免疫细胞化学实验技能总结课件

免疫细胞化学实验技能总结免疫细胞化学实验技能总结1免疫化学相关实验技能免疫化学相关实验21、定义用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。1、定义32、原理根据抗原抗体反应和化学显色原理组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应,最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分,在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。2、原理4常用的标记物有光膏、和性网健:标记荧光素的称为兔光造,常用的荧光素有异硫氰酸荧光素(FTC)、罗丹明(rhodamine)等。标记酶的称为兔,常用的酶有辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase)等。标记同位素的称为兔,常用的同位素有3H、c、32s和P等。常用的标记物有光膏、和性网健:5讲解提纲石蜡切片/冰冻切片二、免疫酶/免疫荧光、酶朕免疫吸附试验讲解提纲6(1)石蜡切片的制作取材、固定洗涤蒸馏水洗涤2遍50%70%、80%酒精各15min,95%酒精脱水酒精I、Ⅱ各15min,无水乙醇I、Ⅱ各15min,无水乙醇/二甲苯(1:1)15min选明、浸二甲米约2mBn元甲石蜡(:13mn纯蜡I各Ⅱ30r包、切片常规石蜡切片,切片厚度为7m晨片、烤片于干净载玻片上进行展片,37℃烤千(1)石蜡切片的制作7Q取材根据不同的实验目的,选择相应的材料,材料要求新鲜、准确、完整,材料要避免挤压、挫伤、千枯。所采集材料应立即放入固定液,并编号,注明采集时间、名称、组织部位,所取组织块要大小适当,即要能说明问题,又要考虑固定剂的穿透能力如:角膜、TEHC等组织材料细胞材料肝脏、鱼卵Q取材8國固定取材后,应立即进行固定。固定是制片极为关键的一个步骤,制片质量的优劣除与材料的新鲜程度有关外,还取决于最初的固定是否适当和完全。固定的意义新鲜的组织被割取后,由于细胞内酶的作用和细菌的繁殖,可引起组织的自溶和腐败。因此,割取组织块后,应立即采用一种方法.将组织尽可能保持原有的形态结构,且有利于保存和适于制片的操作,这一步骤称为固定。國固定9固定的目的和作用在于①防止组织自溶和腐败;②使细胞内的蛋白质、糖、脂肪等各种成分沉淀保存下来从而保存细胞的各种组成成分使其保持与生活时相近似的形态和结构;③因沉淀及凝固的关系,使细胞内不同的成分产生不同的折光率,造成光学上的差别,使原来在生活情况下看不清楚的结构变得清晰易见,且有的固定剂还有助染作用(如醋酸、苦味酸),从而使细胞各部易于染色;④固定剂还兼有硬化作用,使柔软组织硬化而不易变形,有利于操作。