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文档简介

2023学年高考生物模拟试卷考生请注意:1.答题前请将考场、试室号、座位号、考生号、姓名写在试卷密封线内,不得在试卷上作任何标记。2.第一部分选择题每小题选出答案后,需将答案写在试卷指定的括号内,第二部分非选择题答案写在试卷题目指定的位置上。3.考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后,请将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1.细胞增殖严格有序地进行与细胞内的周期蛋白依赖性激酶(简称CDK)密切相关,CDK的活性受周期蛋白(简称cyclin)的调节。CDK在连续分裂的细胞中一直存在,cyclin的含量在细胞周期中呈现有规律的变化,细胞分裂间期积累,分裂期消失。下图表示cyclinB与CDK1活性调节的过程。下列叙述正确的是()A.cyclinB在G2期开始合成B.CDK1可能具有促进染色质凝缩的作用C.CDK1持续保持较高活性的细胞,细胞周期会缩短D.CDK1的活性下降是因为cyclinB在M期不能合成所致2.下列有关植物激素的应用,正确的是()A.苹果树开花后,喷施适宜浓度的脱落酸可防止果实脱落B.用赤霉素处理马铃薯块茎,可延长其休眠时间以利于储存C.用一定浓度乙烯利处理采摘后未成熟的香蕉,可促其成熟D.用生长素类似物处理二倍体番茄幼苗,可得到多倍体番茄3.下列有关生物技术工程的说法正确的是()A.动物细胞培养所用的液体培养基需要高压蒸汽灭菌B.PCR体系中应该加入解旋酶和耐高温的DNA聚合酶C.核移植获得的克隆动物只具有供体亲本的遗传性状D.植物组织培养培养到愈伤组织即可获得细胞分泌物4.已知抗维生素D佝偻病为伴X染色体显性遗传病,血友病为伴X染色体隐性遗传病。下列有关人类遗传病的说法正确的是A.—对患有抗维生素D佝偻病的夫妇,所生的女儿不一定患病B.镰刀形细胞贫血症的根本病因是血红蛋白中一个氨基酸被替换C.某家庭中母亲患血友病,父亲正常,生了一个凝血正常且性染色体组成为XXY的孩子,则其形成原因最可能是卵细胞异常D.人群中某常染色体显性遗传病的发的发病率为19%,一对夫妇中妻子患病,丈夫正常,则所生子女不患该病的概率是9/195.下列关于细胞中化合物叙述错误的是()A.在转录时DNA上会结合RNA聚合酶B.氨基酸的空间结构决定了蛋白质功能C.糖原、淀粉和纤维素的单体相同D.葡萄糖和脂肪的组成元素相同6.小花碱茅属于禾本科草本植物,种子外包被颖壳。研究人员以小花碱茅成熟种子为外植体,对种子进行脱颖处理,用不同浓度激素配比诱导愈伤组织形成及再分化,成功建立了完整的小花碱茅组织培养植株再生体系,以下是部分研究数据,下列说法正确的是()处理激素浓度愈伤组织诱导率%2,4-D6-BA6346.6±2.22543.2±2.6334.65.4±6.9454.67.9±2.4574.68.6±6.4634.39.7±2.8A.6-BA会抑制愈伤组织形成,浓度越高抑制作用越强B.脱分化形成愈伤组织时,可避光条件下无菌培养C.可以用高压蒸汽灭菌法对脱颖种子进行无菌处理D.对种子进行脱颖处理的目的是防止颖壳污染环境7.下列关于人类遗传病的叙述,正确的是()A.遗传病患者都携带致病基因,且性状与性别相关联时一定是伴性遗传B.X连锁隐性遗传病的特点是致病基因的频率男性明显高于女性C.基因突变引起的遗传病一定不能利用光学显微镜进行检测D.遗传病是指生殖细胞或受精卵里的遗传物质发生改变而引发的疾病8.(10分)某兴趣小组研究放牧对某地高寒草甸植物物种丰富度的影响,结果如下图所示。下列有关分析错误的是()A.随着放牧强度的增加,该地区植物物种丰富度呈下降趋势B.调查物种丰富度时,不能对采集到的数据取平均值C.过度放牧会导致高寒草甸退化,草甸的生态功能下降D.维持牧草和放牧数量的适宜比例,能保证高寒草甸不发生演替二、非选择题9.(10分)发酵工业起源很早,中国早在公元前就采用发酵法酿酒、制酱等,随着科技的发展一些现代生物技术也应用到发酵工业中,取得良好效益。有技术员利用啤酒酵母固定化技术进行酒精发酵,装置如图。请回答下列问题:(1)制作啤酒酵母悬液时,在干酵母中加入温水和极少量蔗糖,待悬浮液中出现______________,说明酵母菌已经活化。酵母菌活化的目的是__________________。(2)适宜条件下,将活化的啤酒酵母细胞与海藻酸钠混合后,滴加到一定浓度的氯化钙溶液中形成凝胶珠,这种固定酵母细胞的方法是_____________________。