第十一章监察制度和质量检验课件

第十一章兽用生物制品的生产和质量管理主要内容：二、药品生产管理与质量检验标准一、兽用生物制品的管理体系三、兽用生物制品的质量检验第十一章主要内容：二、药品生产管理与质量检验标准一、兽用生一、兽用生物制品的管理体系

负责本行政区域内的兽药监督管理工作国务院兽医行政管理部门负责全国的兽药监督管理工作县级以上地方政府兽医行政管理部门（一）行政管理部门和机构国家和地方兽药监察机构国家和地方兽医卫生防疫部门一、兽用生物制品的管理体系负责本行政区域内的兽药监督管理工北京中关村南大街8号北京中关村南大街8号一、兽用生物制品的管理体系生产和质量经营和使用生产和检验的技术法规和质量标准行政手段和许可证（二）管理的范围和措施一、兽用生物制品的管理体系生产和质量经营和使用生《兽药管理条例》2004年3月24日国务院第45次常务会议通过，自2004年11月1日起施行。《兽药生产质量管理规范》即“兽药GMP”，2002年年3月19日经农业部常务会议审议通过，自2002年6月19日起施行。《兽用生物制品管理办法》，2001年9月17日业经农业部常务会议审议通过，自2002年1月1日起施行。《兽药质量监督抽样规定》，2001年12月8日经农业部常务会议审议通过，并发布施行。《兽药注册办法》，2004年11月15日经农业部常务会议审议通过并发布施行。（三）管理条列、规范、办法、规定和规程《中华人民共和国兽用生物制品规程》，农业部兽用生物制品规程委员会编。《兽用生物制品注册分类及注册资料要求》（农业部公告第442号发布）《兽药管理条例》2004年3月24日国务院第45次常务会议通（四）新兽用生物制品的研制

临床前研究（实验室阶段）：包括菌毒种、细胞株、生物组织等起始材料的系统鉴定、生产工艺、保存条件、遗传稳定性、实验室安全、效力试验及免疫学的研究等。

使用一类病原微生物还要具备国务院兽医行政管理部门规定的条件，并在实验室阶段前报国务院兽医行政管理部门批准。临床试验分为两个阶段，第一阶段包括I、II、III期临床试验，第二阶段为IV期临床试验。在临床试验前，向国务院兽医行政管理部门提出申请。提出新兽药注册申请时，还要提供菌（毒、虫）种、细胞等有关材料和资料，并由国务院兽医行政管理部门指定的机构保藏。《兽药非临床研究质量管理规范》（GLP），2004年6月16日公布《兽药临床试验质量管理规范》

（GCP），2005年7月27日公布（四）新兽用生物制品的研制临床前研究（实验室根据《兽药管理条例》、《兽药注册办法》、《新兽药研制管理办法》规定制定：《兽用生物制品通用名命名指导原则》《兽用生物制品安全和效力试验报告编写指导原则》《兽用生物制品生产用细胞系试验研究指导原则》《兽用生物制品菌（毒、虫）种种子批建立试验技术指导原则》《兽用生物制品菌（毒、虫）种毒力返强试验技术指导原则》《兽用生物制品实验室安全试验技术指导原则》《兽用生物制品实验室效力试验技术指导原则》《兽用生物制品稳定性试验技术指导原则》《兽用生物制品临床试验技术指导原则》《兽用诊断制品试验研究技术指导原则》《兽用免疫诊断试剂盒试验研究技术指导原则》中华人民共和国农业部第683号公告（2006年7月12日）根据《兽药管理条例》、《兽药注册办法》、《新兽药研制管理办每批兽用生物制品，在出厂前应当由国务院兽医行政管理部门指定的检验机构审查核对，并在必要时进行抽查检验。

强制免疫所需兽用生物制品，由国务院兽医行政管理部门指定的企业生产。我国对兽用生物制品生产实行双重许可，即生产许可证制度和产品批准文号制度。生产许可证制度：生产兽用生物制品的企业必须获得国务院兽医行政管理部门核发的兽药生产许可证，按照兽药生产质量管理规范（兽药GMP）组织生产。产品批准文号制度：所生产的产品必须获得国务院兽医行政管理部门核发的产品批准文号。开办兽用生物制品生产企业（含科研、教学单位的生物制品生产车间和三资企业）的单位必须在立项前提出申请，经所在地省、自治区、直辖市人民政府兽医行政管理部门提出审查意见后报国务院兽医行政管理部门审批。（五）兽用生物制品的生产每批兽用生物制品，在出厂前应当由国务院兽医行政第十一章监察制度和质量检验课件第十一章监察制度和质量检验课件第十一章监察制度和质量检验课件二、生产管理与质量检验标准

（一）基本原则——“朱兰质量螺旋曲线”模式二、生产管理与质量检验标准（一）基本原则——“朱兰质量螺旋二、生产管理与质量检验标准（二）《兽药生产质量管理规范》（兽药GMP）1.GMP的基本内容我国1989年颁布了《兽药生产质量管理规范》。1994年又颁布了《兽药生产质量管理规范实施细则》。2002年3月修订发布了《兽药生产质量管理规范》。兽药GMP是对兽医生物制品生产全过程的质量管理，涉及人员、厂房和设备、原料（采购、入库、检验、发料）、加工、半成品检验、分包装、成品检定、产品运输、销售、用户意见及使用反应处理等在内的全过程的质量管理，可概括为人员、厂房设备和原材料、管理制度和要求三个方面。二、生产管理与质量检验标准（二）《兽药生产质量管理规范》（2.GMP的作用与特点(1)实施涉及两个方面政府兽医药政管理部门，从管理角度出发把GMP看成是政府对兽药企业提出的最低要求，并作为兽药药政管理部门检查兽药企业和兽药质量的依据。兽药企业，应把GMP视为本企业所必须具备的技术水平，包括生产管理、质量管理和质量监测等。(2)实施GMP的目的

防止兽药生产过程中的污染、混淆或其他事故，根除生产上的不良习惯，防患于未然，保证产品质量和安全。2.GMP的作用与特点(1)实施涉及两个方面2.GMP的作用与特点(3)GMP是根据通用的原则性规定，各兽药企业应按GMP要求，制订更具体的实施细则和条例。(4)GMP强调有效性的证实，即对一个工序或一件用具或设备在用于生产之前，要经过验证。证明符合要求和有效，以保证产品的质量。(5)GMP要求有生产管理部门和质量控制部门的权力分立。在组织上，生产部门和质控部门的地位平行。实行GMP管理的单位，生产部门和质控部门负责人不能兼职。(6)GMP强调人员素质、卫生要求、无菌要求、核对制度以及质量监督和检查制度。2.GMP的作用与特点(3)GMP是根据通用的原则性规定，3.GMP对人员的基本要求兽医生物制品生产企业应配备有和生产品种规模相适应的具有适宜素质和数量的各类管理人员、专业技术人员和生产人员。

各类生产人员、管理人员和专业人员应有计划地进行技术培训和质量意识的教育，并进行考核，不断提高其业务能力和技术水平。3.GMP对人员的基本要求兽医生物制品生产企3.GMP对人员的基本要求(1)负责生产和质量管理的企业领导人

必须具有制药或相关专业大专学历，对兽药生产及质量管理应具有较丰富的实践经验，并经过有关专业领域和基础理论的培训和学习。

(2)生产管理和质量控制部门的主要负责人与高级技术人员

应具有兽医学或药学等相关专业知识，经过有关专业领域和基础理论的培训和学习，有丰富的实践经验，有能力对生产和质量或本专业领域中出现的实际问题作出正确的判断和处理。(3)其他各类管理人员、专业技术人员和生产人员

