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文档简介
第二章显微镜光学仪器及其成像的基本原理光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第1页!一、基本的光学元件
光学元件是基于光的直线传播、光的折射、光的反射、以及对光的选择性吸收等规律,对光线进行调控操作的物理器件。最常见的有光学元件:透镜、反射镜、滤光片、光栅。在显微镜操作中也有时候需要用到不透光的挡光板。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第2页!透镜透镜是由透明物质(如玻璃等)制成的一种光学元件。透镜是显微镜技术中应用最多的光学元件,可以分为凸透镜、凹透镜、棱镜和平面透镜等除了有时候利用平面镜对光线的直线传播外(如照相机镜头的保护镜片、载物玻片),透镜一般都是利用光的折射,所以又称折射镜,其折射面是两个球面,或一个球面一个平面、或两个平面。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第3页!凸透镜和凹透镜单个具有球面的透镜一般可以分为两大类:凸透镜和凹透镜。凸透镜具有会聚光线的作用,所以也叫会聚透镜。凹透镜具有发散光线的作用,所以也叫发散透镜。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第4页!透镜组合放大镜是最简单的视野放大设备,只由一个凸透镜组成。即使最简单的普通光学显微镜都是由多个光学元件组成。透镜的组合有多种多样,可以满足人们不同的需要。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第5页!棱镜:出射线和入射线之间的交角称为偏向角作用:改变光路-便于观察;色散分光-便于得到所需的单色光。顶角A偏向角光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第6页!平面镜成像:光在平面界面上的反射和折射
,还可以用来成像,不过它不能起到放大作用。
成象规律:①物象关于镜面对称、等大、旋性相反②物空间、象空间重合,用途:主要用于改变光的行进方向和成象位置SS’光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第7页!1、主光轴、光心、透镜两球面的球心的连线称为透镜的主光轴,简称主轴,主轴与透镜的交点称为光学中心,简称为光心。包含主轴的任一平面,称为主截面,透镜都制成圆片形,而以主轴为对称轴。圆片的直径称为透镜的孔径。物点在主轴上时,由于对称性,任一主截面内的光线分布都相同,故通常只研究一个主截面。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第8页!2、焦点、焦平面、一束平行于主轴的光线入射到正透镜上,经过透镜的折射光线将会聚到主轴上某点,然后再以锥状的扩散开来,这个聚集所有光线的一点,就叫做焦点。透镜的焦点有两个(根据光路可逆原理),物方焦点和像方焦点,分用F和F′表示。从透镜中心到焦点的距离称为镜头的焦距。物方焦点到透镜的距离称为物方焦距,用f表示。像方焦点到透镜的距离称为像方焦距,用f′表示。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第9页!通过焦点并垂直于光轴的平面为焦平面。平行于光轴的光线汇集于焦点,其他平行光束汇集于焦平面上。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第10页!3、弥散圆在焦点前后,光线开始聚集和扩散,如果在这些地方放上光屏,得到点的影象变成模糊的,形成一个扩大的圆,这个圆就叫做弥散圆。当弥散圆的尺寸达到一定程度后,人眼将认为其是模糊的。如果弥散圆的直径小于人眼的鉴别能力,在一定范围内实际影象产生的模糊是不能辨认的。这个刚好能够辨认的弥散圆就称为容许弥散圆。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第11页!焦点深度光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第12页!4、景深通常,凸透镜的曲率决定了它的焦距。成像平面和透镜中心的距离(像距)决定了能够在焦平面上清晰成像的景物的距离(物距)。光圈的大小决定进入镜头光的多少。