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电话:400-998-2324邮箱:service_uplc_ms@163.com网址:本产品仅供科学研究使用!请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途!-上海液质检测技术有限公司第第页海藻糖酶(THL)活性检测试剂盒说明书可见分光光度法UPLC-MS-424150T/24S试剂名称规格保存条件提取液液体50mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体30mL×1瓶2-8℃保存试剂二粉剂×2支2-8℃保存试剂三液体30mL×1瓶2-8℃保存试剂四液体30mL×1瓶常温保存标准品粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制:11.2mL2-8℃110mg<0.2%)1mL10mg/mL标准4℃22-8℃4周;采用3,5THL3,5THLReducingSugar+DNS
Amino-2-Hydroxy-5-NitrobenzoicAcid注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。1mL/一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)15001mL提(203秒,关1030次800,1020.1g1mL8000g,4℃10min3浆0.1L浆.9L800g,二、测定步骤1、分光光度计预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。2、将10mg/mL标准液用蒸馏水稀释至1、0.8、0.6、0.4、0.2mg/mL,现用现配,标准液稀释可参考下表。序号稀释前浓度(mg/mL)标准液体积(µL)蒸馏水体积(µL)稀释后浓度(mg/mL)110100900121160400.831120800.641801200.451401600.2备注:实验中每个标准管需180µL标准溶液。3、样本测定(在1.5mLEP管中依次加入下列试剂):试剂名称(μL)对照管测定管标准管空白管样本180180--标准液--180-蒸馏水--180试剂一300220300300试剂二-80--置于37℃(哺乳动物)水浴锅/恒温水浴锅或25℃(其它物种)水浴锅中,准确反应时间10min试剂三400400400400试剂四400400400400105(5nAΔA=A-AΔA=A标准-A1-2三、THL活力计算1、标准曲线的建立y,gL)A(xAA(xAy,g2、按照蛋白浓度计算单位的定义:每mg组织蛋白在反应体系中每分钟催化产生1μg葡萄糖定义为一个酶活力单位。THL活力(U/mgprot)=1000×y÷Cpr÷T=100×y÷Cpr3、按样本质量计算单位的定义:每g组织在反应体系中每分钟催化产生1μg葡萄糖定义为一个酶活力单位。THL活力(U/g质量)=1000×y÷(W÷V样总)÷T=100×y÷W4、按细菌或细胞数量计算单位的定义:每1万个细菌或细胞在反应体系中每分钟催化产生1μg葡萄糖定义为一个酶活力单位。THL活力(U/104cell)=1000×y÷(500÷V样总)÷T=0.2×y5、按血清(浆)体积计算单位的定义:每mL血清(浆)在反应体系中每分钟催化产生1μg葡萄糖定义为一个酶活力单位。THL活力(U/mL)=1000
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