分析化学下册课件8hplc

1一、输液系组成：储液瓶、高压输液泵、过滤器往复泵结构示第二节高效液相色谱输液进样分离检测HPLC与气相色谱比气相色相分析对操作温HPLC与经典液相色谱1一、输液系组成：储液瓶、高压输液泵、过滤器往复泵结构示第二节高效液相色谱输液进样分离检测HPLC与气相色谱比气相色相分析对操作温HPLC与经典液相色谱比经典液相色柱1-3cm（玻璃2-6mm（不锈钢固定<均匀（球型相驱动方重高压输分析时周期周期效柱效柱效检测方无 检检操作方纯手可自动第一节概HC是007HighPerformanceLiquidChromatogra 2（一）紫外-可见检2（一）紫外-可见检用于在紫外可见光区有吸收的样灵敏对温度、流速和 四、检测系紫外可见检测荧光检测电化示差折光检测蒸发光散射检测三、分离系统-色谱材料：不锈钢柱管（耐高压形状长度：长10～30cm，内径2～5mm（分析 固定相粒度：1～10m（分析预保存：冲净密六通针头式微孔滤 进样注：样品需使用微孔滤膜过定量二、进样系统-六通进六通阀工作原载样位置（load）进样位置输液等度洗脱梯度洗脱输液泵使用注防止任何固体进入泵—— 相过滤 过相不能含腐蚀性物防 相被用不得超过最高3检测构第三节固定相 一、HPLC类3检测构第三节固定相 一、HPLC类 液固色吸附色亲和色2、二极管阵列检测（二）紫外-可见检测器1、可变波长检测类似紫外可见分4三 （一 相的要求4三 （一 相的要求①不与固定相发生反②对试样有一定的溶③必须与检测器相适④纯度⑤粘度⑥使用前，须过滤并2化学键合相特点和使用注意事特使用过程中固定相不流化学稳定性通过改变键合官能团的类型来改变分离选择性 相中水相 2-8，避免硅胶溶不同厂家、不同批号的同一类键合相可能有不同的色谱性弱极极性键合氨基(≡Si(CH2)3NH2)通常作为正相色谱固定相，也可用于反相色（1）非极性键合相（反相色谱键合相（C18或ODS）应用分离样品：非极性（一）化学键合将固定液通过化学反应键合到载体表面，这样制得的固定相称为化载体：硅键合相种类：正相、反相、离子交换、手性、亲正相键合相色 ase,NP）反相键合相色 ase,二、固定相（填料液固吸附色谱法-硅胶、高分子微固定液液分配色谱化学键合5一、涡流扩散项A=5一、涡流扩散项A=HPLC中减小涡流扩散的措施第四节分离条件的选高效液相色谱中的速率理论同气相色谱理HAB/u梯度洗脱优缺改善分离,加快分析速度改善峰形,减少拖尾可能引起基线（三）洗脱方 （二 相的选正相色谱：石油醚、醇类、酮类、酯类、卤代烷及反相色谱①以水为主体，加入甲醇、乙腈甲醇-水、乙腈②可用弱酸、弱碱或者缓冲盐调节值，抑制组分解离，增 相的过滤-除去过滤方法：使用水相或有机 相脱方法：超声波、抽真空、加热 6三、分离方法的选择 6三、分离方法的选择 二、定量分①外标②内标第五节高效液相色谱分析方一、色谱鉴定保留时间、保留体积、相对保留值、已知物对化学鉴定法-收集柱后馏联用HPLC合适的分离条件粒度、均匀的球形化学键合②低