开郁健脾法对脾虚大鼠血清胃泌素、尿D-木糖影响的实验分析

开郁健脾法对脾虚大鼠血清胃泌素、尿D-木糖影响的实验分析

【摘要】

目的

观察具有开郁健脾功效中药复方对脾虚大鼠体质量、血清胃泌素、尿D-木糖排泄率的影响。方法

以破气苦降加饥饱失常的方法建立脾虚证大鼠模型,随机分组，实验组中药复方煎剂灌胃，以ELISA法测定大鼠血清胃泌素,间苯三酚法测定D-木糖排泄率。结果

(1)与模型组比较，中药复方低、中、高剂量组体质量明显增长(P<0.01)。(2)与模型组比较，中药复方低、高剂量组、中剂量组尿D-木糖排泄率显著增高(P<0.05、P<0.01)()。结论

开郁健脾中药复方有促进胃肠吸收的作用。

【关键词】

小儿厌食;血清胃泌素;尿D-木糖排泄率;开郁健脾;中药复方小儿厌食是指小儿较长时期见食不贪、食欲不振、厌恶进食的病症，是儿科门诊常见病之一，城市儿童发病率较高，各年龄儿童均可发病，尤以1～6岁小儿多见

[1]。笔者长期跟随导师出诊，导师擅长运用开郁健脾之法治疗小儿厌食，每获良效。为探讨开郁健脾法组成中药复方的疗效机理,参照曾益宏等人的方法建立大鼠脾虚模型[2]，以开郁健脾中药复方为施加因素，探讨其疗效机理。Onecannotgetbloodfromastone.

1

材料与方法Self-confidenceisthefirstrequisitetohumangreatness.

1.1

动物与分组选用SD大鼠40只[雌雄各半,(180±20)g，由辽宁中医药大学实验动物中心提供，实验动物使用许可证：SCXK(辽)2009-2005]，将大鼠随机分为5组，分别为正常组，模型组，中药复方低、中、高剂量组，每组8只，分笼饲养，自由饮水。饲料采用标准颗粒饲料(由辽宁中医药大学动物实验室提供)。Thereismoretroubleinhavingnothingtodothaninhavingmuchtodo.

1.2

主要试剂和仪器大鼠胃泌素试剂盒(RD公司生产，批号09-04)，D-木糖试剂盒(南京建成生物工程研究所，批号20090722)，紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司，T6新世纪),全自动酶标仪(奥地利安图公司，2010)(医药学/临床医学论文)。Athingisbiggerforbeingshared.

1.3

药物制备(1)造模药物制备。小承气汤：

大黄∶厚朴∶枳实=4∶5∶3。常规煎法，然后浓缩至500

%。(2)实验药物制备。中药复方：党参12

g、白术9

g、半夏6

g、鸡内金9

g、炒麦芽9

g、山楂9

g、厚朴7

g、郁金9

g。常规煎法，然后浓缩至低剂量浓度116.7

%、中剂量浓度350

%、高剂量浓度525

%，冷冻保存。1.4

造模方法采用破气苦降法加饥饱失常复制脾虚动物模型[3-4]，本模型是继大黄致脾虚模型之后比较广泛的脾虚模型[3]。各组大鼠除了正常组外每日灌饲小承气汤50

g/kg，隔日半量进食，自由饮水，造模15

d结束，测量大鼠的体质量，以大鼠体质量下降10

%～15

%)为造模成功(与对照组比较)。1.5

给药方法正常对照组与模型组自由饮水，不限制饮食，分笼饲养。中药复方低剂量组、中剂量组按1

mL/100

g、每日1次灌胃，高剂量组按1

mL/100

g、每日2次灌胃，连续给药4周。1.6

血清胃泌素测定中药复方低、中、高剂量组在最后1次给药后禁食24

h，正常组与模型组禁食24

h，各组均不限制饮水，术前给予各组大鼠10

%水合氯醛腹腔注射1

mL/100

g，大鼠麻醉后仰卧手术台上，用手术剪剪开腹腔，找到腹主动脉，用注射器从腹主动脉采血2

mL，快速离心分离血清，按说明书由辽宁中医药大学免疫室测定。Onecannotbeintwoplaceatonce.

