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14 RNA的生物合成RNA聚合酶由哪些亚基组成各个亚基的主要功能是什么r 2 解答:原核生物的转录作用,不论其产物是还是tRNA,都是由同一种RNA聚合酶催化合成的。用SDS分离大肠杆菌RNA聚合酶可得几个大小不等的亚基:ββ 亚基的M分别×105和和σ的M分别×104和×104用磷酸纤维素柱层析分离出由各个亚基组成的全酶,其亚基组成为αβ ,M约。其中的σ因子易于从全酶上解离,其他的亚基则比较牢固地结合成为核心酶e,当σ因子与核心酶结合成全酶时,即能起始转录,σ因子从转录起始复合物中释放后,核心酶沿DNA模板移动并延伸RNA链可见σ因子为转录起始所必需但对转录延伸并不需要全酶以4种核苷三磷酸为原料以DNA为模板在下以40nt/s的速度从5 →3 合成一个大肠杆菌约含7000个RNA聚合酶分子大约2000~5000个聚合酶同时催化RNAr 2 αrpoAα全酶与某些转录因子相互作用时也发挥重要作用。β和β 亚基分别由基因rpoB和rpoC编码β亚基是催化部位的主体,研究表明亚基有两个结构域分别负责转录的起始和延伸亚基上结合的两个Zn2+参与催化过程β 亚基可能是RNA聚合酶与模板DNA的结合部位。大肠杆菌的σrpoDσ结合后,全酶对启动子特异性结合能力是对其他DNA107倍。RNA聚合酶它们各自的主要功能是什么解答RNA聚合酶,按照对聚合酶Ⅰ基本不受鹅膏蕈碱的抑制,在大于10-3mol/LRNA聚合酶Ⅱ对α-10-8mol/LRNA聚合酶Ⅲ对鹅膏蕈碱的敏感性介10-5mol/L10-4mol/LRNA聚合酶Ⅰ存在于核仁中,其功能是合成rRNA18SrRNA28SrRNARNA聚合酶Ⅱ存在于核质中,其mRNARNAtRNA5SrRNAAlu序列。DNARNAGTPUTP和[α-32P]ATP混合物一起保温,再用脾磷酸二酯酶水解RNA3′-32PNMP5′ATCTTCGTATGCATGTCT3′解答:根据DNA模板的碱基序列先写出RNA产物的碱基序列,每个A的5 端为32p:5′pApGpApCpApUpGpC
pApUpApCpG
pApApGpApU 3′32 32
32
32 32 32脾磷酸二酯酶从RNA的5 –末端开始依次水解生成3 得到3 –32p[GMP]∶3–32p[CMP]∶3 32p[UMP]∶3 –32p[AMP]=3∶2∶1∶1。原核生物的启动子和真核生物的三类启动子各有何结构特点解答-10区有一共有序列(consensusPribnow(Pribnow-10-35区还有一个共有序列TTGACA-35序列。在不同基因的启动子中,这两个共有序列的位置和序列与聚合酶对启动子A-TDNA区与-35区之间的距离,明显影响转录的效率。RNA聚合酶、II、III的转录。类别I启动子包括核心启动子和上游控制元件两部分,需要UBF1SL1II启动子包括四类控制元III启动子有两类:上游启动子和基因内启动子,分别由装配因子和起始因子促进转录起始复合物的形成和转录。简要说明原核生物和真核生物转录调控的主要特点解答键步骤均在转录的起始阶段。其二,DNA均含有可以同顺式作用元件相互作用的反式作用因子。3σRNA聚合酶的识别特异性。原核生物只有一种RNA聚合酶,核心酶催化转录的延长,σ列,即不同的σ因子协助启动不同基因的转录。②操纵子模型的普遍性。除个别基因外,原核生物的绝大多数基因按功能相关性成簇地连续排列在DNA分子上,共同组成一个转录单位即操纵子,如乳糖操纵子等。一个操纵子含一个启动序列及数个编码基因。真核生物基因转录调控的特点可归纳为6子的影响外,还受一些细胞外因子(如激素和细胞因子)的影响。简要说明四类内含子剪接作用的特点。解答第一类内含子的剪接反应需要一个鸟嘌呤核苷或核苷酸辅因子这一辅因子并是被作为能源使用,而是直接参与反应的催化。剪接反应是第一步中鸟苷的3 -羟基作为亲核基团与内含子5 末端形成一个正常的3 ,5 -磷酸二酯键这一步中5 外显子的3 羟基被释放出来,然后作为亲核基团在内含子的3 末端进行同样的反应。导致内含的切除,及外显子的连接。第二类内含子的剪接模式与第一类剪接反应的差别内部的一个腺苷酸残基的2-羟基,而不是外源的辅因子。这步反应中产生一种不寻常的分叉套索样中间体。特殊的叫做剪接体RNA-蛋白复合物发挥作用。tRNAATPDNA连接酶的连接机制相同。链延伸的平均速率,即每一条RNA钟掺入的核苷酸数目。解答:用放射性标记的NTP脉冲标记细胞,然后杀死细胞,提取其RNA,再使用弱碱RNA出。为什么野生型的大肠杆菌细胞内得不到rRNA基因的初级转录物解答rRNA后加工并非绝对发生在转录以后,一些后加工反应在转录还没有才有可能得到真正的初级转录物。HIV的什么性质使得研制艾滋病的疫苗非常困难解答RNA使得该病毒的基因突变率比DNA病毒要高许多,作为疫苗靶子的抗原基因更容易突变,这就增加了额外的难度。σRNA合成可能产生什么影响解答:RNADNARNA合成起始之后,突变的σ因子不能及时解离,极大地降低了RNA聚合酶沿模板移动的速度。因此该突变株的RNA合成比野生型慢得多。一个正在旺盛生长的大肠杆菌细胞内约含15000个核糖体。①如果rRNA前体的50005′–NMPATPrRNA共解答:①15000×5000×2=×108个ATP分子;②(×108)/32=×106个葡萄糖分子。鸡卵清蛋白基因为77001872nt1164)mRNA前体到最后加工成一个成熟的卵清蛋白3′200ATP解答:从卵白蛋清基因转录出的前体mRNA应含7700个核苷酸残基,另外有200个腺苷酸残基组成的尾巴,因为dNMP+2ATP→dNTP+所以每掺入一个残基相当于消耗两分子。如果戴帽和内部修饰消耗的能量忽略不计,这个基因转录和加工共需消耗P数为0+)×2= ×04个P分子。DNA聚合酶没有校正活性,试解释为什么RNA聚合酶缺少校正功能对细胞并无很大害处。解答:RNA聚合酶缺少校正活性,从而使转录错误率远远高于DNA复制的错误率,但RNA的绝大多数的拷贝是正常的,错误的RNAmRNAmRNA翻译的错误的蛋白质数量只占mRNA分子的半衰期很短。RNA作为催化剂的反应之间的区别是什么解答rRNA的初始转录产物经过一个自剪切反应失去了它的间插序列。因为PRNA组分能
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