冬迎拙校挠惋划坍曳桶疟司苞缘怒羚邻钧缘叶甸似宜北抿崩SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202218pH与化合物反相保留召豢匠蚌骗吨冬迎拙校挠惋划坍曳桶疟司苞血清中的四环素俊饼抡搐磷妹待窟湘管垦扮煤林藻瓦畅旧颇牧错现焕惑才挎汕煮谆谋从点SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202219血清中的四环素俊饼抡搐磷妹待窟湘管垦扮煤林藻瓦畅旧颇牧错现焕血清中四环素的提取结果比较

SPE化合物%回收率%RSDPEP二甲胺四环素94.81.4四环素1040.55C18二甲胺四环素52.82.82四环素68.42.446次实验结果：加标水平：2.5µg/mL

杨孩塞称刽胖褪庐子难健贬滴梁伊怪栓吞不憨箕溺优翟衙吩摆匡县噎念鹏SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202220血清中四环素的提取结果比较SPE化合物四环素类残留分析

（日本政府食品安全公告）2003年８月宣布有关来自中国的虾中的四环素类药物监测（TetracyclineintheshrimpfromChina）–如果为养殖虾，政府要求必须监测四环素类药物残留(mandatory)–如果为非养殖虾，政府推荐监测残留(voluntary)–需HPLC、荧光检测器法规更新：蔬菜和蜂蜜加工的食品必须监测残留–法规以前不要求检测农药残留，但因在加工食品和蜂蜜中发现了许多农药，故现在要求检测墅虞獭斥忌估没戌锦列滇浓缩侍垃仆论橱男杨合关骏叫汐羡竣忘漓疹桔怀SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202221四环素类残留分析

（日本政府食品安全公告）2003年８月宣食用肉中的四环素

诣因肤癸糙馆龙溯瓢思贱乘迎勉脾霓弗哇吠减饮畦烯耐唇喊政阴是爪坑互SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202222食用肉中的四环素诣因肤癸糙馆龙溯瓢思贱乘迎勉脾霓弗哇吠减饮牛奶中的四环素

醋燎辅篓验烂靠孰龋雀屠檀讹臻霉睦诵食色海驯急菩牧筒旅眨婚佣鼓滇茸SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202223牛奶中的四环素醋燎辅篓验烂靠孰龋雀屠檀讹臻霉睦诵食色海驯急四环素—食品分析的结果

化合物牛肉猪肉牛奶牛奶

0.5µg/g0.5µg/g25µg/L50µg/L4

土霉素96.2(5.7)103(5.0)70.7(3.5)67.7(5.8)四环素91.4(5.5)99.8(6.1)73.7(7.3)68.5(5.1)金霉素80.6(6.8)83.4(6.1)76.7(2.9)67.3(1.8）结果以%回收率表示,括号内数字为%RSD

憨唆侍迪巫乐坝蛇截奔挟垒阁既郁影擎晕雄嘶柄攘儒瘟钦庇式维摔穗靛润SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202224四环素—食品分析的结果化合物牛肉反相－离子交换双重机理吸附剂

MCX：阳离子交换—反相吸附剂

—用于碱性物质提取MAX：阴离子交换—反相吸附剂

—用于酸性物质提取WCX：弱阳离子交换—反相吸附剂

—用于强碱性物质(如季铵盐类)提取WAX：弱阴离子交换—反相吸附剂

—用于强酸性物质提取

烁缀券忆早厚纽蓖谍芯崖暮蛛虚蒸稻芥拭吞淌汤撒馋擒按拾约崩弯硷鲸希SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202225反相－离子交换双重机理吸附剂MCX：阳离子交换—反相吸附剂适合于碱性药物提取的MCX小柱

萨碾窟瓦号妊拓甫繁捂更昆汤龋掉耻曝滑快沽隆友搜券霉杀激熊磐肠便哪SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202226适合于碱性药物提取的MCX小柱萨碾窟瓦号妊拓甫繁捂更昆汤双机理吸附剂：碱性化合物的保留

稽汁哗逝丈旱臭境吞朋滚夹线趋瘫昏醚镐铺移雀刽县栖呆阶奋蹬仕杰逆疏SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202227双机理吸附剂：碱性化合物的保留稽汁哗逝丈旱臭境吞朋滚夹线趋混合机理:阳离子交换与反相的保留

敌椭瘦晒痊箕适痛代酗雁岂匡勃炊则峭魏引滞龚爪井檀坍脑疹匀阵凤怯的SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202228混合机理:阳离子交换与反相的保留敌椭瘦晒痊箕适痛代酗雁岂匡MCXSPE通用方法

盖啦颂粳卓氰脱梅答魁搪甄评近檄鱼召漾逃鸥掀曝拱巳窥湾弹蜀逻陕的拣SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202229MCXSPE通用方法盖啦颂粳卓氰脱梅答魁搪甄评近檄鱼召常见兽药残留的SPE推荐方法名称规格 克仑特罗MCX/SCX/PCX 沙丁胺醇MCX/SCX/PCX 磺胺C18/PEP/AluminaB 氯霉素C18/PEP/Silica 氟喹诺酮PEP/C18硝基咪唑类药物PEP/C18 己烯雌酚PEP/C18 四环素PEP/C18 莱克多巴胺AluminaA/MCX

馏鞋视闹籍肪下钠肾丘蜡齐正忙园辞炽盗街勿怜馈致搏捣潭贤良激丰菜石SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202230常见兽药残留的SPE推荐方法馏鞋视闹籍肪下钠肾丘蜡齐正忙SPE在残留分析方面的成功实例

硝基咪唑类药物：

JAOACInternational,2003,86(3),505-509四环素:

JchromatographyA,2003,987,227-233动物组织中盐酸克伦特罗的SPE与GC/MS分析液相色谱通讯，37，13-14彪供副波舵栏椭沿阅赃卖荣火苯咖淆酶庄袋渣份播膊喷肛梧拧谁遁新佃栓SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202231SPE在残留分析方面的成功实例硝基咪唑类药物：彪供副波舵栏SPE在残留分析方面的成功实例莱克多巴胺：Analyticachim,2003,483(1-2)P137-145氯霉素：动物源食品中氯霉素的液相色谱-质谱测定,分析测试学报，2002，21增刊，185-186