1.7

尿D-木糖排泄率测定采用间苯三酚法[6]，最后1次给药后，各组大鼠禁食不禁水12

h,3

%

D-木糖溶液灌胃,每只1

mL/100

g,然后收集5

h尿液(期间禁食不禁水)，记录尿量。取尿液5

μL,测试前将尿液用蒸馏水9倍稀释至50

μL检测,加入间苯三酚试剂3

mL,

分别加入蒸馏水0.05

mL(

试剂空白管)，收集未服D-木糖尿液(测定空白管)0.05

mL，1.33

mmol/L

D-木糖标准应用液0.05

mL(标准管)，测定血清0.05

mL(测定管)，各管同时放入100

℃沸水中煮沸4

min，取出立即放冰水中冷却，混匀后，554

nm波长，水调零比色，测各管吸收光度OD值。计算公式：尿木糖(mmol/L)=(测定管OD值-测定空白管OD值)/(标准管OD值-试剂空白管OD值)×标准管浓度(1.33

mmol/L)×标本测定前稀释倍数(10倍)。5

h尿D-木糖排泄率=尿木糖(mmol/L)×150×5

h尿量(L)×1/1000/大鼠灌D-木糖mL×3

%。Firsttry,andthentrust.

1.8

统计方法采用统计软件SPSS11.5进行统计分析，数据以±s表示，大鼠体质量、血清胃泌素、尿D-木糖排泄率以单因素方差分析进行统计分析。

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2

结果

2.1

大鼠造模前后体质量下降率模型组、中药复方低、中、高剂量组与正常组比较，差异有高度统计意义(P<0.01)，体质量下降率>10

%,造模成功。见表1。2.2

模型组与实验组治疗前后体质量增长率比较Ausefultradeisamineofgold.

中药复方低、中、高剂量组与模型组比较，差异有高度统计意义(P<0.01),治疗后实验组体质量明显增长。见表2。2.3

模型组与实验组造模前后体质量增长率比较论文分为专题型、论辩型、综述型和综合型四大类

中药复方低、中、高剂量组与模型组比较，差异有高度统计意义(P<0.01),实验组比模型组体质量增加更明显。见表3。表1

各组大鼠体质量下降率比较表2

模型组与实验组治疗前后体质量增长率比较表3

模型组与实验组造模前后体质量增长率比较

2.4

大鼠尿D-木糖排泄率测定结果中药复方低、高剂量组与模型组比较，差异有统计意义(P<0.05);中剂量组与模型组比较，差异有高度统计意义(P<0.01)。中药复方能促进D-木糖的吸收。见表4。Deathwhenitcomeswillhavenodenial.

表4

大鼠尿D-木糖排泄率测定结果

(±s)项目正常组模型组低剂量组中剂量组高剂量组n88888排泄率(%)26.2±5.9*

16.5±5.127.5±5.6*

32.5±6.2**29.4±5.8*

注：与模型组比较*P<0.05，**P<0.012.5

大鼠血清胃泌素测定结果中药复方低、中、高剂量组与模型组比较,差异无统计意义(P>0.05)，中药复方对血清胃泌素无影响，见表5。Thepeacockhasfairfeathers,butfoul.

表5

大鼠血清胃泌素测定结果

(±s，pg/mL)项目正常组模型组低剂量组中剂量组高剂量组n88888胃泌素30.23±0.8030.33±0.7229.9±1.0428.9±1.3729.5±0.593

讨论3.1

厌食与健脾开郁法

小儿厌食是由于小儿脏腑娇嫩，脾常不足，若饮食不当,饥饱不匀,饥则伤胃,饱则伤脾,致使脾胃功能紊乱。小儿脏腑娇嫩,易虚易实。如施用寒凉攻伐过度,或误用温燥，或攻下太过,耗伤津液,损伤脾胃,致使脾胃升降失调,纳化失常而厌食。小儿乳食不知自节,饥饱无度，故有“乳贵有食,食贵有节,饮食自倍,脾胃乃伤”之说

。儿童在生长发育过程中受到过分的溺爱，有的父母过于娇爱孩子,滋生了任性、耍娇等不良习惯,餐时不进,饭后零食,干扰了脾胃的正常规律。导师张君认为，小儿厌食发病究其原因部分是由于所欲不遂，而致肝郁，肝气郁结，反侮脾土，脾虚小儿每每伴有肝郁，小儿厌食以肝郁脾虚为多，运用开郁健脾，每获良效，因此以开郁健脾之法立方。党参甘平，入脾肺，补气健脾;郁金辛苦寒，入心、肝胆，活血行气解郁。两者共同为君，开郁健脾，补而不滞。白术甘苦平，入脾胃，健脾益气，燥湿利水;鸡内金甘平，入脾胃、小肠、膀胱，运脾和胃，消食健脾;炒麦芽甘平，入脾胃、肝，消食疏肝;山楂酸甘温，入脾胃、肝，消食化积，行气散瘀。四者共同为臣，运脾和胃消食。半夏辛温，入肺、脾胃，降逆止呕，散结消痞为佐。厚朴辛、苦、温，入脾胃、大肠、肺，燥湿化痰，下气除满为使。全方开郁健脾，消食化积，使脾司运化，胃司受纳，脾胃调和，肝气得疏，脾胃调和，方能知饥纳食，食而得化。3.2

