血小板相关组织因子课件

血细胞源性组织因子的研究现状

中南大学湘雅医院陈方平血细胞源性组织因子的研究现状

中南大学湘雅医院陈方平1经典的凝血途径经典的凝血途径2DistributionofTFTF:transmembraneGPTFrichtissueEnvelopetheory

TFbearcell

DistributionofTFTF:transme3

经典凝血学说的修正两阶段学说:启动阶段(组织因子,TF)放大阶段(FⅧ、活化血小板)

血管源组织因子的作用

血细胞源组织因子？作用和价值？经典凝血学说的修正血管源组织因子的作用4PltFVIIIaFVaFIXaFXIaFXIFXFXaproThThFgFTFFVIIaPltFVIIIaFIXaFXIaFXIFXFXaproTh5

6?TF的来源单核细胞循环血管壁中性粒细胞血小板红细胞ＴＦ病理病理

????TF的来源单核细胞循环血管壁中性粒细胞血小板红细胞Ｔ7

血细胞源性组织因子的存在使血液中具备了凝血反应所需的所有凝血因子，因而可通过TF途径独立启动凝血血细胞源性组织因子的存在使血液中具备了凝血反应所需的所8单核细胞是最早发现能够表达TF的细胞

多种物质诱导表达TF

LPS、免疫复合物、肿瘤细胞、过敏毒素、淋巴因子炎性介质伴随炎症、免疫反应单核细胞是最早发现能够表达TF的细胞多种物质诱导表达TF9PMPs（血小板源微颗粒）活化血小板释放出来表达黏附分子受体提供磷脂酰丝氨酸表面可结合到NC、MCPMPs（血小板源微颗粒）活化血小板释放出来10白细胞和血小板的作用PSGL-1（CD15）TF传递有关？CD40、CD40ligand二者黏附力有关

白细胞和血小板的作用PSGL-1（CD15）11

单核细胞是最早发现能够表达TF的细胞

中性粒细胞是否能自身合成TF颇具争议

淋巴细胞已被证明是不表达TF的红细胞也能释放具有促凝活性的含TF微粒

血小板内TF的存在是近年来研究的热点

单核细胞是最早发现能够表达TF的细胞12血小板相关组织因子13循环血平均生存期

9-11天主要功能止血循环血平均主要功能14释放凝血因子PF3的有效性激活因子XI组织因子?血小板促凝活性释放凝血因子PF3的有效性激活因子XI组织因子?血15血小板源TF来源？血栓形成中的地位血栓性疾病中的变化临床意义血小板源TF来源？16正常人血小板破碎液（n=40）ELISA

一期血浆复钙时间

TF单抗乏Ⅶ因子血浆

RT-PCRTF含量Pt的促凝活性Pt促凝活性与TF的关系Pt相关TFmRNA的表达正常人TF含量Pt促凝活性Pt相关TFmRNA17*

*

正常人静息血小板相关TF促凝活性的测定

图1静息血小板TF促凝活性

P：血小板；TFAb：TF单抗；VⅡi：乏VⅡ因子血浆；**正常人静息血小板相关TF促凝活性的测定图1静息血18静息血小板TF单抗乏VII因子血浆促凝活性(U/ml)0.89±0.260.87±0.300.86±0.28三者之间P＞0.05,无明显统计学意义静息血小板TF单抗乏VII因子血浆促凝活性0.89±19

图3各种血小板活化剂引起的血小板促凝活性P：血小板；ADP：ADP；E：肾上腺素；C：胶原图3各种血小板活化剂引起的血小板促凝活性20正常人血浆血小板相关TF蛋白水平的测定组别例数(n)TF（pg/ml）Con-PPP15197.52±42.06Coll-PPP15239.80±44.65**Con-PPP组与Coll-PPP组比较,P<0.001正常人血浆血小板相关TF蛋白水平的测定组别例数(n21图4活化血小板相关TF的促凝活性P：血小板；TFAb：TF单抗；C：胶原；VⅡi：乏VⅡ因子血浆；IgG：非特异性IgG抗体图4活化血小板相关TF的促凝活性22图2M：Marker1：血小板2：阳性对照3：阴性对照β-actin:619bpTF:252bp图2M：Marker1：血小板2：阳性对照23正常人血小板内含有TF蛋白(16.37±6.39pg/ml)；静息状态血小板无TF的促凝活性；血小板活化后可表现出TF促凝活性,其释放的TF可引起血浆TF水平的增高；正常人血小板内含有TF蛋白(16.37±6.39pg/ml)24血小板源组织因子的意义