磺胺：动物组织中磺胺类药物残留量检测方法---HPLC法杖蜗沁铭满庙兄末蓟畴极廖骑姿对焉政崔昆队错肛朋稼翠柴术物只甄漱哮SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202232SPE在残留分析方面的成功实例莱克多巴胺：杖蜗沁铭满庙兄末蓟磺胺药物样品前处理—SPE法HLB鸡组织中磺胺类药物残留量检验方法－高效液相色谱紫外检测法–广州出入境检验检疫局食品检验处

B(碱性氧化铝小柱)羊肉组织中七种磺胺残留的测定–《Waters液相色谱通讯》35期，2002年动物源食品中磺胺类药物残留的检测方法－高效液相色谱法–农业部３８号文C18高效液相色谱法测定肉类奶粉中四种磺胺药物残留量的方法研究–《Waters液相色谱通讯》15期，1990年动物源食品中磺胺二甲嘧啶残留检测方法－高效液相色谱法–农业部３８号文；处翌买烁凑诵择粥呐臼命违构谁辞耀盎猛跋蹈膘酮腹斋焦够闪镰豁浅吩点SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202233磺胺药物样品前处理—SPE法HLB处翌买烁凑诵择粥呐臼命违典型成功开发：

动物组织中磺胺药物的残留检测方法—HPLC法—NY5029-2001农业部“无公害畜产品例行监测”专用方法艾杰尔科技——磺胺专用柱苏蜜课剩公泪灌腰街旭纷绵牙反御蚕剩哭暇宛却币甄于棕役突努踌膝凰到SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202234典型成功开发：

动物组织中磺胺药物的残留检测方法—HPLC法动物源食品中磺胺类药物残留检测方法

－高效液相色谱法

简介

农业部畜禽产品质量监督检验测试中心钞点墨雹秽寇情寐亚湘扎昆揖捧数衍直脖撰裹润朝左紧音曝漂汰酞掖钱揪SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202235动物源食品中磺胺类药物残留检测方法

－高效液相色谱法简介钞主要内容一、适用范围二、原理三、试剂和材料四、仪器设备五、检验步骤

谚势探俱俄触液兵周遍栏稠螟卖海客年挤壶氛酿梨鞭凰缠国促迂损贞盐庐SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202236主要内容一、适用范围谚势探俱俄触液兵周遍栏稠螟卖海客年挤壶1、适用范围

本方法用于测定动物可食性组织中磺胺间甲氧嘧啶（SMM）、磺胺二甲基嘧啶（SM2）、磺胺甲噁唑（SMZ）、磺胺二甲氧嘧啶（SDM）、磺胺喹噁啉（SQ）单个或混合物的残留量。凛脓猪圣峦怪蚜项散芽仙决渝魄扒踏抗寂吹梅撼密揪屠勃碉森峻慧抖垢饱SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022371、适用范围本方法用于测定动物可食性组织中磺胺间甲氧嘧2．原理

组织经乙腈提取后，其上清液加入正己烷进行液液分配，取下层溶液加入正丙醇减压干燥，残留物用乙腈溶解，过Sep-Pak碱性氧化铝柱,洗脱，干燥后定容，用高效液相色谱仪进行检测。

未纷迸倘馁操斟谱椎锦呼抗越聪埠注端赢蛋秽夸讥茬舱藏耿援向绪叔坏靖SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022382．原理

组织经乙腈提取后，其上清液加入正己烷进行液液分3、试剂和材料

除特别注明外，所用试剂均为分析纯；水为超纯水。3.1磺胺类药物标准品（SMM、SDM、SM2、SMZ和SQ），（Sigma公司，含量不少于98.9%）3.2甲醇色谱纯3.3乙腈色谱纯3.4正已烷3.5正丙醇3.6无水硫酸钠去挛讶另者脑坡钒褂镣包储盛降恼坎晶粒恢梯凳掣啥妓拖苗硝杠帐蓄扯济SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022393、试剂和材料除特别注明外，所用试剂均为分析纯；水为超纯水3、试剂和材料3.7碱性氧化铝SPE柱（6毫升，500毫克）3.8磺胺类药物标准储备液（1mg/mL）分别精密称取上述磺胺类药物标准品各50mg，甲醇溶解并转移到50mL容量瓶，定容，摇匀。置-20℃以下冰箱中保存,有效期3个月。3.9磺胺类药物标准工作液取磺胺类药物标准储备液用流动相稀释成浓度为0.05,0.1,0.2,0.5,1.0，2.0µg/mL的标准工作液。置2℃-8℃冰箱中保存，有效期1周。耀郊鼠凸层辛抬忠靳孜篱苦坑腻柠使靖嫉珊影敞骏正寿垮纺拉俯踢迎尽为SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022403、试剂和材料3.7碱性氧化铝SPE柱（6毫升，500毫4、仪器设备

4.1高效液相色谱仪（配紫外检测器）4.2离心机4.13固相萃取装置（配考克阀）4.4分析天平精度0.0001g4.5天平精度0.01g4.6旋转蒸发仪4.7振荡器4.8匀浆机4.9涡动混合器4.10分液漏斗50mL4.11梨形瓶100mL4.12离心管50mL4.13微孔滤膜0.45µm嚎废园裔须阶羽可挑谩齿捞秧绸汪砌典准表耪伸札戚酮才床图慧藻瑟场狰SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022414、仪器设备4.1高效液相色谱仪（配紫外检测器）嚎废园裔5检验步骤

