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文档简介

(2)与

(2)与

聚合酶的比较:

DNA);

(1)两种

(1)E·coliDNA

;T

(二)基因工程的基本操作程序1、

/

2、

非编码区 编码区 非编码区启动子与RNA聚合酶结合

终止子真核细胞的基因结构

编码区

外显子:能编码蛋白质的序列内含子:不能编码蛋白质的序列非编码区:有调控作用的核苷酸序列,包括位于编码区上游的RNA聚合酶结合位点等。注意:非编码序列

原核基因:非编码区真核基因:非编码区+内含子

/

反(逆)转录

mRNA;然后以此条

DNA(即

cDNA,构

70~75℃,在

mRNA。

/

植物.

1、植物基因工程

2、动物基因工程

/

1.理论基础(原理)

/

2.植物组织培养技术

聚乙二醇(PEG)

/

1.

动物细胞培养(1)原理:细胞增殖。(2)流程:取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)→剪碎→分散成单个细胞(用胰蛋白酶或胶原蛋白酶)→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→细胞贴壁成单层→细胞增殖→铺满瓶壁→接触抑制→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理→分瓶继续传代培养→传代10~50

代(遗传物质正常改变)→继续传代→其中少数细胞发生突变,获得不死性。注意:Ⅰ、由于把细胞粘连在一起主要是细胞之间的蛋白质,所以用胰蛋白酶或胶原蛋白酶消化掉细胞间的蛋白质,可把细胞分散开来。Ⅱ、传代中的“代”与细胞增殖代数中的“代”不同:传代中的一代指把细胞放入培养瓶中培养直到再分瓶培养的这段时间。这段时间细胞会增殖多次。Ⅲ、不死性细胞具有癌细胞的一些特性:黏着性降低;细胞膜表面的糖蛋白减少。Ⅳ、目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10

代以内,以保持遗传物质的正常。没有脱分化(3)条件①无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理。通常还要添加一定量的抗生素,更换积累对细胞自身造成危害。②营养:合成培养基成分:糖(葡萄糖)、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常(不是必须)需加入血清、血浆等天然成分。酶的最适

PH

值约为

2.0,所以分散细胞时不能用)。细胞代谢维持培养液的

pH

。2.动物体细胞核移植技术和克隆动物(1)分为胚胎细胞核移植(较容易)和体细胞核移植(较难)。原因胞质多,营养丰富;细胞质中含有使体细胞核表达出全能性所必需的因子。

/

(3)克隆:指共同的祖先经过无性繁殖得到一大群分子,细胞或个体,它们与祖先具有相同的遗传特性。如经过植物组织培养得到一大群植株;经过PCR

扩增得到大量

DNA

片断等等。(4)原理:动物细胞核的全能性。(5)体细胞核移植的大致过程是:

教材

P48

页。注意:操作时,将体细胞与去核的卵母细胞直接融合。用于核移植的供体细胞选传代10

代以内的细胞。得到的克隆动物与供体动物性状基本相同的原因:细胞质中含有受体卵母细胞的线粒体

DNA;性状受环境的影响。生殖方式为无性繁殖。(4)体细胞核移植技术的应用:①加速家畜遗传改良进程,促进良畜群繁育;②保护濒危物种,增大存活数量;③转基因克隆动物用于生产珍贵的医用蛋白:将目的基因导入供体细胞中,再与去核卵母细胞融合,最终得到克隆动物,再用于生产医用蛋白;④转基因克隆动物作为异种移植的供体(如无免疫排斥反应的转基因克隆猪);⑤用于组织器官的移植:取患者的健康细胞(作为供体细胞)进行核移植,得到早期胚胎,再从中提取出胚胎干细胞,诱导其分化形成所需器官。(5)体细胞核移植技术存在的问题:克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺陷等,还存在安全性问题。3.动物细胞融合(1)动物细胞融合也称细胞杂交,融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞。(2)诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似,常用的诱导因素有聚乙二醇、电刺激等,但动物细胞融合还常用灭活的病毒。(3)动物细胞融合的意义:克服了远缘杂交的不亲和性,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育的重要手段。(4)动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较:

4.单克隆抗体

/

瘤+瘤

1、精子的发生

个初级精母细胞→2

个次级精母细胞→4

2、卵子的发生

/

2、

3-7。屏障)。

4、动物胚胎发育的基本过程

(1)卵母细胞的采集和培养

/

(4)胚胎的早期培养:

1.胚胎移植

/

(也叫)。对胚胎进行质量检查,此时的胚胎应发阶段。直接向受体移植或放入-196℃的液氮中保存。2.胚胎分割(1)概念:是指采用机械方法将

(3)材料:发育良好,形态正常的桑椹胚或囊胚。(桑椹胚至囊胚的发育过(4)操作过程:对囊胚阶段的胚胎分割时,要将内细胞团3、胚胎干细胞

(1)基因生物与食物安全:

/

(2)转基因生物与生物安全:对生物多样性的影响(3)转基因生物与环境安全:对生态系统稳定性的影响(1)克隆人:两种不同观点,多数人持否定态度。(2)设计试管婴儿:区别两种不同观点,多数人持认可态度。(3)基因身份证:(1)种类:致病菌

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