生理性凝血过程中，由于破损血管壁凝血初期形成的血栓的屏障作用限制了血管壁来源的TF与外周血凝血因子的进一步作用，因而限制了血栓的进一步扩大，此时激活的血小板释放的TF就可以进一步启动凝血，促进了血栓不断扩大。血小板源组织因子的意义生理性凝血过程中，由于破损血管壁25血栓性疾病患者血小板相关组织因子水平及活性改变

血栓性疾病患者血小板相关组织因子水平及活性改变26正常对照40例冠心病(CHD)患者38例脑梗塞(BI)患者34例糖尿病(DM)合并血管病变患者33例

正常对照40例27表２血栓性疾病组血小板相关TF蛋白水平的测定组别例数(n)TF（pg/ml）正常对照4016.37±6.39CHD3820.71±8.78*DM3322.12±8.24#BI3423.82±8.03#注：*与对照组相比，P<0.05；#与对照组相比，P<0.001表２血栓性疾病组血小板相关TF蛋白水平的测定组别例28

图５血栓性疾病血小板相关ＴＦ水平比较注：N：正常血小板；C：CHD患者血小板；D：DM患者血小板；B：BI患者血小板

图５血栓性疾病血小板相关ＴＦ水平比较29

图6血栓性疾病组血小板相关TF促凝活性

注：N：正常血小板；TFAb：TF单抗；C：CHD患者血小板；D：DM患者血小板；B：BI患者血小板

图6血栓性疾病组血小板相关TF促凝活性30

31血小板相关TF的来源TissuefactorTFTF血小板相关TF的来源TissuefactorTFTF32血栓性疾病患者血小板相关TF的含量及活性较正常对照明显增高，提示血小板可能可以通过释放TF而参与了血栓性疾病高凝状态的形成血栓性疾病患者血小板相关TF的含量及活性较正常对照明显33细胞高凝状态

细胞高凝状态

34细胞高凝状态的

干预策略细胞高凝状态的

干预策略35Anti-thrombosis

anti-inflammatory

multipletarget

Anti-thrombosis

anti-inflammat36ThankyouThankyou37血细胞源性组织因子的研究现状

中南大学湘雅医院陈方平血细胞源性组织因子的研究现状

中南大学湘雅医院陈方平38经典的凝血途径经典的凝血途径39DistributionofTFTF:transmembraneGPTFrichtissueEnvelopetheory

TFbearcell

DistributionofTFTF:transme40

经典凝血学说的修正两阶段学说:启动阶段(组织因子,TF)放大阶段(FⅧ、活化血小板)

血管源组织因子的作用

血细胞源组织因子？作用和价值？经典凝血学说的修正血管源组织因子的作用41PltFVIIIaFVaFIXaFXIaFXIFXFXaproThThFgFTFFVIIaPltFVIIIaFIXaFXIaFXIFXFXaproTh42

43?TF的来源单核细胞循环血管壁中性粒细胞血小板红细胞ＴＦ病理病理

????TF的来源单核细胞循环血管壁中性粒细胞血小板红细胞Ｔ44

血细胞源性组织因子的存在使血液中具备了凝血反应所需的所有凝血因子，因而可通过TF途径独立启动凝血血细胞源性组织因子的存在使血液中具备了凝血反应所需的所45单核细胞是最早发现能够表达TF的细胞