应具有与本职工作要求相适应的文化程度和专业知识，或经过培训，能胜任本岗位的管理、生产或研究工作。3.GMP对人员的基本要求(1)负责生产和质量管理的企业领4.GMP硬件方面的基本要求(1)生产建筑、附设建筑及设施厂区周围及厂区内环境和分区厂房和水、电、汽供应生产区划分洁净等级环境控制——温度、湿度、压差、送风量、新鲜空气厂房内的管线隐藏、建筑表面光滑工厂的下水道应分为两个网系——正常和废水排水网相应储存仓库和冷库4.GMP硬件方面的基本要求(1)生产建筑、附设建筑及设施4.GMP硬件方面的基本要求(2)设备与设施与其生产规模相适应的和足够的设备及设施空气处理系统－－集中式和分散式设备跨区要密封隔断

管道标明物料名称和流向防止散毒和污物处理设施生产、检验设备及器具应易于清洗、消毒，便于生产操作、维修和保养，并能防止差错和减少污染。制定使用、维修、清洁和保养规程，定期检查、清洁、保养与维修，并由专人进行管理和记录，并建立档案。4.GMP硬件方面的基本要求(2)设备与设施生产、(3)物料和实验动物实验动物

用于生产及检定用的普通实验动物，应符合《实验动物管理规程》要求。对实验动物房的设施及饲养要求均应符合有关规定，特别要制订预防感染的严格制度，确保实验动物健康。物料生产所需的原料、辅料和包装材料等，包括水、生产用原料、菌（毒、虫）种、包装材料。它们的质量直接影响产品的质量，必须予以高度重视，对其管理、检验和出入库应制定完善的制度。(3)物料和实验动物实验动物物料5.GMP软件方面的基本要求(1)卫生及无菌管理卫生管理厂区、车间、操作室、包装室、储存库等必须保持整洁、无堆积废物；工作人员保持良好的卫生习惯，定期体检，建立健康档案。无菌管理生产无菌制品，必须在专用的洁净室内进行。一切接触制品的用具、容器及加入制品的材料，用前必须严格灭菌。生产用器具或材料，灭菌除菌前和灭菌除菌后作明显标志。洁净室（区）应定期消毒，在洁净室的工作人员应控制在最少人数，必须严格执行无菌操作细则。5.GMP软件方面的基本要求(1)卫生及无菌管理文件、制度、细则和记录药政文件：农业部《兽用生物制品管理办法》、《兽药生产质量管理规范》、《兽药生产质量管理规范实施细则》等。生产管理制度：在实施GMP管理中，应制订生产管理制度、质量管理制度、卫生制度、安全制度、核对制度、质量检查制度及其它特定制度(如菌毒种管理制度)。标准操作细则：在实施GMP中，应制订标准操作细则，包括生产操作细则、检定操作细则、仪器操作及保养细则等。记录：在实施GMP管理中，必须认真做好生产记录、检定记录、销售记录及用户意见与不良反应记录。5.GMP软件方面的基本要求(2)生产管理文件、制度、细则和记录5.GMP软件方面的基本要求包装与标签只有经质量控制部门检定，符合质量标准的制品才能进行包装和贴签。所有检验用试剂、生产专用溶液、原液及半成品，都应贴有标签，注明品名、批号、日期及效价等。验证与核对

验证是一个规定的程序，可提供很高的可信度，使某一特定工艺过程能稳定地生产符合质量标准的生物制品。验证的内容包括制造工艺、检验方法、原材料、设备、设施及操作人员等。通过验证，可以考查工艺、方法及设备的有效性，对生产工艺提出问题，预防生产事故，保证生产质量的稳定性。GMP要求对生产全过程，包括生产流程及记录、检定方法及结果、半成品及成品转移和成品标签等进行核对，对制品转移记录及凭据和发出制品的检验报告等关键步骤及内容应进行双核对。5.GMP软件方面的基本要求(2)生产管理包装与标签5.GMP软件方面的基本要求(3)质量管理质量管理的组织系统①主管质量的企业负责人

②质量控制部门

③生产管理部门

④三级质量监督网

⑤群众性质量管理小组质量控制部门及其职权企业设有独立的质量控制部门，直属企业负责人，组织上与生产管理部门平行，业务上接受本企业和中监所双重领导，国家对兽用生物制品实行批签发制度。质量控制部门的主要职责和权限包括质量监督管理和质量检定两个方面。5.GMP软件方面的基本要求(3)质量管理5.GMP软件方面的基本要求①质量监督管理审定质量管理文件和制订质量监督文件；审定制造和检验操作细则及有关记录负责菌毒种、标准品或参考品的申请、分发和管理对工艺、方法、设备、仪器、仪表验证及结果监督检查根据检定结果，决定原料、原液和半成品是否允许继续加工，决定成品可否使用和签发合格证审定包装材料、标签、说明书及成品容器可否使用组织或会同有关部门对各类人员进行质量意识教育及实施GMP的技术培训协助会同生产管理部门对本企业实施GMP的检查和考核协助会同有关部门调查处理与制品不良反应或质量事故(3)质量管理①质量监督管理(3)质量管理②质量检定

制定制品的抽样办法，对每批成品及主要原料的全面质量检定，留样观察，签发检定报告，参与半成品原液的效价测定，评价制品的质量及稳定性。

生产洁净区及生产用水质量监测。

对发生临床不良反应或用户发现质量问题制品的实验室复查。(3)质量管理②质量检定(3)质量管理③质量自查与用户意见的处理

按《兽用新生物制品管理办法》的有关规，每批成品有销售记录，其内容包括品名、规格、批号、数量、收货单位和地址及发货日期。记录应保存至制品失效期或负责期后一年。按GMP要求定期组织全面质量检查，并接受上级部门的检查和监督。建立产品不良反应监察报告制度，指定专门部门或人员负责管理。

对用户的产品质量投诉和产品不良反应作详细的记录和调查处理，并连同原投诉材料存档备查。

对产品不良反应及时向当地农牧行政管理部门提出书面报告。产品生产出现重大质量问题和严重安全隐患时，应立即停止生产，并及时向当地农牧行政管理机关报告。(3)质量管理③质量自查与用户意见的处理(3)质量管理（三）《中华人民共和国兽用生物制品规程》I总则兽用生物制品命名原则兽用生物制品国家标准品的制备和标定生产用菌（毒、虫）种和标准品管理规定防止散毒办法生产、检验用动物暂行规定生产、检验用细胞标准标签、说明书与包装的规定制品检验的有关规定制品的贮藏、运输和使用办法II灭活疫苗（三）《中华人民共和国兽用生物制品规程》I总则II灭活疫III活疫苗IV抗血清V诊断制品III活疫苗IV抗血清V诊断制品VI附录培养基制造方法溶液配制——PBS、Tris缓冲液等原料标准——玻璃瓶、瓶塞等试验方法——HA、HI、中和试验法等检验方法——活菌计数法、支原体检验法测定方法——甲醛、苯酚含量测定法等

这些方法一般为通用方法。

VI附录规定所用种毒种毒标准毒力含毒量安全性免疫原性纯净特异性效检用强度标准保存期规定所用种毒种毒标准生产用种毒标准半成品检验无菌检验病毒含量测定生产用种毒标准半成品检验成品检验物理性状无菌检验支原体检验鉴别检验安全检验

