白蛋白测定与线性范围试验实用课件

血清总蛋白（TP）测定

与线性范围试验

邹佳峻血清总蛋白（TP）测定

与线性范围试验

邹佳峻1一、双缩脲法测定血清总蛋白（TP）

二、线性范围试验一、双缩脲法测定血清总蛋白（TP）

二、线性范围试验21.实验目的掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理、方法熟悉722分光光度计的使用了解TP测定的临床意义一、双缩脲法测定血清总蛋白（TP）1.实验目的一、双缩脲法测定血清总蛋白（TP）3+Cu2+

OH-2.实验原理CO(NH2)2

+CO(NH2)2缩合H2N-OC-NH-CO-NH2紫红色化合物（1）双缩脲反应：+Cu2+OH-2.实验原理CO(NH2)2+CO(4OH蛋白质分子中的肽键+铜离子紫红色复合物（CONH）Cu2+紫色复合物在540nm波长有特定的吸收峰，其颜色的深浅（吸光度）与蛋白质的浓度在一定范围内成正比。此反应和2个尿素分子缩合后生成的双缩脲在碱性溶液中与Cu2+作用生成紫红色复合物的反应相似，故称双缩脲反应。（2）双缩脲法测定TP的原理

53.实验材料试剂（1）商品双缩脲试剂（2）自配双缩脲试剂（3）血清样品（4）总蛋白标准液（70.0g/L）器材试管、加样枪、吸量管、722分光光度计、水浴箱3.实验材料试剂（1）商品双缩脲试剂64.实验方法取5支试管，按下表操作4.实验方法取5支试管，按下表操作7另取5支试管，按下表操作另取5支试管，按下表操作82、选择菜单Analyze>CompareMeans>PariedSampleTTest2、选择菜单Analyze>CompareMeans>PariedSampleTTest2、选择菜单Analyze>CompareMeans>PariedSampleTTest试剂自配双缩脲试剂、TP标准液、质控血清（用蒸馏水稀释，浓度为120g/L）。7、选择“分析”→“回归分析”→“线性”线性回归——用直线方程表达X（自变量）和Y（因变量）之间的数量关系。一、双缩脲法测定血清总蛋白（TP）