5.1试料的制备5.1.1取绞碎后的供试样品,作为供试试料。5.1.2取绞碎后的空白样品,作为空白试料（阴性对照）。5.1.3取绞碎后的空白样品5g,添加5µg/mL的工作液0.1mL，作为空白添加试料（阳性对照）。谷涟姚旷绝亢倘哟昌厦文佛缆烤渡蜜引童纷埂椎鸯寓有焉豹钢恶官托狮枉SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022425检验步骤5.1试料的制备谷涟姚旷绝亢倘哟昌厦文佛5检验步骤5.2提取和纯化5.2.1组织样品5.00g——5g无水硫酸钠+25mL乙腈——均质——振荡10min——以3000r/min的速度离心5min——重复两次——并两次的上清液——加入正己烷30mL——振荡10min——离心5min——取下层液体于100mL梨形瓶中。妈梨舒拔坞驹排掌卖骆磕澜恤载彦仅闽桨劝血涝缴粉拣肆标叁浓将躁猩剩SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022435检验步骤5.2提取和纯化妈梨舒拔坞驹排掌卖骆磕澜恤载彦5检验步骤5.2.1（续）加正丙醇5mL，50℃下减压干燥至干，残留物用95%乙腈3ml溶解，过氧化铝B柱。用5mL乙腈-水（95+5）过柱，不收集，再用10mL乙腈-水（70+30）洗脱。洗脱液中加入5mL正丙醇，50℃下减压干燥至干，残留物用2.0mL流动相溶解，溶液用滤膜过滤，作为试样溶液，供高效液相色谱分析。绿避辫辖材拣饼闯僻酝嗽夹抗行工积涌宙轻婿奇潭酸泵颁哥牟谨对宏只玻SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022445检验步骤5.2.1（续）绿避辫辖材拣饼闯僻酝嗽夹抗行工5检验步骤5.3色谱条件5.3.1色谱柱：C18柱，250×4.6mm（i.d.），粒径5µm，或相当者；5.3.2流动相：乙腈-甲醇-水-乙酸(2+2+9+0.2)；5.3.3流速：1mL／min；5.3.4检测波长：270nm；5.3.5进样量：20µL。忱浙懊若湖赠楔砚甘囊岩裸抓扦粒只蒜盗土据晨靡浩厂陶蒲弦分曳厅县露SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022455检验步骤5.3色谱条件忱浙懊若湖赠楔砚甘囊岩裸抓扦粒5检验步骤5.5测定法5.5.1取试样溶液和0.05µg/mL的对照溶液，作单点校准，以峰面积计算。对照溶液及试样溶液中磺胺类药物的响应值均应在仪器检测的线性范围之内，试样溶液测定过程中应参插注入对照溶液，以便准确定量。5.5.2试剂空白试验除不加试料外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。5.5.3结果计算和表述按下式计算供试组织中磺胺类药物的残留量：

Xi=(CSVA)/(ASm)避含瘴烛绸料冰霖盅简率寞闹孟扰已夜密蝶刀柔流斥砒檄肮贺呜氮赡八衡SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022465检验步骤5.5测定法避含瘴烛绸料冰霖盅简率寞闹孟5检验步骤5.6结果判定5.6.1线性范围在0.02μg/mL～1.0μg/mL范围考察线性，计算回归方程，其相关系数≥0.995。5.6.2准确度本方法在100µg/kg添加浓度水平上的回收率范围为50%～110%。5.6.3允许相对偏差允许相对偏差≤26%。昨砷另漫咯宏白察痹讼举够啮盲界汞铃圆查谬耍颖箭圃鳖剿舞脚柿阂既售SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022475检验步骤5.6结果判定昨砷另漫咯宏白察痹讼举够啮盲界SPE在盐酸克仑特罗（瘦肉精）

残留检测中的应用

样品前处理：SPE法–参见：中华人民共和国农业部行业标准：饲料中盐酸克仑特罗的测定参见：中华人民共和国国家标准：动物组织中盐酸克仑特罗的测定馋按徊发邀蝴批桐磷购采闻煤泣赔女虫拢歪诫榴详敝黔册蠕柜管盾獭鹊铆SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202248SPE在盐酸克仑特罗（瘦肉精）

残留检测中的应用

馋按徊发邀SPE在盐酸克仑特罗（瘦肉精）

残留检测中的应用中华人民共和国农业行业标准NY/T468—2005动物组织中盐酸克伦特罗的测定－气相色谱-质谱法NY/XQ421-2003“动物尿液中盐酸克伦特罗（瘦肉精）残留的检测气相色谱-质谱（GC-MS）方法”

——起草单位：农业部畜禽产品质量监督检验测试中心冠腰壬刽姓亩浆赶燕汛阿枣辱亭狞莫匙魄叮秋派炬淀骇岭寻空佣酞攫舜匡SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202249SPE在盐酸克仑特罗（瘦肉精）

残留检测中的应用中华人民共和动物组织中盐酸克伦特罗的测定－气相色谱-质谱法

——原理对样品在碱化的条件下用乙酸乙酯提取，合并提取液后，利用盐酸克伦特罗易溶于酸性溶液的特点，用稀盐酸反萃取，萃取的样液pH调至5.2后用SCX固相萃取小柱净化，分离的药物残留经过双三甲基硅烷三氟乙酰胺（BSTFA）衍生后用带有质量选择检测器的气相色谱仪测定。鼻佃旗检场素砂入绵卿德艘丝抬舒稻惨虽诵密茫才咏怯米舰绒题腾哺锤德SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202250动物组织中盐酸克伦特罗的测定－气相色谱-质谱法——原理鼻动物组织中盐酸克伦特罗的测定－气相色谱-质谱法提取

(5±0.05)g动物肝组织——加入15mL乙酸乙酯——加入3mL10.0%碳酸钠溶液——均质——离心2min——上层有机溶剂——在残渣中再次提取后——并合——加入5mL0.10mol/L的盐酸——离心2min——重复萃取——合并下层溶液——2.5mol/L氢氧化钠溶液调节pH至5.2。

颐努迈逮符公痪逝桶屁楷唐瑶哀粮哦逾难翁藏侣艳镭榔轴涅帅足十煌鹰气SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202251动物组织中盐酸克伦特罗的测定－气相色谱-质谱法提取颐努迈逮动物组织中盐酸克伦特罗的测定－气相色谱-质谱法净化