(3)装置中长导管的作用是_____________;从上端漏斗中加入葡萄糖溶液的浓度不能过高的原因是__________________;生产中要提高酒精度,加入葡萄糖溶液后应关闭装置中的__________________。(4)与利用游离酵母菌生产啤酒相比,利用固定化酵母生产啤酒的优点有________________(写出两点)。(5)上图装置还可用于研究固定化葡萄糖异构酶生产高果糖浆。研究中常将1个葡萄糖异构酶活力单位定义为每分钟产生1微摩尔________________所需酶量。10.(14分)生态系统中各成分之间存在着密切的关联,它们相互作用,处于动态变化过程之中。请回答下列问题:(1)某大片山坡上的农田在闲置多年以后,随着演替的进行,灌木能够替代草本植物成为优势物种的原因是____________。(2)山林中,狼的数量一般比羊少得多。狼的捕食可造成羊个体的伤害、死亡,但客观上起到促进羊种群发展的作用。根据现代生物进化理论解释其原因:____________。(3)山脚下人工投喂部分饲料的水库不仅能够养殖鱼类,还能涵养水源,后者体现了生物多样性的____________价值,流入该生态系统的总能量是____________。11.(14分)下图是基因工程中获取目的基因和构建重组质粒的过程,请回答下列有关问题:(1)①分析上图可知,构建重组DNA分子最好选用_____限制酶,理由是____。②科学家已经测出某种酶的氨基酸序列,因此可以通过_____方法来获取目的基因,获得目的基因后,常利用____在体外将其大量扩增;(2)将目的基因导入感受态细胞的处理方法是___。真核细胞作为受体细胞的优势是____。(3)若将某种酶的氨基酸顺序进行重新排列,其催化能力能有效提高,生产上述高效酶的现代生物工程技术是____。(4)胚胎工程只是指对动物的____所进行的多种显微操作和处理技术。虽然转基因技术和细胞工程在动植物都有广泛应用。(5)生态工程是实现循环经济最重要的手段之一,请写出它遵循的基本原理______(至少答二项)。12.萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用,而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药,做了相关研究。(1)研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒,得到重组质粒,再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中,获得转基因大肠杆菌。(2)检测发现,转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低,研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好,因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物(引物B和C中都替换了一个碱基),并按图2方式依次进行4次PCR扩增,以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物?请填写以下表格(若选用该引物划“√”,若不选用该引物则划“×”)。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4(3)研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌,提取培养液中的蛋白质,用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物,判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性,研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上,培养一段时间后,比较_________的大小,以确定表达产物的生物活性大小。(4)作为微生物农药,使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌,其优点是_________。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、B【解析】