二、线性范围试验0，选择“输入数据”取5支试管，按下表操作器材试管、加样枪、吸量管、722分光光度计、水浴箱。（3）血清样品蛋白质分子中的肽键+铜离子紫红色复合物（CONH）Cu2+血浆浓缩（如呕吐、严重腹泻、高烧）。蛋白质丢失增加（如严重烧伤、肾病综合征）；（4）同一浓度应采用三管平行操作，初步判断测出的吸光度值，若相差超过0.0软件对线性范围内的浓度C与对应吸光度值A作直线回归分析，求出回归方程ŷ=a+bx，并求出相关系数（r）和决定系数（r2）。因此，新建立的分析方法，其线性范围尚未确定时，为较准确地测出该方法符合LambertBeer定律的浓度范围，我们需要进行线性范围的测定。要确定回归直线方程，只要确定截距a与回归系数b即可。5.实验结果2、选择菜单Analyze>CompareMean9参考值：60~82g/L结合实验数据分析结果进行讨论,用SPSS13.0分析两组数据间有无统计学意义（配对t检验）。参考值：60~82g/L结合实验数据分析结果106.总蛋白测定的临床意义（1）血清总蛋白浓度增高见于a.蛋白质合成增加（如多发性骨髓瘤）；b.血浆浓缩（如呕吐、严重腹泻、高烧）。6.总蛋白测定的临床意义（1）血清总蛋白浓度增高见于11（2）血清总蛋白浓度降低见于a.蛋白质合成障碍（如肝严重受损）；b.蛋白质丢失增加（如严重烧伤、肾病综合征）；c.营养不良或消耗增加（如低蛋白饮食、严重结核病、甲亢）；d.血液稀释。（2）血清总蛋白浓度降低见于12配对样本是指同一样本进行两次测试所获得的两组数据，或对两个完全相同的样本在不同条件下进行测试所得的两组数据。SPSS13.0操作1、录入数据；2、选择菜单Analyze>CompareMeans>PariedSampleTTest3、生成统计结果，查看P“sig.(2tailde)”（值（P值>0.05，可以认为两种方法的结果差别无显著性差异；P<0.05，有显著性差异。）配对样本是指同一样本进行两次测试所获得的两组数据，或对两个完137.注意事项（1）样品中TP含量超过100.0g/L则用蒸馏水稀释后测定，结果乘以稀释倍数。（2）黄疸、溶血标本对本法有干扰，故用标本空白管来消除。（3）取量要准确，操作要规范。7.注意事项（1）样品中TP含量超过100.0g/L则用蒸馏148.思考题（1）氨基酸可以用双缩脲法测定吗？为什么？（2）结合实验数据分析结果进行讨论，最后得出本次实验的结论。8.思考题152、选择菜单Analyze>CompareMeans>PariedSampleTTest最小二乘法各实测点到直线的纵向距离的平方和最小。掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理、方法掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理、方法OH蛋白质合成增加（如多发性骨髓瘤）；在两个具有相关关系的变量的一组数据（X与Y）间，通过散点图我们可观察出所有数据点都分布在一条直线附近，这样的直线可以画出许多条，而我们希望其中的一条能最好地反映X与Y之间的关系，即我们要找出一条直线，使这条直线“最贴近”已知的数据点。蛋白质丢失增加（如严重烧伤、肾病综合征）；（4）同一浓度应采用三管平行操作，初步判断测出的吸光度值，若相差超过0.器材试管、加样枪、吸量管、722分光光度计、水浴箱。熟悉线性范围试验的具体操作过程。8、选择自变量（X），因变量（Y）0软件对线性范围内的浓度C与对应吸光度值A作直线回归分析，求出回归方程ŷ=a+bx，并求出相关系数（r）和决定系数（r2）。CO(NH2)2+CO(NH2)2试剂自配双缩脲试剂、TP标准液、质控血清（用蒸馏水稀释，浓度为120g/L）。另取5支试管，按下表操作Analyze>Regression>Linear此反应和2个尿素分子缩合后生成的双缩脲在碱性溶液中与Cu2+作用生成紫红色复合物的反应相似，故称双缩脲反应。（1）标本、试剂的加量必须十分准确，应用加样枪进行加样。0分析两组数据间有无统计学意义（配对t检验）。二、线性范围试验1.实验目的通过线性范围的测定，选择线性段作为该测定方法的分析范围。掌握线性范围试验的评价及意义。熟悉线性范围试验的具体操作过程。2、选择菜单Analyze>CompareMean16在比色分析中，在符合LambertBeer定律的条件下，有色溶液的吸光度与被测物质浓度成正比。以标准物质浓度C为横坐标，吸光度A为纵坐标，可在普通方格纸上绘出一条直线，即剂量反应曲线或校正曲线。2.实验原理在比色分析中，在符合LambertBeer定律的条件下，有色17在此情况下，待测物浓度与吸光度的比值为一常数，直线上任何一点的斜率tanθ都相等，即tanθ=A1/C1=A2/C2=A3/C3=……An/Cn=K此处K即为校正常数。在此情况下，待测物浓度与吸光度的比值为一常数，直线上任何一点18在实际工作中并不存在理想的反应曲线，当被测物浓度过高、仪器处于非理想状态时，都可导致对LambertBeer定律的偏离，出现正偏离和负偏离现象。在实际工作中并不存在理想的反应曲线，当被测物浓度过高、仪器处19因此，新建立的分析方法，其线性范围尚未确定时，为较准确地测出该方法符合LambertBeer定律的浓度范围，我们需要进行线性范围的测定。因此，新建立的分析方法，其线性范围尚未确定时，为较准确地测出20线性范围的确定要求能覆盖临床上的参考值和常见疾病的医学决定水平，以减少标本稀释重测的机会。线性范围的确定213.实验材料试剂自配双缩脲试剂、TP标准液、质控血清（用蒸馏水稀释，浓度为120g/L）。需用到的公式C1*V1=C2*V2器材试管、加样枪、吸量管、722分光光度计、水浴箱。3.实验材料试剂自配双缩脲试剂、TP标准液、质控血清（用蒸馏22取试管31支，除空白管外，1~10号管各做3个平行管，一共有10个浓度。按表三加样4.实验方法取试管31支，除空白管外，1~10号管各做3个平行管，一共有235.实验结果所得数据如实填入表四5.实验结果所得数据如实填入表四246.注意事项（1）标本、试剂的加量必须十分准确，应用加样枪进行加样。（2）稀释时，应使测定管系列成为精确的浓度等差系列。（3）质控血清稀释时，要严格规范操作，准确加样。6.注意事项（1）标本、试剂的加量必须十分准确，应用加样枪进25（4）同一浓度应采用三管平行操作，初步判断测出的吸光度值，若相差超过0.100，应去掉其中的异常数值后再算平均值。（5）标准溶液和样品溶液的蛋白质浓度均应超过10mg/mL。（4）同一浓度应采用三管平行操作，初步判断测出的吸光度值，若267.数据处理与分析（1）用Excel软件制作出浓度C对吸光度值A的标准曲线图，求出线性范围。（2）采用SPSS13.0软件对线性范围内的浓度C与对应吸光度值A作直线回归分析，求出回归方程ŷ=a+bx，并求出相关系数（r）和决定系数（r2）。7.数据处理与分析（1）用Excel软件制作出浓度C对吸光27（一）线性回归（一）线性回归28掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理、方法因此，新建立的分析方法，其线性范围尚未确定时，为较准确地测出该方法符合LambertBeer定律的浓度范围，我们需要进行线性范围的测定。掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理、方法Analyze>Regression>Linear试剂自配双缩脲试剂、TP标准液、质控血清（用蒸馏水稀释，浓度为120g/L）。以标准物质浓度C为横坐标，吸光度A为纵坐标，可在普通方格纸上绘出一条直线，即剂量反应曲线或校正曲线。掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理、方法另取5支试管，按下表操作将“因变量”选入“Dependent”下框内，（5）标准溶液和样品溶液的蛋白质浓度均应超过10mg/mL。（2）复制“Patch.0统计学软件