用鸡胚检验

用鸡检验效力检验用鸡胚检验

用鸡检验剩余水分测定真空度检验成品检验规定所用种毒

同低毒力活疫苗种毒鉴定同低毒力活疫苗规定所用种毒种毒鉴定半成品检验无菌检验毒价检验灭活检验成品检验物理性状外形

剂型半成品检验成品检验成品检验物理性状外形

剂型

稳定性

粘度无菌检验安全检验效力检验甲醛含量测定成品检验三、兽用生物制品的质量检验

生物制品的质量检验，应从用于生产的菌种、毒种、虫种和原材料到半成品的检查，直至最终的成品检验，都属于质量检查范围，应贯穿于生产的始终，即全面质量管理(TQC)。生物制品质量检验主要包括物理性状检验、无菌或纯粹检验、枝原体检验、鉴别检验、活菌计数或病毒含量测定、安全检验及外源病原体检验、效力检验(效价或恃异检验)、剩余水分检验、真空度测定，以及灭活剂、防腐剂的检查等。上述各项检验项目，主要是指成品检验，但有的只用于某些制品，如剩余水分检验和真空度测定，只用于冻干制品；活菌计数和病毒含量只用于弱毒活疫苗等。三、兽用生物制品的质量检验生物制品的质量检验，应从（一）无菌检验或纯净检验

生物制品都不应有外源微生物。灭活疫苗不得含有活的本菌或本毒。活疫苗只含有疫苗菌和疫苗毒，不含有任何其他微生物。1.抽样应随机取样，样品应有确切的代表性。按灭活菌苗及血清批量：50万毫升以下——每批抽样5瓶50～100万毫升——每批抽样10瓶100万毫升以上——每批抽样15瓶同批冻干制品分几柜冻干应以柜为单位，每柜抽样5瓶。诊断液每批抽样5瓶。效力检验同批分为若干组分装时，应逐组随机抽样检验，抽取样品数依需要而定。（一）无菌检验或纯净检验生物制品都不应有外源微生物2.检验用培养基厌氧及需氧性细菌检验——硫乙醇酸盐培养基(T.G)——酪蛋白胨琼脂(G.A)菌及腐生菌检验用——葡萄糖蛋白胨培养基(G.P)

上述培养基均须用指定的需氧菌菌株、厌氧菌菌株及霉菌菌株做灵敏度测定，达到标准后方能使用。2.检验用培养基厌氧及需氧性细菌检验上述培养基均须用指3.检验及结果判定（1）含甲醛、苯酚、汞类等防腐剂和抗生素的制品用T.C培养基50m1，接种供试品(冻于制品先做10倍稀释)1m1，置361C培养3天。

自小瓶中吸取培养物，分别接种T.C小管和G.A斜面各2支，每支0.2m1，1支置361C，1支置251C

另取0.2m1接种1支G.P小管，置251C，均培养5天，应无菌生长。3.检验及结果判定（1）含甲醛、苯酚、汞类等防腐剂和抗生素的（2）细菌性活疫苗及不含防腐剂、抗生素的其它制品将供试品(冻干制品加稀释液恢复原量)接种T.G小管、G.A斜面或适于本菌生长的培养基各2支，每支0.2m1，1支置361C，1支置251C。

另用1支G.P小管，接种0.2m1，置25-361C，均培养6天。细菌性活疫苗应纯粹，即无其它菌生长。3.检验及结果判定（2）细菌性活疫苗及不含防腐剂、抗生素的其它制品3.检验及结(3)血液制品和混浊制品如未加防腐剂或抗生素，可直接用不加琼脂的T.G小管和G.A斜面，接种量、培养条件、时间和判定标准同2项。如加有防腐剂或抗生素，检验方法和判定同1项。如培养后混浊不易判定时，可移植培养后再判定。3.检验及结果判定(3)血液制品和混浊制品3.检验及结果判定（4）结果判定

每批抽检的样品(除允许含一定数量非病原者外)应全部无菌或纯净生长。如发现个别瓶有杂菌或结果可疑时，可重检原瓶(如为安瓶或冻干制品，可重抽样品)，如无菌或无杂菌生长，可作无菌或纯粹通过。如仍有杂菌，可抽取加倍数量的样品重检，个别瓶仍有杂菌，则作为污染杂菌处理。3.检验及结果判定（4）结果判定3.检验及结果判定（1）杂菌计数每批污染制品至少抽样3瓶，用肉汤或蛋白胨水分别作50倍稀释，接种于含4％血清及0.1％血红素的马丁琼脂(或G.A)平板上，每个样品接种平板2个，置361C培养48小时后，再移置室温24小时，数杂菌菌落数(CFU)，然后分别计算杂菌数。任何1瓶每克被检样品（或每头剂）的非病原菌数不应超过该规程的规定。如污染霉菌时，亦作为杂菌计算。4.杂菌计数及其病原性鉴定（1）杂菌计数4.杂菌计数及其病原性鉴定（2）病原性鉴定——检查需氧性细菌将污染需氧性杂菌管培养物移植1支T.G管或马丁汤，置同条件下培养培养24小时。

取培养物用蛋白胨水稀释100倍，接种体重18-20g的健康小鼠3只，每只皮下注射0.2m1，观察10天。4.杂菌计数及其病原性鉴定（2）病原性鉴定——检查需氧性细菌4.杂菌计数及其病原（2）病原性鉴定——检查厌氧性细菌将生长有杂菌管延长培养至96小时，取出置65C水浴加温30min后移植T.G管或厌气肉肝汤1支，在同样条件下培养24～72小时。

如有细菌生长，将培养物接种体重350～450g的豚鼠之只，每只肌肉注射1m1，观察10天。如发现制品同时污染需氧性及厌氧性细菌，则按上述要求同时注射小鼠及豚鼠。4.杂菌计数及其病原性鉴定（2）病原性鉴定——检查厌氧性细菌4.杂菌计数及其病原（2）病原性鉴定——判定小鼠、豚鼠均应健活。

如有死亡或局部化脓坏死，证明有病原菌时，该批制品应废弃。4.杂菌计数及其病原性鉴定（2）病原性鉴定——判定4.杂菌计数及其病原性鉴定

凡用普通鸡胚生产的各种弱毒疫苗，将被检物用划线法接种麦康凯平板或S.S琼脂平板，经37C培养18～24小时后，挑选无色半透明、边缘整齐、表面光滑并稍突起的菌落2～3个，分别接种于三糖铁培养基。

方法是：先在该培养基上层斜面涂布，再穿刺至底部，经37C培养24小时后，如培养基下层变黄，斜面为淡红色时，要进一步用多价沙门氏因子血清作玻片凝集试验，如为阳性即证明为沙门氏菌污染。除此之外，有些生物制品在需要的情况下，还要进行支原体检验和衣原体检验。5.禽沙门氏菌的检验凡用普通鸡胚生产的各种弱毒疫苗，将被检物用划线法接种（二）安全检验

生物制品的安全性是其首要的条件，各种制品都必须经过安全检验合格者方可出厂。1．安全检验的内容检验外源性污染灭活或脱毒效果检查残余毒力或毒性物质检查检查对胚胎的毒性（二）安全检验生物制品的安全性是其首要的条件，各种（1）检验外源性污染不仅是因为有致病性细菌的污染，而且即使是非病原菌，如数量过多，其代谢产物也会影响安全。另外，外源性的病毒及支原体的污染亦是影响安全的重要方面。活疫苗在采用细胞培养时，可通过培养病毒的组织细胞带来外来的病毒，如：猪瘟兔化弱毒疫苗采用猪肾细胞培养时，有可能带入野外猪瘟强毒；细胞培养多用犊牛血清，血清就可能带入牛病毒性腹泻病毒。

使用鸡胚则可能带入鸡白血病等，而且除原材料以外，生产环境不佳及操作不严密，亦可能造成外源性污染。1．安全检验的内容（1）检验外源性污染1．安全检验的内容（2）灭活或脱毒效果检查灭活疫苗都是以致病微生物加入甲醛或其它灭活剂灭活，而类毒素则是加入甲醛将毒素脱毒。

