基因工程测试题经典(完整资料)

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xｘxXXＸXX学校ＸXXＸ年学年度第二学期第二次月考ﻫXXX年级ｘx班级基因工程测试题经典(完整资料）(可以直接使用，可编辑优秀版资料，欢迎下载）姓名：____＿＿_______＿_班级:_____＿_________考号：_＿___________＿_题号一、选择题二、填空题三、综合题总分得分评卷人得分一、选择题（每空？分，共?分)1、下列有关基因工程和蛋白质工程的叙述，正确的是A．蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的Ｂ．基因工程合成的是天然存在的蛋白质，蛋白质工程合成的可以不是天然存在的蛋白质C.基因工程是分子水平操作,蛋白质工程是细胞水平(或性状水平）操作Ｄ．基因工程完全不同于蛋白质工程2、PＣR是一种体外迅速扩增DNＡ片段的技术，下列有关PCR过程的叙述,不正确的是A．变性过程中破坏的是ＤNA分子内碱基对之间的氢键B．复性过程中引物与DＮA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成Ｃ．延伸过程中需要DNＡ聚合酶、ＡTP、四种核糖核苷酸D.PＣＲ与细胞内DＮA复制相比所需要酶的最适温度较高3、35．采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。但是人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。下列有关叙述,正确的是(

）A．人体细胞中凝血因子基因的碱基对数目,小于凝血因子氨基酸数目的3倍B.可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵C．在该转基因羊中，人凝血因子基因只存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中D．人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA4、ch1Ｌ基因是蓝细菌拟核DNA上控制叶绿素合成的基因．为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失ch１L基因的变异株细胞。技术路线如图所示，对此描述错误的是(）A．ｃh１L基因的基本组成单位是脱氧核苷酸B。①②过程中使用的限制性核酸内切酶的作用是将ＤＮA分子的磷酸二酯键打开C.①②过程都要使用DNA聚合酶D.若操作成功,可用含红霉素的培养基筛选出该变异株5、下图表示基因工程中目的基因的获取示意图，不正确的是：Ａ、同种生物的基因组文库大于cDＮＡ文库B、③表示PCR技术，用来扩增目的基因C、从基因文库中要得到所需目的基因,可根据目的基因的有关信息来获取Ｄ、只要基因的核苷酸序列已知，就只能通过人工合成的方法获取6、图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有MspⅠ、BａｍHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ４种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为：Ｃ↓CGG、Ｇ↓GＡＴCC、↓GＡTC、CＣＣ↓GGG。下列分析中正确的是:A、若用限制酶ＭspⅠ完全切割图1中ＤNA片段,会破坏２个磷酸二酯键B、若图1所示DNA虚线方框内的碱基对被T-A替换，用限制酶SmaⅠ完全切割后会产生3种不同的DＮA片段C、若切割图2中的质粒以便拼接目的基因D应选择限制酶BamHⅠ和ＭbｏⅠD、若用上述条件构建含有目的基因Ｄ的重组质粒并成功导入细菌体内，则此细菌在添加抗生素Ａ和B的培养基中不能存活评卷人得分二、填空题（每空？分，共？分）７、转基因抗病香蕉的培育过程如图。图中PstⅠ、ＳmaⅠ、ＥcoＲⅠ、ApaⅠ为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下图表示四种限制酶的识别序列及酶切位点.（1)构建重组质粒需要用限制酶和

酶。（2）基因工程中除质粒外，

和

也可作为载体。基因工程操作的核心步骤是

。（3）将重组质粒导入植物细胞常用方法是

；若将重组质粒导入大肠杆菌细胞,需用

处理大肠杆菌。(２）若要获得抗病基因，能否用限制酶SｍaⅠ对图中对应的位点进行切割？请说明理由

。要获得含抗病基因的重组质粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割质粒？

。8、如图为利用生物技术获得生物新品种的过程，据图回答：ﻫﻫ(1）图中采用的目的基因获取方法是

技术,其中②过程需要

酶才能完成．ﻫ（２)在培养转基因绵羊的过程中常用的受体细胞是

,目的基因导入的方法是

．其中在动物细胞培养过程中，需让培养液中含有一定量的CＯ2，其主要作用是

．在③过程中还需要用到的主要生物技术有

（3）在抗虫棉的培育过程，其中④过程常用的方法是

,要确定目的基因．（抗虫基因）导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达,需进行检测和鉴定工作，请写出在个体生物学水平上的鉴定具体方法是：

．评卷人得分三、综合题(每空?分，共?分）9、请根据上述信息分析回答：（1）、外源ＤNA、质粒分别有___＿___、__＿___＿个游离的磷酸基团.(２）、DＮA分子的一条多核苷酸链中,两个脱氧核苷酸之间以＿________和__＿＿__＿__相连。用SｍaⅠ限制酶切割外源DNＡ,切开的是___＿＿__＿___和____＿__＿＿_之间相连的键。（３)、如果用SｍaⅠ酶切割外源DNＡ和质粒来重组质粒,其结果是___＿____＿_＿＿_。（4）、如果使用EcｏRⅠ酶切割外源DNA和质粒，将目的基因片段与切割后的质粒混合，加入___＿＿____酶，获得的环状DNＡ可能有哪几种情况?______＿＿＿_＿_＿_.(5)、如果使用BamＨⅠ和HｉndⅢ两种限制酶同时处理外源DNA和质粒，比用EcｏRⅠ酶切割的优点是____＿____＿＿____＿＿____。（６）、将重组质粒导入大肠杆菌中，培养基中需加入_________＿_进行鉴别和筛选含有__＿_＿______的细胞。１０、基因工程是在现代生物学、化学和工程学基础上建立和发展起来的,并有赖于微生物学理论和技术的发展运用，基因工程基本操作流程如图所示,请据图分析回答：（1)图中A是_____＿＿＿_＿；最常用的是＿__＿_＿__;在基因工程中，需要在__＿＿____＿___＿_______酶的作用下才能完成剪接过程。（2）在上述基因工程的操作过程中，可以遵循碱基互补配对原则的步骤有___＿________。(用图解中序号表示)（３）不同种生物之间的基因移植成功，从分子水平分析,进行基因工程的主要理论依据是_＿___＿________，也说明了生物共用一套＿_＿_＿___＿_＿_＿_。（4)研究中发现,番茄体内的蛋白酶抑制剂对害虫的消化酶有抑制作用,导致害虫无法消化食物而被杀死，人们成功地将番茄的蛋白酶抑制剂基因导入玉米体内,玉米获得了与番茄相似的抗虫性状，玉米这种变异的来源是__＿＿＿______＿___＿____。（５)科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，并用基因工程的方法将该基因导入金茶花叶片细胞的染色体DNＡ上，经培养长成的植株具备了抗病性，这说明__＿＿＿＿_＿_＿_＿＿__＿＿_＿＿_____________。如果把该基因导入叶绿体ＤNＡ中,将来产生的配子中＿___＿___(选填“一定"或“不一定”)含有抗病基因。参考答案一、选择题1、B２、C3、【答案】B【解析】人体细胞是真核细胞，其基因中含有内含子,其碱基对数大于氨基酸数的三倍；山羊的受精卵中导入人凝血因子基因,长成的山羊每个体细胞中都含有这种基因；DＮA连接酶是把两条DNA链末端之间的缝隙“缝合”起来，而不是参与转录。基因工程外源基因的导入多采用人工的方法，使体外重组的DNA分子转移到受体细胞，在本题中可采用显微注射法。4、C5、D6、Ｄ二、填空题７、（1)ＤＮＡ连接酶