回归分析步骤当两变量呈反向变化时，1＜r＜0，为负相关；0软件对线性范围内的浓度C与对应吸光度值A作直线回归分析，求出回归方程ŷ=a+bx，并求出相关系数（r）和决定系数（r2）。a是回归直线在Y轴上的截距，即X=0时Y的预测值。（2）自配双缩脲试剂一、双缩脲法测定血清总蛋白（TP）器材试管、加样枪、吸量管、722分光光度计、水浴箱。熟悉线性范围试验的具体操作过程。试剂（1）商品双缩脲试剂6、输入数据，注意“自变量”和“因变量”所对应的位置在两个具有相关关系的变量的一组数据（X与Y）间，通过散点图我们可观察出所有数据点都分布在一条直线附近，这样的直线可以画出许多条，而我们希望其中的一条能最好地反映X与Y之间的关系，即我们要找出一条直线，使这条直线“最贴近”已知的数据点。掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理、方法在两个具有相关关系的变29线性回归——用直线方程表达X（自变量）和Y（因变量）之间的数量关系。ŷ是y（实测值）的预测值，表示当x取值xi=（1，2，……，n）时，y相应的预测值为yi。ŷ=a+bx称为Y对X的回归直线方程，相应的直线称为回归直线。线性回归——用直线方程表达X（自变量）和Y（因变量）之间的数30a是回归直线在Y轴上的截距，即X=0时Y的预测值。b是回归直线的斜率，又称为回归系数。表示自变量X对因变量Y影响大小的参数，即当X改变一个单位时，Y的预测值平均改变|b|个单位。要确定回归直线方程，只要确定截距a与回归系数b即可。a是回归直线在Y轴上的截距，即X=0时Y的预测值。31回归直线的求法最小二乘法各实测点到直线的纵向距离的平方和最小。回归直线的求法32直线相关——如果两个随机变量中，一个变量由小到大变化时，另一个变量也相应地由小到大(或由大到小)地变化，并且测得两个变量组成的坐标点在直角坐标系中呈直线趋势，就称这两个变量存在直线相关关系。可用相关系数r表示。（二）直线相关直线相关——如果两个随机变量中，一个变量由小到大变化时，另一33相关系数r——是说明有直线关系的两个变量间相关关系的密切程度和相关方向的统计指标。相关系数没有单位，其值1≤r≤1。|r|越大，两变量的关系越密切。相关系数r——是说明有直线关系的两个变量间相关关系的密切程度34当两变量呈同向变化时，0＜r＜1，为正相关；r=1为完全正相关。当两变量呈同向变化时，0＜r＜1，为正相关；35当两变量呈反向变化时，1＜r＜0，为负相关；r=1为完全负相关。当两变量呈反向变化时，1＜r＜0，为负相关；36r=0为零相关，表示无直线相关关系。r=0为零相关，表示无直线相关关系。37决定系数r²反映了回归平方和占总平方和的比例，其越接近于1，回归直线拟和的效果越好。拟合度越大，自变量X对因变量Y的解释程度越高，自变量引起的变动占总变动的百分比高，观察点在回归直线附近越密集。决定系数r²反映了回归平方和占总平方和的比例，其越接近于1，38相关表达两个变量之间相互关系的密切程度和方向。回归表达两个变量之间的数量关系，已知X值可以预测Y值。白蛋白测定与线性范围试验实用课件398、选择自变量（X），因变量（Y）2、选择菜单Analyze>CompareMeans>PariedSampleTTesta是回归直线在Y轴上的截距，即X=0时Y的预测值。拟合度越大，自变量X对因变量Y的解释程度越高，自变量引起的变动占总变动的百分比高，观察点在回归直线附近越密集。另取5支试管，按下表操作另取5支试管，按下表操作器材试管、加样枪、吸量管、722分光光度计、水浴箱。b是回归直线的斜率，又称为回归系数。（2）采用SPSS13.一、双缩脲法测定血清总蛋白（TP）

