免疫学检测原理参考答案

免疫学检测原理参考答案

一、填空题1．特异性2．凝集、沉淀3．免疫学检测法、生物活性检测法、分子生物学检测法

二、多选题[A型题]1.D2.C3.E4.E5.D6.D7.C8.B9.D10.E11.D12.D13.C14．B15.C[B型题]1.D2.C3.B4.E5.E6.B7.D8.A[X型题]1.ABCD2.ABCDE

三、名词解释1．酶联免疫吸附试验（ELISA）：将已知抗原或抗体吸附在固相载体表面，使抗原抗体反应在固相表面上进行，用洗涤方法使固相上的抗原抗体复合物与液相中游离抗原或抗体分开。用于抗原或抗体的定量检测。2．放射免疫分析法（RIA）：用放射性核素标记抗原或抗体进行的免疫学检测。常用于微量抗原或抗体的定量检测。3．免疫荧光技术：用荧光素与抗体连接成荧光抗体、再与待检标本中的抗原反应，在荧光显微镜下观察抗原抗体反应的部位，用于抗原的定位检测。4．凝集反应：颗粒性抗原（如细菌、细胞等）与相应的抗体结合后形成肉眼可见的凝集块。5．直接凝集反应：将细菌或红细胞与相应抗体直接反应，出现细菌或红细胞凝集的现象。6．间接凝集反应：将可溶性抗原包被（结合）在无关载体颗粒表面，再与相应抗体反应后，出现载体颗粒凝集的现象。7．对流免疫电泳：在琼脂糖电泳凝胶的正负极端打孔，并分别加入抗体和抗原，在电场的作用下，抗体和抗原作定向扩散，其中抗体由于电渗作用，扩散方向为正极向负极，而抗原则由于电泳作用，扩散方向为负极向正极，在二着比例适当的位置出现沉淀线。用于抗原或抗体的定性检测。

四、问答题1.从外周血分离淋巴细胞的方法有哪些？答案（1）依靠淋巴细胞物理特征的分离方法*葡聚糖-泛影葡酸（Ficoll）等密度梯度离心法，根据淋巴细胞的比重将其与其他血细胞成分分离。*尼龙绵分离法：根据B淋巴细胞粘附于尼龙棉的特性，将B细胞与T细胞分开。（2）依靠表面标记的分离方法*E花环分离法：T细胞表面的CD2是绵羊红细胞（SRBC）受体，能使T细胞与SRBC结合形成E花环，因花环形成后比重变大，采用密度梯度离心即可将T细胞从其他淋巴细胞中分离出来。*免疫磁珠分离法：将某种表面标记特异性抗体包被在磁性微珠上，与磁珠交联的抗体能够特异性结合具有这种表面标记的细胞结合，然后用强磁场可将具有这种表面标记的细胞分离出来。*流式细胞术分离法：利用各种荧光素标记的表面标记特异性抗体，使不同表面标记的细胞结合上不同的荧光素，借助荧光活化细胞分选仪（FACS）将各种细胞分离开来。2.简述细胞毒试验的原理答案：（1）对于可溶性物质（如抗体、补体、肿瘤坏死因子等）导致的靶细胞破坏，可以采用简单的染色法来进行检测，原理是当靶细胞破坏时，其胞膜完整性被破坏，当用染料（如台盼蓝、酚红、结晶紫等）染色时，损伤的细胞浆将会着色，而未受损的靶细胞因胞膜完整，会拒染。结合光密度的测定，能够进行定量检测。（2）对于效应细胞（如CTL、NK等）对靶细胞的损伤，可以采用同位素释放法、酶释放法来进行测定。其原理如下：*51Cr释放法：用Na251CrO4标记靶细胞，若效应细胞损伤靶细胞，51Cr将释放进入上清，检测上清中的放射活性，即可计算出效应细胞对靶细胞的杀伤活性。*酶释放法：靶细胞内具有多种酶，当靶细胞受损时，这些酶将从胞内释放至上清，通过上清中酶活性的检测，可以计算出效应细胞杀伤靶细胞的活性。最常用的酶是乳酸脱氢酶。（3）细胞凋亡检测法：某些因素能够诱导靶细胞发生凋亡，也是免疫应答杀伤靶细胞的一种形式。凋亡是细胞内源性D