盐水介质法血型鉴定标准操作程序

编号：版本号：盐水介质法血型鉴定标准操作程序临床基础实验室SOP文件编写人：升初审人：复审人：批准人：宏第1页，共3页实施日期：2操作人员：经批准人授权的本院专业技术人员部门主管：质量控制员：唐目的保证血型鉴定的操作规范化，为临床提供准确可靠的结果。该SOP变动程序：本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。适用范围：适用于盐水介质法血型鉴定的操作。方法学原理：1、正定型：用已知IgM类特异性标准抗血清与被检红细胞在盐水介质中反应（室温），若出现凝集现象，表明被检红细胞膜上有与血型抗体相对应的抗原，从而判断和鉴定被检者的血型。2、反定型：用已知标准A、B、O型红细胞与被检血清反应，若被检血清与已知型别的标准红细胞出现凝集，则证明被检血清中存在着与该红细胞抗原相对应的抗体。反之，若被检血清与已知型别的标准红细胞不出现凝集，证明被检血清中不存在与红细胞抗原相对应的血型抗体。以此反证被检者红细胞抗原的型别。标本采集：由临床科室采用真空负压EDTA－K2抗凝管采集3ml－5ml，作好标记，立即送检。标本编号登记：检验人员认真核对患者姓名、性别、床号、检验目的以及标本是否与申请单一致。确认无误后用专用记号笔在试管与申请单上编写对应数字序号。并按日期索引进行登记。标本处理：将标本置于台式离心机内，放置保证平衡，以1500转/min离心10分钟。保证血浆与血球有效分离。溶血、乳靡血及标本量不足应加以登记，溶血性疾病应注明。试剂：标准抗A、抗B血清，5%A、B型标准红细胞生理盐水悬液，生理盐水。仪器双目显微镜。试剂准备：将A，B红细胞悬液，单克隆抗A，抗B试剂，单克隆IgM/IgG抗D抗体，从冰箱中拿出，室温放置15-20分钟。正定型：每样本取4支小试管，每管编号A，B，D，分别加入抗A，抗B，抗D抗体各两滴，另一支加生理盐水，配制检测样本5%红细胞悬液，将红细胞悬液各加两滴入编好号的抗A，抗B，抗D试管中，室温放置（25℃）5分钟，1000r/min离心1分钟后先肉眼观察显微镜观察。红细胞悬液稀释见附表1。附表1：红细胞悬液配制表悬液浓度%压积RBC(滴)盐水（滴）212ml(40)510.8ml(16)1010.4ml(8)2010.2ml(4)反定型：每样本取2支试管，每管编号抗A，抗B，分别将2500r/min离心后的样本取血清，每管加两滴血清于抗A，抗B管，然后分别加入A，B红细胞悬液，室温放置5分钟，1000r/min离心1分钟后先肉眼观察后显微镜观察。结果判读：RH抗D血型鉴定结果判读:抗D管凝集者为RH（D）阳性，不凝集者为RH（D）阴性。ABO血型鉴定结果判读见附表2。附表2：血型结果判读ABO正定型ABO反定型已知血清+受检红细胞受检者血型判读受检者血清+试剂红细胞抗A抗BA细胞B细胞+-A-+-+B+---O++++AB--不合上述结果的必须进行复核，复核仍有矛盾，需记录并报告输血科主任作分析与进一步处理。报告格式：血型鉴定ABO正定型血型型ABO反定型血型型Rh(D)