但如灭活不彻底或脱毒不完全，都影响制品安全性。1．安全检验的内容（2）灭活或脱毒效果检查1．安全检验的内容（3）残余毒力或毒性物质检查

残余毒力是指生产疫苗类制品的菌(毒)种，本身是活的减毒株或弱毒株，允许有轻微毒力的存在，能在接种的机体内表现出来。这种残余毒力的大小，按制品不同而有不同的指标要求，测定和制定方法也不一致。

如无毒炭疽芽孢苗菌种的毒力标准是在注射部位引起剧烈水肿，家兔不死亡，豚鼠可死亡1/2，小鼠可全部死亡。又如羊痘鸡胚化弱毒疫苗的标准是试验羊2/3可发生不全经过型痘种，持续10天左右，可有部分体温反应。毒性检查主要是对死菌苗或类毒素这类制品，这类制品虽经杀菌或脱毒，但其本身的某些成分，当接种时可引起有害反应，即毒性反应。如灭活疫苗某些污染革兰氏阴性菌；仔猪副伤寒活疫苗冻于后的存活率过低会出现内毒素反应。1．安全检验的内容（3）残余毒力或毒性物质检查如无毒炭疽芽孢苗菌种的毒（4）检查对胚胎的毒性有的病毒致弱毒株虽对免疫动物已经致弱，但还能通过孕畜影响胚胎。

如国外猪瘟的某些弱毒株，就可通过孕猪的胎盘屏障传给胚胎以致造成死胎、胎儿畸形或生后发育不良等。因此欧洲药典中明确规定猪瘟病毒应经过对胚胎毒性的检查。

检查方法是：选10头未免疫的母猪在怀孕25~35天时肌肉注射两头剂的疫苗，同时另选10头未免疫的同龄同源怀孕母猪注射等量生理盐水，然后观察疫苗对胎儿或仔猪是否有影响。1．安全检验的内容（4）检查对胚胎的毒性1．安全检验的内容

疫苗和免疫血清的成品安全检验方法主要是动物检验，剂量应大于使用剂量。

能以小动物作出正确判断者，多用实验小动物。禽用疫苗苗则可直接以使用对象动物作安检。

无论使用何种动物，其首要条件是选用敏感的动物。安全检验用动物一般有品种要求，譬如：猪丹毒以鸽和小鼠比较敏感；而猪肺疫则以家兔比较敏感。2．安全检验的方法及要点疫苗和免疫血清的成品安全检验方法主要是动物检验，剂量

一般概念敏感动物是不含母源抗体的，如以猪检查猪瘟疫苗的安全性，就必须检查供试猪是否含有母源猪瘟抗体，无母源抗体者方可使用。除了动物的敏感性外，动物的健康状况也与安检结果的正确判断密切相关。2．安全检验的方法及要点（续）同一种动物不同品系其敏感性也下一样，如鸡新城疫的安检鸡，用我国土种鸡就不如用来航鸡敏感。又如不同日龄的小鼠对猪丹毒的敏感性也下一致，日龄过大敏感性差。试验期间的饲养管理也会影响安检结果的判断，安检动物舍应与健康动物和其它试验动物分开。在安检期间，如安检动物有死亡时，必须及时解剖明确原因，在整个安检期内应及时观察动物健康情况，并予以记录。一般概念敏感动物是不含母源抗体的，如以猪检查猪瘟疫苗3．安全检验的判断安检期死亡动物经解剖明确非制品所致者可以重检，如检验结果可疑难以判定时，应以加倍头数该种动物重检。凡规定用多种动物进行安检的制品，如牛瘟兔化绵羊化活疫苗用小鼠和豚鼠两种动物检验，两种均应安全合格。用小动物检验不合格者，有的规定可用使用对象动物重检。但用使用对象动物检验不合格者，不能再以小动物重检。3．安全检验的判断安检期死亡动物经解剖明确非制品所致者可以重（1）用于鸡的活疫苗检验4．外源病毒检验

取样品2～3瓶混合(如是细胞苗，须用超声波或3次冻融方法破坏细胞)，用相应含专一特异性抗体的血清中和后作为检品。

用鸡作检验用动物，被检样品不做处理。如对检验样品中病毒中和不完全，可用高效价血清重做，或用制品使用对象进行检验。（1）用于鸡的活疫苗检验4．外源病毒检验取样品2～3方法1：用9~11日龄SPF鸡胚20个，分为2组，每胚各以10个使用剂量接种，第一组10个胚接种于尿囊腔内；第二组10个胚接种于绒毛尿囊膜上，在37C

培养，弃去在接种后24小时内死亡的胚，但每组胚须存活6个以上。7天后剖检，胎儿应发育正常，绒毛尿囊膜无病变。取鸡胚液应无血凝价。（1）用于鸡的活疫苗检验——鸡胚检查法方法2：用来自对脑脊髓炎易感鸡群的1~7日龄鸡胚15只，每胚卵黄囊内接种0.2m1，继续孵化直至孵出雏鸡。对雏鸡观察15天，不应出现运动失调，或呈现AE组织病理变化的死亡，并至少有9只胚孵出小鸡。用鸡胚检查无结果或可疑时，可用鸡检1次。方法1：用9~11日龄SPF鸡胚20个，分为2组，每胚各以1采用用补体结合(COFAL)试验，即用9～11日龄的SPF鸡胚，制成鸡胚成纤维细胞单层，将用特异性血清中和过的疫苗(至少含50个使用剂量)接种于成纤维细胞单层上，维持培养不少于14天，在此期间每隔3~4天细胞继代1次。培养结束时，做COFAL试验检查细胞中应无鸡白血病病毒。（1）用于鸡的活疫苗检验——检查禽白血病病毒采用用补体结合(COFAL)试验，即用9～11日龄的用适于接种本疫苗日龄的SPF鸡20只，点眼、滴鼻接种10个使用剂量，肌肉注射100个使用剂量，接种后21天，按上述方法重复接种1次，第一次接种后42天采血，进行有关疫病的血清抗体检验。

在42天内，不应有疫苗引起的局部或全身症状和呼吸道症状或死亡。如有死亡，应做病理学检验，查明是否由于疫苗所致。血清抗体检验，除本疫苗所产生的特异性抗体外，不应有其它疫苗的抗体存在。（1）用于鸡的活疫苗检验——用鸡检查方法用适于接种本疫苗日龄的SPF鸡20只，点眼、滴鼻接种细胞制品检验，将3瓶样品混合，经3次冻融后，接种细胞单层培养4天，传第二代，取培养物，分别进行丙酮固定后，以适宜的荧光抗体进行染色。检验内容：猪细胞苗：BVDV、PRV、RV、PPV、HCV牛羊细胞苗：BVDV、RV、PRV、PPV、BTV

马细胞苗：马传染性贫血病病毒犬细胞苗：RV、PRV、PPV、BVDV。(2)非禽源细胞的活疫苗检验——荧光抗体检查法细胞制品检验，将3瓶样品混合，经3次冻融后，接种细胞(2)非禽源细胞的活疫苗检验——荧光抗体检查法检验方法及判定：

确定被检对象后，取片进行染色与镜检。

若被检样出现任何一种特异荧光，为不合格；

若阳性对照组不出现特异荧光或不明显为无结果，可以重检。

若被检组出现不明显荧光，必须重检，重检仍出现不明显荧光，为不合格。(2)非禽源细胞的活疫苗检验——荧光抗体检查法检验方法疫苗用相应特异性血清中和后，用Vero细胞3个单层，总面积不少于100cm2，每个单层接检品1ml，连传2代，每代7天，应不出现细胞病变，并无红细胞吸附因子存在及荧光抗体检查无特异荧光。(2)非禽源细胞的活疫苗检验——绿猴肾(Vero)传代细胞检查法疫苗用相应特异性血清中和后，用Vero细胞3个单层，