（２）动植物病毒

λ噬菌体的衍生物基因表达载体的构建

（3）农杆菌转化法（或基因枪法、花粉管通道法）

Cａ2+（4)不能，因为用SmaⅠ酶进行切割会破坏抗病基因的结构（2分）

不能８、解:（１）在基因工程中，A→B为ＰＣR技术，利用的原理是ＤNＡ复制，其中①为DNA解旋过程，②过程表示PＣR技术中的中温延伸,该过程需要通过热稳定DＮA聚合酶或Tａｑ酶催化完成的．

（２）由于受精卵具有全能性，可使外源基因在相应组织表达，因此通常要将外源基因转入动物的受精卵中，目的基因导入绵羊受体细胞常用的方法是显微注射法.其中在动物细胞培养过程中,需让培养液中含有一定量的CＯ２,其主要作用是维持培养液的PＨ值．在③过程中还需要用到的主要生物技术有早期胚胎培养和胚胎移植。

（3）B→D为抗虫棉的培育过程，目的基因导入植物细胞中常用农杆菌转化法，要确定目的基因（抗虫基因)导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达,需进行检测和鉴定工作，在个体生物学水平上的鉴定可以让害虫吞食转基因棉花的叶子,观察害虫的存活情况，以确定性状．ﻫ故答案为:

（１）PCR

热稳定性DNA聚合ﻫ（2）受精卵

显微注射法

维持培养液的PH值

早期胚胎培养和胚胎移植ﻫ(3）农杆菌转化法

让害虫吞食转基因棉花的叶子，观察害虫的存活情况，以确定是否具有抗虫性状三、综合题9、1０、(１)运载体质粒限制性核酸内切酶和ＤNA连接（2)①②④(3)不同生物的DNA结构基本形式相同密码子(４)基因重组（5）目的基因（抗枯萎病的基因）已表达不一定专题1基因工程复习测试卷(一)高二一部生物李真真2016/4/22一、选择题（）1.下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体A.细菌质粒Ｂ．噬菌体Ｃ.动植物病毒Ｄ.细菌核区的DＮＡ（)2．基因工程是在DNＡ分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的是Ａ.人工合成目的基因B．目的基因与运载体结合Ｃ．将目的基因导入受体细胞D。目的基因的检测表达（）3．在基因工程中，切割载体和含有目的基因的DＮA片段中，一般需使用A.同种限制酶B．两种限制酶Ｃ.同种连接酶Ｄ。两种连接酶()4．下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件A.具有某些标记基因B。决定宿主细胞的生存C.能够在宿主细胞中复制D。有多个限制酶切点（）５．水母发光蛋白由23６个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环,现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中，这种蛋白质的作用A.促使目的基因导入宿主细胞中B.促使目的基因在宿主细胞中复制C.使目的基因容易被检测出来D.使目的基因容易成功表达（)6.应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。这里的基因探针是指A.用于检测疾病的医疗器械B。用放射性同位素或荧光分子等标记的DNＡ分子C.合成β—球蛋白的DNA D。合成苯丙氨酸羟化酶的DＮA片段（）7。基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶。一种限制性内切酶能识别DＮＡ子中的GAATTC顺序,切点在G和Ａ之间，这是应用了酶的A。高效性B.专一性C.多样性Ｄ。催化活性受外界条件影响（）8．作为基因的运输工具——运载体,必须具备的条件之一及理由是A．能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因B．具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达C.具有某些标记基因,以使目的基因能够与其结合D。它的参与才能够使目的基因在宿主细胞中复制并稳定保存（）9。下列平末端属于同一种限制酶切割而成的是A.①③B.①④ ﻩC。②③ﻩﻩＤ.②④（)１0．下列有关基因工程的叙述中,不正确的是A.DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来Ｂ．基因探针是指用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子Ｃ．基因治疗主要是对有基因缺陷的细胞进行替换D.蛋白质中氨基酸序列可为合成目的基因提供资料(）11.下列属于ＰCR技术的条件的是①单链的脱氧核苷酸序列引物②目的基因所在的DNA片段③脱氧核苷酸④核糖核苷酸⑤DNA连接酶⑥ＤNA聚合酶⑦ＤNA限制性内切酶A.①②③⑤B.①②③⑥ C.①②③⑤⑦ﻩﻩD.①②④⑤⑦（）1２．下列有关ＰCR技术的叙述正确的是A．作为模板的DNA序列必须不断的加进每一次的扩增当中Ｂ.作为引物的脱氧核苷酸序列必须不断的加进每一次的扩增当中C．反应需要的ＤNA聚合酶必须不断的加进反应当中D。反应需要的DNA连接酶必须不断的加进反应当中（)13。蛋白质工程中，直接需要进行操作的对象是A。氨基酸结构ﻩ B.蛋白质的空间结构ﻩ Ｃ。肽链结构D．基因结构（)14。某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶（Amｙ）基因a,通过基因工程的方法,将a转到马铃薯植株中，经检测发现Amｙ在成熟块茎细胞中存在.这一过程涉及A.目的基因进入受体细胞后，可随着马铃薯的ＤNA分子的复制而复制，传给子代细胞B。基因a导入成功后，将抑制细胞原有的新陈代谢,开辟新的代谢途径C。细菌DNＡ分子较小，可直接作为目的基因，导入受体中不需要整合到马铃薯的DNA分子中D。目的基因来自细菌，可以不需要运载体直接导入受体细胞(）１5．关于基因工程的叙述，正确的是Ａ．基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因Ｂ。细菌质粒是基因工程常用的运载体Ｃ。通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的DNA,用另一种处理运载体DNＡＤ。为育成抗除草剂的农作物新品种导入的抗除草剂的基因只能以受精卵为受体（)16.采用基因工程的方法培养抗虫棉,下列导入目的基因的作法正确的是①将毒素蛋白注射到棉受精卵中②将编码毒素蛋白的ＤNA序列注射到棉受精卵中③将编码毒素蛋白的DNＡ序列与质粒重组导入细菌,用该细菌感染棉花体细胞，再进行组织培养④将编码毒素蛋白的DNA序列与质粒重组，注射到棉花子房，并进入受精卵A.①②B。②③C．③④Ｄ.④①（）17.蛋白质工程的基本流程是①蛋白质分子结构设计②DNA合成③预期蛋白质功能④据核苷酸序列推出脱氧核苷酸序列A。①②③④ﻩ B.④②①③C．③①④②ﻩ D.③④①②（)18．以下关于蛋白质工程的说法正确的是Ａ、蛋白质工程以基因工程为基础B、蛋白质工程就是酶工程的延伸Ｃ、蛋白质工程就是用蛋白酶对蛋白质进行改造D、蛋白质工程只能生产天然的蛋白质(）19．下列关于基因的叙述中，正确的是Ａ.每一个DNA片段都是一个基因

