苯乙胺类似肾上腺素药物的分析

（优选）苯乙胺类似肾上腺素药物的分析第一页，共四十五页。基本内容一、结构与性质二、鉴别试验三、特殊杂质与检查四、含量测定五、体内药物分析第二页，共四十五页。（一）基本结构：苯乙胺或儿茶酚胺类*第一节结构与性质第三页，共四十五页。盐酸克仑特罗代表药物（二）化学性质（1）弱碱性：具有脂烃胺侧链，其氮为仲胺氮。（2）酚羟基特性：具有邻苯二酚或苯酚结构，酚易氧化，多元酚更易氧化显色。（3）光学活性：本类药物大多具手性碳原子，具有旋光性。（4）芳伯氨基特性第四页，共四十五页。第二节鉴别试验一、与三氯化铁反应具有酚羟基的本类药物高铁离子价有多高？第五页，共四十五页。第二节鉴别试验二、与甲醛-硫酸反应具有酚羟基的本类药物请看具体例子第六页，共四十五页。第二节鉴别试验一、与三氯化铁反应、与甲醛－硫酸反应药物三氯化铁甲醛－硫酸肾上腺素0.1mol/L盐酸液中显翠绿色，加氨试液显紫色，紫红色红色重酒石酸去甲肾上腺素翠绿色，加碳酸氢钠试液显蓝色，红色淡红色盐酸去氧肾上腺素紫色玫瑰红，橙红，深棕红盐酸异丙肾上腺素深绿色，滴加新制5%碳酸氢钠液，显蓝紫色，红色棕色，暗紫色盐酸多巴胺墨绿色，滴加1%氨溶液，显紫红色第七页，共四十五页。第二节鉴别试验三、氧化反应酚羟基，易被碘、过氧化氢、铁氰化钾氧化呈现不同颜色肾上腺素碘或过氧化氢中性或酸性肾上腺素红放置棕红色多聚体盐酸异丙肾上腺素偏酸性条件碘异丙肾上腺素红硫代硫酸钠淡红色溶液重酒石酸去甲肾上腺素酒石酸氢钾饱和液pH3.56碘试液放置5min硫代硫酸钠溶液为无色或仅显微红色或淡紫色肾上腺素或盐酸异丙肾上腺素明显的红棕色或紫色书上说的是还原性反应第八页，共四十五页。四、双缩脲反应是鉴别芳环氨基醇的特殊反应；可用于盐酸麻黄碱，盐酸伪麻黄碱鉴别：D＋CuSO4+NaOH显蓝紫色＋乙醚，醚层(紫红色)水层(蓝色)盐酸麻黄碱第二节鉴别试验第九页，共四十五页。五、与亚硝基铁氰化钠的反应重酒石酸间羟胺

红紫色亚硝基铁氰化钠试液丙酮（无甲醛）、碳酸氢钠

脂肪族伯胺的专属反应（Rimini反应）第十页，共四十五页。第二节鉴别试验六、UV和IR药物溶剂浓度(mg/ml)λnm(nm)吸收度(A)重酒石酸间羟胺水0.10272盐酸异丙肾上腺素水0.052800.50盐酸多巴胺0.5%硫酸0.03280盐酸芬氟拉明0.1mol/L盐酸0.25263,270盐酸苯乙双胍水0.012340.60盐酸克伦特罗0.1mol/L盐酸0.03243,296硫酸沙丁胺醇水0.08274盐酸伪麻黄碱水0.50251,257,263第十一页，共四十五页。一、酮体检查第三节特殊杂质与检查

杂质来源原料残存检查方法含量测定法（UV法）第十二页，共四十五页。一、酮体检查生产工艺：酮体氢化还原制得，若氢化不完全则引入酮体杂质。降解产物肾上腺素红多聚体第十三页，共四十五页。三、Detectionofspecificimpurities通过UV光谱检测第十四页，共四十五页。

检查原理：利用酮体在310nm波长处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶液在310nm波长处的吸收度限制酮体的量。例如：肾上腺素本项检查配2.0mg/mlλ=310nmA≤0.05