二、线性范围试验0，选择“输入数据”紫色复合物在540nm波长有特定的吸收峰，其颜色的深浅（吸光度）与蛋白质的浓度在一定范围内成正比。0统计学软件

回归分析步骤血浆浓缩（如呕吐、严重腹泻、高烧）。（4）同一浓度应采用三管平行操作，初步判断测出的吸光度值，若相差超过0.需用到的公式C1*V1=C2*V2掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理、方法蛋白质合成障碍（如肝严重受损）；8.思考与讨论（1）结合实验数据分析的结果进行讨论，最后得出本次实验的结论。（2）线性范围试验在方法学评价中有何作用？8、选择自变量（X），因变量（Y）8.思考与讨论（1）结合实40SPSS13.0统计学软件

回归分析步骤1、SPSS13.0软件的安装（1）运行“SPSS13Eval，点击“下一步”，直至安装完成；（2）复制“Patch.exe”至SPSS安装文件夹（默认为C：\ProgramFiles\SPSSEVAL），“运行”→“破解”。SPSS13.0统计学软件

回归分析步骤1、SPSS13.0412、运行SPSS13.0，选择“输入数据”2、运行SPSS13.0，选择“输入数据”424、修改小数点和输入标签名称5、选择“DataView”选项卡：3、选择“VariableView”选项卡：4、修改小数点和输入标签名称5、选择“DataView”436、输入数据，注意“自变量”和“因变量”所对应的位置6、输入数据，注意“自变量”和“因变量”所对应的位置447、选择“分析”→“回归分析”→“线性”Analyze>Regression>Linear7、选择“分析”→“回归分析”→“线性”458、选择自变量（X），因变量（Y）将“因变量”选入“Dependent”下框内，“自变量”选入“Independent”下框，点击“OK”8、选择自变量（X），因变量（Y）469、生成分析结果“Regression”并标注9、生成分析结果“Regression”并标注47谢谢谢谢48血清总蛋白（TP）测定

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邹佳峻49一、双缩脲法测定血清总蛋白（TP）

二、线性范围试验一、双缩脲法测定血清总蛋白（TP）

二、线性范围试验501.实验目的掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理、方法熟悉722分光光度计的使用了解TP测定的临床意义一、双缩脲法测定血清总蛋白（TP）1.实验目的一、双缩脲法测定血清总蛋白（TP）51+Cu2+