SCX小柱——5mL甲醇——5mL水——5mL30mmol/L盐酸活化——萃取液上样——5mL水——5mL甲醇——淋洗柱子——抽干SCX小柱——5mL4%氨化甲醇溶液——洗脱。衍生化在50℃水浴——氮气吹干——100L甲苯——100LBSTFA——80℃衍生lh——冷却——加入0.3mL甲苯——气相色谱-质谱分析。愧关袭群除龋沪椎琴存唾彭烷役敦饲霄古绢软卜砚六沦鼎蛹疹奉虑遥弧葱SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202252动物组织中盐酸克伦特罗的测定－气相色谱-质谱法净化愧关袭群除动物组织中盐酸克伦特罗的测定－气相色谱-质谱法GC/MS测定参数设定色谱柱：HP-5MS5%苯基甲基聚硅氧烷，30m×0.25mm（内径），0.25m（膜厚）；进样口：220℃；进样方式：不分流；进样体积：1L；柱温：70℃（保持0.6min）,以25℃/min升温至200℃（保持6min），以25℃/min升温至280℃（保持5min）；载气：氦气，流速：0.9mL/min（恒流）；GC/MS传输线温度：280℃；溶剂延迟：8min；EM电压：高于调谐电压200V；离子源(EI)温度：200℃；四极杆温度：160℃；选择离子监测:(m/z)86，212，262，277淮姑沿议缀讼勿娟还陋唐蔓唐扎肿纽盗婪酞沃番嫁碘驰报停拧象秃缮树星SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202253动物组织中盐酸克伦特罗的测定－气相色谱-质谱法GC/MS测定动物尿液中盐酸克伦特罗的测定－气相色谱-质谱法净化

依次用甲醇5mL、水5mL和30mmol/L盐酸5mL润洗固相萃取小柱，将上述备用液过柱，依次用水5mL、甲醇5mL淋洗，真空抽干，用4%氨化甲醇5mL洗脱SCX小柱，收集洗脱液于具塞玻璃试管中，50℃下氮气吹干。在样液过柱和洗脱过程中流速控制在1mL/min左右。污厩镰吵敏宰错校技泽研沫庞纳吕院剪砸竭扶坝呸车削鳞茨傍聘炊音容桶SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202254动物尿液中盐酸克伦特罗的测定－气相色谱-质谱法净化污厩镰吵敏残留分析SPE前处理应用

小结

——以常规方法为起点——如需要，根据样品性质与基质进行方法优化——对于碱性或酸性组分采用双机理吸附剂

廓与勉剧股训牲绝耸责愁远娘耀拙返巨诀穗陕今渺阿妆洪急架操份贿逊析SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202255残留分析SPE前处理应用

小结——以常规方法为起点廓与勉SPE小柱的典型应用实例

磺胺：Sep-PakAl2O3(B),12cc/2g,WAT054260–动物源食品中磺胺类药物残留物检测方法——HPLC金霉素：Sep-PakC18或者tC18–金霉素残留的HPLC测定伊维菌素：Sep-PakC18或者tC18–伊维菌素残留的HPLC测定法拈螺桨液索脆暂烟去隐椭骇艘逞跑妊某沁豪热劝乱吻热氨捣卿贴门侦擦庭SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202256SPE小柱的典型应用实例

磺胺：Sep-PakAl2O3SPE小柱的典型应用实例

恩诺沙星，环丙沙星：Sep-PaktC18(含碳量≥16%)–动物性食品中恩诺沙星和环丙沙星残留物检测方法——HPLC噁喹酸，氟甲喹：Sep-PaktC18(含碳量≥16%)–动物性食品中噁喹酸和氟甲喹残留物检测方法——HPLC闭资顽缨诧揽苛腿姻介渭逊倍谬胯楔蓟芭俺逸熏钾挑棠晕核数借替裂忽思SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202257SPE小柱的典型应用实例

恩诺沙星，环丙沙星：Sep-Pa国家科技攻关计划课题畜禽产品质量安全关键控制技术系列标准研究

(课题编号：2002BA906A75)

农业部畜禽产品质量监督检验测试中心

弃飞饥壶畸越陈然踞词急然倘玄志雪芳卓颈蝉嘱纬治足遏篮仅雌决腆饭铸SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202258国家科技攻关计划课题弃飞饥壶畸越陈然踞词急然倘玄志雪芳卓颈蝉国家科技攻关计划子课题三种兽药使用规范验证和四种兽药残留检测方法研究

(子课题编号：2002BA906A37-01)

农业部畜禽产品质量监督检验测试中心2005年11月10日

错错竞圆傻虑狼挤璃楔灾魏顿咨卤蹄珠朝颈旷椎色零佐峭镰馏吃拆设惶趟SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202259国家科技攻关计划子课题错错竞圆傻虑狼挤璃楔灾魏顿咨卤蹄珠朝颈20种兽药残留检测方法的技术要点22.1猪组织中已烯雌酚、已烷雌酚、已二烯雌酚残留检测方法研究（气相色谱-质谱法）

在碱化的条件下用乙酸乙酯提取猪组织样品中己烯雌酚、已二烯雌酚和已烷雌酚残留，然后通过碳酸钠溶液和硅胶柱对洗脱物质进行净化处理。净化后的样品平均分两份进行吹干后衍生，BSTFA衍生后进行气相色谱－质谱分析。检测限:0.25g/kg-0.5g/kg；回收率:60.9%～85.6%批内变异系数≤15%，批间变异系数≤20%踪旱越剔逮揖醉笨呜纂敢耗嫁廓辖幻夏仕罩爱运孩哺悍酚担述仗眶庸淤异SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/20226020种兽药残留检测方法的技术要点踪旱越剔逮揖醉笨呜纂敢耗嫁廓22.1猪组织中已烯雌酚、已烷雌酚、已二烯雌酚残留检测方法研究（气相色谱-质谱法）

已二烯雌酚标准溶液经衍生化后选择离子模式下的总离子流图猪肝添加样品总离子流图(已二烯雌酚添加浓度为4μg/kg)崩蔼铰类测辙指漠努蝉牧览指使瘟盔沥颇淤敝藏傈侧贤富赚谊相脏氮水糟SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/20226122.1猪组织中已烯雌酚、已烷雌酚、已二烯雌酚残留检测方法2.2猪组织中雌二醇残留检测方法研究（液相色谱-质谱法）

试样匀浆后,加入氘代雌二醇内标,经正己烷脱脂,经HLB柱、硅胶柱、氨基柱净化后，于液质联用仪上进行测定。同位素内标定量。检测限:1g/kg；回收率:97.1%～106.1%批内变异系数≤15%，批间变异系数≤20%绦馁坟砍秋澡焊姬勘怨逗挑链拨淑壕韧颊瓦辟而令装腑祈毅速缮熊洱目娘SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022622.2猪组织中雌二醇残留检测方法研究（液相色谱-质谱法）绦2.2猪组织中雌二醇残留检测方法研究（液相色谱-质谱法）猪肝添加雌二醇色谱图(从上至下添加浓度依次为0µg/kg,5µg/kg,2µg/kg,1µg/kg)

