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文档简介
2023学年高考生物模拟试卷注意事项:1.答题前,考生先将自己的姓名、准考证号填写清楚,将条形码准确粘贴在考生信息条形码粘贴区。2.选择题必须使用2B铅笔填涂;非选择题必须使用0.5毫米黑色字迹的签字笔书写,字体工整、笔迹清楚。3.请按照题号顺序在各题目的答题区域内作答,超出答题区域书写的答案无效;在草稿纸、试题卷上答题无效。4.保持卡面清洁,不要折叠,不要弄破、弄皱,不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1.大肠杆菌拟核DNA是环状DNA分子。将无放射性标记的大肠杆菌,置于含3H标记的dTTP的培养液中培养,使新合成的DNA链中的脱氧胸苷均被3H标记。在第二次复制未完成时将DNA复制阻断,结果如下图所示。下列对此实验的理解错误的是A.DNA复制过程中,双链会局部解旋B.Ⅰ所示的DNA链被3H标记C.双链DNA复制仅以一条链作为模板D.DNA复制方式是半保留复制2.下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是()A.胰蛋白酶能消化细胞中的胶原纤维和其他成分,获得单细胞悬液B.动物细胞只能贴壁生长,不能进行悬浮培养C.细胞进行一次传代培养所需时间等于一个细胞周期的时间D.能连续传代的细胞通常具有异倍体核型,其贴壁性下降3.森林群落中由于老龄树木死亡造成林冠层出现空隙,称为林窗。研究者调查了某森林中林窗下与林下的土壤动物群落,得到如图所示的结果。据此可以推断出()A.在各层次中林窗的土壤动物丰富度均高于林下B.林窗下和林下土壤动物种类均随深度的增加而增加C.光照只影响土壤动物群落的水平结构D.林窗下和林下不同层次的土壤动物种群密度相同4.假如你在研究中发现一种新的单细胞生物并决定该生物属于原核生物还是真核生物,则以下哪种特性与你的决定无关?()①核膜的有无②核糖体的有无③细胞壁的有无④膜上磷脂的有无A.①③ B.②④ C.①④ D.②③5.科学家利用拟南芥野生型个体和突变体研究赤霉素和脱落酸的作用,实验处理及结果如下表所示(MS培养基是多数植物组织培养的基本培养基)。下列相关叙述错误的是()实验材料野生型个体突变体实验处理MS培养基MS培养基+一定量赤霉素拮抗剂MS培养基+一定量脱落酸MS培养基MS培养基+一定量赤霉素MS培养基+一定量脱落酸种子萌发与否A.突变体体内的赤霉素合成可能异常B.赤霉素与脱落酸在实验过程中作用相反C.实验证明赤霉素有促进植物细胞伸长的作用D.加入脱落酸后拟南芥种子不萌发主要是因为外源脱落酸的抑制作用6.某植物花的红色和白色受多对等位基因控制,用该种植物的三个基因型不同的红花纯系(甲、乙、丙)分别与白花纯系杂交,其子一代都开红花,子二代都出现了白花植株,且红花和白花的比例分别为15:1、63:1、4095:1。下列描述正确是()A.这对相对性状至少受5对等位基因控制B.只有当每对基因都有显性基因存在时才表现为红色C.让甲和乙杂交,其子二代开白花概率的最大值是1/64D.让甲与白花纯系杂交的子一代测交,其子代红花:白花为3:17.下图为一只果蝇两条染色体上部分基因分布示意图,下列叙述不正确的是()A.朱红眼基因cn、暗栗色眼基因cl为一对等位基因B.在有丝分裂后期,基因cn、cl、v、w会出现在细胞的同一极C.在减数第二次分裂后期,基因cn、cl、v、w可出现在细胞的同一极D.在有丝分裂中期,X染色体和常染色体的着丝点都排列在赤道板上8.(10分)叶绿体中的色素为脂溶性,液泡中紫红色的花青苷为水溶性。以月季成熟的紫红色叶片为材料,下列实验无法达到目的的是A.用无水乙醇提取叶绿体中的色素B.用水做层析液观察花青苷的色素带C.