细菌生理生化反应

细菌生理生化反应细菌生理生化反应目的要求

学习并掌握细菌分类鉴定中常用的生理生化反应。目的要求

实验原理

细菌的代谢与呼吸，主要取决于酶的催化作用，各种细菌具有不同的酶系统。不同的细菌分解大分子碳水化合物、蛋白质和脂肪的能力不同，所能发酵的类型和终产物也不一样。细菌代谢类型的多样性，具体表现在生化反应多样性，因此在细菌分类鉴定中，常利用其生理生化反应作为重要依据。实验原理细菌的代谢与呼吸，主要取决于酶的催化作用，各种糖发酵试验

在肠道细菌的鉴定上尤为重要细菌可发酵的基质

糖（葡萄糖、蔗糖、乳糖）醇（甘露醇）糖苷（甘油）发酵后产生的有机酸

乳酸、醋酸、丙酸等发酵后产生的气体

甲烷、氢、二氧化碳等糖发酵试验在肠道细菌的鉴定上尤为重要葡萄糖发酵试验

乳糖发酵试验

指示剂：溴甲酚紫（变色范围pH5.2-6.8,pH<5.2黄色，pH>6.8紫色）安装倒立的徳汉氏氏小管（内充满液体）pH<5.2,溶液由清亮紫色变为浑浊黄色

乳酸、醋酸、丙酸葡萄糖/乳糖甲烷、氢、二氧化碳徳汉氏小管内有气泡，产气漂浮葡萄糖发酵试验

乳糖发酵试验指示剂：溴甲酚紫（变色范围pH乙酰甲基甲醇试验（V.P.试验）

甲基红试验（M.R.试验）细菌在糖代谢过程中，分解葡萄糖，所产生的丙酮酸，可被进一步代谢。细菌体内丙酮酸代谢途径的不同，可通过V.P.和M.R.这一对实验进行鉴别。乙酰甲基甲醇试验（V.P.试验）

甲基红试验（M.R.试验）V.P.反应阳性途径：V.P.反应阳性途径：吲哚产生试验判断细菌是否（含色氨酸酶）能利用色氨酸。吲哚产生试验判断细菌是否（含色氨酸酶）能利用色氨酸。实验材料1.大肠杆菌（Escherichiacoli）2.产气肠杆菌（Enterobacteraerogenes)3.普通变形杆菌(Proteus

vulgaris)实验材料1.大肠杆菌（Escherichiacoli实验方法与步骤（一）液体培养基的制备与灭菌

1）蛋白胨培养基：蛋白胨 4.0gNaCl 2.0gH2O 400mL调pH7.6，分出2管，然后加0.5ml1.6%溴甲酚紫乙醇溶液,溶液呈浅紫色；分装到装有倒立的德汉氏小管的试管中（6管）实验方法与步骤（一）液体培养基的制备与灭菌2）10%葡萄糖溶液，10%乳糖溶液各20ml112度，30分钟灭菌3支德汉氏管中加葡萄糖溶液各1ml3支德汉氏管中加乳糖溶液各1ml

2）10%葡萄糖溶液，10%乳糖溶液各20ml3）葡萄糖蛋白胨培养基：葡萄糖 0.5g蛋白胨 0.5gK2HPO4 0.2gH2O 100mL分装2管3）葡萄糖蛋白胨培养基：（二）接种培养试验名称被接菌种1（管数）被接菌种2（管数）对照（管数）1．葡萄糖发酵大肠杆菌普通变形杆菌不接种2．乳糖发酵大肠杆菌普通变形杆菌不接种3．VP试验大肠杆菌产气肠杆菌4．吲哚试验大肠杆菌产气肠杆菌（二）接种培养试验名称被接菌种1（管数）被接菌种2（管数）对（三）反应结果鉴定