只有位于物距处的景物才能在像平面上清晰成像:位于物距之前(近处)的景物成像于像平面之后;而位于物距之后(远处)的景物成像于像平面之前。如果景物不能再像平面上清晰成像,就会形成模糊的像:一个点会变成一个光斑。这个光斑的大小就决定了景深的范围。在显微技术中,我们制备生物材料的厚度要与显微镜的景深大小相适应。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第13页!景深随镜头的焦距、光圈值、拍摄距离而变化。对于固定焦距和拍摄距离,使用光圈越小,景深越大。以持照相机拍摄者为基准,从焦点到近处容许弥散圆的的距离叫前景深,从焦点到远方容许弥散圆的距离叫后景深。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第14页!影响景深的因素由景深计算公式可以看出,景深与镜头使用光圈、镜头焦距、拍摄距离以及对像质的要求(表现为对容许弥散圆的大小)有关。这些主要因素对景深的影响如下(假定其他的条件都不改变):(1)、镜头光圈:光圈越大,景深越小;光圈越小,景深越大;(2)、镜头焦距:镜头焦距越长,景深越小;焦距越短,景深越大;(3)、拍摄距离:距离越远,景深越大;距离越近,景深越小。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第15页!景深的应用效果图光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第16页!三、透镜成像原理、基本规律:显微镜和放大镜起着同样的作用,就是使近处的微小物体形成一个放大的像,以供人眼观察。只是显微镜比放大镜可以具有更高的放大率而已。当物体位于物镜前方,离开物镜的距离大于物镜的焦距,但小于两倍物镜焦距。所以,它经物镜以后,必然形成一个倒立的放大的实像A'B'。这个实相A‘B’再经目镜放大为虚像A‘’B‘’后,供眼睛观察。透镜是显微镜的最基本构造元件,了解透镜的成像原理是运用显微镜的前提。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第17页!薄透镜的作图求象法:利用经过两焦点和光心的三条典型光线中的两条画出象点的方法,都要在近轴条件下才成立。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第18页!凸透镜的成像可用公式计算法:1/S’-1/S=1/f’
透镜成像放大率计算公式:K=A’B’/AB=S’/S当K>0时正立、虚像K<0时倒立、实像|K|>1时放大像|K|=1时等大像|K|<1时缩小像光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第19页!光学系统实物成虚实象光学系统物空间像空间实物成实象光学系统虚物成实象光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第20页!四、透镜成像的像差从前面的讨论已知,理想光学系统对近轴物体发出的窄光束能理想成像,即每一个物点对应一个像点;每一个物平面对应一个像平面,而且系统对同一物平面上的点的横向放大率是一个常数。由于实际的光学系统中非近轴物点和非近轴光线也参与成像,因此实际像与理想像之间存在着偏差,这种偏差就是像差。像差可分为单色像差和色差两种。共轴系统的单色像差可分为球差、彗差、像散、场曲和畸变五种。色差是由于光学系统中的透镜材料对不同波长的光折射率不同产生色散而导致的像差。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第21页!色差和象差破坏了象的清晰度,但从能量方面视场广阔方面,物体不宜限于近轴范围以内。这就是说:一方面要求成象清晰,尽可能消除象差和色差。另一方面又要求象场广阔而明亮,这些常常不可兼得。如果要使象差越小,衍射就会越明显,衍射花样减小,象差又趋明显。两者又是不可分割的,这又是另一类矛盾成象清晰度与细节分辨程度的关系。为了使这些关系有一个适当的处理标准,人们就特别注意权衡光学仪器的放大本领,聚光本领和分辨本领这些方面的得失。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第22页!如下图,近轴光线的交点Q′P是近轴像点。边缘光线形成的像点Q′M和近轴象点Q′P之间的距离称为纵向球差。边缘光线与近轴像面的交点到近轴像点的距离叫横向球差。当Q′M点在Q′P点的左侧时,为负球差,反之为正球差。当有球差存在时,在任何位置都得不到一个理想的像点,即物点的像总是一个弥散圆。