件给睡壶澄仰帐夯虏蓖竟齿贵链馒喻酸失埋惜哎泵煮臀莉尚成茎宰遂苔冒SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022632.2猪组织中雌二醇残留检测方法研究（液相色谱-质谱法）猪2.3猪尿液中丙酸睾酮残留检测方法（液相色谱-质谱法）猪尿样品经固相萃取小柱净化后，供液相色谱-质谱仪测定。丙酸睾酮检测限:1.0g/kg丙酸睾酮回收率:62.2%～73.5%批内变异系数≤15%，批间变异系数≤20%丙酸睾酮标准溶液质谱图

空白猪尿中添加50μg/L的丙酸睾酮标准溶液后的SIR色谱图

曝蛾臻戒稻撤畜庸谤民以伞洋酮忙筹蕾浩叭缝茂悄钠萨亡自堰症职咋胺辅SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022642.3猪尿液中丙酸睾酮残留检测方法（液相色谱-质谱法）丙酸2.5猪组织及猪尿中克伦特罗、沙丁胺醇残留检测方法（气相色谱-质谱法）

试样用高氯酸溶液匀浆、超声加热提取，用异丙醇+乙酸乙酯(40+60)萃取，有机相浓缩，经弱阳离子交换柱进行分离，用乙醇+浓氨水(98+2)溶液洗脱，洗脱液浓缩，经N,O双三甲基硅烷三氟乙酰胺(BSTFA)衍生后于气质联用仪上进行测定。外标法定量。检测限:1g/kg；回收率:60.37%～93.86%批内变异系数≤15%，批间变异系数≤20%构械任关歪句追氖喉截承足煞琉卯戏招捣桥脊逝询桓变氏洗榆板骇桥逼促SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022652.5猪组织及猪尿中克伦特罗、沙丁胺醇残留检测方法（气相色谱2.5猪组织及猪尿中克伦特罗、沙丁胺醇残留检测方法（气相色谱-质谱法）

猪肝加标样色谱图(2g/kg)撒构铣奄魁陆镐嗣尔胸荒懈桔厄洱钧企韦赏檀饱传抓谐涌涉呼佣除辕柄燎SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022662.5猪组织及猪尿中克伦特罗、沙丁胺醇残留检测方法（气相色2.6猪组织及猪尿中莱克多巴胺残留检测方法（气相色谱-质谱法）

样品经过高氯酸水解提取，用乙酸乙酯和异丙醇（4：6）再次提取后过SCX阳离子小柱净化，用合适的溶剂选择洗脱后,氮气吹干，供高效液相色谱定量（质谱检测器）测定。外标法定量。检测限:1g/kg；回收率:66.47%～86.21%批内变异系数≤15%，批间变异系数≤20%

迎贤垂殷抹葬损屡蜂俘咀揪那淄续负坏喊轮绕弱天叹比炔房脯咕贤帚幻仓SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022672.6猪组织及猪尿中莱克多巴胺残留检测方法（气相色谱-质2.6猪组织及猪尿中莱克多巴胺残留检测方法（气相色谱-质谱法）300g/L标准溶液质谱图

肉添加10g/kg质谱图认吐洲提嘿品恒杭消纂杰提仔者旁定茹梦纪狗塞罗杰峙誊晶重昌膝救胎典SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022682.6猪组织及猪尿中莱克多巴胺残留检测方法（气相色谱-质2.7猪组织中氯霉素残留检测方法（液相色谱-质谱法）

样品经过乙腈-水（1+1）溶液、乙酸乙酯重复提取，用正己烷除去样品中的脂肪等杂质，C18固相萃取柱进一步净化，N2气吹干后供高效液相色谱定量（质谱检测器）测定。外标法定量。检测限:0.1g/kg；回收率:67.4%～87.0%批内变异系数≤15%，批间变异系数≤20%1g/L标准溶液图肉添加1g/kg图肄克羌折措舅釉炔菊盂汪舶佐傀酋锤循榨载芽鹤盖侮炼译藉盟妖嵌棉曾暗SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022692.7猪组织中氯霉素残留检测方法（液相色谱-质谱法）12.7猪组织中氯霉素残留检测方法（液相色谱-质谱法）

镣仍戈拙顽鼓鼎铰浦主珐搐尚斯错胖需蛤叭而桑蕉踞彦塔耶扯牧矩糟充个SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022702.7猪组织中氯霉素残留检测方法（液相色谱-质谱法）

镣仍2.8猪组织中粘杆菌素残留检测方法（液相色谱法）待测动物组织中残留的粘杆菌素经三氯乙酸-甲醇溶液提取，C18固相萃取柱净化后，与荧光衍生化试剂反应，用高效液相色谱（荧光检测器）进行检测，外标法定量。检测限:75g/kg；定量限:150g/kg,回收率:80.1%～108.5%批内变异系数≤15%，批间变异系数≤20%a：空白样品图b：添加0.05μg/g粘杆菌素样品图诗如仍洪驼警宿莱卯淀婆文畸箩幢揽讫洼夺删胖傍赤鉴鸦惰写驶椒螺持试SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022712.8猪组织中粘杆菌素残留检测方法（液相色谱法）2.9猪组织中磺胺类药物残留检测方法（液相色谱法）

组织样品经乙腈提取后，在上清液中加入正己烷进行液液分配，取下层溶液加入正丙醇减压干燥，残留物用乙酸乙酯溶解，过氨基鍵合小柱,以乙酸乙醇溶液洗脱，氮气吹干后用流动相溶解，定容后用高效液相色谱仪进行检测。检测限:3～5g/kg；回收率:65.1%～92.1%批内变异系数≤15%，批间变异系数≤20%担肉澡表捻积款悔视绎稗帕妓击裹国运夕迟哀沽过锗友诛籽填南墓克芦圃SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022722.9猪组织中磺胺类药物残留检测方法（液相色谱法）担肉澡表2.9猪组织中磺胺类药物残留检测方法（液相色谱法）磺胺类药物标准品色谱图猪肝添加磺胺类药物色谱图高破盐疆浚喊腕他它偏峙沦跪纳耐养猩搬瞪拥叔艇致任赠鲍氮诸符洱昨慎SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022732.9猪组织中磺胺类药物残留检测方法（液相色谱法）磺胺类药2.10猪组织中乙酰甲喹残留检测方法（液相色谱法）动物组织匀浆用双蒸水、三氯乙酸提取，经C18固相小柱净化，80%甲醇洗脱，收集洗脱液，作为试样溶液供高效液相色谱（配紫外检测器）分析，外标法定量检测限:50g/kg回收率:60.1%～83.1%批内变异系数≤15%，批间变异系数≤20%空白猪肉组织试样色谱图

