微生物学教研室-oweroinresena

微生物学教研室吕厚东

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肝炎病毒第二节乙型肝炎病毒

（hepatitisBvirus,HBV）我国感染现状：

我国是HBV感染的高发区（“国害”）

10%HBsAg携带者（1.3亿）

3000万慢性肝炎患者

30万/年死于肝癌及肝硬化

75～150万女性HBsAg携带者通过母婴传播使60～100万新生儿被感染。选择填空题:

我国是一个————大国（填一疾病名称）乙型肝炎1963年Blumberg在多次输血

的血友病患者中发现了一种

异常的抗原，称为澳抗。1968年才明确这种抗原与乙型

肝炎（简称乙肝）有关。1970年Dane在电子显微镜下观察到HBV的形态，并命名为Dane颗粒。1986年将其列入嗜肝DNA病毒科。Blumberg一、生物学特性形态与结构：病人血清中存在着3种形态病毒颗粒管形颗粒小球形颗粒Dane颗粒电镜下形态1.大球形颗粒又称Dane颗粒2.小球形颗粒3.管形颗粒HBV基因组:dsDNA：3.2Kb分为长链L（-）和短链S（+）（约为L链的50%至85%长），组成的不完全双链环状DNA，长链载有病毒蛋白质的全部密码。有4个开放读码框架(ORF)，分别称为S、C、P和X区2.HBV基因组结构pre-s1pre-s2SPCpre-cXHBVDNA3.2kbpre-S1pre-S1蛋白pre-S2pre-S2蛋白SHBsAgpre-CHBeAgCHBcAgPDNAPXHBxAg编码HBsAgpre-S2pre-S1+-前基因组逆转录HBV的复制方式：⑴吸附、穿入、脱壳，DNA进入肝细胞核⑵以-DNA为模板，修复+DNA的裂隙区⑶-DNA→2.1kbRNA→外衣壳蛋白3.5kbRNA→内衣壳蛋白及HBV-DNAHBV.swfHBV:ReplicationHBV3.5KBProvirusRTReplicateNuclear2.1KBHBV的抗抗原组成表面抗原HBsAg核心抗原HBcAge抗原HBeAgHBcAgHBsAgHBeAgDane颗粒-+表面抗原HBsAg存在于三型型颗粒中是HBV感感染的主要要标志分亚型（a,d/y,w/r））:adw、adr、ayw、ayr产生抗-HBsPreS1、PreS2抗原产生抗-PreS1和抗抗-PreS2HBV血清清型和基因因型的地理理分布基因型血血清型流流行行地区Aadw2,ayw1欧欧洲西北部部、美国、、非洲中部部Badw2,ayw1中中国大陆陆、台湾湾、日本本、印度度尼西亚亚越南Cadw2,adrq+,adrq-,ayr中中国大大陆、台台湾、日日本、韩韩国、越越南玻利尼西西亚Dayw2,ayw3地地中海地地区、印印度Eayw4非非洲洲西部Fadw4q-,adw2,ayw4非非洲中部部和南部部、玻利利尼西亚亚Gadw2法法国、美美国HBsAg的亚型adradwayrayw长江以北长江以南新疆、西藏、内蒙等核心抗原原HBcAg仅存在于于Dane颗粒中中不易在血血液中检检出可在感染染的肝细细胞表面面存在刺激机体体产生抗抗-HBc（IgG、、IgM）表明病毒毒在复制制e抗原HBeAg存在于Dane颗粒中中游离存在在于血液液中为病毒复复制及强强传染性性的指标标产生抗-HBeHBeAg可存存在于血血清中HBeAgHBcAg分泌到细细胞外切割、加加工表达HBV的的其它生生物学性性状培养黑猩猩动动物模型型用分子生生物学技技术的细细胞培养养成功抵抗力抵抗力强强于HAV对低温、、干燥、、紫外线线耐受不被70％乙醇醇灭活100℃℃10min可灭活HBV与与原发性性肝癌流行病学学方面:—HBsAg携携带者发发生肝癌癌的危险险性217倍动物模型型病毒分子子结构：：—x基因因→x蛋蛋白→反反式激活活作用二、致病病性与免免疫性传染源主要传染染源是患患者或无症状HBsAg携带带者HBsAg存在在于血液液、尿液液、精液液、唾液液、乳汁汁之中传播途径径血液、血血制品传传播母-婴传传播其它潜伏期:30~160dHBV的的致病机机制1.