其中在Q′P和Q′M之间某一平面上有一个面积最小的弥散圆,它的亮度最大,这个弥散圆叫做明晰圆。轴上物点经共轴球面系统所成的像只存在球差。对单个透镜完全将球差消除是不可能的,但是可以设法使球差减小到最小限度。球差光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第23页!2、彗差即使消除了球差的共轴光学系统,对近轴物点发出的大孔径单色光束也不能理想成像于一点,而是成一锥形弥散斑,因其形状象拖着尾巴的彗星,所以叫彗差。彗差与球差引起的弥散斑不同,它的光斑对光束的主光线不对称。当我们用放大镜对太阳光聚焦时,只要把放大镜倾斜一些,就会看到已经聚好焦的亮点散开成为彗星状的弥散斑,这就是所说的彗差。慧差光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第24页!3、像散和像面弯曲即使在消除了球差和彗差的光学系统中,远离光轴的物点发出的细光束,经折射后仍不能成一个理想像点。单心光束经折射后成为像散光束,在近轴光线成像的像平面上可接收到椭圆形光斑。当接收屏向光学系统逐渐移近时,像斑由长椭圆变为在子午面内的竖线,称为弧矢焦线,而后变为圆斑,称为明晰圆,进而变为扁椭圆,又变为垂直于子午面的横线,称为子午焦线。上面所说的这种像差叫做像散。这里所说的子午面是指包含物点和主轴的平面。通常用弧矢焦线和子午焦线在主轴上的投影距离表示像散的大小。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第25页!4、畸变由于实际光学系统对于同一物平面上的各物点的垂轴放大率不等而使得物体的像发生形变的现象叫畸变。如果离轴越远的物点放大率越小,就会发生桶形畸变(正畸变);如果离轴越远的点放大率越大,则发生枕形畸变(负畸变)。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第26页!5、色差可见光是波长范围约400nm~760n的电磁波。不同颜色的光对应着不同的波长。所有的光学玻璃都是色散介质,即不同波长的光通过透镜后偏折的角度不同。所以,每种颜色的光各自成像,不同颜色的像其大小和位置是不一致的,这样引起的像差叫色像差,简称色差。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第27页!色差校正
光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第28页!人眼的结构水晶体中央窝直径约为2.4cm,透明角膜曲率半径约为8mm。外来光束过弱时,瞳孔直径可扩大到8mm。水晶体由折射率约为1.42的胶状透明物质所组成,构成一双凸透镜,前后两面的曲率半径分别约为10mm和6mm。由于睫状肌的松弛和紧缩,水晶体的表面的曲率可以改变。前房内有透明淡盐溶液,后房内有胶性透明液体,称为玻璃液。这两种液体的折射率均为1.33,与水的折射率相同。视网膜:当外面物体发出的光束进入眼内在视网膜上成像时,即由视神经传到大脑而形成视觉。中央窝。当眼睛观察物体时,眼球通常转到一适当位置,使所成的象恰好在黄斑点内中央窝处,因而所形成的视觉最为清晰。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第29页!人眼的调节功能眼对物体的大小感觉:是以物体在视网膜上所形成的象对光心的张角大小来衡量的。为了使不同距离的物体都能在网膜上形成清晰象,必须改变眼睛的焦距,人眼的调节主要借助于水晶体的作用。远点:(松驰)能看清楚的最远点。近点:(紧张)能看清楚的最近点。明视距离:适当的照明下,通常的眼观察眼前25cm处的物体不费力,而且能看清楚物体的细节。近视眼:远点在有限距离。(远点移近)远视眼:近点变远。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第30页!各种凸透镜和凹透镜中央部分比边缘部分厚的叫凸透镜,有双凸、平凸、凹凸三种;中央部分比边缘部分薄的叫凹透镜,有双凹、平凹、凸凹三种。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第31页!其他光学元件凸透镜和凹透镜是显微镜的主要光学元件。除此之外,利用棱镜、平面镜和反光镜等光学元件可以改变光路的特性,在复杂显微镜中是必不可少的。还有,滤光片、光栅是特殊显微镜的重要组成元件,在暗视野显微镜中还用到挡光板作为调节元件。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第32页!反光镜各种反光镜在显微镜中通常用来改变光路,使得成像便于人们的观察。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第33页!二、透镜成像的有关的概念
