神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件

LHW神经生物学常用形庵学研究方法LHW1LHW组织阀的程1定(fixation目的:防止组织自溶,保护组织免受微生物侵袭,保存组织成份不被破坏丢失,维持组织结构使之正确的反应生活状态。固定剂:4%多聚甲醛(常用)方法:浸泡固定,灌注固定2切片(section):石蜡切片,冰冻切片LHW2LHW(-)尼氏染色方法(Nisslstaining):1.定义:是用碱性染料染神经组织的一种方法,神经组织中可与碱性染料结合的主要成份是核酸,经元胞体中有大量核糖核酸,主要以尼氏小体的形式存在。细胞核中染色质少,故染色浅,但有明显的核仁。神经胶质细胞的核中染色质较多,着色较深,但胞浆不着色。电镜下尼氏小体是许多规则平行排列并相互够通的粗面内质网以及其间的游离核糖体组成LHW3LHW2用于尼氏染色的常用染料有:焦油紫(cresylviolet硫堇(thionine)甲苯胺蓝(toluidineblue)LHW4LHW焦油紫染色法:石蜡切片或冰冻切片0.1%焦油紫染液一37℃5-10min烝馏水洗-70%Alc3min95%Ac3min100%Ac1min×3次二甲苯5min×2次·封片。结果:尼氏小体紫色,本底无色。LHW5LHWDLGDRGCresylvioletstainingLHW6LHW09ThioninestainingCresylvioletstainingLHW7LHW高尔基技术(Golgitechnique)TheGolgi(andrelated)methodsworkbystainingtissuewithsilvernitratewhichisthenreducedtosilver.Thisproducesuniformdarkcoloringofthewholeneuron.ThemorphologyofdendritesandaxoncanbestudiedindetailLHW8LHWCerebellumcortexneuronLHW9LHW神经束路示踪利用轴浆运输现象追踪神经元之间联系的种方法示踪剂:HRP(horseradishperoxidase,辣根过氧化物酶),快蓝(fastblue),荧光金(fluorogold),核黄(nuclearyellow),神经生物素(neurobiotin),生物素化葡聚糖胺(biotinylateddextranamine,BDA)LHW10神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件11神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件12神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件13神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件14神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件15神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件16神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件17神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件18神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件19神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件20神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件21神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件22神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件23神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件24神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件25神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件26神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件27神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件28神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件29神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件30神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件31神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件32神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件33神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件34神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件35神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件36神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件37神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件38神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件39神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件40神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件41神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件42神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件43神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件44神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件45神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件46神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件47神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件48神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件49神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件50神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件51神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件52神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件53神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件54神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件55神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件56神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件57神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件58神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件59神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件60神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件61神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件62神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件63神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件64神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件65神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件66神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件67LHW神经生物学常用形庵学研究方法LHW68LHW组织阀的程1定(fixation目的:防止组织自溶,保护组织免受微生物侵袭,保存组织成份不被破坏丢失,维持组织结构使之正确的反应生活状态。固定剂:4%多聚甲醛(常用)方法:浸泡固定,灌注固定2切片(section):石蜡切片,冰冻切片LHW69LHW(-)尼氏染色方法(Nisslstaining):1.定义:是用碱性染料染神经组织的一种方法,神经组织中可与碱性染料结合的主要成份是核酸,经元胞体中有大量核糖核酸,主要以尼氏小体的形式存在。细胞核中染色质少,故染色浅,但有明显的核仁。神经胶质细胞的核中染色质较多,着色较深,但胞浆不着色。电镜下尼氏小体是许多规则平行排列并相互够通的粗面内质网以及其间的游离核糖体组成LHW70LHW2用于尼氏染色的常用染料有:焦油紫(cresylviolet硫堇(thionine)甲苯胺蓝(toluidineblue)LHW71LHW焦油紫染色法:石蜡切片或冰冻切片0.1%焦油紫染液一37℃5-10min烝馏水洗-70%Alc3min95%Ac3min100%Ac1min×3次二甲苯5min×2次·封片。结果:尼氏小体紫色,本底无色。LHW72LHWDLGDRGCresylvioletstainingLHW73LHW09ThioninestainingCresylvioletstainingLHW74LHW高尔基技术(Golgitechnique)TheGolgi(andrelated)methodsworkbystainingtissuewithsilvernitratewhichisthenreducedtosilver.Thisproducesuniformdarkcoloringofthewholeneuron.ThemorphologyofdendritesandaxoncanbestudiedindetailLHW75LHWCerebellumcortexneuronLHW76LHW神经束路示踪利用轴浆运输现象追踪神经元之间联系的种方法示踪剂:HRP(horseradishperoxidase,辣根过氧化物酶),快蓝(fastblue),荧光金(fluorogold),核黄(nuclearyellow),神经生物素(neurobiotin),生物素化葡聚糖胺(biotinylateddextranamine,BDA)LHW77神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件78神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件79神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件80神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件81神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件82神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件83神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件84神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件85神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件86神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件87神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件88神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件89神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件90神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件91神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件92神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件93神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件94神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件95神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件96神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件97神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件98神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件99神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件100神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件101神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件102神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件103神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件104神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件105神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件106神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件107神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件108神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件109神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件110神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件111神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件112神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件113神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件114神-经-生-物-学-常-用-形-态-学-研-究-方-法课件115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