用质壁分离和复原实验探究细胞的失水与吸水D.用光学显微镜观察表皮细胞染色体的形态和数目二、非选择题9.(10分)基因工程目前已成为生物科学的核心技术,在农牧业、工业、医药卫生等方面有良好的应用前景。回答下列问题:(1)基因表达载体中的复制原点,本质上是一段富含A—T碱基对的DNA序列,它易与引物结合而成为复制起点的原理是____________。启动子与复制原点的化学本质____________(填“相同”或“不同”),启动子功能的含义主要是________________________。(2)利用PCR技术扩增目的基因,可在PCR扩增仪中进行的三步反应是____________。若在PCR扩增仪中加入模板DNA分子100个,则经过30次循环后,DNA分子数量将达到____________个。(3)植物基因工程技术主要用于提高农作物的抗逆能力,如抗虫性、抗病性等。我国的抗虫棉就是通过____________法导人抗虫基因____________基因培育成功的;抗病毒的转基因小麦是导入抗病毒基因培育的,使用最多的抗病毒基因有________________________。10.(14分)一般信息传递有三个基本环节:信息产生(信源)、信息传输(信道)、信息接收(信宿)。任何一个环节出现问题,都会导致信息传递失败。(1)尿崩症患者水分调节过程中信息传递出现问题,临床上表现为排出大量低渗尿液。可分为两类情况:一类是信源环节出现问题,发病原因是由于_____________分泌的抗利尿激素的量不足所致。另一类是信宿环节出现问题,病因是_____________,而使抗利尿激素不能发挥作用。(2)生态系统中有些昆虫的雌性个体能释放性外激素吸引雄性个体,这类信息属于_____________信息。有科学家发现,如果将雄性昆虫的触角切除,两性个体间不能再通过这种方式传播信息,这属于破坏了信息传递的_____________环节。农林生产中可以利用生态系统信息传递的作用来防治害虫,例如人们利用性外激素诱杀雄虫,以达到防治害虫的效果。请分析其中的生物学原理__________________________。11.(14分)回答下列(一)、(二)小题:(一)开发山楂果醋恰好让山楂中的有机酸丰富了果醋的酸味,同时也弥补生食山楂酸味大的缺陷,具体酿制山楂果醋分为以下三个阶段,请将具体过程补充完整。(1)制备山楂果原汁:选成熟的山楂果,在清水冲洗山楂果_______(填“之前”或“之后”)去梗。将山楂果切片并去籽,再添加_______,酶解适宜时间后压榨取果汁。(2)乙醇发酵:由于山楂果原汁_______,故发酵液中添加适量蔗糖,以获得酒精含量较高的果酒。果汁中加入活化的________后,在适宜环境下发酵一段时间,当发酵液中停止_______,发酵完毕待过滤,或发酵至_______,上清液即为果酒,用虹吸法取出。(3)醋酸发酵:将醋化醋杆菌进行扩大培养后,经检查菌体生长正常并无杂菌污染后接种于山楂酒-水中进行发酵,整个发酵过程需要通入_______。在发酵后期加入1.3~1.4%的食盐,其目的是调味和_______,以防止果醋被发酵分解。(二)下图为转基因抗虫烟草的培育流程,①②③④表示过程,其中②表示利用农杆菌转入受体细胞。回答下列相关问题:(1)在①过程构建重组质粒时,若用同一种限制性核酸内切酶处理Ti质粒和含目的基因的DNA片段,使两者形成粘性末端用于拼接,这种方法的明显缺点是目的基因和质粒________(答出2点即可)。另外,影响拼接效率的主要因素,除以上缺点和盐离子浓度、渗透压、温度等环境因素外,还有_______(答出2点即可)。(2)在②过程中,将图示重组Ti质粒导入农杆菌时可用______处理农杆菌,以提高转化效率。操作之后,需要特定的培养基对农杆菌进行筛选,其原因是_______,最终筛选到的对象在相应选择培养基上的存活情况是________。