以显微镜物镜的成像原理为例来说明,先介绍几个概念:主光轴、光心、焦点、焦平面、弥散园、景深和屈光度。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第34页!透镜的厚度透镜两表面在其主轴上的间隔称为透镜的厚度。如果透镜的厚度比起两球面的曲率半径小得多,或者透镜的厚度对透镜的屈光度影响可以忽略不计,这种透镜称为薄透镜。若透镜的厚度与球面的曲率半径相比不能忽略,则称为厚透镜。理论研究以薄透镜为理想透镜来进行分析,而实际应用中常常要考虑透镜厚度带来的影响。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第35页!凸透镜的焦点是汇集光学聚集的实焦点,而通过凹透镜的光线是发散的,由发散光线的反向延长线汇集到一点为凹透镜的虚焦点。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第36页!焦点的简单测量方法:光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第37页!在用相机照相显微摄影时,通常要调焦,使得感光胶片处在的位置在焦点处,或焦点前后两个容许弥散园的范围内,这样得到的相片才是清晰的。在显微镜的光轴上有一段距离范围内物体被看得清晰。超出这段距离的物体就模糊不清。这段距离位于显微镜焦点的上下很小的范围之内。在焦点前后各有一个容许弥散圆,这两个弥散圆之间的距离是能够清晰成像的上下限叫焦点深度,也叫焦深。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第38页!焦深的运用一是使得我们的眼睛在前后一定范围内可以看清物体,便于我们在运用显微镜时代操作;二是在用胶卷进行显微摄影的时候,选用合适的胶卷。不同的胶片面积都有不同的容许弥散圆直径的数值定义。一般常用的是:例如以画面放大为5x7英寸的照片,观察距离为25~30cm前提,35mm照相镜头的容许弥散圆,大约是底片对角线长度的1/1000~1/1500左右。
画幅24mm
x
36mm6cm
x
9cm4cm
x
5cm弥散圆直径
0.035mm0.0817mm0.146mm光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第39页!如果一个场景中的一个点在像平面上形成的光斑不能被人眼分辨为多个点,那么这个点在场景中的位置就被认为在景深之内。从场景中物距对应的点出发,分别向前和向后测试,直到人眼认为成像点为模糊为止,这一前一后两点之间的距离称为景深。换言之,被摄体在景深范围内的前后纵深里,呈现在底片面的影象模糊度都在容许弥散圆的限定范围内。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第40页!景深的计算:下面是景深的计算公式。其中:δ为容许弥散圆直径,f为镜头焦距,F为镜头的拍摄光圈值,L为对焦距离,ΔL1为前景深,ΔL2为后景深。前景深ΔL1=FδL2/(f2+FδL)(1)后景深ΔL2=FδL2/(f2–FδL)(2)景深ΔL=ΔL2+ΔL2
=2f2FδL2/(f4-F2δ2L2)从公式(1)和(2)可以看出,后景深>前景深。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第41页!景深的控制:获取大景深的方法A换用焦距更短的镜头,使用广角端拍摄。由于一般消费级数码相机广角端焦距很小,在使用广角端时很容易获得大景深的效果;B缩小光圈,尽可能使用相机上的最小光圈,额外说一句,光圈的数值愈大,光圈愈小,如8.0的光圈小于3.5的光圈;C增大摄距,远离拍摄主体。获取浅景深的方法A换用焦距更长的镜头,使用长焦端拍摄;B使用最大光圈;C缩短摄距,靠近拍摄主体;光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第42页!5、屈光度球面镜片对光线的屈折能力大小用屈光度(屈光力、折射力)来衡量,用D表示。D=1/f′式中f′为像方焦距,单位:米D为屈光度,单位:度镜头的屈光度也是显微镜的一个基本参数。