B．每一个基因都控制着一定的性状Ｃ．有多少基因就控制着多少遗传性状D．基因控制的性状都能在后代表现出来（）20．以下说法正确的是Ａ。所有的限制酶只能识别同一种特定的核苷酸序列B。质粒是基因工程中惟一的运载体Ｃ。运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接D．基因治疗主要是对有缺陷的细胞进行修复()２１.不属于质粒被选为基因运载体的理由是Ａ.能复制B。有多个限制酶切点C．具有标记基因D．它是环状DＮA（)22。依右图有关基因工程的工具酶功能的叙述,不正确的是A。切断ａ处的酶为限制核酸性内切酶B。连接ａ处的酶为DNA连接酶Ｃ．切断b处的酶为ＤNA解旋酶D.切断b处的为限制性内切酶(）23．基因工程的操作步骤：①制备重组DNA分子,②转化受体细胞，③筛选出获得目的基因的受体细胞、培养受体细胞并诱导目的基因的表达，④获取目的基因,正确的操作顺序是A。③②④①Ｂ．②④①③Ｃ．④①②③D。③④①②（)６．１976年，美国的H。Ｂｏｙeｒ教授首次将人的生长抑制素释放因子的基因转入大肠杆菌，并获得表达,这是人类第一次获得的转基因生物，此文中的表达是指该基因在大肠杆菌A．能进行DNA复制B．能进行转录和翻译C.能控制合成抑制生长素释放因子D．能合成人的生长激素(）２4.基因工程是在DＮＡ分子水平上进行设计施工的,在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是A。人工合成基因Ｂ。制备重组DNA分子C.转化受体细胞Ｄ．目的基因的检测和表达(）25。在烟草的叶片中含有大量的烟碱,当把烟草嫁接到番茄上时,烟草的叶就不含烟碱了。反之，嫁接到烟草上的番茄叶中却含有烟碱。这说明A.烟草根部能合成烟碱B.烟草叶受番茄的影响，遗传性状发生改变Ｃ．番茄叶受烟草的影响，遗传性状发生改变D．只有依赖烟草根部吸收某种物质，烟草叶片才能合成烟碱（）26.科学家常选用的细菌质粒往往带有一个抗菌素抗性基因，该基因的主要作用是A．提高受体细胞在自然环境中的耐热性B．有利于检测目的基因否导入受体细胞C．增加质粒分子的相对分子质量D。便于与外源基因连接（)２7．下图是基因工程主要技术环节的一个基本步骤，这一步需用到的工具是Ａ.DNA连接酶和解旋酶Ｂ。ＤＮA聚合酶和限制性核酸内切酶C。限制性核酸内切酶和DＮA连接酶D.DNA聚合酶和RNA聚合酶()2８。人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体加工合成。通过转基因技术，可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是Ａ。大肠杆菌Ｂ．酵母菌C。Ｔ4噬菌体Ｄ。质粒DNA（)29.蛋白质工程是新崛起的一项生物工程,又称第二代基因工程。下图示意蛋白质工程流程，图中A、B在遗传学上依次表示A．转录和翻译B.翻译和转录Ｃ.复制和转录Ｄ。传递和表达（)30．限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割ＤNＡ分子上特定的核苷酸碱基序列.下图为四种限制酶BａｍＨI，EcoRI，ＨindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位,其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合?其正确的末端互补序列为何？A。ＢamHＩ和EcoRI；末端互补序列—ＡAＴT-Ｂ.BamHI和HｉnｄⅢ；末端互补序列—GAＴC-C.EcoRI和HindⅢ；末端互补序列—ＡAＴT—D.BamHI和ＢｇｌＩＩ；末端互补序列—GATC—专题1基因工程复习测试卷(二）高二一部生物李真真2016/4/22二、非选择题31。生物学家通过基因工程培育出了能够通过乳房生物反应器生产人的血清蛋白。（1）在基因工程的操作中,目的基因是怎样获取的？。(2）“分子手术刀",(3)“分子缝合针”，（4)“分子运输车”。胰腺反转录酶质粒②⑤③①DNA大肠杆菌原胰岛素信使RNA③④(5)操作步骤：从人的____＿_＿＿_＿_＿胰腺反转录酶质粒②⑤③①DNA大肠杆菌原胰岛素信使RNA③④（6)人的基因在牛体内能表达，说明人和牛。32。197９年,科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DＮA分子重组,并且在大肠杆菌体内表达成功。请根据图回答问题:(１）此图表示的是采取_＿____＿____＿合成基因的方法获取_____＿_____＿__基因的过程。(2）图中①DＮＡ是以____＿____＿____为模板,_＿__＿__＿___形成单链DＮＡ，在酶的作用下合成双链DＮA，从而获得了所需要的基因。(３)图中②代表的是____＿_______＿,在它的作用下将质粒（_＿____＿_DＮＡ）切出__＿＿__＿___末端。（4）图中③代表＿__＿_______＿______＿_＿_DＮA,含___＿__________________。(５)图中④表示将_______＿＿_＿__＿_＿＿＿。⑤表示______＿____＿____＿ＤNＡ随大肠杆菌的繁殖而进行______＿_＿＿＿_______。３３。右图是利用基因工程办法生产人白细胞干扰素的基本过程图,据图回答：（1）①过程需要_＿__＿＿＿_＿______酶的参与。（2）②物质是从大肠杆菌分离出的__＿____＿_＿＿_＿＿__＿.其化学本质是______＿＿_＿______,它必须能在宿主细胞中_＿___＿___＿_＿_＿＿______＿_____。（3）③过程表明目的基因___＿__＿___＿______＿__＿___＿__＿___＿_。３4。199０年对一位缺乏腺苷脱氨酶基因，而患先天性体液免疫缺陷病的美国女孩进行基因治疗，其方法是首先将患者的白细胞取出作体外培养,然后用逆转录病毒将正常腺苷脱氨酶基因转入人工培养的白细胞中，再将这些转基因白细胞回输到患者的体内,经过多次治疗,患者的免疫功能趋于正常。(１）在基因治疗过程中，逆转录病毒的作用相当于基因工程中基因操作工具中的，此基因工程中的目的基因是，目的基因的受体细胞是。（2)将转基因白细胞多次回输到患者体内后,兔疫能力趋于正常是由于产生了。人胰岛细胞大肠杆菌胰岛人胰岛细胞大肠杆菌胰岛素mRNAA①人胰岛素人胰岛素大量的A重复进行③④②⑤⑥⑦⑧⑨⑩BCD（1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程?，为什么？。（2）过程②必需的酶是酶，过程③必需的酶是酶.(3）与人体细胞中胰岛素基因相比，通过②过程获得的目的基因不含有非编码区和.(４)若Ａ中共有ａ个碱基对，其中鸟嘌呤有ｂ个，则③④⑤过程连续进行4次,至少需要提供胸腺嘧啶个。(5）在利用AＢ获得C的过程中，必须用切割A和B，使它们产生,再加入,才可形成Ｃ。（６)为使过程⑧更易进行，可用（药剂）处理D.基因工程和细胞工程测试题姓名成绩一、选择题（每题5分，共50分)１。小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应，为了克服这个缺陷,可选择性扩增抗体的可变区基因（目的基因)后再重组表达。下列相关叙述正确的是（）A．设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列B。用ＰCR方法扩增目的基因时必须知道基因的全部序列C.ＰCＲ体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNＡ聚合酶D．一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞2．从某海洋动物中获得一基因,其表达产物为一种抗菌性和溶血性均较强的多肽P1。目前在P１的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是()Ａ。合成编码目的肽的ＤNA片段B．构建含目的肽ＤNA片段的表达载体C．依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽D．筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽３.某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子。