根据图形和题干信息分析,CDK1在连续分裂的细胞中一直存在,在间期活性逐渐升高,分裂期活性逐渐下降;cyclinB的含量在细胞周期中呈现有规律的变化,细胞分裂间期积累,分裂期消失。细胞分裂间期又可以分为三个阶段:G1期进行相关RNA和蛋白质的合成,为S期做物质上的准备;S期进行DNA的复制过程;G2期进行相关RNA和蛋白质的合成,为分裂期做物质上的准备。【详解】A、由图形分析可知cyclinB在S期开始合成,A错误;B、图中CDK1活性在S期开始升高,分裂期M活性逐渐下降,是细胞由DNA复制后进入分裂期的主要酶,可能具有促进染色质凝缩的作用,B正确;C、CDK1持续保持较高活性的细胞,则细胞周期可能会一直处于分裂期,细胞周期增长,C错误;D、CDK1是细胞由DNA复制后进入分裂期的主要酶,其活性下降是因为cyclinB在M期含量逐渐减少的原因,而非“不能合成”,D错误。故选B。2、C【解析】

A.苹果树开花后,喷施适宜浓度的生长素可防止果实脱落,脱落酸只能加快果实脱落,A项错误;B.用脱落酸处理马铃薯块茎,可延长其休眠时间以利于储存,B项错误;C.乙烯利能促进果实成熟,因此用一定浓度乙烯利处理采摘后未成熟的香蕉,可促其成熟,C项正确;D.用一定浓度的秋水仙素处理二倍体番茄幼苗,可得到多倍体番茄,生长素类似物没有诱导染色体数目加倍的作用,D项错误。故选C。【定位】植物激素的应用3、D【解析】

本题考查的知识点涉及到动物细胞培养、PCR技术、核移植技术、植物组织培养技术等,回忆各个技术的原理、过程、结果与结论等,据此答题。【详解】A、为了防止杂菌污染,动物细胞培养所用的液体培养基需要加入抗生素,A错误;B、PCR体系中应该加入耐高温的DNA聚合酶,但是不需要加入解旋酶,B错误;C、核移植获得的克隆动物的细胞核来自于供体,细胞质来自于受体,而细胞核和细胞质中都有遗传物质,C错误;D、植物组织培养培养到愈伤组织即可获得细胞分泌物,D正确。故选D。4、D【解析】一对患有抗维生素D佝偻病的夫妇,该病为伴X染色体显性遗传病,由于父亲患病,因此所生女儿一定患病,A错误;镰刀型细胞贫血症的根本原因是血红蛋白基因中一个碱基对被替换,B错误;血友病是伴X染色体隐性遗传病(用H、h表示),父亲正常,母亲患血友病,生了一个性染色体为XXY的凝血正常的儿子,则这对夫妇的基因型为XHY×XhXh,儿子的基因型为XHXhY。根据儿子的基因型可知,他是由含XHY的精子和含Xh的卵细胞结合形成的受精卵发育而来的,即其形成原因可能是精子异常,C错误;假设控制该遗传病的基因为A、a,已知该病的发病率为19%,则正常(aa)的概率为81%,根据哈迪-温伯格定律,a的基因频率为90%,A的基因频率为10%,由此人群中AA的基因型概率为=10%×10%=1%,Aa的基因型频率=2×10%×90%=18%,所以患病妻子的基因型为Aa的概率为18%/(18%+1%)=18/19,其后代不患该病的概率为18/19×1/2=9/19,D正确。【点睛】解答本题的关键是掌握基因频率和基因型频率的关系,能够利用基因型频率计算基因频率,进而计算出正常个体中杂合子的概率,最后计算后代不患病的概率。5、B【解析】

转录是以DNA的一条链为模板,合成RNA的过程,需要RNA聚合酶的催化;蛋白质的结构多样性决定了其功能的多样性;糖类分为单糖、二糖和多糖,单糖包括五碳糖(脱氧核糖和核糖)和六碳糖(葡萄糖、果糖、半乳糖),二糖包括蔗糖、麦芽糖、乳糖,多糖包括糖原、淀粉和纤维素;葡萄糖的组成元素是C、H、O,脂质包括脂肪、磷脂和固醇,其中脂肪的组成元素是C、H、O。【详解】A、转录时,RNA聚合酶与DNA上的识别位点结合,A正确;B、蛋白质的结构决定了蛋白质的功能,而蛋白质结构多样性与氨基酸的种类、数量、排列顺序以及蛋白质的空间结构有关,B错误;C、糖原、淀粉和纤维素都是多糖,它们的单体都是葡萄糖,C正确;D、葡萄糖和脂肪的组成元素都是C、H、O,D正确。故选B。6、B【解析】

6、在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中,需要的条件:①消毒灭菌;②一定浓度的植物激素;③适宜的温度;④充足的养料。2、影响植物组织培养的因素:①培养基配制;②外植体选取;③激素的运用;④消毒;⑤温度、pH、光照。3、植物组织培养中植物激素使用:物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素;同时使用生长素和细胞分裂素时,两者用量的比例影响植物细胞的发育方向;先使用细胞分裂素,后使用生长素;植物组织培养过程中分化成的幼苗需要移栽,移栽时,应先将培养瓶的封口膜打开一段时间,让试管苗在培养间生长几日;移栽时需用流水清洗根部的培养基;最后幼苗需移植到消过毒的新环境下生活一段时间,等幼苗长壮后再移栽到土壤中。【详解】A、6-BA会抑制愈伤组织形成,当2,4-D浓度为3时,6-BA为4.3时比4.6时的愈伤组织诱导率要高,所以并不是6-BA浓度越高抑制作用越强,A错误;B、脱分化形成愈伤组织时,可避光条件下无菌培养,B正确;C、高压蒸汽灭菌法会使所有的种子失活,种子不能再脱分化,C错误;D、对种子进行脱颖处理的目的是为了更利于种子脱分化,D错误。故选B。7、D【解析】