盐酸去氧肾上腺素配2.0mg/mlλ=310nmA≤0.02盐酸异丙肾上腺素配2.0mg/mlλ=310nmA≤0.15

第十五页，共四十五页。药物杂质溶剂C(mg/ml)λ(nm)

A肾上腺素肾上腺酮HCl(9→2000)

2.0

310≤0.05盐酸去氧肾上腺素酮体水

2.0

310≤0.20重酒石酸去甲肾上腺素去甲肾上腺酮水

2.0

310≤0.05盐酸异丙肾上腺素酮体水

2.0

310≤0.15盐酸甲氧明酮胺水

1.5

347≤0.06紫外分光光度法检查酮体的条件及要求第十六页，共四十五页。例中国药典（2010年版）规定肾上腺素中检查酮体的方法为：取本品，加盐酸溶液（9→2000）制成每1ml中含2.0mg的溶液，于310nm波长处测定，吸光度不得过0.05，已知酮体在310nm波长处的百分吸收系数为453，肾上腺素在该波长处无吸收。计算肾上腺素中酮体的限量。第十七页，共四十五页。光学纯度检查光学纯度检查：药物溶剂C(mg/ml)比旋度肾上腺素HCl(9→2000)

20

-50.0~-53.5盐酸去氧肾上腺素水

20

-42~-47重酒石酸去甲肾上腺素水

50

-10.0~-12.0盐酸麻黄碱水

50

-33~-35.5盐酸伪麻黄碱水

50

+61.0~+62.5手性碳原子第十八页，共四十五页。高低浓度对比法:1mg/ml,2μg/ml单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积（0.2%)；各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2.5倍（0.5%).1.肾上腺素采用HPLC法。有关物质检查第十九页，共四十五页。2.盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查－PC法样品制备：本品甲醇溶解即得展开：7.5×50cm，EtOAc-ethanol-water(6:3:1)显色：10％铁氰化钾＋10％亚硝基铁氰化钠＋10％NaOH检测：剪下显色斑点后甲醇萃取用UV法测定第二十页，共四十五页。一、非水溶液滴定法利用本类药物分子中的芳伯氨基和侧链脂烃胺的碱性，在冰醋酸溶液中，用高氯酸液的滴定，以结晶紫为指示剂，也可用电位法指示终点。第四节含量测定第二十一页，共四十五页。非水溶液滴定法(弱碱性)为什么要应用非水滴定法？这是因为本类药物多为弱碱性，在水溶液中用酸碱滴定液直接滴定没有明显的突跃，终点难以观测，常不能获得满意的测定结果。而在非水酸性溶剂中，只要在水溶液中的pKb<10，均可以被冰醋酸均化到溶剂醋酸根水平，相对碱度显著增强。因而可使弱碱性的药物都能顺利进行滴定。第二十二页，共四十五页。(一)基本原理当HA酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低HA的酸性，使反应顺利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游离碱类盐被置换出的弱酸因此，要根据不同情况采用相应测定条件。第二十三页，共四十五页。(二)一般方法供试品+冰醋酸10ml~30ml若供试品为氢卤酸盐再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml~5ml高氯酸滴定液滴定以空白试验校正以消耗标准液8ml计算结果指示剂：结晶紫第二十四页，共四十五页。(三）讨论Kb为10-8~10-10选冰醋酸作溶剂Kb为10-10~10-12选冰醋酸和醋酐作溶剂Kb﹤10-12选醋酐作溶剂①

适用范围Kb﹤10-8的有机碱盐。第二十五页，共四十五页。＊HA不同，对滴定反应的影响也不同。②

盐的滴定置换滴定，即用强酸（HClO4）置换出与生物碱结合的较弱的酸（HA）。HClO4、HBr、HCl、H2SO4、HNO3在HAc中酸强度不相同。HClO4＞HBr＞H2SO4＞HCl＞HNO3＞其它弱酸在水中酸强度相等第二十六页，共四十五页。a.