为尽快推广种植,可应用多种技术获得大量优质苗,下列技术中不能选用的是(）A.利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗B．采用花粉粒组织培养获得单倍体苗C．采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上D。采用幼叶、茎尖等部位的组织进行组织培养４。如图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述，正确的是()Ａ．①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应Ｔ淋巴细胞B.②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成C．③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性D.④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群５．某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉,其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽".下列有关叙述错误的是（)A．消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害B。在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞C．出芽是细胞再分化的结果，受基因选择性表达的调控D。生根时，培养基通常应含α－萘乙酸等生长素类调节剂6.将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是A．具有完整细胞核的细胞B．一定的营养物质和植物激素C．离体状态Ｄ．导入外源基因７.芥酸会降低菜籽的品质。油菜有两对独立遗传的等位基因(H和h,G和ｇ)控制菜籽的芥酸含量，下图是获得低芥酸油菜新品种（HHGG）的技术路线.已知油菜单个花药由花药壁(２ｎ)及大量花粉（ｎ）等组分组成，这些组分的细胞都具有全能性。据图分析,下列叙述错误的是（）A.①、②两过程均需要植物激素来诱导细胞脱分化B．与④过程相比，③过程可能会产生二倍体再生植株C．图中三种途径中，利用花粉培养筛选低芥酸植株（HＨＧG)的效率最高D．F1减数分裂时，H基因所在染色体会与G基因所在染色体发生联会８．天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰。下列操作正确的是（）Ａ．提取矮牵牛蓝色花的ｍＲNA，经逆转录获得互补的DNA,再扩增基因BB。利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC。利用DNA聚合酶将基因Ｂ与质粒连接后导入玫瑰细胞D．将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞9．下图示植物组织培养过程。据图分析下列叙述正确的是（）A．⑤植株根尖细胞的全能性比①植株根尖细胞的强B。②试管的培养基中含有植物生长调节剂,不含有有机物C．③试管中的细胞能进行减数分裂D.调节④培养基中植物生长调节剂的比例可诱导产生不同的植物器官１0。下列是应用动物细胞工程获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤,其中对单克隆抗体制备的相关叙述错误的是（)①从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞②将Ｘ抗原注入小鼠体内，获得能产生抗X抗体的B淋巴细胞③将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内培养④筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞⑤利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞⑥从小鼠腹水中提取抗体⑦利用促细胞融合因子促使细胞融合A．实验顺序应该是①②⑦⑤④③⑥B．③过程产生多个杂交瘤细胞的过程称为克隆C。⑦过程获得的细胞均可无限增殖D．利用细胞融合生产单克隆抗体的过程中通常要经过两次筛选二、非选择题（共5０分）1１．绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒（TＭV）基因，可以合成一种抗ＴＭＶ蛋白,叶片对TＭV具有抗感染性.烟草是重要的经济作物，由于ＴＭV的感染会导致大幅度减产.研究人员利用转基因技术培育出了抗ＴＭＶ的烟草,主要流程如下图所示。（１）科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RＮA，然后合成目的基因。图中①过程表示_＿_____＿。（2）由图分析,在过程③构建的重组Tｉ质粒上应该含有的标记基因是＿＿_＿＿_____＿基因，重组Ti质粒导入烟草体细胞的方法是__________＿____＿____。（3）在过程⑤培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外,还必须添加________＿______＿＿，以保证受体细胞能培养成再生植株。（4）过程⑥可采取________＿___＿__＿＿___的方法,检测植株是否合成了抗TＭV蛋白。在个体水平的鉴定过程中，可通过____＿_______＿___的方法来确定植株是否具有抗性.12．单纯疱疹病毒I型(HＳV-1）可引起水泡性口唇炎。利用杂交瘤技术制备出抗HSＶ－１的单克隆抗体可快速检测HSＶ-1。回答下列问题：(1）在制备抗HSV－1的单克隆抗体的过程中,先给小鼠注射一种纯化的HSV-l蛋白,一段时间后，若小鼠血清中抗＿＿__＿_＿＿＿________＿_＿的抗体检测呈阳性，说明小鼠体内产生了__＿___________＿_＿反应，再从小鼠的___＿＿____＿_中获取Ｂ淋巴细胞。将该Ｂ淋巴细胞与小鼠的＿___＿___＿＿_＿__细胞融合，再经过筛选、检测,最终可获得所需的杂交瘤细胞，该细胞具有的特点是＿＿＿_＿＿＿__＿____＿＿__＿_＿___＿___＿___＿_＿＿__＿。(2)若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体，可在体外对杂交瘤细胞进行培养，也可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的___＿＿＿___＿____中使其增殖，再从___＿___＿__＿_＿_中提取、纯化获得。(３)通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种HＳV-1蛋白,其原因是该抗体具有＿___＿______＿＿_＿_＿和___＿____＿_＿___＿＿_等特性.13．花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化,并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合,以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。据图回答下列问题：(１)过程①所需的酶是_＿___＿_＿______＿＿＿_______＿____。（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中如有有供体的_＿____＿_＿＿__＿_（填细胞器）存在，根据这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。(３)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持细胞具有一定的渗透压，从而维持__＿__＿__＿_______＿__＿＿_＿。原生质体经过＿＿____＿_____＿＿再生，进而分裂和脱分化形成_＿_________＿组织。(４）若分析再生植株的染色体变异类型,应剪取再生植株和_____＿__＿__＿＿__＿＿＿__植株的根尖，通过_＿＿________、_______＿_＿＿、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目.