(3)在③过程常通过调节_______的适当配比,从愈伤组织诱导出芽和根的_____,并由此再生出新植株。获得转基因烟草后,再通过[④]_______过程实现多个世代组织培养。12.一个由英国伦敦帝国学院和芬兰图尔库大学的科学家组成的研究小组日前开发出一种通过大肠杆菌制造丙烷的新技术。科研人员要对大肠杆菌进行研究和利用,需要对大肠杆菌进行培养、分离、鉴定与计数等,请结合所学知识,回答下列问题:(1)培养基配制时需要对培养基进行灭菌,采用的方法是_____________,实验室常用的三种消毒方法的名称是__________________________。在接种前通常需要检测固体培养基是否被污染,检测的方法是__________________________。(2)图1所示的方法是_____________,对分离得到的大肠杆菌可通过观察菌落的_____________进行形态学鉴定。在5个平板上分别接入1.1mL稀释液,经适当培养后,5个平板上菌落数分别是19、61、64,65和66,则1g土壤中的活菌数约为___________个。(3)图2是某同学利用不同于图1方法分离菌株的示意图。下列对其操作的叙述正确的有_____________。a.操作前用无水乙醇对双手进行消毒处理b.不能将第⑤区域的划线与第①区域的划线相连c.整个过程需要对接种环进行6次灼烧d.平板划线后培养微生物时要倒置培养
2023学年模拟测试卷参考答案(含详细解析)一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、C【答案解析】
DNA分子的复制:1、时间:细胞分裂时;2、条件:①模板:亲代DNA的两条链;②原料:4种游离的脱氧核苷酸;③能量:ATP;④酶:解旋酶和DNA聚合酶;3、特点:边解旋边复制、半保留复制。【题目详解】A、DNA复制过程中,边解旋边复制,A正确;B、Ⅰ所示的DNA链是在含3H标记的dTTP的培养液中复制形成的,所以均被3H标记,B正确;C、双链DNA复制以两条母链作为模板,分别合成与母链互补的两条子链,C错误;D、DNA复制方式是半保留复制,每个新合成的DNA分子都保留有一条母链,D正确。故选C。2、D【答案解析】
动物细胞培养的流程:取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。【题目详解】A、胰蛋白酶能消化细胞间的胶原纤维和其他成分,获得单细胞悬液,A错误;B、动物细胞可以贴壁生长,也能进行悬浮培养,B错误;C、传代培养的实质就是分离后再次培养,进行一次分离再培养称之为传一代,因此细胞进行一次传代培养所需时间应该大于一个细胞周期的时间,C错误;D、能连续传代的细胞通常具有异倍体核型,其贴壁性下降,D正确。故选D。3、A【答案解析】
分析柱形图:随着枯落物层的深度的增加,土壤动物种类数逐渐减少,但林窗和林下不同层次的土壤动物种群密度不相同,在各层次中林窗的土壤动物丰富度均高于林下。【题目详解】A、由图可知,在各层次中林窗的土壤动物丰富度均高于林下,A正确;B、由图可知,林窗和林下土壤动物种类随深度的增加而减少,B错误;C、随着枯落物层的深度的增加,土壤动物种类数逐渐减少,由此可知光照明显影响了土壤动物群落的垂直结构,C错误;D、由图可知,林窗和林下不同层次的土壤动物种群密度各不相同,D错误。故选A。4、B【答案解析】
原核细胞和真核细胞的异同:比较项目原核细胞真核细胞大小较小较大主要
区别无以核膜为界限的细
胞核,有拟核有以核膜为界限的细胞核
细胞壁有,主要成分是糖类
和蛋白质
植物细胞有,主要成分是
纤维素和果胶;动物细胞
无;真菌细胞有,主要成
分为多糖
生物膜系统无生物膜系统有生物膜系统细胞质有核糖体,无其他细
胞器有核糖体和其他细胞器