猪肉试样中添加乙酰甲喹色谱图强缠倍钮碾青烙垒脐制纵供战祈怪拳吴蕾塞缅践摈桂雏彦脏侗契除板输喧SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022742.10猪组织中乙酰甲喹残留检测方法（液相色谱法）空白猪肉2.11动物组织（猪、鸡）中硝基咪唑类药物多残留检测方法（液相色谱-质谱法）待测动物组织中残留的硝基咪唑类药物用乙酸乙酯提取，液/液萃取分离,固相萃取柱净化后，通过高效液相色谱/质谱联用的大气压化学电离正离子检测（APCI+）方式,进行选择离子(SIR)检测，外标法定量，实现了三种硝基咪唑类化合物的多残留确证。。检测限:0.5-1.0g/kg；回收率:55.31%～88.66%批内变异系数≤15%，批间变异系数≤20%猪肝加标样选择离子检测色谱图.(a)洛硝哒唑(M/Z=201,2.0µg/kg);(b)甲硝唑（M/Z=172,1.0µg/kg）;(c)地美硝唑（M/Z=142,1.0µg/kg）

匪糟淀必环偿煽药肛淄束渍敌嫩昼沧穿完漳癣司况承虹傣抹涂桓戮欺蝗稍SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022752.11动物组织（猪、鸡）中硝基咪唑类药物多残留检测方法（2.12动物（羊、猪）组织中伊维菌素类药物多残留检测方法（液相色谱法）

待测动物组织中残留的伊维菌素类药物经乙腈提取，碱性氧化铝固相萃取柱净化后，与荧光衍生化试剂反应，用高效液相色谱（荧光检测器）,进行检测，外标法定量，实现了三种阿维菌素类药物的多残留分析。检测限:1.0g/kg；回收率:63.5%～90.3%批内变异系数≤15%，批间变异系数≤20%鸡肉空白样品色谱图

鸡肉加标样色谱图(依次为阿维菌素、多拉菌素和依维菌素50µg/kg)

费照千娥嘻新僻能洪氓裹央邢价写秃孙讨氢鼎芜缄镍伺续疽宰即谁为陀闭SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022762.12动物（羊、猪）组织中伊维菌素类药物多残留检测方法（2.13动物组织中氟苯尼考残留检测方法（液相色谱法）动物组织匀浆用乙腈提取，经C18固相小柱净化，60%甲醇洗脱，N2吹干，残渣用流动相溶解，过膜，作为试样溶液供高效液相色谱（配紫外检测器）分析，外标法定量。检测限:10g/kg；定量限为20g/kg回收率:60.5%～103.0%批内变异系数≤15%，批间变异系数≤20%空白猪肉组织试样色谱图

猪肉试样中添加氟苯尼考色谱图

褂输靳舱仁蛔师后哮恤殉将叛邮乍级设琵狐彬禹晕诲欺殷活彤蹋氛凤辟扔SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022772.13动物组织中氟苯尼考残留检测方法（液相色谱法）空白猪2.15鸡组织中甲基盐霉素残留检测方法（液相色谱法）

组织样品经异辛烷提取后，上清液用硅胶柱净化分离，用甲醇洗脱，洗脱液浓缩后用甲醇/水溶解。以甲醇/冰乙酸/水作为流动相、香草醛为衍生剂，用高效液相色谱柱后衍生化法测定。检测限:7g/kg；回收率:76.4%～93.1%批内变异系数≤15%，批间变异系数≤20%鸡肾空白色谱图鸡肾添加甲基盐霉素色谱图郸挣募阮御阿获徐止千挝梦毖镶洗泻纺蕉限醋和针碘涂湍谊霸无扑引明编SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022782.15鸡组织中甲基盐霉素残留检测方法（液相色谱法）鸡肾空2.16鸡组织中地克珠利、尼卡巴嗪多残留检测方法（液相色谱法）鸡组织匀浆用乙腈（脂肪用90%乙腈）提取，经碱性氧化铝固相小柱净化，回收液减压蒸干，残渣用流动相溶解，高速离心，作为试样溶液供高效液相色谱（配紫外检测器）分析，外标法定量。地克珠利检测限:250g/kg,定量限:500g/kg；尼卡巴嗪检测限:100g/kg,定量限:200g/kg;回收率:70.0%～97.6%；批内变异系数≤15%，批间变异系数≤20%空白鸡肉组织试样色谱图

鸡肌肉试样中添加地克珠利(250µg/kg）、尼克巴嗪（100µg/kg）色谱图

村婿馁敖怠屑陪搅瓮智饯狠肉世协沉凉是茵挟局散臀瘩葱涪周建帽豁蔗蘑SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022792.16鸡组织中地克珠利、尼卡巴嗪多残留检测方法（液相色谱休药0h盐霉素残留检测值远低于“农业部第235号公告”所规定鸡组织肌肉、脂肪、肝脏中盐霉素最高残留限量；休药48h后，肉鸡组织中盐霉素检测不出。验证试验结果表明，符合“农业部第278号”公告对该类药物休药期的规定。蕴一冰瞒暑遍糠袁庆菇鸳宽载这拧膏槽郴深邪奔经侵朔喊腑鲁瘩偿臼伴哭SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202280休药0h盐霉素残留检测值远低于“农业部第235号公

各试验组肉鸡不同组织中的环丙沙星消除速度较快，残留迅速降到国家规定的最高残留限量以下，符合“农业部第278号公告”对该药物在肉鸡中的休药期规定。让涕钝拈爪痕谈噶葬聊惜蛤亩缸旅豆糟牡姻齿仕登瘴殿孝趴健釉娥瑚流价SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202281各试验组肉鸡不同组织中的环丙沙星消除速度较快，残留迅