(5）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DＮA进行PCＲ扩增,得到两亲本的差异性条带,可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株１～4进行PCR扩增的结果.据图判断,再生植株1～4中一定是杂种植株的有_＿__＿__＿___。（６）对杂种植株进行＿___＿_＿_接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。14。图①表示含有目的基因D的ＤNＡ片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列,图②表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BａmHⅠ、ＭｂｏⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为Ｃ↓ＣGG、Ｇ↓GＡTCC、↓GATＣ、ＣCC↓GGG.请回答下列问题:（1)图①的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由____＿_____________连接.（2）若用限制酶SmaⅠ完全切割图①中DNＡ片段,产生的末端是_＿＿____＿末端，其产物长度为_＿______＿_____＿___＿＿__＿_＿____。(3）若图①中虚线方框内的碱基对被T.A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d.从杂合子分离出图①及其对应的DＮA片段，用限制酶SｍaⅠ完全切割，产物中共有_＿___＿__种不同长度的ＤNＡ片段.（4）若将图②中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒,那么应选用的限制酶是__＿__＿＿_____＿＿___＿_＿__。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加_＿＿______＿__＿＿___＿________的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中的目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是＿___＿_______＿＿_____＿___＿_＿_＿_________＿＿_＿_________＿__.答案一、选择题（每题5分,共5０分)１．小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应，为了克服这个缺陷，可选择性扩增抗体的可变区基因（目的基因）后再重组表达。下列相关叙述正确的是()A．设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列Ｂ.用ＰCＲ方法扩增目的基因时必须知道基因的全部序列C．PCＲ体系中一定要添加从受体细胞中提取的DＮＡ聚合酶D．一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞Ｄ本题主要考查PCR技术的有关知识.利用PCＲ技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列设计引物，但不需知道目的基因的全部序列,需要考虑载体的序列；因PCR反应在高温条件下进行,故反应体系中需加入耐高温的ＤNA聚合酶；因某些目的基因编码的产物需经特殊的加工修饰过程,故一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞.2.从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌性和溶血性均较强的多肽P1.目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物,首先要做的是（）A。合成编码目的肽的DNA片段B。构建含目的肽DＮA片段的表达载体C。依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽D。筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽C由题中信息“在Pｌ的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物”可推知本题考查蛋白质工程的相关知识.根据蛋白质工程的基本途径:从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）,可推知答案为Ｃ。3．某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子。为尽快推广种植，可应用多种技术获得大量优质苗,下列技术中不能选用的是（)A．利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗B.采用花粉粒组织培养获得单倍体苗C。采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上D。采用幼叶、茎尖等部位的组织进行组织培养B本题考查对获得大量优质苗的多种技术手段的分析。为了使优质苗的生物性状不发生性状分离,可采用茎段扦插诱导生根技术快速育苗，也可采用将幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上的方法或用茎尖或幼叶等部位的组织进行植物组织培养获得大量优质苗；花粉粒是减数分裂的产物,利用花粉粒离体培养得到的是单倍体苗，其高度不育，且会发生性状分离，因此Ｂ项方案不能选用。４．如图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述,正确的是（)A．①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞B．②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成C.③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性D．④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群D本题主要考查单克隆抗体制备的相关知识。①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的浆细胞;②中使用聚乙二醇或灭活的病毒等，有利于杂交瘤细胞的形成;③同时具有浆细胞和骨髓瘤细胞的特性；④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群。故D项正确。５.某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉,其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”。下列有关叙述错误的是(）Ａ．消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害B．在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞C.出芽是细胞再分化的结果,受基因选择性表达的调控D.生根时，培养基通常应含α－萘乙酸等生长素类调节剂B本题主要考查植物组织培养的相关知识。在愈伤组织中,因植物细胞含有细胞壁,阻碍了细胞融合，所以此时加入细胞融合的诱导剂，不能获得染色体加倍的细胞；消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害;愈伤组织出芽是细胞分化的结果，而细胞分化的实质是基因的选择性表达；生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，生根时，培养基通常含有α－萘乙酸等生长素类调节剂。故Ｂ项错误.6。