由于生殖细胞或受精卵里的遗传物质发生了改变,从而使发育成的个体患疾病,这类疾病都称为遗传性疾病,简称遗传病。根据目前人们对遗传物质的认识,可以将遗传病分为单基因遗传病,多基因遗传病和染色体病三类。单基因遗传病是由染色体上单个基因的异常所引起的疾病,多基因遗传病是指涉及许多个基因和许多环境因素的疾病,染色体异常遗传病是指由于染色体的数目形态或结构异常引起的疾病。【详解】A、染色体异常遗传病患者由于染色体异常而患病,不携带致病基因,性状与性别相关联时不一定是伴性遗传,如秃顶(从性遗传),对于杂合子(Bb),是男性表现为秃顶,女性正常,B、b基因位于常染色体上,造成这种差异的原因是由于两性体内性激素的不同,A错误;B、X连锁隐性遗传病的特点是人群中男性患者远远多于女性患者,致病基因的频率男性与女性相等,B错误;C、基因突变引起的遗传病如镰刀型贫血症,可以利用光学显微镜观察红细胞的形态,正常人的红细胞呈圆盘形,贫血症患者的红细胞呈镰刀型,C错误;D、遗传病是指生殖细胞或受精卵里的遗传物质发生改变而引发的疾病,D正确。故选D。8、D【解析】

本题考查物种丰富度、群落演替及草原的合理利用,要求考生理解物种丰富度的概念内涵,知道如何合理利用草原和人类活动对群落演替的影响;能利用所学知识解读图形,通过直方柱高度随时间的变化判断物种丰富度的变化趋势,进而分析、判断各选项。【详解】分析图形可知,从2010年到2012年,随着放牧强度的增加,该地区植物物种丰富度呈下降趋势,A正确;调查物种丰富度时,不能对采集到的数据取平均值,B正确;过度放牧导致物种丰富度降低,因此会导致高寒草甸退化,草甸的生态功能下降,C正确;维持牧草和放牧数量的适宜比例,能保证高寒草甸健康发展,更好地利用高寒草甸,但该地区群落会发生演替,D错误。二、非选择题9、气泡使处于休眠状态的酵母细胞重新恢复正常的生活状态包埋法释放酵母菌产生的二氧化碳、防止空气中的杂菌进入反应柱葡萄糖液浓度过高会使固定化的酵母细胞渗透失水,影响其活性,甚至死亡活塞1酵母细胞可多次利用、便于与产物分离,提高产品质量果糖【解析】

制备固定化酵母细胞的实验步骤,请回答:①酵母细胞的活化→②配制CaCl2溶液→③配制海藻酸钠溶液→④海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→⑤固定化酵母细胞;2.1(U)个酶活力单位是指在温度为25℃,其他反应条件,如pH等均为适宜的情况下,在1分钟内转化1mmol的底物所需的酶量。【详解】(1)制作啤酒酵母悬液时,在干酵母中加入温水和极少量蔗糖有利于酵母菌活化,酵母菌活化的目的是使处于休眠状态的酵母细胞重新恢复正常的生活状态,待悬浮液中出现气泡,意味着酵母菌能进行正常的代谢,活化过程完成。(2)为了能够让酵母菌重复利用,通常用包埋法将酵母细胞制成凝胶珠,具体做法是将活化的啤酒酵母细胞与海藻酸钠混合后,滴加到一定浓度的氯化钙溶液中形成凝胶珠。(3)装置中长导管能起到释放酵母菌产生的二氧化碳、防止空气中的杂菌进入反应柱的作用,为了避免酵母细胞渗透失水,甚至死亡,影响其活性,通常要求从上端漏斗中加入葡萄糖溶液的浓度不能过高;生产上,在加入葡萄糖溶液后要关闭装置中的活塞1,以保证发酵罐中的无氧环境,有利于酵母菌的无氧呼吸,提高酒精度,(4)与利用游离酵母菌生产啤酒相比,利用固定化酵母生产啤酒典型优势为酵母细胞可多次利用、便于与产物分离,提高产品质量。(5)图中装置可用于研究固定化葡萄糖异构酶的活力,结合分析可知,常将1个葡萄糖异构酶活力单位定义为每分钟产生1微摩尔果糖所需酶量。【点睛】熟知固定化酶技术的种类和优点是解答本题的关键!掌握酒精发酵的操作流程是解答本题的另一关键!10、灌木较为高大,能获得更多的阳光等环境资源羊群中被狼捕食的主要是老弱病残的个体,壮年健康的个体获得充裕的生存条件并繁殖后代种群的基因库得以逐代优化(或具有有利变异的基因频率不断提高)间接生产者固定的太阳能和饲料中的能量(化学能)【解析】