氢卤酸盐的测定排除方法：加入过量的HgAc2/HAc溶液氢卤酸HAc中酸性较强，对滴定有影响。第二十七页，共四十五页。b.硫酸盐的测定，如硫酸特布他林。直接滴定法注意硫酸盐的结构，正确判断反应的摩尔比。第二十八页，共四十五页。c.

硝酸盐的测定＊HNO3在冰HAc中为弱酸，不影响滴定突跃。＊HNO3具有氧化性，应采用电位法指示终点或将HNO3破坏分解后再进行测定。d.

磷酸盐及有机酸盐的测定磷酸、有机酸为弱酸，不干扰滴定。第二十九页，共四十五页。最常用的指示剂是结晶紫CrystalViolet（CV）紫

蓝

蓝绿

黄绿

黄（碱性区）—————→（酸性区）终点的颜色应用电位法校准。③

终点指示方法第三十页，共四十五页。④

注意事项a.

水分的影响及排除(CH3CO)2O+H2O→2CH3COOHb.

标准溶液的稳定性第三十一页，共四十五页。二、溴量法重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素原料药基本原理：第三十二页，共四十五页。基本操作：供试品→精密称定→加水溶解后精密加溴滴定液＋盐酸→放置并振摇→加碘化钾→振摇→用Na2S2O3滴定至近终点→加淀粉指示液→继续滴定至蓝色消失。第三十三页，共四十五页。①游离溴及碘极易挥散，操作过程中防逸失②不能加入太过量的溴液，以防酚羟基氧化或溴化。一般以过量2％为宜。③平行条件作空白，校正操作中溴及碘挥发。第三十四页，共四十五页。三、亚硝酸钠法盐酸克伦特罗，芳伯氨基，重氮化，永停滴定法指示终点第三十五页，共四十五页。四、紫外分光光度法：苯乙胺类药物分子具有苯环结构具有特征的紫外吸收，Chp2015采用这种方法测定多种紫类药物。如盐酸甲氧明注射液，重酒石酸间羟胺注射液。比色法：分子中具有芳伯胺基的药物采用重氮化-偶合反应显色，分子中含有酚羟基可与亚铁离子显色，然后进行比色测定。Chp2015采用比色法测定盐酸克伦罗特栓和盐酸异丙肾上腺素。第三十六页，共四十五页。四、Assay四、UV和比色法五、HPLC瘦肉精第三十七页，共四十五页。六、体内药物分析(GC-MS)动物组织中的盐酸克伦罗特残留的测定盐酸克伦特罗是肾上腺类神经兴奋剂。克伦特罗在家畜和人体内吸收好，而且与其它β-兴奋剂相比，它的生物利用度高，以至食用了含有克伦特罗的猪肉出现中毒。又称“瘦肉精”应用GC-MS法进行测定。（衍生化）第三十八页，共四十五页。练习与思考[A型题]1．盐酸普鲁卡因注射液中检查的特殊杂质是A.水杨醛B.间氨基酚C.水杨酸D.对氨基苯甲酸E.氨基酚2．对乙酰氨基酚中检查的特殊杂质是A.水杨醛B.间氨基酚C.对氨基酚D.苯甲酸E.苯酚3．肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素中检查的特殊杂质是A.水杨醛B.间氨基酚C.对氨基酚D.酮体E.苯甲酸第三十九页，共四十五页。4、下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者（A）A.乙酰水杨酸B.对氨基水杨酸钠C.对乙酰氨基酚D.普鲁卡因E.苯佐卡因第四十页，共四十五页。5、亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有（BCDE）A.自身指示剂法B.内指示剂法C.永停法D.外指示剂法E.电位法第四十一页，共四十五页。6、亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠的含量时，指示滴定终点的方法为（C）A.自身指示终点法B.电位法指示终点C.永停滴定法D.氧化还原指示剂法E.酸碱指示剂法第四十二页，共四十五页。7、盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是（ABCDE）A.强酸B.加入适量溴化钾C.室温（10～30℃）下滴定D.滴定管尖端深入液面