将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是Ａ．具有完整细胞核的细胞Ｂ．一定的营养物质和植物激素Ｃ．离体状态D。导入外源基因D７．芥酸会降低菜籽的品质。油菜有两对独立遗传的等位基因(H和h，G和g)控制菜籽的芥酸含量,下图是获得低芥酸油菜新品种（HＨGG)的技术路线.已知油菜单个花药由花药壁（2n）及大量花粉（n）等组分组成,这些组分的细胞都具有全能性.据图分析,下列叙述错误的是（）A.①、②两过程均需要植物激素来诱导细胞脱分化B.与④过程相比，③过程可能会产生二倍体再生植株C．图中三种途径中，利用花粉培养筛选低芥酸植株(HHGＧ)的效率最高D．F１减数分裂时，H基因所在染色体会与Ｇ基因所在染色体发生联会D①②两过程是脱分化过程，培养基中需要加入生长素类和细胞分裂素类激素来诱导细胞脱分化，故A项正确；③过程是利用植物花药离体培养获得植株的过程，其中花药壁细胞属于正常的二倍体体细胞,由其获得的植株为二倍体正常植株,④过程是利用花粉粒离体培养获得的，花粉细胞只有一个染色体组，由其获得的植株为单倍体植株，故B项正确；图中的三种途径中，利用花粉培养获得的只有四种品种，比例为1:１：１:1,易筛选出所需品种，故C项正确;Ｈ、h和Ｇ、g分别是两对独立遗传的等位基因,故两者是位于非同源染色体上的，在减数分裂时，H和Ｇ基因所在的染色体不会发生联会，故Ｄ项错误。8．天然的玫瑰没有蓝色花,这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B,而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰。下列操作正确的是（）A.提取矮牵牛蓝色花的mＲＮA，经逆转录获得互补的DNA,再扩增基因BB.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC。利用ＤNＡ聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞Ｄ.将基因Ｂ直接导入大肠杆菌,然后感染并转入玫瑰细胞A可以利用mRＮA经逆转录合成目的基因后再进一步扩增,A项正确；因为开蓝色花的矮牵牛基因Ｂ的序列是已知的，所以该目的基因宜采用化学方法合成或用聚合酶链式反应（PCR）扩增,而不是从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取,B项错误;目的基因必须与运载体结合后才能导入受体细胞，且需要ＤNA连接酶缝合,C、D项错误。9.下图示植物组织培养过程。据图分析下列叙述正确的是（）Ａ．⑤植株根尖细胞的全能性比①植株根尖细胞的强Ｂ．②试管的培养基中含有植物生长调节剂，不含有有机物C.③试管中的细胞能进行减数分裂D．调节④培养基中植物生长调节剂的比例可诱导产生不同的植物器官Ｄ⑤植株根尖细胞的全能性与①植株根尖细胞相同；②试管的培养基中含有植物生长调节剂和有机物等；③试管中的细胞进行的分裂方式为有丝分裂；调节④培养基中植物生长调节剂的比例,可诱导产生根或芽。１0.下列是应用动物细胞工程获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤，其中对单克隆抗体制备的相关叙述错误的是(）①从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞②将Ｘ抗原注入小鼠体内，获得能产生抗X抗体的Ｂ淋巴细胞③将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内培养④筛选出能产生抗Ｘ抗体的杂交瘤细胞⑤利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞⑥从小鼠腹水中提取抗体⑦利用促细胞融合因子促使细胞融合A。实验顺序应该是①②⑦⑤④③⑥B．③过程产生多个杂交瘤细胞的过程称为克隆Ｃ．⑦过程获得的细胞均可无限增殖D．利用细胞融合生产单克隆抗体的过程中通常要经过两次筛选Ｃ利用促细胞融合因子促使细胞融合，可获得多种融合细胞.其中B淋巴细胞与B淋巴细胞融合的细胞不能无限增殖.二、非选择题(共50分)１１.绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒（TMV)基因,可以合成一种抗TMV蛋白，叶片对TMV具有抗感染性。烟草是重要的经济作物，由于TＭV的感染会导致大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草，主要流程如下图所示。（１)科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的ＲＮA，然后合成目的基因。图中①过程表示__＿＿____。（２）由图分析，在过程③构建的重组Tｉ质粒上应该含有的标记基因是_＿___＿_____基因，重组Tｉ质粒导入烟草体细胞的方法是______＿＿___＿____＿＿__.(3)在过程⑤培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外,还必须添加_＿＿＿____＿＿＿______,以保证受体细胞能培养成再生植株.（4）过程⑥可采取____＿________＿______的方法,检测植株是否合成了抗TMV蛋白。在个体水平的鉴定过程中,可通过____＿_________＿_的方法来确定植株是否具有抗性.（1）逆转录(２)卡那霉素抗性农杆菌转化法（3)植物激素(4)抗原—抗体杂交接种烟草花叶病毒（1)由图可知,①表示逆转录（或反转录)。（2）由图示⑤培养基中含有卡那霉素可知，Ti质粒的标记基因是卡那霉素抗性基因，将基因表达载体（重组Tｉ质粒)导入植物细胞中常用的方法是农杆菌转化法。（3）将受体细胞培养成再生植株需要进行植物组织培养，培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外，还必须添加植物激素。(4）通过抗原—抗体杂交的方法，检测植株是否合成了抗ＴMV蛋白,在个体水平上，通过接种烟草花叶病毒的方法可以确定植株是否具有抗性。12。单纯疱疹病毒I型(HSＶ－1）可引起水泡性口唇炎。利用杂交瘤技术制备出抗HＳV—1的单克隆抗体可快速检测ＨSV－1。回答下列问题:（1）在制备抗HSV－1的单克隆抗体的过程中，先给小鼠注射一种纯化的ＨSＶ－ｌ蛋白，一段时间后，若小鼠血清中抗____＿＿_＿___＿__＿_＿＿__的抗体检测呈阳性,说明小鼠体内产生了__＿＿________＿＿＿__反应,再从小鼠的___＿___＿___中获取B淋巴细胞.将该B淋巴细胞与小鼠的__＿＿＿_＿___＿_＿_细胞融合，再经过筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞，该细胞具有的特点是______＿＿_＿______＿＿_____＿__＿__＿____＿____。(2）若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体,可在体外对杂交瘤细胞进行培养,也可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的__＿_＿＿＿＿___＿__中使其增殖,再从＿＿_＿______＿__＿中提取、纯化获得。(3）通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种HSＶ—1蛋白,其原因是该抗体具有____＿__＿_＿＿____＿_和_＿__________＿_＿_＿等特性。（1)HＳＶ-1蛋白体液免疫(其他合理答案也可）脾脏（其他合理答案也可）骨髓瘤无限增殖且产生专一抗体（其他合理答案也可）（2）腹腔腹水(3)纯度高特异性强（其他合理答案也可）(1）制备单克隆抗体时，需要先给小鼠注射特定抗原（HSV－1蛋白），当小鼠血清中抗HSV－1蛋白的抗体检测呈阳性时，就可从小鼠脾脏中获取B淋巴细胞,将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,经过筛选和克隆化培养，最终获得既能无限增殖又能产生专一抗体的杂交瘤细胞.（２)单克隆抗体的获取有两条途径,一是从体外细胞培养液中提纯获得，二是将杂交瘤细胞注射到小鼠的腹腔中使其增殖,再从腹水中提取、纯化获得。（３）单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、纯度高等特点.13．