OH-2.实验原理CO(NH2)2

+CO(NH2)2缩合H2N-OC-NH-CO-NH2紫红色化合物（1）双缩脲反应：+Cu2+OH-2.实验原理CO(NH2)2+CO(52OH蛋白质分子中的肽键+铜离子紫红色复合物（CONH）Cu2+紫色复合物在540nm波长有特定的吸收峰，其颜色的深浅（吸光度）与蛋白质的浓度在一定范围内成正比。此反应和2个尿素分子缩合后生成的双缩脲在碱性溶液中与Cu2+作用生成紫红色复合物的反应相似，故称双缩脲反应。（2）双缩脲法测定TP的原理

533.实验材料试剂（1）商品双缩脲试剂（2）自配双缩脲试剂（3）血清样品（4）总蛋白标准液（70.0g/L）器材试管、加样枪、吸量管、722分光光度计、水浴箱3.实验材料试剂（1）商品双缩脲试剂544.实验方法取5支试管，按下表操作4.实验方法取5支试管，按下表操作55另取5支试管，按下表操作另取5支试管，按下表操作562、选择菜单Analyze>CompareMeans>PariedSampleTTest2、选择菜单Analyze>CompareMeans>PariedSampleTTest2、选择菜单Analyze>CompareMeans>PariedSampleTTest试剂自配双缩脲试剂、TP标准液、质控血清（用蒸馏水稀释，浓度为120g/L）。7、选择“分析”→“回归分析”→“线性”线性回归——用直线方程表达X（自变量）和Y（因变量）之间的数量关系。一、双缩脲法测定血清总蛋白（TP）

