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文档简介
组织学与胚胎学
(histologyandembryology)2020/11/31组织学与胚胎学
(histologyandembry
绪论(Introduction)
细胞(cell)2020/11/32绪论(Introduction)
组织学与胚胎学的定义和研究内容光学显微镜术电子显微镜术组织化学和免疫组织化学技术原位杂交组织学与胚胎学的学习方法细胞连接重点与小结内容提要2020/11/33组织学与胚胎学的定义和研究内容原位杂交内容提要2020/11一、组织学与胚胎学的定义和研究内容组织学(histology):研究机体微细结构及其相关功能的科学。
细胞细胞间质上皮组织结缔组织肌肉组织神经组织器官和系统人体研究内容:2020/11/34一、组织学与胚胎学的定义和研究内容组织学(histology胚胎学(embryology):研究机体发生、生长及其发育机制的一门科学。研究内容:受精卵胚胎儿(2~8周)(9~38周)2020/11/35胚胎学(embryology):研究机体发生、生长及其研究内人体组织学(humanorganization):研究人体结构(微细结构)的自组织过程及其规律的科学。人体发生细胞组织器官系统(微细结构及演化规律)研究内容:2020/11/36人体组织学(humanorganization):研究内容为什么学习组织学与胚胎学?哪个是不正常的?2020/11/37为什么学习组织学与胚胎学?哪个是不正常的?2020/11/3
问题
解决方法
观察对象太小
放大(显微镜)
观察对象无色,无反差
染色(HE染色)
观察对象生化成分不同
细胞化学、免疫组织化学
观察对象是活体
培养二、组织学与胚胎学的研究方法和技术2020/11/38问题(一)光镜技术
1.石蜡切片:取材固定脱水透明包埋切片染色封片
2.冰冻切片、涂片、铺片、磨片等2020/11/39(一)光镜技术2.冰冻切片、涂片、铺片、磨片等2020光镜标本制作程序2020/11/310光镜标本制作程序2020/11/310切片机2020/11/311切片机2020/11/3113.组织切片染色法HE染色:苏木精(Hematoxylin)伊红(Eosin)染色碱性染料将嗜碱性物质(本身酸性)染成蓝色酸性染料将嗜酸性物质(本身碱性)染成红色细胞核中的DNA和RNA、细胞质中的RNA细胞质、膜性结构(线粒体、溶酶体、滑面内质网)2020/11/3123.组织切片染色法HE染色:苏木精(Hematoxyli2020/11/3132020/11/313嗜碱性:对于碱性染料亲和力强的性质。可被苏木精染成紫蓝色。嗜酸性:对于酸性染料亲和力强的性质。可被伊红染成红色。中性:对于两种染料亲和力都不强的性质,HE染色着色淡。组织结构的嗜色性2020/11/314嗜碱性:对于碱性染料亲和力强的性质。可被苏组织结构的嗜色性22020/11/3152020/11/315特殊染色法:硝酸银、地衣红、甲苯胺蓝染色法等活体染色:台盼蓝活体注射2020/11/316特殊染色法:2020/11/3162020/11/3172020/11/317地衣红染色示弹性纤维2020/11/318地衣红染色示弹性纤维2020/11/318甲苯胺蓝染色示肥大细胞2020/11/319甲苯胺蓝染色示肥大细胞2020/11/319台盼蓝活体染色示巨噬细胞2020/11/320台盼蓝活体染色示巨噬细胞2020/11/320血涂片Wright染色2020/11/321血涂片Wright染色2020/11/321透射电镜(transmissionelectronmicroscope):
观察细胞内部结构扫描电镜(scanningelectronmicroscope):
观察组织或细胞表面的立体结构(二)电子显微镜技术分辨率:电镜(0.2nm)、光镜(0.2μm)2020/11/322透射电镜(transmissionelectronmic透射电镜结构图2020/11/323透射电镜结构图2020/11/323电子密度高电子密度低透射电镜结构图2020/11/324电子密度高电子密度低透射电镜结构图2020/11/324扫描电镜结构图2020/11/325扫描电镜结构图2020/11/325(三)组织化学技术
1.一般组织化学术原理:化学或物理反应原理
应用:对组织或细胞内某种化学成分进行定性、定位、定量及相关功能的研究。PAS反应:过碘酸-Schiff反应(periodicacidSchiffreaction,PAS反应)是显示组织或细胞内多糖的一种染色方法。多糖醛紫红色沉淀氧化Schiff试剂HIO42020/11/326(三)组织化学技术PAS反应:过碘酸-Schiff反应(pe糖类—PAS反应肝糖原小肠粘原颗粒2020/11/327糖类—PAS反应肝糖原小肠粘原颗粒2020/11/327
2.免疫组织化学(immunohistochemistry)
技术:原理:抗原和抗体特异性结合。
应用:检测细胞、组织中多肽、蛋白质等。
2020/11/3282.免疫组织化学(immunohistochemistr(1)直接法2020/11/329(1)直接法2020/11/329(2)间接法2020/11/330(2)间接法2020/11/330免疫组织化学(辣根过氧化物酶标记)
示胰岛B细胞呈胰岛素阳性2020/11/331免疫组织化学(辣根过氧化物酶标记)