花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病.野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。据图回答下列问题:（1）过程①所需的酶是____＿___＿____＿___________＿__＿。(２）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中如有有供体的＿＿＿＿_______＿＿_（填细胞器）存在，根据这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。（3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持细胞具有一定的渗透压，从而维持_____＿______＿__＿＿＿____＿。原生质体经过______＿＿_____＿再生，进而分裂和脱分化形成__＿__＿__＿_＿_组织.（4）若分析再生植株的染色体变异类型,应剪取再生植株和__＿_________＿_______植株的根尖，通过_＿_＿_＿_____、_＿_＿______＿、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。（５）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DＮA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1～4进行ＰＣR扩增的结果。据图判断，再生植株１~4中一定是杂种植株的有__＿＿＿______.（６）对杂种植株进行________接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株.(1)纤维素酶和果胶酶（２）叶绿体(3)原生质体完整性细胞壁愈伤（4)双亲(或花椰菜和黑芥)解离漂洗（5）1、2、４（6)黑腐病菌本题考查植物细胞工程、染色体变异的实验鉴定以及高抗性的杂种植株的筛选等相关知识。(1）去除细胞壁获得原生质体需要用纤维素酶和果胶酶处理。（2)叶肉细胞含有叶绿体,因此通过PEG诱导融合的杂种细胞应含有叶绿体，以此作为初步筛选杂种细胞的标志。（3）原生质体失去了细胞壁的保护作用，因此原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇，使原生质体处于等渗溶液中，以维持原生质体正常形态。原生质体经过细胞壁再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织.（4）要判断染色体变异的类型,应剪取再生植株、花椰菜和黑芥植株的根尖，通过解离、漂洗、染色、制片等过程制成装片，然后进行显微观察比较染色体的形态和数目。(5)根据两亲本的差异性条带，可知再生植株1、２和４既有花椰菜的条带，又有黑芥的条带,因此再生植株１、2和４一定为杂种植株.(6）要筛选出高抗性的杂种植株，应进行相应的病原体接种实验，即接种黑腐病菌。14.图①表示含有目的基因D的ＤＮA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图②表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有MspⅠ、BａmHⅠ、MｂoⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CＧG、Ｇ↓GＡTＣC、↓GAＴC、ＣCＣ↓GGG。请回答下列问题：（1）图①的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由___＿＿＿___________＿连接。（2）若用限制酶SmaⅠ完全切割图①中DNA片段,产生的末端是＿_＿_____末端，其产物长度为______＿___________＿___＿____＿_.（3）若图①中虚线方框内的碱基对被Ｔ。A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d.从杂合子分离出图①及其对应的DNA片段，用限制酶SmａⅠ完全切割，产物中共有_______＿种不同长度的DNA片段。（4)若将图②中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是__＿___＿＿＿__＿_＿＿___＿__＿。在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加＿__＿___＿__＿＿___＿___＿______的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中的目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是__＿_＿_＿＿_＿____＿__＿______________＿___＿___＿＿_＿＿______＿_.（1)脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖(2）平５３7bp、790bｐ、６61bp（3)4（4）BaｍＨⅠ抗生素B同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因Ｄ与质粒反向连接（1)在一条脱氧核苷酸链上，相邻两个脱氧核苷酸之间通过３，5­磷酸二酯键相连，所以相邻碱基之间通过脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖相连接。（2)SｍaⅠ识别并切割的序列为CCC↓GGＧ，所以产生的末端为平末端,经ＳmａⅠ切割后，DNＡ片段会形成三个小的DＮA片段，按切割位点计算分别是：5３4bｐ＋3bp＝53７bp;796bｐ－3bp—3bp＝79０ｂp；６５8ｂｐ＋3bｐ＝6６1bp.（3)杂合子基因型为Ｄd。用SmaⅠ切割基因Ｄ,会形成53７ｂp、７90bp、661ｂp三种类型。题图①中虚线方框内C—G被Ｔ-A替换，失去了一个酶切位点,则会被切割成534bp＋796ｂｐ－３ｂp＝13２7bp,和6５8bp＋3ｂp＝6６１bｐ。所以一共会得到4种类型的片段。(4)如果要获得完整的目的基因可用BamＨⅠ和ＭboⅠ切割,但是ＭbｏⅠ会破坏抗生素Ａ抗性基因和抗生素B抗性基因，质粒会失去标记基因，无法筛选，所以只能用ＢaｍHⅠ切割。用BamＨⅠ切割后破坏了抗生素A抗性基因,所以质粒上存在的标记基因是抗生素B抗性基因，因此，在加入抗生素B的培养基上进行培养、筛选，经过同种限制酶切割后会产生相同的末端，部分目的基因与质粒反向连接导致基因无法正常表达。基因工程习题2０17．9.８1．利用细菌大量生产人类胰岛素,下列叙述错误的是（)Ａ．用适当的酶对运载体与人类胰岛素基因进行切割与粘合B。用适当的化学物质处理受体细菌表面,将重组DNA导入受体细菌C．通常通过检测目的基因产物来检测重组DＮＡ是否已导入受体细菌D．重组DＮＡ必须能在受体细菌内进行复制与转录，并合成人类胰岛素2.采用基因工程的方法培育抗虫棉,下列导入目的基因的作法正确的是（)①将毒素蛋白注射到棉受精卵中②将编码毒素蛋白的ＤＮA序列，注射到棉受精卵中③将编码毒素蛋白的DNＡ序列,与质粒重组，导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞,再进行组织培养④将编码毒素蛋白的DNA序列,与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵中。A．①②ﻩB．②③ﻩC.③④ﻩD．④①3。基因工程是在DNA分子水平进行设计施工的，在基因操作的以下步骤中，不进行碱基互补配对的是（）①人工合成目的基因②E.coliDNA连接酶结合目的基因与运载体③将目的基因导入受体细胞④目的基因的检测和表达⑤个体生物学水平的鉴定。A．①③B．①⑤ﻩC．③⑤D。②③④4.．如图表示基因工程中获取水稻某目的基因的不同方法．下列相关叙述中正确的是(）A.这三种方法都用到酶，都是在体外进行B．①②③碱基对的排列顺序均相同C．图示ａ、b、c三种方法均属人工合成法D.方法a不遵循中心法则5。．如图表示基因工程中目的基因的获取示意图,不正确的是（）Ａ。③表示ＰCR技术，用来扩增目的基因B.