二、线性范围试验0，选择“输入数据”取5支试管，按下表操作器材试管、加样枪、吸量管、722分光光度计、水浴箱。（3）血清样品蛋白质分子中的肽键+铜离子紫红色复合物（CONH）Cu2+血浆浓缩（如呕吐、严重腹泻、高烧）。蛋白质丢失增加（如严重烧伤、肾病综合征）；（4）同一浓度应采用三管平行操作，初步判断测出的吸光度值，若相差超过0.0软件对线性范围内的浓度C与对应吸光度值A作直线回归分析，求出回归方程ŷ=a+bx，并求出相关系数（r）和决定系数（r2）。因此，新建立的分析方法，其线性范围尚未确定时，为较准确地测出该方法符合LambertBeer定律的浓度范围，我们需要进行线性范围的测定。要确定回归直线方程，只要确定截距a与回归系数b即可。5.实验结果2、选择菜单Analyze>CompareMean57参考值：60~82g/L结合实验数据分析结果进行讨论,用SPSS13.0分析两组数据间有无统计学意义（配对t检验）。参考值：60~82g/L结合实验数据分析结果586.总蛋白测定的临床意义（1）血清总蛋白浓度增高见于a.蛋白质合成增加（如多发性骨髓瘤）；b.血浆浓缩（如呕吐、严重腹泻、高烧）。6.总蛋白测定的临床意义（1）血清总蛋白浓度增高见于59（2）血清总蛋白浓度降低见于a.蛋白质合成障碍（如肝严重受损）；b.蛋白质丢失增加（如严重烧伤、肾病综合征）；c.营养不良或消耗增加（如低蛋白饮食、严重结核病、甲亢）；d.血液稀释。（2）血清总蛋白浓度降低见于60配对样本是指同一样本进行两次测试所获得的两组数据，或对两个完全相同的样本在不同条件下进行测试所得的两组数据。SPSS13.0操作1、录入数据；2、选择菜单Analyze>CompareMeans>PariedSampleTTest3、生成统计结果，查看P“sig.(2tailde)”（值（P值>0.05，可以认为两种方法的结果差别无显著性差异；P<0.05，有显著性差异。）配对样本是指同一样本进行两次测试所获得的两组数据，或对两个完617.注意事项（1）样品中TP含量超过100.0g/L则用蒸馏水稀释后测定，结果乘以稀释倍数。（2）黄疸、溶血标本对本法有干扰，故用标本空白管来消除。（3）取量要准确，操作要规范。7.注意事项（1）样品中TP含量超过100.0g/L则用蒸馏628.思考题（1）氨基酸可以用双缩脲法测定吗？为什么？（2）结合实验数据分析结果进行讨论，最后得出本次实验的结论。8.思考题632、选择菜单Analyze>CompareMeans>PariedSampleTTest最小二乘法各实测点到直线的纵向距离的平方和最小。掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理、方法掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理、方法OH蛋白质合成增加（如多发性骨髓瘤）；在两个具有相关关系的变量的一组数据（X与Y）间，通过散点图我们可观察出所有数据点都分布在一条直线附近，这样的直线可以画出许多条，而我们希望其中的一条能最好地反映X与Y之间的关系，即我们要找出一条直线，使这条直线“最贴近”已知的数据点。蛋白质丢失增加（如严重烧伤、肾病综合征）；（4）同一浓度应采用三管平行操作，初步判断测出的吸光度值，若相差超过0.器材试管、加样枪、吸量管、722分光光度计、水浴箱。熟悉线性范围试验的具体操作过程。8、选择自变量（X），因变量（Y）0软件对线性范围内的浓度C与对应吸光度值A作直线回归分析，求出回归方程ŷ=a+bx，并求出相关系数（r）和决定系数（r2）。CO(NH2)2+CO(NH2)2试剂自配双缩脲试剂、TP标准液、质控血清（用蒸馏水稀释，浓度为120g/L）。另取5支试管，按下表操作Analyze>Regression>Linear此反应和2个尿素分子缩合后生成的双缩脲在碱性溶液中与Cu2+作用生成紫红色复合物的反应相似，故称双缩脲反应。（1）标本、试剂的加量必须十分准确，应用加样枪进行加样。0分析两组数据间有无统计学意义（配对t检验）。二、线性范围试验1.实验目的通过线性范围的测定，选择线性段作为该测定方法的分析范围。掌握线性范围试验的评价及意义。熟悉线性范围试验的具体操作过程。2、选择菜单Analyze>CompareMean64在比色分析中，在符合LambertBeer定律的条件下，有色溶液的吸光度与被测物质浓度成正比。以标准物质浓度C为横坐标，吸光度A为纵坐标，可在普通方格纸上绘出一条直线，即剂量反应曲线或校正曲线。2.实验原理在比色分析中，在符合LambertBeer定律的条件下，有色65在此情况下，待测物浓度与吸光度的比值为一常数，直线上任何一点的斜率tanθ都相等，即tanθ=A1/C1=A2/C2=A3/C3=……An/Cn=K此处K即为校正常数。在此情况下，待测物浓度与吸光度的比值为一常数，直线上任何一点66在实际工作中并不存在理想的反应曲线，当被测物浓度过高、仪器处于非理想状态时，都可导致对LambertBeer定律的偏离，出现正偏离和负偏离现象。在实际工作中并不存在理想的反应曲线，当被测物浓度过高、仪器处67因此，新建立的分析方法，其线性范围尚未确定时，为较准确地测出该方法符合LambertBeer定律的浓度范围，我们需要进行线性范围的测定。因此，新建立的分析方法，其线性范围尚未确定时，为较准确地测出68线性范围的确定要求能覆盖临床上的参考值和常见疾病的医学决定水平，以减少标本稀释重测的机会。线性范围的确定693.实验材料试剂自配双缩脲试剂、TP标准液、质控血清（用蒸馏水稀释，浓度为120g/L）。需用到的公式C1*V1=C2*V2器材试管、加样枪、吸量管、722分光光度计、水浴箱。3.实验材料试剂自配双缩脲试剂、TP标准液、质控血清（用蒸馏70取试管31支，除空白管外，1~10号管各做3个平行管，一共有10个浓度。按表三加样4.实验方法取试管31支，除空白管外，1~10号管各做3个平行管，一共有715.实验结果所得数据如实填入表四5.实验结果所得数据如实填入表四726.注意事项（1）标本、试剂的加量必须十分准确，应用加样枪进行加样。（2）稀释时，应使测定管系列成为精确的浓度等差系列。（3）质控血清稀释时，要严格规范操作，准确加样。6.注意事项（1）标本、试剂的加量必须十分准确，应用加样枪进73（4）同一浓度应采用三管平行操作，初步判断测出的吸光度值，若相差超过0.100，应去掉其中的异常数值后再算平均值。（5）标准溶液和样品溶液的蛋白质浓度均应超过10mg/mL。（4）同一浓度应采用三管平行操作，初步判断测出的吸光度值，若747.数据处理与分析（1）用Excel软件制作出浓度C对吸光度值A的标准曲线图，求出线性范围。（2）采用SPSS13.0软件对线性范围内的浓度C与对应吸光度值A作直线回归分析，求出回归方程ŷ=a+bx，并求出相关系数（r）和决定系数（r2）。7.数据处理与分析（1）用Excel软件制作出浓度C对吸光75（一）线性回归（一）线性回归76掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理、方法因此，新建立的分析方法，其线性范围尚未确定时，为较准确地测出该方法符合LambertBeer定律的浓度范围，我们需要进行线性范围的测定。掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理、方法Analyze>Regression>Linear试剂自配双缩脲试剂、TP标准液、质控血清（用蒸馏水稀释，浓度为120g/L）。以标准物质浓度C为横坐标，吸光度A为纵坐标，可在普通方格纸上绘出一条直线，即剂量反应曲线或校正曲线。掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理、方法另取5支试管，按下表操作将“因变量”选入“Dependent”下框内，（5）标准溶液和样品溶液的蛋白质浓度均应超过10mg/mL。（2）复制“Patch.0统计学软件