示胰岛B细胞呈胰岛素阳性
(四)
原位杂交技术(insitehybridization)为核酸(DNA和RNA)组织化学术。用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针,与细胞内待测的核酸结合(杂交),从而在原位显示该核酸。2020/11/332
(四)原位杂交技术(insitehybridiz2020/11/3332020/11/333(五)细胞培养术(cellculture)
细胞培养术:是把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件下进行培养的技术。
原代培养(primaryculture):
传代培养(subculture):
细胞系(cellline):
细胞株(cellstrain):2020/11/334(五)细胞培养术(cellculture)2020/11/超净工作台2020/11/335超净工作台2020/11/335培养箱2020/11/336培养箱2020/11/336体外培养的上皮细胞
在相差显微镜下的图象2020/11/337体外培养的上皮细胞
在相差显微镜下的图象2020/11/33三、组织胚胎学学习方法要点平面与立体的关系结构与功能相联系静态结构了解动态变化纵横联系深化认识2020/11/338三、组织胚胎学学习方法要点平面与立体的关系2020/11/3平面与立体2020/11/339平面与立体2020/11/339结构与功能舒张状态收缩状态2020/11/340结构与功能舒张状态收缩状态2020/11/340静态与动态2020/11/341静态与动态2020/11/341综合与比较2020/11/342综合与比较2020/11/342四、细胞
(一)基本结构
2020/11/343四、细胞
(一)基本结构
2020/11/343
(二)细胞连接(celljunction)1.紧密连接2.中间连接3.桥粒4.缝隙连接2020/11/344(二)细胞连接2020/11/344紧密连接(tightjunction)功能:(1)阻止大分子物质由外部进入细胞间隙。(2)有一定机械性的连接作用。2020/11/345紧密连接2020/11/345功能:(1)粘着和连接相邻细胞。(2)保持细胞的形态。2.中间连接(intermediatejunction)2020/11/346功能:2.中间连接(intermediatejunctio3.桥粒(desmosome)
是一种最牢固的细胞连接,多见于易受机械刺激或摩擦较多的部位。2020/11/3473.桥粒2020/11/3472020/11/3482020/11/348功能:(1)利于细胞之间小分子物质和离子的交换,协调各细胞的功能。(2)利于细胞之间传递电冲动。4.缝隙连接(gapjunction)2020/11/349功能:4.缝隙连接2020/11/349
两种或两种以上的细胞连接紧接连在一起,则称为连接复合体。连接复合体(junctionalcomplex):2020/11/350两种或两种以上的细胞连接紧接连在一起,则称为连组织学研究技术新进展流式细胞术(flowcytometry)流式细胞仪形态计量术(morphometry)
图像分析仪2020/11/351组织学研究技术新进展流式细胞术(flowcytometry五、重点与小结1.HE染色的概念2.嗜酸性、嗜碱性、嗜中性的含义3.PAS反应4.免疫组织化学技术5.原位杂交技术6.细胞连接类型、功能7.连接复合体预习:人体的胚胎发生2020/11/352五、重点与小结1.HE染色的概念预习:人体的胚胎发生202组织学与胚胎学
(histologyandembryology)2020/11/353组织学与胚胎学
(histologyandembry
绪论(Introduction)
细胞(cell)2020/11/354绪论(Introduction)
组织学与胚胎学的定义和研究内容光学显微镜术电子显微镜术组织化学和免疫组织化学技术原位杂交组织学与胚胎学的学习方法细胞连接重点与小结内容提要2020/11/355组织学与胚胎学的定义和研究内容原位杂交内容提要2020/11一、组织学与胚胎学的定义和研究内容组织学(histology):研究机体微细结构及其相关功能的科学。
细胞细胞间质上皮组织结缔组织肌肉组织神经组织器官和系统人体研究内容:2020/11/356一、组织学与胚胎学的定义和研究内容组织学(histology胚胎学(embryology):研究机体发生、生长及其发育机制的一门科学。研究内容:受精卵胚胎儿(2~8周)(9~38周)2020/11/357胚胎学(embryology):研究机体发生、生长及其研究内人体组织学(humanorganization):研究人体结构(微细结构)的自组织过程及其规律的科学。人体发生细胞组织器官系统(微细结构及演化规律)研究内容:2020/11/358人体组织学(humanorganization):研究内容为什么学习组织学与胚胎学?哪个是不正常的?2020/11/359为什么学习组织学与胚胎学?哪个是不正常的?2020/11/3
问题
解决方法
观察对象太小
放大(显微镜)
观察对象无色,无反差
染色(HE染色)
观察对象生化成分不同
细胞化学、免疫组织化学
观察对象是活体
培养二、组织学与胚胎学的研究方法和技术2020/11/360问题(一)光镜技术