免疫疫低下：：HBsAg无无症状携携带者2.病毒毒变异：：逃逸免免疫3.细胞胞介导的的免疫损损伤：CTL①细胞免免疫功能能正常：：急性肝肝炎②细胞免免疫功能能低下：：慢性肝肝炎（胸腺肽、、干扰素素）③细胞免免疫反应应过强：：暴发性性肝炎(肝萎缩缩、黄疸疸、96h内死死亡）④免疫耐耐受：HBsAg无症症状携带带者4.免疫疫复合物物性的免免疫损伤伤：肝外外及肝脏脏损伤5.自身身免疫反反应的免免疫损伤伤：肝特异性性脂蛋白白(LSP)抗原三、微生生物学检检查法检测HBV抗原原、抗体体（乙肝五项项）HBsAg、抗抗-HBsHBeAg、抗抗-HBe(HBcAg)抗-HBcHBV抗原、抗抗体检测测结果的的临床分分析HBsAgHBeAg抗-HBs抗-HBe抗-HBc结果分析+----HBV感染或无症状携带者++---急性或慢性乙型肝炎，或无症状携带者++--+急性或慢性乙型肝炎（传染性强，“大三阳”）+--++急性感染趋向恢复（“小三阳”）--+++既往感染恢复期--++-既往感染恢复期----+既往感染或“窗口期”--+--既往感染或接种过疫苗恢复期急性期症状转氨氨酶酶异异常常潜伏伏期期HBsAgHBeAg抗-HBe感染染后后月月数数抗-HBc乙型型肝肝炎炎病病程程中中各各种种血血清清学学标标志志动动态态变变化化HBV标标志志滴滴度度0123456789抗-HBsHBVDNA四、、防防治治原原则则1.HBV疫苗苗预预防防：：(血源源性性、、基基因因工工程程08课课件件/genetic_engineering.swf、可可食食用用)2.HBIG预防防：：含高效效价价抗抗-HBs的的人人血血清清球球蛋蛋白白720406080100抗-HBs阳性率(%)136接种后月数数1针2针3针03.治疗：：⑴干扰素:IFN-，500万u/次次，3次/周，>6月⑵核苷类似似物：拉米呋啶（（lamivudine，3TC）：：终止前基因因组的合成成，但对肝肝细胞核内内cccDNA的合合成无作用用泛昔洛韦（（famciclovir））：阻碍HBVcccDNA的产产生，抑制制DNA多多聚酶，干干扰逆转录录过程苏拉明(suramin)：：具有抗逆转转录病毒的的活性，可可抑制HBVDNA的活性性，从而抑抑制HBV的复制⑶中草药：：黄芪、五味味子等提取取物唯有及时、准确、规范、足够的抗病毒治疗，病人才能有理想的预后。部分双链的DNA胞浆膜乙肝病毒的的复制拉米夫定的的抑制作用用细胞核细胞浆内质网拉米夫定A(n)有感染性的的HBV毒粒(-)-DNAmRNAcccDNA有感染性的的HBV毒粒有包膜的前基因组肝细胞转录逆转录HBsAg的囊膜抗原成分翻译第三节丙丙型肝炎病病毒（hepatitisCvirus，HCV）一、HCV的生物学学性状40～60nm球形形有包膜+ssRNAHCV的基基因结构：：+ssRNA、9.5kb，有9个基因区区组成HCV的基因型有有6种：Ⅰ~ⅥⅥⅠ型：欧美美流行ⅡⅡ~Ⅵ：亚亚洲，中国国---Ⅱ型HCV.swf结合囊泡融合与与病毒释放放RNA复复制正链负链翻译与多肽肽链加工脱壳与膜融合病毒装配与与成熟胞饮作用DavisGLetal.SeminLiverDis.1999;19(suppl1):103-112.HCV生生活周期CNS3NS4NS5E2NS2E101020304050变异率(%)7152225263638丙型肝炎病病毒不同基基因区的变变异率二、HCV的致病性性与免疫性性传播途径似似HBV是引起输血血后慢性肝肝炎和肝硬硬化的主要要原因潜伏期：4~8周周无症状HCV携带者者和慢性丙丙肝者多见见肝外损伤：：肾小球肾肾炎免疫力不牢牢固丙型肝炎的的特点我国丙肝病病毒携带者者的比例在在2%~5%随着年龄的的增长，丙丙肝病毒携携带率亦增增高易感人群感感染HCV后，慢性性化的比例例高达50%以上乙肝患者容容易重叠HCV感染染20位患者20%痊愈HCV感感染的预后后100位位HCV急性感感染80位患者80%持续感染24位患者30%稳定，慢性，无进展AdaptedfromAlterHF,SeeffLB.Semin