检测外源病毒时，亦可采用致细胞病变和(或)红细胞吸附试验。先用相应的特异性血清中和后，接种敏感的细胞单层进行培养。A.致细胞病变的检测取经传代后培养至少7天的细胞单层(每个cm2)1个或多个，用适宜染色液，对细胞单层进行染色，观察细胞单层，检查包涵体、巨细胞的数目异常或其它由外源病毒引起的细胞病变的出现情况。(3)用细胞单层生产的病毒性活疫苗检测外源病毒时，亦可采用致细胞病变和(或)红细胞吸附检验方法：

取传代后培养7天以上的细胞单层(每个6cm2)至少1瓶，以PBS洗涤细胞单层数次，加入0.2%红细胞悬液适量，覆盖整个单层表面。

红细胞悬液应是豚鼠红细胞、人O型红细胞、鸡红细胞的等量混合悬液，混合或分别滴加于不同的细胞单层上。4C放置30min，用PBS洗涤，检查红细胞吸附情况。若无明显的红细胞吸附现象可重复一次，在细胞单层加入红细胞悬液后置20～25C培养30min，用PBS洗涤，再次检查红细胞吸附情况。(3)用细胞单层生产的病毒性活疫苗——红细胞吸附病毒的检测检验方法：(3)用细胞单层生产的病毒性活疫苗

若出现外源病毒所致的特异性细胞病变或有红细胞吸附现象，判不合格。

若疑有外源病毒污染，但又不能通过其它试验排除这种可能性，则作不合格处理。

(3)用细胞单层生产的病毒性活疫苗——判定若出现外源病毒所致的特异性细胞病变或有红细胞吸附现象

制品的效力是指它的使用价值。

效力不好的制品，如为疫苗和类毒素，则无法有效地控制疫情。

治疗用的血清，则无法医治病畜，从而使疫病蔓延。

诊断制品，则影响检疫及诊断的正确性。（三）效力检验制品的效力是指它的使用价值。（三）效力检验（三）效力检验（1）免疫原性菌(毒)种的免疫原性优劣，决定生物制品质量的重要因素，除其作为免疫原的能力外，还与血清型等经诸多因素有关，是生物制品菌(毒)种检验的重要方面。如制猪丹毒灭活疫苗的菌种应选择2型菌，因为2型菌株免疫原性良好，试验证明对其它菌型也有免疫力。又如流感与口蹄疫，因其在流行中病原常有型的变化，所以用以制备疫苗毒株的型必须与流行型相对应。否则即使是制品的免疫原性良好，也收不到免疫效果。1．效力检验的内容（三）效力检验（1）免疫原性1．效力检验的内容(2)制品的免疫持续期不同主动制品免疫持续期各异，理想制品应具有较长的免疫持续期，免疫持续过短的应考虑增加免疫接种的次数。

免疫持续期通常是在选育菌(毒)种时测定。1．效力检验的内容(2)制品的免疫持续期1．效力检验的内容(3)抗原的稳定性一般灭活苗和血清的热稳定性较好，弱毒疫苗较差，但也随制品的种类而异，制品热稳定性也与制品中所加入的稳定剂或制备工艺有关。1．效力检验的内容(3)抗原的稳定性1．效力检验的内容(4)抗原量的测定疫苗效力取决于接种动物的抗原量，即一定量病毒(细菌)才能在体内增殖到一定程度，促使机体产生免疫应答。

若数量不够，则达不到免疫效果。所以，常以测定抗原量来检查制品的效力，当然实验室的检定指标应和使用效果一致。1．效力检验的内容(4)抗原量的测定1．效力检验的内容所用动物依制品而异，但使用敏感小动物应与使用对象动物有平行关系，禽用疫苗一般均使用对象动物作检验。当小动物检验如遇有某种原因难以判断者，可以改用制品使用对象动物检验。使用对象动物检验不合格者，不能再用小动物重检。有的制品没有相应小动物，只能用使用对象动物检验，如抗猪瘟血清与羊痘活疫苗只能用猪和羊效检。动物保护试验的方法有多种，但凡需攻毒者，均应设立同品种同来源的同批动物作对照组，并必须在特设的隔离强毒动物舍内进行。2．成品的效力检验（1）动物保护力试验——使用动物的原则所用动物依制品而异，但使用敏感小动物应与使用对象动物这种方法是以待检品接种动物，经2~3周后，用相应的强毒攻击。观察动物接种后所建立的主动免疫抗感染水平，即以动物的存活或不受感染的情况来判定制品的效力。（1）动物保护力试验——定量强毒攻击法例如：猪丹毒活疫苗效检，用小鼠10只，每只注射0.02个使用剂量猪丹毒活疫苗，14天以后连同未接种的小鼠3只攻击1000个小鼠MLD强毒，另3只攻1个MLD。观察10天，免疫组存活8只以上，攻1000MLD对照组全死、攻1个MLD对照小鼠至少死亡2只为合格。

如以猪检验则用易感猪10头，其中5头接种疫苗，每头注射1m1活疫苗，14天后连同对照组5头，每头攻击致死量的强毒，免疫猪保护4头以上，对照猪全部发病，并有2头以上死亡，疫苗为效力合格。这种方法是以待检品接种动物，经2~3周后，用相应的强这种方法是把动物分为两大组，一为免疫组，一为对照组，两大组又各分为相等的若干小组，每小组动物数相等。

免疫动物均用同一剂量的制品接种免疫，经一定时间后，与对照组同时用不同稀释倍数强毒攻击，比较免疫组与对照组的存活率。

按LD50计算，如对照组攻10-5稀释毒有50%的动物死亡，而免疫组攻10-3稀释毒死50%，即免疫组对强毒的耐受力比对照组高100倍，亦即免疫组有100个LD50的保护力。（1）动物保护力试验——定量免疫变量攻击法这种方法是把动物分为两大组，一为免疫组，一为对照组，将疫苗稀释为各种不同的免疫剂量接种动物，间隔一定时间，各免疫组均用同一剂量强毒攻击，观察一定时间，用统计学方法计算能使50%的动物得到保护的免疫剂量。（1）动物保护力试验——变量免疫定量攻击法例如：鸡新城疫油乳剂灭活苗检验，用3~4周龄易感鸡35只，以1/25、1/50、1/100稀释的疫苗0.5ml剂量，每个稀释度各皮下或肌肉注射10只鸡，另5只不接种作对照。3~4周后，每只鸡肌肉注射10-5ELD50的强毒，观察14天。记录每组的死亡数，对照应全部死亡，最后算出50%的保护剂量，以PD50表示。每一使用剂量(0.5ml)的效价应不低于50个PD50。将疫苗稀释为各种不同的免疫剂量接种动物，间隔一定时间（1）动物保护力试验——被动免疫抗体测定变量用高度免疫的动物抗病血清注射易感动物，经一定时间(一般1~3天)用相应的强毒攻击，观察血清抗体被动免疫所引起的保护作用。例如：炭疽血清检验，用8只豚鼠，每组4只，分别注射被检血清0.5和1ml，24小时后，连同不注血清对照豚鼠4只攻击致死量的炭疽芽孢液，如对照组7天内全死，两组免疫豚鼠共健活6只以上；或对照组死亡3/4，免疫组全部健活时，血清为合格有效。有的疫苗也可用这种方法检定效力，即用疫苗接种免疫试验动物后，然后采取免疫动物的血清测定其抗体效价，来判定疫苗的免疫力，如羊梭菌多联干粉灭活疫苗即用此法。（1）动物保护力试验——被动免疫抗体测定变量用高度某些活疫苗的菌数与保护力之间有着密切而稳定的关系，因此，可以不用动物来测保护力，只需要进行细菌计数。活菌数能达到使用剂量规定要求者，即可保证免疫效力。