模型建立与选择查阅近几年小儿厌食动物模型，对此研究的比较少，主要是运用高脂、高蛋白饮食喂食幼鼠[7]，造成小儿厌食的动物模型。本实验选择破气苦降加饥饱失常的方法建立脾虚证大鼠模型,该模型是继大黄所致脾虚模型之后比较广泛的模型，也是比较公认的模型。虽然它不如大黄所建立的脾虚模型常见，但是临床上小儿厌食出现泄泻的比较少，出现肝郁脾虚的比较多，与所选择动物模型比较接近。3.3

健脾开郁中药复方对体质量的影响小承气汤与隔日半量饮食相结合对大鼠进行造模，比较第1

d与第15

d的大鼠体质量变化，模型组与正常组比较体质量下降率大于10

%,模型组，中药复方低、中、高剂量组与正常组比较差异有高度统计意义(P<0.01),说明造模成功。经过开郁健脾中药复方治疗4周后，比较第43

d与第1

d大鼠体质量增长率，结果表明，中药复方低、中、高剂量组与模型组比较差异有高度统计意义(P<0.01)。说明经过具有开郁健脾作用的中药复方治疗后，大鼠体质量与造模前大鼠体质量比较明显增长，模型组增长缓慢，中药复方能促进大鼠体质量增长。尤其以最后1周治疗组大鼠体质量增长最快，治疗第1周治疗组大鼠体质量增加不明显，因此脾虚大鼠需要经过一段时间的治疗才能达到满意的效果,短时间疗效不令人满意。模型组与实验组造模前后体质量增长率比较，结果表明，中药复方低、中、高剂量组与模型组比较差异有高度统计意义(P<0.01)，说明中药复方能够促进脾虚大鼠体质量增长,治疗脾虚大鼠。低、中、高剂量组组间比较P>0.05,说明中药复方各剂量组大鼠体质量增长无明显的差异。论文分为专题型、论辩型、综述型和综合型四大类

3.4

健脾开郁中药复方对大鼠尿D-木糖排泄率、血清胃泌素影响造模大鼠脾气虚弱，脾失健运，脾不能运化水谷精微，物质代谢障碍表现在糖代谢方面，则会出现D-木糖吸收低下。口服D-木糖后一定时间内血和尿中D-木糖含量基本上可反映小肠吸收功能状况[8]。D-木糖口服吸收易化扩散，需消耗能量，与细胞膜表面的Na+|K+|ATP酶有关。有研究显示[9],脾虚的时候Na+|K+|ATP酶活性降低,小肠黏膜具有吸收功能的绒毛寿命、长度变短,数量减少,从而导致D-木糖吸收降低。尿D-木糖排泄率作为脾虚证诊断及疗效评价的客观指标[10],本实验与这样的观点相符。结果表明，中药复方低、高剂量组大鼠与模型组大鼠比较差异有统计意义(P<0.05),中剂量组与模型组比较差异有高度统计意义(P<0.01),中药复方能够促进D-木糖吸收,提高尿D-木糖排泄率，促进小肠的吸收功能。治疗后,各治疗组与正常组比较尿D-木糖排泄率无明显差异(P>0.05),提示治疗后尿D-木糖排泄率已恢复正常水平。中药复方低、中、高剂量组之间组间比较差异也无统计意义(P>0.05),说明无明显的量效关系。血清胃泌素是胃肠道主要的激素之一[11]，由G细胞分泌,以胃窦部最多,其次是胃底、十二指肠、空肠等处,促进胃黏膜和壁细胞的增长以及胃肠道的蠕动。结果显示，中药复方低、中、高剂量组大鼠与模型组大鼠比较差异无统计意义(P>0.05),说明中药复方对脾虚大鼠血清胃泌素影响很小，具有开郁健脾中药复方治疗脾虚不是通过血清胃泌素实现的。Childrenandfoolscannotlie.

【参考文献】

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