固定的目的和作用在于10名称10%甲醛4%多聚苦味酸冰醋酸锇酸甲醛固定效果好好沉淀一对染色好切蛋白质固定好组织收缩大小大小小主要用途常规病理免疫化不单独不单独电镜切片使用使用核型缺点长期用其固定的渗透力使组织价格昂固定的组时间不弱,对膨胀,贵;有织变为酸宜太长,组织收一般不性不利于以24小缩大单独使染色,特时以内用别是细胞为宜核的着色名称10%甲醛4%多聚苦味酸冰醋酸锇酸11免疫细胞化学实验技能总结课件12免疫细胞化学实验技能总结课件13免疫细胞化学实验技能总结课件14免疫细胞化学实验技能总结课件15免疫细胞化学实验技能总结课件16免疫细胞化学实验技能总结课件17免疫细胞化学实验技能总结课件18免疫细胞化学实验技能总结课件19免疫细胞化学实验技能总结课件20免疫细胞化学实验技能总结课件21免疫细胞化学实验技能总结课件22免疫细胞化学实验技能总结课件23免疫细胞化学实验技能总结课件24免疫细胞化学实验技能总结课件25免疫细胞化学实验技能总结课件26免疫细胞化学实验技能总结课件27免疫细胞化学实验技能总结课件28免疫细胞化学实验技能总结课件29免疫细胞化学实验技能总结课件30免疫细胞化学实验技能总结课件31免疫细胞化学实验技能总结课件32免疫细胞化学实验技能总结课件33免疫细胞化学实验技能总结课件34免疫细胞化学实验技能总结课件35免疫细胞化学实验技能总结课件36免疫细胞化学实验技能总结课件37免疫细胞化学实验技能总结课件38免疫细胞化学实验技能总结课件39免疫细胞化学实验技能总结课件40免疫细胞化学实验技能总结课件41免疫细胞化学实验技能总结课件42免疫细胞化学实验技能总结课件43免疫细胞化学实验技能总结课件44免疫细胞化学实验技能总结课件45免疫细胞化学实验技能总结课件46免疫细胞化学实验技能总结课件47免疫细胞化学实验技能总结课件48免疫细胞化学实验技能总结课件49免疫细胞化学实验技能总结课件50免疫细胞化学实验技能总结课件51免疫细胞化学实验技能总结课件52免疫细胞化学实验技能总结课件53免疫细胞化学实验技能总结课件54免疫细胞化学实验技能总结课件55免疫细胞化学实验技能总结课件56免疫细胞化学实验技能总结课件57免疫细胞化学实验技能总结课件58免疫细胞化学实验技能总结课件59免疫细胞化学实验技能总结课件60免疫细胞化学实验技能总结课件61免疫细胞化学实验技能总结课件62免疫细胞化学实验技能总结课件63免疫细胞化学实验技能总结课件64免疫细胞化学实验技能总结课件65免疫细胞化学实验技能总结课件66免疫细胞化学实验技能总结课件67免疫细胞化学实验技能总结课件68免疫细胞化学实验技能总结课件69免疫细胞化学实验技能总结课件70免疫细胞化学实验技能总结课件71免疫细胞化学实验技能总结课件72免疫细胞化学实验技能总结课件73免疫细胞化学实验技能总结课件74免疫细胞化学实验技能总结课件75免疫细胞化学实验技能总结课件76免疫细胞化学实验技能总结课件77免疫细胞化学实验技能总结课件78免疫细胞化学实验技能总结课件7941、学问是异常珍贵的东西，从任何源泉吸收都不可耻。——阿卜·日·法拉兹