回归分析步骤当两变量呈反向变化时，1＜r＜0，为负相关；0软件对线性范围内的浓度C与对应吸光度值A作直线回归分析，求出回归方程ŷ=a+bx，并求出相关系数（r）和决定系数（r2）。a是回归直线在Y轴上的截距，即X=0时Y的预测值。（2）自配双缩脲试剂一、双缩脲法测定血清总蛋白（TP）器材试管、加样枪、吸量管、722分光光度计、水浴箱。熟悉线性范围试验的具体操作过程。试剂（1）商品双缩脲试剂6、输入数据，注意“自变量”和“因变量”所对应的位置在两个具有相关关系的变量的一组数据（X与Y）间，通过散点图我们可观察出所有数据点都分布在一条直线附近，这样的直线可以画出许多条，而我们希望其中的一条能最好地反映X与Y之间的关系，即我们要找出一条直线，使这条直线“最贴近”已知的数据点。掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理、方法在两个具有相关关系的变77线性回归——用直线方程表达X（自变量）和Y（因变量）之间的数量关系。ŷ是y（实测值）的预测值，表示当x取值xi=（1，2，……，n）时，y相应的预测值为yi。ŷ=a+bx称为Y对X的回归直线方程，相应的直线称为回归直线。线性回归——用直线方程表达X（自变量）和Y（因变量）之间的数78a是回归直线在Y轴上的截距，即X=0时Y的预测值。b是回归直线的斜率，又称为回归系数。表示自变量X对因变量Y影响大小的参数，即当X改变一个单位时，Y的预测值平均改变|b|个单位。要确定回归直线方程，只要确定截距a与回归系数b即可。a是回归直线在Y轴上的截距，即X=0时Y的预测值。79回归直线的求法最小二乘法各实测点到直线的纵向距离的平方和最小。回归直线的求法80直线相关——如果两个随机变量中，一个变量由小到大变化时，另一个变量也相应地由小到大(或由大到小)地变化，并且测得两个变量组成的坐标点在直角坐标系中呈直线趋势，就称这两个变量存在直线相关关系。可用相关系数r表示。（二）直线相关直线相关——如果两个随机变量中，一个变量由小到大变化时，另一81相关系数r——是说明有直线关系的两个变量间相关关系的密切程度和相关方向的统计指标。相关系数没有单位，其值1≤r≤1。|r|越大，两变量的关系越密切。相关系数r——是说明有直线关系的两个变量间相关关系的密切程度82当两变量呈同向变化时，0＜r＜1，为正相关；r=1为完全正相关。当两变量呈同向变化时，0＜r＜1，为正相关；83当两变量呈反向变化时，1＜r＜0，为负相关；r=1为完全负相关。当两变量呈反向变化时，1＜r＜0，为负相关；84