从基因文库中要得到所需的目的基因可以根据目的基因的相关信息来获取C.若获取的目的基因相同,则图中基因组文库小于cDNA文库D．若基因比较小，核苷酸序列又已知,则可以直接通过人工合成的方法获取6．。以下为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图．据图分析，下列说法正确的是（）A．催化②⑤过程的酶都是DＮA聚合酶，都能耐高温Ｂ。催化①过程的酶是ＲNA聚合酶C．④过程发生的变化是引物与单链DNＡ结合Ｄ．如果RNA单链中Ａ与U之和占该链碱基含量的40%，则一个双链ＤNA中,A与U之和也占该DNA碱基含量的40%7。.下列关于质粒的叙述，正确的是(）Ａ．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器Ｂ.细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的Ｃ．质粒只有在导入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制D.质粒是细菌细胞质中能够自主复制的小型环状ＤNA分子８。。科学家常选用的细菌质粒往往带有一个抗生素抗性基因,该抗性基因的主要作用是（）A．提高受体细胞在自然环境中的耐热性B.有利于检测目的基因否导入受体细胞Ｃ．增加质粒分子的相对分子质量D．便于与外源基因连接9。.下列关于基因工程工具的说法不正确的是（）A．构建基因文库和构建基因表达载体都需要限制酶和DＮA连接酶B。DＮA连接酶对所连接的DNＡ两端碱基序列有专一性要求Ｃ。载体能将外源基因导入受体细胞并使其在受体细胞中稳定遗传并表达D。在基因工程操作中,被用作载体的质粒，都是经过人工改造的1０．下列叙述符合基因工程概念的是（）Ａ。在细胞内将ＤNＡ进行重组,赋予生物新的遗传特性B.将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株C．用紫外线照射青霉菌,使其DＮA发生改变,通过筛选获得青霉素高产菌株Ｄ。自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DＮA上1１。下列四条DNA分子,彼此间具有互补粘性末端的一组是（)Ａ。①② Ｂ．②④ C.③④ D．②③12．下列有关基因工程技术的叙述，正确的是()Ａ．重组DNＡ技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和运载体B．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C．选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快Ｄ．只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达１3。下列提到的物质不是基因工程常用的工具的是（)①限制性核酸内切酶②ＤNA聚合酶③DNA连接酶④运载体⑤解旋酶．A。②④⑤ﻩB．①③④ C。①②③ﻩD。②⑤１４.如图是利用基因工程技术培育转基因植物,生产可食用疫苗的部分过程示意图，其中PstⅠ、SｍａⅠ、EcｏＲⅠ、ＡｐaⅠ为四种限制酶。下列说法错误的是（）Ａ.图示过程是基因工程的核心步骤B.表达载体构建时需要用到限制酶SmaⅠC。抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来D。除图示组成外,表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构１5.一种质粒和人的胰岛素基因存在的限制酶的酶切位点(用Ｅ１表示)如图所示，ａ表示标记基因，ｂ表示胰岛素基因．现用该种限制酶分别切割质粒和胰岛素基因,然后用DNA连接酶连接切割后的质粒和胰岛素基因，最不可能出现的是（）A。ﻩＢ．ﻩC。ﻩＤ．１6.利用乳腺生物反应器生产药用蛋白是动物基因工程的重要应用，目前科学家已在牛和山羊等动物乳腺生物反应器中获得了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素和α﹣抗胰蛋白酶等医药产品．下列有关乳腺生物反应器的叙述错误的是(）Ａ。受体细胞可选用受精卵或胚胎干细胞Ｂ。获得转基因动物需利用胚胎移植技术C．鉴别药用蛋白基因是否导入受体细胞一般利用分子杂交法Ｄ。转基因动物产生的生殖细胞可能含有药用蛋白基因１7。美国科学家将萤火虫的荧光素基因转入烟草植物细胞，获得高水平的表达，长成的植物通体光亮，堪称奇迹．下列有关发光烟草培育的叙述正确的是()A．在培育过程中需用同一种限制酶分别切割荧光素基因和质粒Ｂ．将目的基因直接导入烟草细胞常用的方法是显微注射法Ｃ．受体细胞只能用烟草的受精卵，因为受精卵的全能性最高D．导入目的基因的烟草细胞不需进行植物组织培养就能发育成一个完整的植株18。现有一长度为10０0碱基对（by）的ＤNA分子，用限制性核酸内切酶EcoＲ1酶切后得到的ＤNＡ分子仍是１０00ｂy，用Kpｎ１单独酶切得到40０by和6０0bｙ两种长度的DＮA分子,用EｃｏRⅠ，KpnⅠ同时酶切后得到200by和6０0ｂy两种长度的DNA分子.该ＤNA分子的酶切图谱正确的是（）A.ﻩB.C．D.１９．下列何种技术能有效地打破物种的界限，定向地改造生物的遗传性状，培育农作物的新的优良品种A.基因工程技术ﻩB。诱变育种技术ﻩC。杂交育种技术ﻩD.组织培养技术20。科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶蛋白．以下有关该基因工程的叙述错误的是（）A。采用逆转录的方法得到的目的基因B．DNA分子杂交技术可以用来检测人奶基因是否表达Ｃ。马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞D．用同种限制酶处理质粒和含有目的基因的DNＡ,可产生黏性末端而形成重组DNA分子21。下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述，错误的是(）①一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列；②限制性核酸内切酶的活性受温度影响；③限制性核酸内切酶能识别和切割ＲNA；④限制性核酸内切酶可从原核生物中提取；⑤限制性核酸内切酶的操作对象是原核细胞。A．②③ﻩB．③④ﻩＣ．③⑤ D．①⑤２2.关于基因工程和蛋白质工程的说法正确的是()A.都是分子水平上的操作B．基因工程就是改造基因的分子结构C．蛋白质工程就是改造蛋白质的分子结构D．基因工程和蛋白质工程都能创造出自然界根本不存在的蛋白质２3。下列关于各种与基因工程有关酶的叙述，不正确的是（)Ａ。DＮA连接酶能将２个具有末端互补的DＮA片段连接在一起B．PCＲ反应体系中的引物可作为ＤNA聚合酶作用的起点C．限制酶的活性受温度影响D。逆转录酶是以核糖核苷酸为原料，以RＮA为模板合成互补DNA24．根据基因工程的有关知识,回答下列问题：（1）基因工程的基本操作程序的第四步。目前获取目的基因常用的方法有、和。（2）限制性内切酶切割DＮA分子后产生的片段，其末端类型有。（３）质粒载体用ＥcoRⅠ切割后产生的片段如下：为使载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EｃoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是.（４)按其来源不同,基因工程中所使用的ＤNＡ连接酶有两类,即DNＡ连接酶和Ｅ·coｌｉDNA连接酶。(5)反转录作用的模板是，产物是。若要在体外获得大量反转录产物,常采用技术，此技术中需要的酶是。（6)基因工程中除质粒外,和也可作为运载体。（7）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是。(8)被称为第二代基因工程，它的基本途径有四步，其中第二步是。2５.如图是利用基因工程技术产生人胰岛素的操作过程示意图，请据图回答:(1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？原因是．（２）过程②必须的酶是，过程③必须的酶是．(3）若A中共有a个碱基对,其中鸟嘌呤有ｂ个,则③④⑤连续进行4次，至少需要提供胸腺嘧啶个.（４）图中B应该符合的条件为、、．（5)为使过程⑧更易进行可用药剂