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第43页!透镜镜的成像原理:物体上各个点发生或反射的光线,经过透镜,都会形成相应的一个像点,这些像点重新组成物体的像。根据光线的传播规律,作图法一般利用三条特殊光线进行图解透镜的成像过程:a.平行主轴的入射光线折射后过像方焦距F′;b.过物方焦点F的入射光线折射后平行于主轴;c.过光心的入射光线,折射后方向不变。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第44页!如果物点在主轴上,三条典型的光线就合并成一条,这时用作图法确定象的位置必须利用焦平面的性质。在近轴条件下,通过物方焦点F与主轴垂直的平面叫做物方焦平面(相应的叫像方焦平面)。与主轴成一定倾角的入射平行光束,折射后会聚于象方焦平面上一点。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第45页!透镜成像基本规律:(1)当物体位于透镜物方二倍焦距以外时,则在象方二倍焦距以内、焦点以外形成缩小的倒立实象;(2)当物体位于透镜物方二倍焦距上时,则在象方二倍焦距上形成同样大小的倒立实象;(3)当物体位于透镜物方二倍焦距以内,焦点以外时,则在象方二倍焦距以外形成放大的倒立实象;(4)当物体位于透镜物方焦点上时,则象方不能成象;(5)当物体位于透镜物方焦点以内时,则象方也无象的形成,而在透镜物方的同侧比物体远的位置形成放大的直立虚象。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第46页!凹透镜成像原理:物体经薄凹透镜的成像位于像方焦点F′左方的。可以看出凹透镜成像图为图中A′B′并非光线实际会聚后所结成的影像,而人眼自凹透镜右方观察时的感觉,故为虚像。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第47页!像差球差象散慧差场曲负畸变正畸变光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第48页!1、球差入射到薄透镜上的平行于主光轴的单色光束,如果是近轴光线,则经过透镜折射后与光轴交于一点,为共轭点。如果不是近轴光线,而是大孔径光束,则折射光线与主轴的交点就不是一点了。例如凸透镜边缘的光线的聚焦点比近轴光线的聚焦点离透镜光心近一些;而凹透镜边缘的光线折射后的虚焦点离透镜光心要近一些。因此轴上物点发出的单色大孔径光束经透镜折射后不能再会聚于一点,即不能产生一个共轭像点,而将得到的是一个扩展的像斑。这样的像差叫球面像差,简称球差。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第49页!消除球差的方法当孔径和焦距固定后,球差的大小随物距和透镜形状而变。对于一个会聚透镜非近轴处的光线会偏折得过分利害,但是如果把一块透镜想象成为两块底部相连的棱镜,根据棱镜对光线偏折规律可知,当光线在表面的入射角与光线在第二表面的折射角大致相等时,光线的偏折将最小。因此平凸透镜的凸面对着平行入射光线要比平面对着平行入射光线产生的球差小。适当搭配透镜两个表面的曲率半径就可以减少球差,这种方法叫配曲法。消除球差的另一个方法叫做配对法。即利用凸凹透镜的恰当组合使某一高度的球差减少到零。这是由于凸透镜的球差是负的,凹透镜的球差是正的。因此把凸透镜和凹透镜粘合起来组成一个复合透镜,可以使某一高度的球差减小到零,其它高度的球差虽不能完全消除,但也要比单透镜小得多。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第50页!如图所示,近轴物点发出的单色大孔径光束入射在透镜上的光斑可将其分为一系列的同心环带。从同心环带中心通过的光线与理想像平面交于P′点,该点为理想像点。通过透镜不同环带的光线在像平面上交成一系列大小不等相互重叠的圆斑。半径越大的圆斑离P′点越远。这样在像平面上形成了彗星般的亮斑,可见产生彗差的原因是由于近轴物点发出的光束过粗而引起的。光学仪器及其成像的基本原理共57页,您现在浏览的是第51页!来自同一物平面上离轴远近不同的物点经光学系统折射成像其像散大小不同。物点离轴越远,像散越大。同一物平面上各物点的子午焦线构成了子午像面,同样它们的弧矢焦线构成了弧矢像面。一个物平面所对应的子午像面、弧矢像面和明晰圆的轨迹都是以主轴为对称轴的迥
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