版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
慢性乙型肝炎慢性乙型肝炎
主要内容
乙型肝炎病毒
荧光定量PCR技术HBV-DNA与临床
主要内容
乙型肝炎病毒
什么是乙肝?什么是乙肝?乙肝:是指由乙型肝炎病毒引起的,以肝脏损害为主的一组全身性传染病。
临床表现:以疲乏、食欲减退、厌油、肝功能异常为主,部分病例呈现黄疸。
乙肝:是指由乙型肝炎病毒引起的,以肝脏损害为主的一组全身性传一、形态和生物学特性:
HBV感染者血清中存在三种形式的病毒颗粒:
①大球形颗粒(Dane):完整的病毒颗粒,含量最少
包膜:HBsAg,糖蛋白,脂质
核心:DNA,DNA聚合酶,HBcAg
是病毒复制的主体。
②小球形颗粒:
仅HBsAg,无核酸,无感染性,含量最多
③管形颗粒:仅HBsAg,无核酸,无感染性
HBV抵抗力很强,在血清中30-32℃可保存6个月,-20℃可保存15年。
一、形态和生物学特性:
HBV感染者血清中存在三种形式的病电镜下HBV颗粒HBV病毒结构示意图电镜下HBV颗粒HBV病毒结构示意图HBV基因组结构,1979年二、基因组结构和编码蛋白HBV基因组结构,1979年二、基因组结构和编码蛋白根据HBV全基因序列差异≥8%或S区基因序列差异≥4%,目前HBV分为A-H八个基因型。各基因型又可分为不同亚型。我国主要是B和C。IFN治疗HBV应答率:A>D,B>C,A、D>B、C基因型是否影响核苷类似物的疗效尚未确定。65℃10h、煮沸10min或高压蒸气均可灭活HBV。根据HBV全基因序列差异≥8%或S区基因序列差异≥4%,目前三、抗原抗体系统HBsAg是HBV感染的主要标志,2-12周出现。只有抗原性,无传染性。目前感染,患者或病毒携带者。抗-HBs保护性抗体,曾感染或免疫HBeAgHBV复制及强感染性的指标,仅见于HBsAg阳性患者,HBeAg阳性标本HBVDNA检出率90%左右,两者有着良好的相关性抗-HBe有一定的保护作用,感染恢复期,传染性低,病情趋于稳定,预后良好抗-HBc非保护性抗体,曾感染,病情趋于稳定。HBcAb-IgM提示HBV处于复制状态HBcAg主要存在于感染的肝细胞核心,血循环中游离的极少。与HBVDNA呈正相关,HBV复制及强感染性的指标。三、抗原抗体系统HBsAg是HBV感染的主要标志,2-12周四、分子生物学标记
1.HBV-DNA:主要存在于Dane颗粒中,是病毒复制和传染性的直接标志。
2.HBV-DNA多聚酶:位于核心部位,血清中HBV-DNA多聚酶活力是判断病毒复制、传染性高低的指标之一。
流行病学流行病学1.传染源:急、慢性乙型肝炎患者,病毒携带者;
2.传播途径:母婴传播、血液及血制品传播、破损的皮肤和黏膜及性接触传播,日常工作或生活接触一般不会传染HBV;经吸血昆虫传播未证实;
3.易感人群:抗HBs阴性者。婴幼儿是获得HBV感染的最危险时期。
1.传染源:急、慢性乙型肝炎患者,病毒携带者;
2.传播途径全球20亿曾感染HBV,慢性HBV感染者3.5亿我国属HBV感染高流行区,一般人群HBsAg阳性率为9.09%,总感染率为57.6%(包括既往感染和现症感染)。接种与未接种乙型肝炎疫苗人群的HBsAg阳性率分别为4.51%和9.51%。男性高于女性,有家庭聚集现象,婴幼儿感染多见。全球20亿曾感染HBV,慢性HBV感染者3.5亿自然史自然史12/11/202215急性
HBV感染慢性乙肝肝硬化肝癌失代偿期肝硬化
5年病死率70-86%代偿期肝硬化
5年病死率14-20%青少年和成人期
5-10%12-25%5年6-15%5年25-30%
婴幼儿期12/10/202215急性
HBV感染慢性乙肝肝硬化肝癌失发生肝硬化的高危因素包括:病毒载量高、HBeAg持续阳性、ALT水平高或反复地波动、嗜酒、合并HCV、HDV或HIV感染等。HBeAg阳性患者的肝硬化发生率要高于HBeAg阴性者HBV感染是HCC的重要相关因素。肝硬化患者发生HCC高危因素包括:男性、年龄、嗜酒、黄曲霉素、合并HCV或HDV感染、持续肝脏炎症、持续HBeAg阳性及HBVDNA持续高水平等发生肝硬化的高危因素包括:病毒载量高、HBeAg持续阳性、A发病机制发病机制免疫清除期非活动或
低复制期再活动期不治疗
但应检测免疫耐受
需治疗
不治疗
但应检测
需治疗
HBV携带者
HBsAg(+)HBeAg(+)/
抗-HBe(-)
HBVDNA+++
ALT–
肝活检-慢乙肝
HBsAg(+)HBeAg(+)/
抗-HBe(-)