42、只有在人群中间，才能认识自己。——德国

43、重复别人所说的话，只需要教育；而要挑战别人所说的话，则需要头脑。——玛丽·佩蒂博恩·普尔

44、卓越的人一大优点是：在不利与艰难的遭遇里百折不饶。——贝多芬

45、自己的饭量自己知道。——苏联41、学问是异常珍贵的东西，从任何源泉吸收都不可耻。——阿卜80免疫细胞化学实验技能总结免疫细胞化学实验技能总结81免疫化学相关实验技能免疫化学相关实验821、定义用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。1、定义832、原理根据抗原抗体反应和化学显色原理组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应,最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分,在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。2、原理84常用的标记物有光膏、和性网健:标记荧光素的称为兔光造,常用的荧光素有异硫氰酸荧光素(FTC)、罗丹明(rhodamine)等。标记酶的称为兔,常用的酶有辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase)等。标记同位素的称为兔,常用的同位素有3H、c、32s和P等。常用的标记物有光膏、和性网健:85讲解提纲石蜡切片/冰冻切片二、免疫酶/免疫荧光、酶朕免疫吸附试验讲解提纲86(1)石蜡切片的制作取材、固定洗涤蒸馏水洗涤2遍50%70%、80%酒精各15min,95%酒精脱水酒精I、Ⅱ各15min,无水乙醇I、Ⅱ各15min,无水乙醇/二甲苯(1:1)15min选明、浸二甲米约2mBn元甲石蜡(:13mn纯蜡I各Ⅱ30r包、切片常规石蜡切片,切片厚度为7m晨片、烤片于干净载玻片上进行展片,37℃烤千(1)石蜡切片的制作87Q取材根据不同的实验目的,选择相应的材料,材料要求新鲜、准确、完整,材料要避免挤压、挫伤、千枯。所采集材料应立即放入固定液,并编号,注明采集时间、名称、组织部位,所取组织块要大小适当,即要能说明问题,又要考虑固定剂的穿透能力如:角膜、TEHC等组织材料细胞材料肝脏、鱼卵Q取材88國固定取材后,应立即进行固定。固定是制片极为关键的一个步骤,制片质量的优劣除与材料的新鲜程度有关外,还取决于最初的固定是否适当和完全。固定的意义新鲜的组织被割取后,由于细胞内酶的作用和细菌的繁殖,可引起组织的自溶和腐败。因此,割取组织块后,应立即采用一种方法.将组织尽可能保持原有的形态结构,且有利于保存和适于制片的操作,这一步骤称为固定。國固定89固定的目的和作用在于①防止组织自溶和腐败;②使细胞内的蛋白质、糖、脂肪等各种成分沉淀保存下来从而保存细胞的各种组成成分使其保持与生活时相近似的形态和结构;③因沉淀及凝固的关系,使细胞内不同的成分产生不同的折光率,造成光学上的差别,使原来在生活情况下看不清楚的结构变得清晰易见,且有的固定剂还有助染作用(如醋酸、苦味酸),从而使细胞各部易于染色;④固定剂还兼有硬化作用,使柔软组织硬化而不易变形,有利于操作。固定的目的和作用在于90名称10%甲醛4%多聚苦味酸冰醋酸锇酸甲醛固定效果好好沉淀一对染色好切蛋白质固定好组织收缩大小大小小主要用途常规病理免疫化不单独不单独电镜切片使用使用核型缺点长期用其固定的渗透力使组织价格昂固定的组时间不弱,对膨胀,贵;有织变为酸宜太长,组织收一般不性不利于以24小缩大单独使染色,特时以内用别是细胞为宜核的着色名称10%甲醛4%多聚苦味酸冰醋酸锇酸91免疫细胞化学实验技能总结课件92免疫细胞化学实验技能总结课件93免疫细胞化学实验技能总结课件94免疫细胞化学实验技能总结课件95免疫细胞化学实验技能总结课件96免疫细胞化学实验技能总结课件97免疫细胞化学实验技能总结课件98免疫细胞化学实验技能总结课件99免疫细胞化学实验技能总结课件100免疫细胞化学实验技能总结课件101免疫细胞化学实验技能总结课件102免疫细胞化学实验技能总结课件103免疫细胞化学实验技能总结课件104免疫细胞化学实验技能总结课件105免疫细胞化学实验技能总结课件106免疫细胞化学实验技能总结课件107免疫细胞化学实验技能总结课件108免疫细胞化学实验技能总结课件109免疫细胞化学实验技能总结课件110免疫细胞化学实验技能总结课件111免疫细胞化学实验技能总结课件112免疫细胞化学实验技能总结课件113免疫细胞化学实验技能总结课件114免疫细胞化学实验技能总结课件115免疫细胞化学实验技能总结课件116免疫细胞化学实验技能总结课件117免疫细胞化学实验技能总结课件118免疫细胞化学实验技能总结课件119免疫细胞化学实验技能总结课件120免疫细胞化学实验技能总结课件121免疫细胞化学实验技能总结课件122免疫细胞化学实验技能总结课件123免疫细胞化学实验技能总结课件124免疫细胞化学实验技能总结课件125免疫细胞化学实验技能总结课件126免疫细胞化学实验技能总结课件127免疫细胞化学实验技能总结课件128免疫细胞化学实验技能总结课件129免疫细胞化学实验技能总结课件130免疫细胞化学实验技能总结课件131免疫细胞化学实验技能总结课件132免疫细胞化学实验技能总结课件133免疫细胞化学实验技能总结课件134免疫细胞化学实验技能总结课件135免疫细胞化学实验技能总结课件136免疫细胞化学实验技能总结课件137免疫细胞化学实验技能总结课件138免疫细胞化学实验技能总结课件139免疫细胞化学实验