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文档简介

红细胞及白细胞计数实验目的掌握显微镜下红细胞和白细胞计数方法实验原理用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,冲入计数池后,在显微镜下计数一定体积内的红细胞数量,经换算求出每升血液中的红细胞数。用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数,同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液冲入计数池后,在显微镜下计数一定体积内的白细胞数,经换算求出每升血液中的白细胞数。1mm 3mm 白细胞计数区域白细胞计数区域白细胞计数区域

白细胞计数区域红细胞和血小板计数区域大方格镜下示意图 中方格镜下示意图 器材:显微镜、改良计数板、试管、微量吸管、移液管、洗耳球、试管架试剂:生理盐水、红细胞、白细胞稀释液标本:EDTA抗凝血实验器材实验操作(一):红细胞计数1.加稀释液:

取小试管1支,加红细胞稀释液1.99ml。2.加血:

用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血10μl,擦去管外余血,轻轻加至红细胞稀释液底部,再轻吸上清液清洗吸管2~3次,立即混匀。3.充池:

混匀后用微量吸管将红细胞悬液冲入计数池,室温下平放3~5分钟,待细胞下沉后于显微镜下计数。4.计数:

用高倍镜依次计数中央大方格内4角和正中共5个中方格内的红细胞数。5.计算:

红细胞/L=N×25/5×10×106×200=N×1010=N/100×1012

N:表示5个中方格内数得的红细胞数。

×25/5:将5个中方格红细胞数换算成1个大方格红细胞数。

×10:将1个大方格红细胞数换算成1μl血液内红细胞数。

106:1L=106μl200:为血液的稀释倍数实验操作(二):白细胞计数1.加白细胞稀释液:

用吸管吸取白细胞稀释液0.38ml于小试管中。2.加血:

用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血20μl,擦去管外余血,轻轻加至白细胞稀释液底部,再轻吸上清液清洗吸管2~3次,混匀。3.充池:

混匀后用微量吸管将完全变为棕褐色的细胞悬液冲入计数池,室温下平放3~5分钟,待细胞下沉后于显微镜下计数。4.计数:

用低倍镜依次计数4个大方格内的白细胞数。5.计算:

白细胞/L=N/4×10×106×20=N/20×109/LN:表示4个大方格内数得的白细胞总数。

×10:将1个大方格白细胞数换算成1μl血液内白细胞数

106:1L=1

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