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文档简介
早期胚胎细胞的凋亡
Apoptosisintheearlyphaseembryocells主要内容概述细胞凋亡的分子机制细胞凋亡的检测研究进展展望概述细胞凋亡(Apoptosis)是指细胞接受某信号或受到某些因素刺激后为了维持内环境稳定而发生的一种主动性消亡过程,是一种由基因调控的,细胞的自杀性死亡胚胎发育既存在着细胞的不断增殖,又存在着细胞的不断凋亡。一方面通过凋亡除掉异常的、有害的和有错误发育潜能的卵裂球细胞另一方面,如果凋亡的细胞比例增大,存在的大量死亡细胞会破坏胚胎的动态平衡,受损的胚胎会停止发育或死亡。细胞凋亡的生化特征DNA的片段化染色体DNA降解,产生180~200bp整数倍的DNA片段在琼脂糖凝胶电泳中就是呈现特异的“梯状(Ladder)图谱研究胚胎细胞凋亡的意义形态良好的囊胚也许在亚细胞水平有缺陷,对哺乳动物胚胎卵裂球细胞进行凋亡分析,评估胚胎活性提供了一种新的方法凋亡指数成为反映胚胎质量和健康的重要参数。凋亡指数(theapoptoticcellratio,ACR):凋亡的细胞数占细胞数的百分率.(Thepercentageofapoptoticcellsperembryo)胚胎细胞凋亡的主要原因染色体和核的异常(如多倍体和嵌合体;不合适的发育潜能)如存在能够形成滋养层的内细胞团生长或“存活”因子的不平衡(如IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ、TGF-a、PAF及激素)在不合适的培养条件下(如不适的培养液组成成分和不合适的胚胎培养密度)暴露于有害因素(如活性氧、紫外线或热激活)凋亡发生的分子机制两个基因家族:BCl-2家族:促凋亡成员(Bax,Bcl-Xs,Bak,Bad)抗凋亡成员(Bcl-XL,Bcl-W,Bcl-2)Caspase家族:启动Caspase(Caspase-8,9,12)执行Caspase(Caspase-3,6,7)P53(肿瘤抑制因子)调节Bax基因的表达细胞凋亡的途径
(一)线粒体途径细胞凋亡检测方法显微镜形态学观察(光学、荧光、电子显微镜)DNA琼脂糖凝胶电泳流式细胞仪(flowcytometry,FCM)检测技术Caspase-3活性的检测原位末端标记(TUNEL)法用荧光显微镜观察,选用蓝色激发光(波长488n
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