群落演替的概念、特点和标志:

概念:在生物群落发展变化的过程中,一个群落代替另一个群落的演变现象。

特点:群落的演替是长期变化累积的体现,群落的演替是有规律的或有序的。

标志:在物种组成上发生了(质的)变化;或者一定区域内一个群落被另一个群落逐步替代的过程。【详解】(1)某大片山坡上的农田在闲置多年以后,随着演替的进行,灌木能够替代草本植物成为优势物种的原因是灌木较为高大,能获得更多的阳光等环境资源。(2)狼捕食羊,在捕食关系中,捕食者与猎物之间在数量上相互制约,协同进化,捕食者虽能造成猎物的伤害、死亡,但其捕食的多为老弱病残的猎物,猎物种群中壮年健康的个体便可以获得更为充裕的生存条件并繁殖后代,种群的基因库得以逐代优化。(3)山脚下人工投喂部分饲料的水库不仅能够养殖鱼类,还能涵养水源,后者体现了生物多样性的间接价值;该生态系统为人工投喂饲料的池塘生态系统,流入该生态系统的能量包括生产者同定的太阳能和饲料中含有的能量。【点睛】本题主要考查群落和生态系统稳定性的相关知识,意在考查考生对种间关系、演替等相关知识的理解能力,把握知识间内在联系。11、BamHI和PstI提高重组DNA分子的比例(防止自身的黏性末端连接和防止目的基因与载体反向连接)化学合成PCR技术Ca2+处理细胞,使之转化为感受态细胞含有的内质网和高尔基体可对蛋白质进行加工和修饰蛋白质工程(或在基因工程基础上,延伸出来的第二代基因工程)配子或早期胚胎系统学和工程学原理、物种多样性原理【解析】

基因工程技术的基本步骤:

(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因—DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA—分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质—抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】(1)①由图示可知,质粒和外源DNA中共同含有且不会破坏目的基因的限制酶是BamHI和PstI,因此构建重组DNA分子最好选用BamHI和PstI限制酶,这样可以防止自身的黏性末端连接,防止目的基因与载体反向连接。②由于已经测出该酶的氨基酸序列,故可推测出相应的RNA和DNA的序列,因此可以通过化学合成方法来获取目的基因。获得目的基因后,常利用PCR技术在体外将其大量扩增。(2)受体细胞是微生物,将目的基因导入受体细胞,常用Ca2+处理细胞,使之转化为感受态细胞,真核细胞作为受体细胞的优势是细胞中含有内质网和高尔基体,可对蛋白进行加工和修饰。(3)若将某种酶的氨基酸顺序进行重新排列,实质是对其基因进行改造,使其催化能力能有效提高,该技术属于蛋白质工程。(4)胚胎工程只是指对动物的配子或早期胚胎所进行的多种显微操作和处理技术。(5)生态工程遵循的基本原理有:物质循环再生原理、系统学和工程学原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理。【点睛】本题考查基因工程、胚胎工程和生态工程原理的相关知识,要求考生识记基因工程的操作工具及具体的操作步骤,掌握各步骤中的相关细节,能结合题干信息准确答题,属于考纲识记和理解层次的考查。12、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒(pET质粒)抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全;不会造成基因污染;有效成分纯度较高【解析】

(一)基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。(2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶(E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较:①相同点:都缝合磷酸二酯键。②区别:E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率较低。(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键.DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体(1)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入。③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。(2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。(3)其它载体:噬菌体的衍生物、动植物病毒。(二)基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的获取1、目的基因是指:编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得,真核基因是人工合成.人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因(1)原理:DNA双链复制(2)过程:第一步:加热至90~95℃DNA解链;第二步:冷却到55~60℃,引物结合到互补DNA链;第三步:加热至70~75℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步:基因表达载体的构建1、目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因(1)启动子:是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需的蛋白质。(2)终止子:也是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的尾端。(3)标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来.常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步:将目的基因导入受体细胞1、转化的概念:是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法:将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是农杆菌转化法,其次还有基因枪法和花粉管

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