【题目详解】①核膜的有无是判断真核生物与原核生物重要依据,①正确;
②真核生物和原核生物都有核糖体,与确定生物类型无关,②错误;
③除支原体外,原核生物都有细胞壁,而真核生物中动物细胞无细胞壁,植物的细胞壁的成分与原核生物的细胞壁的成分不同,所以细胞壁可以作为判断真核生物与原核生物的依据,③正确;
④真核生物和原核生物细胞膜上都有磷脂,不能作为判断依据,④错误。
故选B。5、C【答案解析】
实验结果分析:野生型拟南芥种子能在MS培养基上萌发,而不能在MS培养基+一定量GA拮抗剂的培养基上萌发,说明一定量GA拮抗剂抑制种子萌发;拟南芥突变体1不能在MS培养基上萌发,但可以在MS培养基+一定量GA培养基上萌发,说明GA可以促进突变体1种子的萌发。野生型拟南芥种子不能在MS培养基+一定量ABA培养基上萌发,说明一定量ABA抑制种子萌发,并且GA拮抗剂与ABA具有相同作用。【题目详解】A、突变体在缺少赤霉素的培养基上种子不能萌发,而添加赤霉素后可以萌发,说明突变体体内的赤霉素合成可能异常,A正确;B、从突变体在分别添加赤霉素和脱落酸的培养基上的萌发情况看出,赤霉素与脱落酸在实验过程中作用相反,B正确;C、从图中看出赤霉素可以促进种子萌发,C错误;D、加入脱落酸后拟南芥种子不萌发主要是因为外源脱落酸的抑制作用,D正确。故选C。【答案点睛】本题主要考查影响植物激素作用的相关因素,学生需要对实验数据和表格数据的进行综合分析,结合植物激素的作用进行解答。6、D【答案解析】
本题考查基因自由组合定律的相关知识。根据题意分析可知:甲、乙、丙不同的红花纯系分别与白花纯系杂交,在所有的杂交组合中,子一代都开红花,子二代都出现了白花植株,遵循基因的自由组合定律。由于子一代均开红花,因此红花为显性性状。【题目详解】A、由分析可知,控制花色的基因遵循基因的自由组合定律,红花和白花的比例分别为15:1、63:1、4095:1,说明只有纯隐性个体才会表现为白花;子二代中红花和白花的比例为15:1时,说明子一代有2对基因是杂合的;子二代中红花和白花的比例为63:1时,说明子一代有3对基因是杂合的;子二代中红花和白花的比例为4095:1也就是(1/4)6=1/4096时,说明子一代有6对基因是杂合的,A错误;B、由以上分析可知,只要所有等位基因中任何一对有显性基因存在就会表现为红色,B错误;C、让甲和乙杂交,如果两个体的显性基因均不同,由以上分析可知,则不同的显性基因有2+3=5对,则子二代开白花的概率的最大值是(1/4)5=1/1024,如果有相同的显性基因,则没有开白花的个体,C错误;D、让甲与白花纯系杂交,子一代有2对基因是杂合的,子一代测交,其子代红花:白花为3:1,D正确。故选D。7、A【答案解析】
据图分析,图示常染色体和X染色体为非同源染色体,两者含有的基因均为非等位基因,其中朱红眼基因和暗栗色基因都位于常染色体上,辰砂眼基因、白眼基因都位于X染色体上。【题目详解】A、朱红眼基因cn、暗栗色眼基因cl位于同一条染色体上,为非等位基因,A错误;B、有丝分裂后期,着丝点分裂,子染色体移向细胞两极,细胞中具有两套完全相同的基因,两极都含有与亲本相同的遗传物质,因此,基因cn、cl、v、w会出现在细胞的同一极,B正确;C、图示常染色体和X染色体为非同源染色体,在减数第一次分裂结束后可能会移向同一个子细胞,因此在减数第二次分裂后期,基因cn、cl、v、w可出现在细胞的同一极,C正确;D、在有丝分裂中期,所有染色体的着丝点都排列在赤道板上,D正确。故选A。8、D【答案解析】
