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电话:400-998-2324邮箱:service_uplc_ms@163.com网址:本产品仅供科学研究使用!请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途!-上海液质检测技术有限公司第第页甘油三酯(TG)含量检测试剂盒说明书货号:UPLC-MS-4399规格:100T/96S
微量法产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。试剂名称规格保存条件试剂一160mL×1瓶(自备)4℃保存试剂二液体10mL×1瓶4℃保存试剂三液体20mL×1瓶4℃保存试剂四液体5mL×1瓶4℃保存试剂五液体15mL×1瓶4℃保存试剂六液体15mL×1瓶4℃保存标准品粉剂×1瓶4℃保存溶液的配制:1、试剂一:自备玻璃空瓶,正庚烷和异丙醇按体积比1:1混合,盖紧后混匀;2、标准品:临用前加5mL试剂一,即1mg/mL甘油三酯标准溶液,4℃保存。产品说明:TGTG,KOHTG后水解生成甘油及脂肪酸,过碘酸氧化甘油生成甲醛,在氯离子存在下甲醛与乙酰420nmTG含量成正比。技术指标:最低检出限:0.0372mg/mL线性范围:0.0625-3mg/mL注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。需自备的仪器和用品:可见分光光度计///96蒸馏水、玻璃空瓶。操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,8000g,4℃离心10min,取上清待测。2、细胞、细菌:先收集400-500万细胞或细菌到离心管内,离心弃上清,加1mL试剂一,超声波破碎1min(20%2s1s,8000g,4℃10min,取上清待测。3、血清(浆)等液体样本:直接测定。二、测定步骤分光光度计/30min420nm,蒸馏水调零。65℃。空白管标准管测定管标准液(μL)-120-TG待测液(μL)--120试剂一(μL)495375375试剂二(μL)75757530s3-5min30s3次,常温静30μLEP管中。甘油三酯含量测定:空白管标准管测定管上层溶液(μL)303030试剂三(μL)100100100试剂四(μL)303030充分混匀,65℃水浴3min,冷却试剂五(μL)100100100试剂六(μL)100100100充分混匀,65℃水浴15min,冷却200μL至微量玻璃比色皿/96420nmA空,AA(空白管和标1-2)三、TG计算公式血清(浆)中甘油三酯含量:TG含量(mg/dL)=C标准品×(A测-A空)÷(A标-A空)×100=100×(A测-A空)÷(A标-A空)C标准品:1mg/mL;100:单位换算系数,1dL=100mL。组织中甘油三酯含量:按样本蛋白浓度计算TG含量(mg/mgprot)=C标准品×V×(A测-A空)÷(A标-A空)÷(Cpr×V)=(A测-A空)÷(A标-A空)÷Cpr按样本质量计算TG含量(mg/g质量)=C标准品×V×(A测-A空)÷(A标-A空)÷W=(A测-A空)÷(A标-A空)÷WC标准品:1mg/mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;V:加入试剂一的体积,1mL。细胞、细菌中甘油三酯含量:TG含量(mg/104cell)=C标准品×(A测-A空)÷(A标-A空)÷细菌或细胞密度=(A测-A空)÷(A标-A空)÷细菌或细胞密度C标准品:1mg/mL;细菌或细胞密度:104cell/mL。注意事项:试剂盒中有易挥发性物质,实验过程中需佩戴手套和口罩,试剂瓶盖打开后应该及时盖紧
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