葡萄糖/乳糖发酵试验

直接观察。VP试验：去塞，加40％KOH10滴，再加等量5%α－奈酚，用力振荡，37℃培养30min，观察。吲哚试验：加1ml乙醚（作用是萃取出吲哚）。振荡，静止片刻使分层，沿管壁慢慢加入吲哚试剂10滴，观察。（三）反应结果鉴定葡萄糖/乳糖发酵试验细菌生理生化反应细菌生理生化反应目的要求

学习并掌握细菌分类鉴定中常用的生理生化反应。目的要求

实验原理

细菌的代谢与呼吸，主要取决于酶的催化作用，各种细菌具有不同的酶系统。不同的细菌分解大分子碳水化合物、蛋白质和脂肪的能力不同，所能发酵的类型和终产物也不一样。细菌代谢类型的多样性，具体表现在生化反应多样性，因此在细菌分类鉴定中，常利用其生理生化反应作为重要依据。实验原理细菌的代谢与呼吸，主要取决于酶的催化作用，各种糖发酵试验

在肠道细菌的鉴定上尤为重要细菌可发酵的基质

糖（葡萄糖、蔗糖、乳糖）醇（甘露醇）糖苷（甘油）发酵后产生的有机酸

乳酸、醋酸、丙酸等发酵后产生的气体

甲烷、氢、二氧化碳等糖发酵试验在肠道细菌的鉴定上尤为重要葡萄糖发酵试验

乳糖发酵试验

指示剂：溴甲酚紫（变色范围pH5.2-6.8,pH<5.2黄色，pH>6.8紫色）安装倒立的徳汉氏氏小管（内充满液体）pH<5.2,溶液由清亮紫色变为浑浊黄色

乳酸、醋酸、丙酸葡萄糖/乳糖甲烷、氢、二氧化碳徳汉氏小管内有气泡，产气漂浮葡萄糖发酵试验

乳糖发酵试验指示剂：溴甲酚紫（变色范围pH乙酰甲基甲醇试验（V.P.试验）

甲基红试验（M.R.试验）细菌在糖代谢过程中，分解葡萄糖，所产生的丙酮酸，可被进一步代谢。细菌体内丙酮酸代谢途径的不同，可通过V.P.和M.R.这一对实验进行鉴别。乙酰甲基甲醇试验（V.P.试验）

甲基红试验（M.R.试验）V.P.反应阳性途径：V.P.反应阳性途径：吲哚产生试验判断细菌是否（含色氨酸酶）能利用色氨酸。吲哚产生试验判断细菌是否（含色氨酸酶）能利用色氨酸。实验材料1.大肠杆菌（Escherichiacoli）2.产气肠杆菌（Enterobacteraerogenes)3.普通变形杆菌(Proteus

vulgaris)实验材料1.大肠杆菌（Escherichiacoli实验方法与步骤（一）液体培养基的制备与灭菌

1）蛋白胨培养基：蛋白胨 4.0gNaCl 2.0gH2O 400mL调pH7.6，分出2管，然后加0.5ml1.6%溴甲酚紫乙醇溶液,溶液呈浅紫色；分装到装有倒立的德汉氏小管的试管中（6管）实验方法与步骤（一）液体培养基的制备与灭菌2）10%葡萄糖溶液，10%乳糖溶液各20ml112度，30分钟灭菌3支德汉氏管中加葡萄糖溶液各1ml3支德汉氏管中加乳糖溶液各1ml

2）10%葡萄糖溶液，10%乳糖溶液各20ml3）葡萄糖蛋白胨培养基：葡萄糖 0.5g蛋白胨 0.5gK2HPO4 0.2gH2O 100mL分装2管3）葡萄糖蛋白胨培养基：（二）接种培养试验名称被接菌种1（管数）被接菌种2（管数）对照（管数）1．葡萄糖发酵大肠杆菌普通变形杆菌不接种2．乳糖发酵大肠杆菌普通变形杆菌不接种3．VP试验大肠杆菌产气肠杆菌4．吲哚试验大肠杆菌产气肠杆菌（二）接种培养试验名称被接菌种1（管数）被接菌种