A、由于叶绿体中色素为脂溶性,可用无水乙醇提取,A正确;B、花青苷为水溶性,可用水做层析液,B正确;C、月季成熟的紫红色叶片含有紫红色的大液泡,可发生质壁分离和复原,则可用质壁分离和复原实验探究细胞的失水与吸水,C正确;D、表皮细胞高度分化,不能分裂,不能用光学显微镜观察其染色体的形态和数目,D错误。故选D。【定位】色素,提取,质壁分离和复原【答案点睛】本题主要考查色素提取和分离以及质壁分离和复原的知识。要求学生结合题干信息脂溶性和水溶性来判断色素的提取和分离方法。二、非选择题9、A-T碱基对多,相对氢键少,DNA易解旋相同启动子驱动基因转录成mRNA高温变性,低温退火、中温延伸100×230花粉管通道Bt毒蛋白病毒外壳蛋白基因和病毒的复制酶基因【答案解析】
基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。PCR一般要经历三十多次循环,每次循环可分为变性、复性、延伸三步。在循环之前,常需要进行一次预变性,以便增加大分子模板DNA彻底变性的概率。PCR过程为:变性,当温度上升到90℃以上时,氢键断裂,双链DNA解旋为单链。复性,当温度降低到50℃左右时,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。延伸,温度上升到72℃左右,溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。【题目详解】(1)基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因、标记基因和复制原点等,所以复制原点和启动子化学本质相同,都是一段特定的DNA序列。已知复制原点中含A-T碱基对多,因此含氢键少,结构不稳定,易解旋,可做为复制的起点,而启动子是驱动基因转录成mRNA的。(2)PCR技术扩增目的基因包括三步反应:高温变性(氢键断裂)、低温退火(复性)形成氢键和中温延伸形成子链。PCR扩增仪可以自动调控温度,实现三步反应循环完成。PCR技术扩增目的基因的原理是DNA双链复制,结果使DNA呈指数增长,即2n(n为扩增循环的次数),所以100个DNA分子,30次循环,使DNA数量可达到100×230个。(3)植物基因工程培育抗虫抗病等转基因植物用到的抗虫基因有Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因等,我国的抗虫棉就是利用花粉管通道法导入Bt毒蛋白基因培育的;抗病毒基因有病毒外壳蛋白基因和病毒的复制酶基因。【答案点睛】基因表达载体的构建是基因工程的关键步骤,熟知基因表达载体中各部分的结构和功能是解答本题的关键,最后一问提醒学生要关注生物科学的新进展。10、下丘脑肾脏相应细胞表而缺乏受体(肾脏相应细胞表而受体对抗利尿激素不敏感)化学信息接收(信宿)通过大量诱杀害虫的雄性个体,破坏害虫种群正常的性别比例,使很多雌性个体不能完成交配,降低出生率,从而使该种害虫的种群密度明显降低,以达到防治害虫的效果【答案解析】
1、生态系统中信息的类型(1)物理信息:生态系统中的光、声、颜色、温度、湿度、磁力等,通过物理过程传递的信息。(2)化学信息:生物在生命活动过程中,产生的一些可以传递信息的化学物质。(3)行为信息:是指某些动物通过某些特殊行为,在同种或异种生物间传递的某种信息。2、信息传递在生态系统中的作用(1)个体:生命活动的正常进行,离不开信息的作用。(2)种群:生物种群的繁衍,离不开信息传递(3)群落和生态系统:能调节生物的种间关系,维持生态系统的稳定。【题目详解】(1)尿崩症患者水分调节过程中信息传递出现问题,可分为两类情况:一类是信源环节出现问题,发病原因是由于下丘脑分泌的抗利尿激素的量不足所致。另一类是信宿环节出现问题,肾脏相应细胞表而缺乏受体(肾脏相应细胞表而受体对抗利尿激素不敏感),而使抗利尿激素不能发挥作用。(2)生态系统中有些昆虫的雌性个体能释放性外激素吸引雄性个体,这类信息属于化学信息。如果将雄性昆虫的触角切除,两性个体间不能再通过这种方式传播信息,这属于破坏了信息传递的信息接收环节。