1.石蜡切片:取材固定脱水透明包埋切片染色封片
2.冰冻切片、涂片、铺片、磨片等2020/11/361(一)光镜技术2.冰冻切片、涂片、铺片、磨片等2020光镜标本制作程序2020/11/362光镜标本制作程序2020/11/310切片机2020/11/363切片机2020/11/3113.组织切片染色法HE染色:苏木精(Hematoxylin)伊红(Eosin)染色碱性染料将嗜碱性物质(本身酸性)染成蓝色酸性染料将嗜酸性物质(本身碱性)染成红色细胞核中的DNA和RNA、细胞质中的RNA细胞质、膜性结构(线粒体、溶酶体、滑面内质网)2020/11/3643.组织切片染色法HE染色:苏木精(Hematoxyli2020/11/3652020/11/313嗜碱性:对于碱性染料亲和力强的性质。可被苏木精染成紫蓝色。嗜酸性:对于酸性染料亲和力强的性质。可被伊红染成红色。中性:对于两种染料亲和力都不强的性质,HE染色着色淡。组织结构的嗜色性2020/11/366嗜碱性:对于碱性染料亲和力强的性质。可被苏组织结构的嗜色性22020/11/3672020/11/315特殊染色法:硝酸银、地衣红、甲苯胺蓝染色法等活体染色:台盼蓝活体注射2020/11/368特殊染色法:2020/11/3162020/11/3692020/11/317地衣红染色示弹性纤维2020/11/370地衣红染色示弹性纤维2020/11/318甲苯胺蓝染色示肥大细胞2020/11/371甲苯胺蓝染色示肥大细胞2020/11/319台盼蓝活体染色示巨噬细胞2020/11/372台盼蓝活体染色示巨噬细胞2020/11/320血涂片Wright染色2020/11/373血涂片Wright染色2020/11/321透射电镜(transmissionelectronmicroscope):
观察细胞内部结构扫描电镜(scanningelectronmicroscope):
观察组织或细胞表面的立体结构(二)电子显微镜技术分辨率:电镜(0.2nm)、光镜(0.2μm)2020/11/374透射电镜(transmissionelectronmic透射电镜结构图2020/11/375透射电镜结构图2020/11/323电子密度高电子密度低透射电镜结构图2020/11/376电子密度高电子密度低透射电镜结构图2020/11/324扫描电镜结构图2020/11/377扫描电镜结构图2020/11/325(三)组织化学技术
1.一般组织化学术原理:化学或物理反应原理
应用:对组织或细胞内某种化学成分进行定性、定位、定量及相关功能的研究。PAS反应:过碘酸-Schiff反应(periodicacidSchiffreaction,PAS反应)是显示组织或细胞内多糖的一种染色方法。多糖醛紫红色沉淀氧化Schiff试剂HIO42020/11/378(三)组织化学技术PAS反应:过碘酸-Schiff反应(pe糖类—PAS反应肝糖原小肠粘原颗粒2020/11/379糖类—PAS反应肝糖原小肠粘原颗粒2020/11/327
2.免疫组织化学(immunohistochemistry)
技术:原理:抗原和抗体特异性结合。
应用:检测细胞、组织中多肽、蛋白质等。
2020/11/3802.免疫组织化学(immunohistochemistr(1)直接法2020/11/381(1)直接法2020/11/329(2)间接法2020/11/382(2)间接法2020/11/330免疫组织化学(辣根过氧化物酶标记)
示胰岛B细胞呈胰岛素阳性2020/11/383免疫组织化学(辣根过氧化物酶标记)
示胰岛B细胞呈胰岛素阳性
(四)
原位杂交技术(insitehybridization)为核酸(DNA和RNA)组织化学术。用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针,与细胞内待测的核酸结合(杂交),从而在原位显示该核酸。2020/11/384
(四)原位杂交技术(insitehybridiz2020/11/3852020/11/333(五)细胞培养术(cellculture)
细胞培养术:是把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件下进行培养的技术。
原代培养(primaryculture):
传代培养(subculture):
细胞系(cellline):
细胞株(cellstrain):2020/11/386(五)细胞培养术(cellculture)2020/11/超净工作台2020/11/387超净工作台2020/11/335培养箱2020/11/388培养箱2020/11/336体外培养的上皮细胞
在相差显微镜下的图象2020/11/389体外培养的上皮细胞
在相差显微镜下的图象2020/11/33三、组织胚胎学学习方法要点平面与立体的关系结构与功能相联系静态结构了解动态变化纵横联系深化认识2020/11/390三、组织胚胎学学习方法要点平面与立体的关系2020/11/3平面与立体2020/11/391平面与立体2020/11/339结构与功能舒张状态收缩状态2020/11/392结构与功能舒张状态收缩状态2020/11/340静态与动态2020/11/393静态与动态2020/11/341综合与比较2020/11/394综合与比较2020
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