HBVDNA++
ALT/AST+++
肝活检+++HBeAg(-)慢乙肝
HBeAg(-)/
抗-HBe(+)
HBVDNA+
ALT++
肝活检++非活动状态
HBsAg携带者
HBeAg(-)/
抗-HBe(+)
HBVDNA-
ALT/AST-
肝活检-免疫清除期非活动或
低复制期再活动期不治疗
但应检测免疫耐受乙肝或HBsAg阳性史超过6个月,现HBsAg和/或HBVDNA仍阳性者,可诊断为慢性HBV感染慢性
乙型肝炎隐匿性
慢性乙肝乙型肝炎
肝硬化
携带者
慢性HBV携带(耐受)非活动性HBsAg携带HBeAg(+)HBeAg(-)慢性
HBV
感染代偿期失代偿期HBsAg(-),HBVDNA(+)根据肝功能损害程度
分为轻度/中度/重度分为活动期/静止期ALT正常乙肝或HBsAg阳性史超过6个月,现HBsAg和/或HBV(一)携带者大三阳或小三阳,HBVDNA为阳性或阴性,但1年内连续随访3次以上
ALT和AST均在正常范围,肝组织学检查无异常(二)慢性乙型肝炎大三阳或小三阳,HBVDNA阳性,血清ALT持续或反复升高,或肝组织学检查有肝炎病变
(一)携带者(三)隐匿性慢性乙型肝炎
-血清HBsAg阴性,但血清和(或)肝组织中HBVDNA
阳性,并有慢性乙型肝炎的临床表现。患者可伴
有血清抗-HBs、抗-HBe和(或)抗-HBc阳性-另约20%隐匿性慢性乙型肝炎患者除HBVDNA阳性
外,其余HBV血清学标志均为阴性-诊断需排除其他病毒及非病毒因素引起的肝损伤(三)隐匿性慢性乙型肝炎HBsAg和HBeAg均阳性而HBVDNA阴性?●干扰素或拉米夫定等治疗后病毒复制受抑制。●PCR所用引物相应的DNA序列发生突变,此引物与突变DNA不能配对结合。●病毒DNA整合于宿主肝细胞染色体而血中游离HBVDNA很少或缺乏。HBsAg和HBeAg均阳性而HBVDNA阴性?为什么要检测HBV-DNA?为什么要检测HBV-DNA?
“大三阳”、“小三阳”、“携带者”等免疫学指标反应的是机体的免疫反应状态,不能反应体内病毒复制水平与感染程度。血清学指标(-)不能排除HBV感染。因此,要准确知道HBV是否处于复制状态,最准确的方法还是通过检测HBVDNA来决定。HBVDNA是HBV本身的遗传物质,是病毒存在和复制的最可靠、最直接的指标,也是患者具有传染性的标志。
“大三阳”、“小三阳”、“携带者”等免疫学指标反应的是怎样检测HBV-DNA?怎样检测HBV-DNA?荧光定量PCR技术荧光定量PCR技术荧光定量PCR技术Polymerasechainreaction(PCR),聚合酶链式反应,是一种DNA的快速扩增技术。PCR技术通过两个短的称为引物的DNA小片段和一种耐热酶(TaqDNA聚合酶)的作用,经过高温变性、低温退火、适温延伸三个步骤在3个小时内反复循环30-40次,把特定的DNA片段扩增1000万倍。每个PCR体系含4种主要成分:含有待扩增序列的DNA模板引物TaqDNA聚合酶脱氧核糖核酸三磷酸(dNTP)荧光定量PCR技术Polymerasechainreac
实时荧光定量PCR技术,是指在反应体系中加入荧光标记,利用荧光信号积累实时检测整个PCR过程,通过标准曲线对PCR终产物的分析,最终实现对未知的起始模版进行定量分析的一种技术,是迄今对已知基因序列的核酸测定中最灵敏的方法。实时荧光定量PCR技术,是指在反应体系中加入荧光标PCR反应过程5’5’3’3’d.NTPsTaq酶Primers5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’反应组分变性5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’PCR反应过程5’5’3’3’d.NTPsTaq酶Prim延伸5’3’5’3’5’3’5’3’3’5’3’TaqTaq5’5’重复退火延伸5’3’5’3’5’3’5’3’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’5’3’3’5’3’5’3’循环24个拷贝循环38个拷贝5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’3’5’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’5’3’3’5’3’5’TaqMan探针5’5’3’3’d.NTPsTaq酶Primers5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’反应体系变性5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’Taql5’3’RQProbe5’3’RQTaqMan探针5’5’3’3’d.NTPsTaq酶Prim5’3’5’3’5’3’RQ退火5’3’1.