如无毒炭疽芽孢苗计活芽孢数，每毫升含活芽孢数应在500万～2000万之间。布鲁氏菌活疫苗、仔猪副伤寒活疫苗也是用计活菌数测定。（2）活菌计数与病毒量的滴定——活菌计数某些活疫苗的菌数与保护力之间有着密切而稳定的关系，因此鸡马立克氏病活疫苗采用蚀斑计数，无论是HVT还是“814”疫苗都采用此法，因为火鸡疱疹病毒与马立克病毒都能形成蚀斑，蚀斑的数量又与鸡保护率之间有直接而稳定的关系，因此通过蚀斑形成单位(PFU)测定进行检验。猪瘟细胞苗测定对兔的发病量，≥10-5为合格。

鸡新城疫低毒力活疫苗测其EID50，每头份EID50≥106为合格。

多种细胞苗用TCID50作为病毒滴度标准。（2）活菌计数与病毒量的滴定——蚀斑计数或其它滴定病毒量的方法鸡马立克氏病活疫苗采用蚀斑计数，无论是HVT还是“8

在我国的兽医生物制品的成品检验中使用血请学检验方法，主要用于诊断用制品。因为绝大多数诊断制品都是用于血清学试验，所以也必须用血清学方法检验其敏感性和恃异性。在其它生物制品中也有少数使用血清学方法检验的，如牛瘟活疫苗，在效检时当体温反应可疑时可用体温可疑牛的血清以免作中和试验以判定其效力。又如马传染性贫血病活疫苗的效检，是以安全检验马定期作血清学检查，凡血清学阳转2/3-3/4者，认为其效价合格。在兽医生物制品效检中血清学方法有如下几种：（3）血清学试验检验方法在我国的兽医生物制品的成品检验中使用血请学检验方法，A.凝集试验凝集试验有试管法与平板法两种，前者为布鲁氏茵试管凝集试验抗原与阴阳性血清的检验等，后者为布鲁氏菌平板试验抗原检验等。B.沉淀试验沉淀试验法有三种：①环状沉淀反应，如炭疽沉淀素血清的检验；②琼脂扩散反应，如马传染性贫血琼扩抗原的检验；③培养凝巢试验法，如猪丹毒抗原的检验。（3）血清学试验检验方法A.凝集试验（3）血清学试验检验方法C.中和试验中和试验用于兽医生物制品的效力检验比其它血清学方法应用较多，在疫苗中除牛瘟与马传贫疫苗以外，尚有小鹅瘟活疫苗，一些梭菌属灭活疫苗等。在诊断液的检验中也较多用，如牛鼻气管炎抗原、产气英膜梭菌定型血清等。（3）血清学试验检验方法D.补体结合试验这在很多诊断用制品中常用，如牛肺疫补体结合试验抗原、马传染性贫血补体结合试验抗原、布鲁氏菌补体结合试验抗原等。C.中和试验（3）血清学试验检验方法D.补体结合试验E.抗毒素单位的测定抗毒素的测定方法仍然是利用抗原抗体反应，但抗毒素血清中所含的抗毒素抗体，国际上都采用“单位”来表示它的效价，抗毒单位简称“AE”，是德文Antitoxineinheit的缩写。

例如：

如破伤风抗毒素单位的测定，是将被检血清不同倍数稀释与定量标准毒素中和，同时以标准血清与定量标准毒素作对照，用小鼠来测定，以与对照动物死亡时间相近的最高稀释度数的一半，即为待检血清的抗毒单位。每毫升被检血清应含1000AE以上，精制的每毫升含2000AE以上。（3）血清学试验检验方法E.抗毒素单位的测定（3）血清学试验检验方法F.类毒素单位的测定在兽医生物制品中，破伤风类毒素的效检用免疫动物攻标准毒素法。但在分装前必先测定其结合力单位(EC)，并规定混合后的类毒素结合力单位应不少于250个EC。

结合力单位的测定是利用抗原抗体反应原理，并通过动物观察类毒素与抗毒素结合的程度来判断类毒素的质量。（3）血清学试验检验方法F.类毒素单位的测定（3）血清学试验检验方法A.与标准品(对照参考品)同时注射致敏动物测定反应值如结核菌素，被检菌素用一个与标准菌素相当的稀释度(如均稀释为1:1000)，用致敏豚鼠测定，两者反应面积比值为10.1，即认为合格。B.热型反应与发病观察如牛瘟活疫苗，用绵羊效检，规定应有2/3羊为定型热反应。猪瘟兔化弱毒活疫苗观察接种兔热型反应；羊痘鸡胚化弱毒疫苗接种易感羊观察发痘情况等。（4）其它效检方法A.与标准品(对照参考品)同时注射致敏动物测定反应值（4(1)检验动物的影响效力检验目前主要还是以动物保护试验为主。动物的品种、健康状态和饲养管理等对效力都有明显的影响，即使按照所规定的要求选用检验动物，动物个体的差异仍然存在，这对效检的正确性有一定的影响。因此实验动物的规格化，应是生物制品中一个重要问题。(2)培养基的影响使用的培养基，特别是作活菌什数的培养基对计数结果影响更为明显。有些兽用生物制品菌数不仅是质量标准而且是量的标准，而培养基质量不一致时，菌数就会出现较大的差异，因此培养基质量规格是影响效验的另一因素3.影响效力检验的因素与应注意的问题(3)增设标准品对照在我国兽医生物制品中，除破伤风抗毒素、鸡马立克氏病活疫苗和一些诊断用制品使用标准品或参照品作为对照外，其它制品还没有标准品或参照品作为对照，这对正确评价制品效力会有影响。(1)检验动物的影响(2)培养基的影响3.影响效力检验的（四）其它检验(1)一致性检验的定义一致性检验(identitytest)，又名鉴别检验，或同一性试验。这种试验主要用于：①生物制品的试验，即根据生物制品的性状(生物学、理化方面等)进行核实检查。②决定微生物种属的试验，即在生物制品中的应用，既可属于效力检验的范围，如抗原性的变异、毒力的变化等，亦可属于安全检验的范围。目前我国规程中有不少制品有此检验规定。1．一致性检验（四）其它检验(1)一致性检验的定义1．一致性检验(2)一致性检验方法一般采用已知特异血清(国家检定机构发给的标准血清)或参考血清和其它适宜方法，对制品进行特异鉴定。不同的制品采用不同的方法，如中和试验、凝集试验、沉淀试验、间接血凝试验、血凝试验、抑制血凝试验以及菌种形态和培养特性检查等。常用方法如下：

A.中和试验主要用于活疫苗，此法系将特异性血清与疫苗中和，如鸡马立克氏病活疫苗(火鸡疱疹病毒)，当疫苗毒和单一特异性抗火鸡疮疹病毒血清混合后，再接种于易感细胞，由于该病毒彼中和，失去产生细胞病变的能力。

B.培养特性的检验常用于细菌灭活疫苗，如仔猪副伤寒活疫苗，由于该菌种是通过一定浓度的醋酸钝减弱的，在醋酸铊普通肉汤中均匀混浊生长，而仔猪副伤寒强毒菌株不能在此种培养基中生长，可用此鉴别。(2)一致性检验方法(1)液体疫苗和诊断液各种液体疫苗及诊断液，外观必须符合其规定要求。如炭疽芽孢苗静置后为透明液体，瓶底应有少量白色沉淀。同时检查瓶装量是否准确，封口是否严密，瓶签有无差错等。2．物理性状检验(2)血清制品所有血清都应为微带乳光橙黄色或茶色清朗液体，不应有摇不散的絮状沉淀与异物。若有沉淀时，稍力摇动，即成轻度均匀混浊。装量、封口、瓶签同时检查。(3)冻干疫苗应为海绵状疏松物，色微白、微黄或微红，无异物和干缩现象。如为安瓶应无裂口及烧焦物。冻干制品加稀释液或水（原量）稀释振荡后，应在常温几钟内迅速溶解成均匀一致悬浮液。(1)液体疫苗和诊断液2．物理性状检验(2)血清制品(3)冻