农林生产中通过大量诱杀害虫的雄性个体,破坏害虫种群正常的性别比例,使很多雌性个体不能完成交配,降低出生率,从而使该种害虫的种群密度明显降低,以达到防治害虫的效果。【答案点睛】本题考查个体和生态系统层次信息传递相关知识点,掌握相关知识结合题意答题。11、之后果胶酶(和果胶甲酯酶)含糖量较低干酵母(悬液)出现气泡酵母下沉无菌空气/氧气抑制杂菌反向拼接/倒接、(自身)环化且的基因的浓度、质粒的浓度、反应时间氯化钙CaCl2不是所有的农杆菌都接纳了重组质粒在含四环素培养基上存活,在含青霉素培养基上死亡营养物质和生长调节剂/植物激素项端分生组织继代培养【答案解析】
1.酿酒和制醋是最古老的生物技术。与酒和醋的生产有关的微生物分别是酵母菌和醋杆菌,它们各有不同的菌种。菌种的不同,所产生的酒和醋的风味也不同。本实验的内容是制作果酒和果醋,所用的原料是葡萄或其他果汁。葡萄酒是酵母利用葡萄糖进行酒精发酵(乙醇发酵)的产物。酵母菌只有在无氧条件下才能进行酒精发酵,即将葡萄糖氧化成乙醇,而且当培养液中乙醇的浓度超过16%时,酵母菌就会死亡。葡萄糖氧化成乙醇的反应式如下。醋杆菌在有氧条件下才能将乙醇氧化为醋酸,醋杆菌所产生的醋酸可使培养液中醋酸的含量高达13%。2.基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成.(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等.(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法.(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等.【题目详解】(一)(1)制备山楂果原汁通常选成熟的山楂果,为了避免杂菌污染,通常在用清水冲洗山楂果之后去梗。将山楂果切片并去籽,为了提高出汁率和澄清度,通常需要添加果胶酶(和果胶甲酯酶)处理,酶解适宜时间后压榨取果汁。(2)乙醇发酵时通常需要在发酵液中添加适量蔗糖,以弥补山楂果原汁含糖量较低的不足,同时也是为了满足酵母菌发酵需要的底物量,从而获得酒精含量较高的果酒。然后在果汁中加入活化的干酵母(悬液)后,置于适宜环境下进行发酵,由于酵母菌无氧呼吸的产物是酒精和二氧化碳,所以在发酵过程中会有气泡产生,当发酵液中不再出现气泡时,意味着发酵完成,然后过滤获得果酒;也可发酵至酵母下沉后,用虹吸法取出上清液即为果酒。(3)醋酸发酵中,由于醋化醋杆菌在有氧气的条件下将酒精变为为乙醛,进而变为乙醇,所以整个发酵过程需要通入无菌空气/氧气。在发酵后期加入1.3~1.4%的食盐,食盐起到了调味和抑制杂菌的作用,进而防止果醋被其他微生物发酵分解。(二)(1)①为构建基因表达载体的过程,若用同一种限制性核酸内切酶处理Ti质粒和含目的基因的DNA片段,则两者会出现相同的粘性末端从而使得拼接变得容易,但这种方法存在明显的缺点是在拼接时会出现反向拼接/倒接、(自身)环化等情况。影响拼接效率的因素主要有盐离子浓度、渗透压、温度等环境因素,除此外,还有且的基因的浓度、质粒的浓度和反应时间也会影响拼接的效率。(2)②过程为将目的基因导入受体细胞的过程,将图示重组Ti质粒导入农杆菌时,为了提高导入的成功率,可用氯化钙CaCl2处理农杆菌,以提高转化效率。因为导入的成功率较低,也就是说,并不是所有的农杆菌都接纳了重组质粒,可能有的导入的是普通质粒,或者没有导入成功,所以需要在特定的培养基对农杆菌进行筛选,由于图中重组质粒上含有标记基因四环素抗性基因,而抗青霉素的基因被破坏,为了筛选出成功导入重组质粒的农杆菌,需要将待筛选的农杆菌分别接种在含有四环素的培养基和含青霉素的培养基上进行筛选,最终筛选到成功导入重组质粒的农杆菌
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