多种物质诱导表达TF

LPS、免疫复合物、肿瘤细胞、过敏毒素、淋巴因子炎性介质伴随炎症、免疫反应单核细胞是最早发现能够表达TF的细胞多种物质诱导表达TF46PMPs（血小板源微颗粒）活化血小板释放出来表达黏附分子受体提供磷脂酰丝氨酸表面可结合到NC、MCPMPs（血小板源微颗粒）活化血小板释放出来47白细胞和血小板的作用PSGL-1（CD15）TF传递有关？CD40、CD40ligand二者黏附力有关

白细胞和血小板的作用PSGL-1（CD15）48

单核细胞是最早发现能够表达TF的细胞

中性粒细胞是否能自身合成TF颇具争议

淋巴细胞已被证明是不表达TF的红细胞也能释放具有促凝活性的含TF微粒

血小板内TF的存在是近年来研究的热点

单核细胞是最早发现能够表达TF的细胞49血小板相关组织因子50循环血平均生存期

9-11天主要功能止血循环血平均主要功能51释放凝血因子PF3的有效性激活因子XI组织因子?血小板促凝活性释放凝血因子PF3的有效性激活因子XI组织因子?血52血小板源TF来源？血栓形成中的地位血栓性疾病中的变化临床意义血小板源TF来源？53正常人血小板破碎液（n=40）ELISA

一期血浆复钙时间

TF单抗乏Ⅶ因子血浆

RT-PCRTF含量Pt的促凝活性Pt促凝活性与TF的关系Pt相关TFmRNA的表达正常人TF含量Pt促凝活性Pt相关TFmRNA54*

*

正常人静息血小板相关TF促凝活性的测定

图1静息血小板TF促凝活性

P：血小板；TFAb：TF单抗；VⅡi：乏VⅡ因子血浆；**正常人静息血小板相关TF促凝活性的测定图1静息血55静息血小板TF单抗乏VII因子血浆促凝活性(U/ml)0.89±0.260.87±0.300.86±0.28三者之间P＞0.05,无明显统计学意义静息血小板TF单抗乏VII因子血浆促凝活性0.89±56

图3各种血小板活化剂引起的血小板促凝活性P：血小板；ADP：ADP；E：肾上腺素；C：胶原图3各种血小板活化剂引起的血小板促凝活性57正常人血浆血小板相关TF蛋白水平的测定组别例数(n)TF（pg/ml）Con-PPP15197.52±42.06Coll-PPP15239.80±44.65**Con-PPP组与Coll-PPP组比较,P<0.001正常人血浆血小板相关TF蛋白水平的测定组别例数(n58图4活化血小板相关TF的促凝活性P：血小板；TFAb：TF单抗；C：胶原；VⅡi：乏VⅡ因子血浆；IgG：非特异性IgG抗体图4活化血小板相关TF的促凝活性59图2M：Marker1：血小板2：阳性对照3：阴性对照β-actin:619bpTF:252bp图2M：Marker1：血小板2：阳性对照60正常人血小板内含有TF蛋白(16.37±6.39pg/ml)；静息状态血小板无TF的促凝活性；血小板活化后可表现出TF促凝活性,其释放的TF可引起血浆TF水平的增高；正常人血小板内含有TF蛋白(16.37±6.39pg/ml)61血小板源组织因子的意义

生理性凝血过程中，由于破损血管壁凝血初期形成的血栓的屏障作用限制了血管壁来源的TF与外周血凝血因子的进一步作用，因而限制了血栓的进一步扩大，此时激活的血小板释放的TF就可以进一步启动凝血，促进了血栓不断扩大。血小板源组织因子的意义生理性凝血过程中，由于破损血管壁62血栓性疾病患者血小板相关组织因子水平及活性改变

血栓性疾病患者血小板相关组织因子水平及活性改变63正常对照40例冠心病(CHD)患者38例脑梗塞(BI)患者34例糖尿病(DM)合并血管病变患者33例

正常对照40例64表２血栓性疾病组血小板相关TF蛋白水平的测定组别例数(n)TF（pg/ml）正常对照4016.37±6.39CHD3820.71±8.78*DM3322.12±8.24