冻干制品都要求测定水分含量，水分含量高低，直接影响制品的质量和保存。冻干制品剩余水分均不应超过4%。测剩余水分的方法有两种。(1)真空烘干法取样品置于含有五氧化二磷的真空烘箱内，抽真空度达133.322～666.61Pa，加热至60～70C干燥3小时，两次烘干达到恒重（恒重指物品连续两次干燥后重量差异在0.5mg以下的重量）为止，减失的重量即为含水量。水分计算公式为：含水分％（样品干前重-

千后重）/干前重Xl003．干燥制品剩余水分检验冻干制品都要求测定水分含量，水分含量高低，直接影响制(2)卡氏测定法卡氏测定法是利用化学方法来测定制品的含水量。卡氏试剂用的化学药品为碘、二氧化硫、甲醇、吡啶。

其原理为：因水分能与碘、二氧化硫发生作用，因一分子水与一分子碘作用后，大量碘能与微量水起反应，碘即变为碘化物，溶液由原来的棕红色，吸水后变为无色，可用肉眼来观察终点，计算制品的含水量。

无论哪种方法测水分都应注意不受或少受空气湿度的影响，因为冻干制品都容易吸潮，所以在操作中，一是要掌握快速、二是要在干燥环境中进行、三是所使用的工具都必须干燥。在上述两种方法中卡氏法要求更高，雨天不宜进行，且化学药剂的配制标化保存都比较麻烦，所以一般部使用真空法。(2)卡氏测定法无论哪种方法测水分都应注意不受或少

经冷库保存的冻干制品，出厂前两个月应由监察室测定真空度，无真空的制后，应子剔除报废，不得重抽真空。真空测定的方法是通过高频火花真空测定器来测定，凡容器内出现白色、粉色或紫色辉光者为合格。4．真空度测定

有些生物制品还需要以下检验：苯酚(石炭酸)含量测定、汞类防腐剂含量测定和甲醛含量测定。经冷库保存的冻干制品，出厂前两个月应由监察室测定真空我国新动物生物制品的管理目前动物生物制品生产及检验规程的审批程序是：按新制品要求准备详细资料，向中国兽药监察所申报，然后交中央农业部兽药规程委员会审定，审定认可后列入《规程》，正式生产、销售和使用。

2.新制品管理凡菌(毒)种的变换、生产工艺的重大改变或新的生物制剂的研制成功，经实验室试验、区域性试验和中间试验三个步骤证明安全有效，并有一定的数据者均属新制品。新制品可按国家新制品管理要求申报列入《规程》。第十一章监察制度和质量检验课件申报新制品的资料应包括:1.菌(毒)种的选育与鉴定2.菌(毒)种的毒力与稳定性3.免疫原性4.生产工艺流程5.安全与效力检验标准和方法6.免疫剂量、免疫产生期和免疫期7.保存条件与保存期等方面的内容申报新制品的资料应包括:①申报公函；②新制品制造及检验规程草案；③新制品使用说明书；④新制品质量标准起草说明；⑤新制品试验研究报告；⑥新制品中间试制和区域试验总结；⑦区域试验地区的反映。新制品申报的资料应包括：新制品只能在经兽药规程委员会审定认可后方可正式生产、销售。第十一章监察制度和质量检验课件第十一章兽用生物制品的生产和质量管理主要内容：二、药品生产管理与质量检验标准一、兽用生物制品的管理体系三、兽用生物制品的质量检验第十一章主要内容：二、药品生产管理与质量检验标准一、兽用生一、兽用生物制品的管理体系

负责本行政区域内的兽药监督管理工作国务院兽医行政管理部门负责全国的兽药监督管理工作县级以上地方政府兽医行政管理部门（一）行政管理部门和机构国家和地方兽药监察机构国家和地方兽医卫生防疫部门一、兽用生物制品的管理体系负责本行政区域内的兽药监督管理工北京中关村南大街8号北京中关村南大街8号一、兽用生物制品的管理体系生产和质量经营和使用生产和检验的技术法规和质量标准行政手段和许可证（二）管理的范围和措施一、兽用生物制品的管理体系生产和质量经营和使用生《兽药管理条例》2004年3月24日国务院第45次常务会议通过，自2004年11月1日起施行。《兽药生产质量管理规范》即“兽药GMP”，2002年年3月19日经农业部常务会议审议通过，自2002年6月19日起施行。《兽用生物制品管理办法》，2001年9月17日业经农业部常务会议审议通过，自2002年1月1日起施行。《兽药质量监督抽样规定》，2001年12月8日经农业部常务会议审议通过，并发布施行。《兽药注册办法》，2004年11月15日经农业部常务会议审议通过并发布施行。（三）管理条列、规范、办法、规定和规程《中华人民共和国兽用生物制品规程》，农业部兽用生物制品规程委员会编。《兽用生物制品注册分类及注册资料要求》（农业部公告第442号发布）《兽药管理条例》2004年3月24日国务院第45次常务会议通（四）新兽用生物制品的研制

临床前研究（实验室阶段）：包括菌毒种、细胞株、生物组织等起始材料的系统鉴定、生产工艺、保存条件、遗传稳定性、实验室安全、效力试验及免疫学的研究等。

使用一类病原微生物还要具备国务院兽医行政管理部门规定的条件，并在实验室阶段前报国务院兽医行政管理部门批准。临床试验分为两个阶段，第一阶段包括I、II、III期临床试验，第二阶段为IV期临床试验。在临床试验前，向国务院兽医行政管理部门提出申请。提出新兽药注册申请时，还要提供菌（毒、虫）种、细胞等有关材料和资料，并由国务院兽医行政管理部门指定的机构保藏。《兽药非临床研究质量管理规范》（GLP），2004年6月16日公布《兽药临床试验质量管理规范》

（GCP），2005年7月27日公布（四）新兽用生物制品的研制临床前研究（实验室根据《兽药管理条例》、《兽药注册办法》、《新兽药研制管理办法》规定制定：《兽用生物制品通用名命名指导原则》《兽用生物制品安全和效力试验报告编写指导原则》《兽用生物制品生产用细胞系试验研究指导原则》《兽用生物制品菌（毒、虫）种种子批建立试验技术指导原则》《兽用生物制品菌（毒、虫）种毒力返强试验技术指导原则》《兽用生物制品实验室安全试验技术指导原则》《兽用生物制品实验室效力试验技术指导原则》《兽用生物制品稳定性试验技术指导原则》《兽用生物制品临床试验技术指导原则》《兽用诊断制品试验研究技术指导原则》《兽用免疫诊断试剂盒试验研究技术指导原则》中华人民共和国农业部第683号公告（2006年7月12日）根据《兽药管理条例》、《兽药注册办法》、《新兽药研制管理办每批兽用生物制品，在出厂前应当由国务院兽医行政管理部门指定的检验机构审查核对，并在必要时进行抽查检验。

强制免疫所需兽用生物制品，由国务院兽医行政管理部门指定的企业生产。我国对兽用生物制品生产实行双重许可，即生产许可证制度和产品批准文号制度。生产许可证制度：生产兽用生物制品的企业必须获得国务院兽医行政管理部门核发的兽药生产许可证，按照兽药生产质量管理规范（兽药GMP）组织生产。产品批准文号制度：所生产的产品必须获得国务院兽医行政管理部门核发的产品批准文号。开办兽用生物制品生产企业（含科研、教学单位的生物制品生产车间和三资企业）的单位必须在立项前提出申请，经所在地省、自治区、直辖市人民政府兽医行政管理部门提出审查意见后报国务院兽医行政管理部门审批。（五）兽用生物制品的生产每批兽用生物制品，在出厂前应当由国务院兽医行政第十一章监察制度和质量检验课件第十一章监察制度和质量检验课件第十一章监察制度和质量检验课件二、生产管理与质量检验标准