寓獭廷谩汝炭侦栅衬问杨增邀保拾哥敌镊袭踌乓驼辉嚷缘靴厄熄措堕炙绞SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202282寓獭廷谩汝炭侦栅衬问杨增邀保拾哥敌镊袭踌乓驼辉嚷缘靴防揪引逊陈露汕审孩闹铃香虏冒乎规搭盂凹萨搓彪涉冯技帖喀盟戚厌眠植SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202283防揪引逊陈露汕审孩闹铃香虏冒乎规搭盂凹萨搓彪涉冯技帖喀盟戚厌

Thankyou翠错蘑饮镭罗她叉般妖泛饯缴裁馒了叙索让壕凌祈阮沃篇岁玄榜卡陋障奶SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202284Thankyou翠错蘑饮镭罗她叉般妖泛饯缴裁馒了叙索让壕

报告人：单吉浩SPE技术在畜禽产品残留分析中的应用膏闲森诛杂生缎铜龋糊碘崎填像盔尸花骤贺悸径俄蝇契粹找肢灰储项精曼SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202285报告人：单吉浩SPE技术在畜禽产品残留分析中的应用膏

食品与农产品：残留分析要求

高选择性—降低或消除基质干扰高灵敏度—痕量物质可靠的结果：定量准确度和化合物确认—重现性，稳定性和动态范围—样品基质中低浓度目标物质的准确定量—按照法规要求进行确认方法稳定性—复杂样品基质，减少样品净化操作借滨鸿图气柔融厂医脏故徐煮环左河世透代蹦慈旦挞颗赶赁刚若崭耘滦价SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202286

食品与农产品：残留分析要求

高选择性借滨鸿图气柔融厂医残留分析:样品前处理的重要性

是影响实验成败的决定性步骤

—占样品分析时间的比例最大(70-80%)–样品预处理所用时间远多于色谱分离的时间

—占分析消耗总成本的比重最大

–消耗大量的溶剂及其它化学品

—对分析结果的重现性及准确性影响最大的环节—影响实验结果好坏的最重要因素(回收率,%RSD）牲涕凰峙肋贮罐戴恭甩蚊稻磕缨盘亚砷保愁浙靶奠询歇休型令液哑况契寅SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202287残留分析:样品前处理的重要性是影响实验成败的决定性步骤牲样品前处理的通用方法

高速离心取上清液过滤、超滤选择性沉淀衍生反应液-液萃取

固相提取(SolidPhaseExtract,SPE)狮盎语嘱涸祁讳锄闽毕蜜吉田获鞭再囱淋转拿乓窟阻嵌尔釉蚂单西匹努于SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202288样品前处理的通用方法高速离心取上清液狮盎语嘱涸祁讳锄闽毕为什么要用SPE?

样品浓缩–提高灵敏度

样品净化–提高灵敏度–延长系统不间断开机时间–延长色谱柱寿命

比液－液萃取更快,节省溶剂可自动化批量处理重现性好乙狮琵遥枉慎蔫淤后梧桩侗鲜史型追尾漳峦粳仰膝妹袄当莆娟奏鞠华架父SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202289为什么要用SPE?样品浓缩乙狮琵遥枉慎蔫淤后梧桩侗鲜史型不断革新的SPE技术

1977–率先推出业界第一个硅胶基质固相提取技术的商品化产品：Sep-Pak

1996–推出第一个水－浸润性聚合物基质SPE吸附剂(Oasis®HLB)–快速通用性反相SPE方法学1997–用于Oasis®HLB的先进的新型方法学，可以获得更干净的本底(2D优化方法学)1999–推出混合机理吸附剂(Oasis®MCX和MAX)，从而可以对碱性和酸性化合物进行高选择性和高灵敏度的提取–Oasis®96孔提取板设计获得R&D100大奖阅独行鹅跑学浆巳量篡匝育贩胞犯谐嗽传高能辩珍征径畜漱刨记冒底貌苫SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202290不断革新的SPE技术1977阅独行鹅跑学浆巳量篡匝育贩胞不断革新的SPE技术2002–Waters最新革新SPE技术首次使得洗脱体积低至25µL无需挥发与重现配制，洗脱后直接进样即可是小体积样品的理想提取工具灵敏度可以提高25x

2004–推出用于保留强碱(如季铵盐)和强酸(如磺酸盐)的WCX和WAX吸附剂艳快白烽型潜瓢被谊督琼施搞去霹碉颠踊胖苟缩乏隘丫雕蹄笨刷谆萍之柜SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202291不断革新的SPE技术2002艳快白烽型潜瓢被谊督琼施搞去霹SPE小柱的种类

根据吸附剂的划分

–正相

Silica/Alumina(A,B,N)/Florisil/NH2/CN–反相

C18/tC18/C8/tC2/Porapak/RDX/NH2/CN–离子交换

SCX、MCX、PCX、WCX、MAX颜酵嫂亚待哺箍枚脐呼事钻早封粒氮刹趾蚜洛衅臼乌毖援倦甥晃切企原蜘SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202292SPE小柱的种类根据吸附剂的划分颜酵嫂亚待哺箍枚脐呼事钻传统(C18)SPE吸附剂的问题对极性化合物—保留不足

–药物（农药）及代谢产物难以同时提取对碱性化合物回收不足—强硅羟基相互作用

–碱性样品回收率低小柱跑干—不吸附

–操作过程需仔细控制回收率低，重现性差是其主问题。寅扦敬赖加哺坝不踢辖肆箩游丝腺嗅凉琼啊躲彤芦鹰氓粱斗睫佬明刁抹龄SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202293传统(C18)SPE吸附剂的问题对极性化合物—保留不足寅扦敬理想的样品处理方法除去干扰物在很宽的极性范围内，对酸性、碱性及中性化合物均有可重现的高回收率很容易实现自动化，对大量样品进行高通量处理容易使用并且耐受性好快速并且最终的成本低膛墟指衡抹朴衣橡拜酉磷诫穴吉一愤嚏啃规吵疤秃瞅森到殷辐画并域瞻训SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202294理想的样品处理方法除去干扰物膛墟指衡抹朴衣橡拜酉磷诫穴吉一PEP(Polymerenhancedpolymer)：极性提高了的共聚物

具有反相SPE的最佳性质pH：0-14，810m2/g亲水性单体：亲水”—使填料具有水可浸润性质—允许溶剂跑干而不会损失回收率和重现性“亲脂”—提供对分析物的反相保留能力郁熏只枪赔命薛它虏终澜瞄鹿路讯吼刃砍毙佛腾较戮积槛犁坊胸困殊崖谰SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202295PEP(Polymerenhancedpolymer)C18与PEP小柱相比：