LiverDis.2000;20:17-35.28位患者28位患者56位患者接受抗病毒治疗持久性应答(50%)肝脏疾病终末期，肝细胞癌，肝脏移植，死亡治疗失败(50%)30%呈严重进展40%有不同程度的进展32位患者24位患者三、微生物物学检查法法检查病毒RNA：PCR检测抗-HCV：ELISA诊断、监测测方法HCV血清清学试验EIA检测测抗HCV、ImmunoblotassayHCV-RNA定性性试验PCR、TMAHCV-RNA定量量试验PCR、bDNAALT肝纤维化非非损伤试验验肝活检基因分型诊断丙肝感感染者和现现患病人的的最佳实验验室方法NationalInstituteofHealthConsensusDevelopmentConferenceStatement:ManagementofHepatitisC:2002-June10-12,2002四、防治原原则预防：由于HCV免疫原性性不强且易易变异，因因此疫苗的的研制较为为困难治疗：IFN-α第四节丁丁型肝炎病病毒（hepatitisDvirus，HDV）HDV是一一种缺陷病毒由HBsAg构成其其外壳HDV定位位于肝肝细胞胞核内内，在在血液液中由由HBsAg包包被，，形成成35~37nm颗颗粒-ssRNAHDV的结结构Rizzetto于于1977年首首先发发现，，又称称抗原（（HDAg）35~37nm球形形颗粒粒；-ssRNA，，1.7Kb含含9个个ORF35-37nm丁型肝肝炎的的特点点HDV感染染后可可表现现为急急性肝肝炎、、慢性性肝炎炎或无无症状状携带带者我国HD感感染率率在1.6%~5%，西西南地地区感感染率率高联合感染重叠感染慢性、、携带带者HBV+HDVHBV+HDV潜伏期期急性肝肝炎肝硬化暴发性性肝炎炎慢性丁丁肝（coinfection））（superinfection）微生物物学检检查及及防治治原则则微生物物学检检查：：HDAg、、抗-HD及HDV-RNA持续抗抗-HD(IgG)高高滴度度是慢慢性HDV感染染的主主要血血清学学标志志防治原原则：：丁型肝肝炎传传播途途经与与乙型型肝炎炎相似似防治原原则似似HBV第五节节戊戊型肝肝炎病病毒（hepatitisEvirus，，HEV））一、生生物学学性状状属于杯杯状病病毒科科球形，，无包包膜直径32～～34nm+ssRNA，，3个个ORF两个基基因型型（7.5kb）二、致致病性性及免免疫主要为为粪－口口途径径传播由胆汁汁经粪粪便排排出体体外对肝细细胞的的直接接损伤伤及免免疫病病理作作用多表现现为急急性戊戊型肝肝炎孕妇感感染常常致流流产或或死胎胎戊型肝肝炎的的特点点与甲型型肝炎炎相比比，患患者黄黄疸前前期症症状重重，病病程持持续时时间较较长，，病死死率较较高，，特别别是孕孕妇感感染HEV后。。戊型肝肝炎分分两种种：“流行行性””多多发生生在雨雨季和和洪水水后“散发发性””在在秋冬冬季呈呈现高高峰潜伏末末期至至发病病初期期传染染性强强，患患者的的隔离离期为为起病病后3周。。尚末发发现有有2次次发病病者。。三、微微生物物学检检查及及预防防检测HEV：RT-PCR检检测HEVRNA检测抗抗-HEVIgM预防：：一