（一）基本原则——“朱兰质量螺旋曲线”模式二、生产管理与质量检验标准（一）基本原则——“朱兰质量螺旋二、生产管理与质量检验标准（二）《兽药生产质量管理规范》（兽药GMP）1.GMP的基本内容我国1989年颁布了《兽药生产质量管理规范》。1994年又颁布了《兽药生产质量管理规范实施细则》。2002年3月修订发布了《兽药生产质量管理规范》。兽药GMP是对兽医生物制品生产全过程的质量管理，涉及人员、厂房和设备、原料（采购、入库、检验、发料）、加工、半成品检验、分包装、成品检定、产品运输、销售、用户意见及使用反应处理等在内的全过程的质量管理，可概括为人员、厂房设备和原材料、管理制度和要求三个方面。二、生产管理与质量检验标准（二）《兽药生产质量管理规范》（2.GMP的作用与特点(1)实施涉及两个方面政府兽医药政管理部门，从管理角度出发把GMP看成是政府对兽药企业提出的最低要求，并作为兽药药政管理部门检查兽药企业和兽药质量的依据。兽药企业，应把GMP视为本企业所必须具备的技术水平，包括生产管理、质量管理和质量监测等。(2)实施GMP的目的

防止兽药生产过程中的污染、混淆或其他事故，根除生产上的不良习惯，防患于未然，保证产品质量和安全。2.GMP的作用与特点(1)实施涉及两个方面2.GMP的作用与特点(3)GMP是根据通用的原则性规定，各兽药企业应按GMP要求，制订更具体的实施细则和条例。(4)GMP强调有效性的证实，即对一个工序或一件用具或设备在用于生产之前，要经过验证。证明符合要求和有效，以保证产品的质量。(5)GMP要求有生产管理部门和质量控制部门的权力分立。在组织上，生产部门和质控部门的地位平行。实行GMP管理的单位，生产部门和质控部门负责人不能兼职。(6)GMP强调人员素质、卫生要求、无菌要求、核对制度以及质量监督和检查制度。2.GMP的作用与特点(3)GMP是根据通用的原则性规定，3.GMP对人员的基本要求兽医生物制品生产企业应配备有和生产品种规模相适应的具有适宜素质和数量的各类管理人员、专业技术人员和生产人员。

各类生产人员、管理人员和专业人员应有计划地进行技术培训和质量意识的教育，并进行考核，不断提高其业务能力和技术水平。3.GMP对人员的基本要求兽医生物制品生产企3.GMP对人员的基本要求(1)负责生产和质量管理的企业领导人

必须具有制药或相关专业大专学历，对兽药生产及质量管理应具有较丰富的实践经验，并经过有关专业领域和基础理论的培训和学习。

(2)生产管理和质量控制部门的主要负责人与高级技术人员

应具有兽医学或药学等相关专业知识，经过有关专业领域和基础理论的培训和学习，有丰富的实践经验，有能力对生产和质量或本专业领域中出现的实际问题作出正确的判断和处理。(3)其他各类管理人员、专业技术人员和生产人员

应具有与本职工作要求相适应的文化程度和专业知识，或经过培训，能胜任本岗位的管理、生产或研究工作。3.GMP对人员的基本要求(1)负责生产和质量管理的企业领4.GMP硬件方面的基本要求(1)生产建筑、附设建筑及设施厂区周围及厂区内环境和分区厂房和水、电、汽供应生产区划分洁净等级环境控制——温度、湿度、压差、送风量、新鲜空气厂房内的管线隐藏、建筑表面光滑工厂的下水道应分为两个网系——正常和废水排水网相应储存仓库和冷库4.GMP硬件方面的基本要求(1)生产建筑、附设建筑及设施4.GMP硬件方面的基本要求(2)设备与设施与其生产规模相适应的和足够的设备及设施空气处理系统－－集中式和分散式设备跨区要密封隔断

管道标明物料名称和流向防止散毒和污物处理设施生产、检验设备及器具应易于清洗、消毒，便于生产操作、维修和保养，并能防止差错和减少污染。制定使用、维修、清洁和保养规程，定期检查、清洁、保养与维修，并由专人进行管理和记录，并建立档案。4.GMP硬件方面的基本要求(2)设备与设施生产、(3)物料和实验动物实验动物

用于生产及检定用的普通实验动物，应符合《实验动物管理规程》要求。对实验动物房的设施及饲养要求均应符合有关规定，特别要制订预防感染的严格制度，确保实验动物健康。物料生产所需的原料、辅料和包装材料等，包括水、生产用原料、菌（毒、虫）种、包装材料。它们的质量直接影响产品的质量，必须予以高度重视，对其管理、检验和出入库应制定完善的制度。(3)物料和实验动物实验动物物料5.GMP软件方面的基本要求(1)卫生及无菌管理卫生管理厂区、车间、操作室、包装室、储存库等必须保持整洁、无堆积废物；工作人员保持良好的卫生习惯，定期体检，建立健康档案。无菌管理生产无菌制品，必须在专用的洁净室内进行。一切接触制品的用具、容器及加入制品的材料，用前必须严格灭菌。生产用器具或材料，灭菌除菌前和灭菌除菌后作明显标志。洁净室（区）应定期消毒，在洁净室的工作人员应控制在最少人数，必须严格执行无菌操作细则。5.GMP软件方面的基本要求(1)卫生及无菌管理文件、制度、细则和记录药政文件：农业部《兽用生物制品管理办法》、《兽药生产质量管理规范》、《兽药生产质量管理规范实施细则》等。生产管理制度：在实施GMP管理中，应制订生产管理制度、质量管理制度、卫生制度、安全制度、核对制度、质量检查制度及其它特定制度(如菌毒种管理制度)。标准操作细则：在实施GMP中，应制订标准操作细则，包括生产操作细则、检定操作细则、仪器操作及保养细则等。记录：在实施GMP管理中，必须认真做好生产记录、检定记录、销售记录及用户意见与不良反应记录。5.GMP软件方面的基本要求(2)生产管理文件、制度、细则和记录5.GMP软件方面的基本要求包装与标签只有经质量控制部门检定，符合质量标准的制品才能进行包装和贴签。所有检验用试剂、生产专用溶液、原液及半成品，都应贴有标签，注明品名、批号、日期及效价等。验证与核对

验证是一个规定的程序，可提供很高的可信度，使某一特定工艺过程能稳定地生产符合质量标准的生物制品。验证的内容包括制造工艺、检验方法、原材料、设备、设施及操作人员等。通过验证，可以考查工艺、方法及设备的有效性，对生产工艺提出问题，预防生产事故，保证生产质量的稳定性。GMP要求对生产全过程，包括生产流程及记录、检定方法及结果、半成品及成品转移和成品标签等进行核对，对制品转移记录及凭据和发出制品的检验报告等关键步骤及内容应进行双核对。5.GMP软件方面的基本要求(2)生产管理包装与标签5.GMP软件方面的基本要求(3)质量管理质量管理的组织系统①主管质量的企业负责人

②质量控制部门

③生产管理部门

④三级质量监督网

⑤群众性质量管理小组质量控制部门及其职权企业设有独立的质量控制部门，直属企业负责人，组织上与生产管理部门平行，业务上接受本企业和中监所双重领导，国家对兽用生物制品实行批签发制度。质量控制部门的主要职责和权限包括质量监督管理和质量检定两个方面。5.GMP软件方面的基本要求(3)质量管理5.GMP软件方面的基本要求①质量监督管理审定质量管理文件和制订质量监督文件；审定制造和检验操作细则及有关记录负责菌毒种、标