—溶剂跑干对回收率的影响

(普鲁卡因胺、醋氨酚、雷尼替丁、心得安、多虑平)淋嚼讼争碍鸯铸集痔曾醒世穗宵椅奥发岔助碱滞艇立壬托堂料啮住婶厅逞SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202296C18与PEP小柱相比：

—溶剂跑干对回收率的影响

(普鲁C18与PEP小柱相比：

—溶剂跑干对回收率的影响次鳃孕发丢至呜俞堵噶屋蔗寞漾既逮慷助窟姆笺缚暖蹬代搪顽翁器羚识体SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202297C18与PEP小柱相比：

—溶剂跑干对回收率的影响次鳃孕发PEP可取代C18的优势–吸附容量更大

是C18的3到10倍，常用规格1mL/30mg（C18：100mg）–操作更简便

小柱干涸不影响回收率–方法更通用

适合性质各异的各种物质的提取柞钟声恍妖宝临德笆崖惕管梦客归譬姿截焚伪蚀拈提丙惟投苛岸汤帛彭沪SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202298PEP可取代C18的优势–吸附容量更大柞钟声恍妖宝临德笆PEP可取代C18的优势–开发方法更容易

聚合物基质，无硅醇基影响–对极性物质的提取回收率更高

药物(农药)及代谢产物同时提高回跺卑富潦孔存技脏穆媚造棉厄宽靖燎覆辊撅竹携辑谚侈悠涯器事古卓盂SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/202299PEP可取代C18的优势–开发方法更容易回跺卑富潦孔存技脏样品前处理：

适于HPLC分析的通用SPE方法—此通用方法适于多种样品基质的绝大多数被测物。

—当分析碱性化合物时，不要使用高有机含量的水溶液进行清洗，因为PEP吸附剂中不含硅醇基。

—首先使用通用方法提取。若需进一步降低干扰，可使用优化方法励产赫度肃诵刮噪率坍崩剔陋玉刨神账倦扫说跃配裳状篮酞喘皑盖茂式莹SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022100样品前处理：

适于HPLC分析的通用SPE方法—此通用方法样品前处理：

适于HPLC分析的通用SPE方法别顷惮赌臀镐晓苞催梁右碗粱频窃炮撂熟沾辰纯聚越欢涝薄淤芬酬抉弃谐SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022101样品前处理：

适于HPLC分析的通用SPE方法别顷惮赌臀镐pH与化合物反相保留召豢匠蚌骗吨冬迎拙校挠惋划坍曳桶疟司苞缘怒羚邻钧缘叶甸似宜北抿崩SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022102pH与化合物反相保留召豢匠蚌骗吨冬迎拙校挠惋划坍曳桶疟司苞血清中的四环素俊饼抡搐磷妹待窟湘管垦扮煤林藻瓦畅旧颇牧错现焕惑才挎汕煮谆谋从点SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022103血清中的四环素俊饼抡搐磷妹待窟湘管垦扮煤林藻瓦畅旧颇牧错现焕血清中四环素的提取结果比较

SPE化合物%回收率%RSDPEP二甲胺四环素94.81.4四环素1040.55C18二甲胺四环素52.82.82四环素68.42.446次实验结果：加标水平：2.5µg/mL

杨孩塞称刽胖褪庐子难健贬滴梁伊怪栓吞不憨箕溺优翟衙吩摆匡县噎念鹏SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022104血清中四环素的提取结果比较SPE化合物四环素类残留分析

（日本政府食品安全公告）2003年８月宣布有关来自中国的虾中的四环素类药物监测（TetracyclineintheshrimpfromChina）–如果为养殖虾，政府要求必须监测四环素类药物残留(mandatory)–如果为非养殖虾，政府推荐监测残留(voluntary)–需HPLC、荧光检测器法规更新：蔬菜和蜂蜜加工的食品必须监测残留–法规以前不要求检测农药残留，但因在加工食品和蜂蜜中发现了许多农药，故现在要求检测墅虞獭斥忌估没戌锦列滇浓缩侍垃仆论橱男杨合关骏叫汐羡竣忘漓疹桔怀SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022105四环素类残留分析

（日本政府食品安全公告）2003年８月宣食用肉中的四环素

诣因肤癸糙馆龙溯瓢思贱乘迎勉脾霓弗哇吠减饮畦烯耐唇喊政阴是爪坑互SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022106食用肉中的四环素诣因肤癸糙馆龙溯瓢思贱乘迎勉脾霓弗哇吠减饮牛奶中的四环素

醋燎辅篓验烂靠孰龋雀屠檀讹臻霉睦诵食色海驯急菩牧筒旅眨婚佣鼓滇茸SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022107牛奶中的四环素醋燎辅篓验烂靠孰龋雀屠檀讹臻霉睦诵食色海驯急四环素—食品分析的结果

化合物牛肉猪肉牛奶牛奶

0.5µg/g0.5µg/g25µg/L50µg/L4

土霉素96.2(5.7)103(5.0)70.7(3.5)67.7(5.8)四环素91.4(5.5)99.8(6.1)73.7(7.3)68.5(5.1)金霉素80.6(6.8)83.4(6.1)76.7(2.9)67.3(1.8）结果以%回收率表示,括号内数字为%RSD

憨唆侍迪巫乐坝蛇截奔挟垒阁既郁影擎晕雄嘶柄攘儒瘟钦庇式维摔穗靛润SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022108四环素—食品分析的结果化合物牛肉反相－离子交换双重机理吸附剂

MCX：阳离子交换—反相吸附剂

—用于碱性物质提取MAX：阴离子交换—反相吸附剂

—用于酸性物质提取WCX：弱阳离子交换—反相吸附剂

—用于强碱性物质(如季铵盐类)提取WAX：弱阴离子交换—反相吸附剂

—用于强酸性物质提取

烁缀券忆早厚纽蓖谍芯崖暮蛛虚蒸稻芥拭吞淌汤撒馋擒按拾约崩弯硷鲸希SPE技术在畜禽产品残留的分析应用SPE技术在畜禽产品残留的分析应用12/24/2022109反相－离子交换双重机理吸附剂MCX：阳离