链取代Taq3’QR5’5’3’3’QTaqR5’2.水解3.聚合5’3’QTaqR3’5’4.检测荧光5’3’3’QTaqR5’l5’3’5’3’5’3’RQ退火5’3’1.链取代T每产生一条DNA链,就切断一条探针每切断一条探针,就产生一个荧光信号信号强度与结合探针的DNA分子数成正比原理图每产生一条DNA链,就切断一条探针原理图血清标本采集一次性无菌注射器抽取受检者静脉血3-5毫升,注入红帽无菌管中室温(22~25ºC)放置30~60分钟血标本使用水平离心机,4000转/分,离心5分钟吸取上层血清,转移至1.5ml灭菌离心管
严禁使用肝素抗凝血标本,抑制PCR反应血清标本采集一次性无菌注射器抽取受检者静脉血3-5毫升,注入结果分析结果分析实验室检查常用指标?实验室检查常用指标?常用指标免疫学检查病毒学检查肝功能检查常用指标免疫学检查指标HBsAg抗-HBsHBeAg抗-HBe抗-HBc诊断结果+++大三阳,急性或慢性现症感染,传染性强+++小三阳,有无传染性应结合HBVDNA检测结果++HBV感染恢复期,或S基因突变,++急性肝炎早期,传染性强++既往感染,有无传染性需结合HBVDNA++感染恢复期,有免疫力,无传染性++①窗口期,抗-HBs即将出现;②HBV感染已过+①注射疫苗后;②遥远的过去有过HBV感染免疫学检查-------乙肝五项分析指标HBsAg抗-HBsHBeAg抗-HBe抗-HBc诊断结乙型肝炎病毒DNA(HBVDNA<103copy/ml)乙肝病毒基因型检测乙肝病毒基因型变异检测病毒学检查病毒学检查肝功能检查
-
ALT、AST:一般可反映肝细胞损伤程度,最常用-血清胆红素(BIL):通常与肝细胞坏死程度有关-凝血酶原时间(PT):反映肝脏凝血因子合成功能-胆碱酯酶(ChE):反映肝脏合成功能,可作参考-白蛋白(ALB):反映肝脏合成功能,A/G可作参考-甲胎蛋白(AFP):出现明显升高往往提示发生HCC肝功能检查如何治疗?如何治疗?目前极少能治愈!是可以治疗的!病毒DNA整合于宿主肝细胞染色体能治愈吗?能治愈吗?乙型肝炎课件谁需要治疗?不论是大三阳还是小三阳,有以下情况者均需治疗:肝功能异常。有明显的肝炎症状:乏力、厌食、黄疸、肝区隐痛不适等。HBVDNA>103copy/ml)谁需要治疗?抗病毒:目前尚无一种能迅速、直接杀死清除乙肝病毒的药物,最好的抗病毒药物疗效也仅能达到50%左右。目前国际医学界公认的治疗慢性乙肝有确切疗效的抗病毒药物主要有两大类:
干扰素:重组人α-1b干扰素、α-2a、
α-2b干扰素等。核苷类似物:拉米夫定、阿德福韦。调节免疫保肝降酶抗病毒:目前尚无一种能迅速、直接杀死清除乙肝病毒的药物,最好乙型肝炎治疗原则改善症状,恢复肝功能;抗病毒;抗肝纤维化,延缓肝硬化的发生;预防和监控肝癌;无症状携带者无需抗病毒治疗。乙型肝炎治疗原则改善症状,恢复肝功能;如何预防?如何预防?疫苗预防阻断母婴传播避免医源性传播疫苗预防乙型肝炎疫苗预防-自2005年6月,我国新生儿HBV疫苗接种完全免费-乙肝疫苗接种对象主要是新生儿,其次为婴幼儿
和高危人群。全程共3针,按照0、1、6个月程序-新生儿要求在出生后24hr内接种。单用疫苗阻断
母婴传播保护率87.8%,联合HBIG保护率95-97%-接种后有抗体应答者保护效果一般至少持续12年乙型肝炎疫苗预防传播途径预防:大力推广安全注射(包括针刺的针具),对牙科器
械、内镜等医疗器具应严格消毒;严格防止医源
性传播;理发、刮脸、修脚、穿刺和纹身等用具
应严格消毒;注意个人卫生,不共用剃须刀和牙
具等用品;进行正确性教育;对HBsAg阳性孕妇,
应避免羊膜腔穿刺,并缩短分娩时间,保证胎盘
的完整性,尽量减少新生儿暴露于母血的机会传播途径预防:意外暴露HBV后预防-血清学检测:立即检测HBsAg、抗-HBs、ALT等,
并在3和6个月内复查。-主动和被动免疫:如已接种过乙肝疫苗,且已知
抗-HBs≥10mIU/ml者,可不进行特殊处理。如未
接种过疫苗或虽接种过疫苗但抗-HBs<10mIU/ml
或抗-HBs水平不详,应立即注射HBIG200-400IU,
并同时在不同部位接种第1针乙肝疫苗20g,于1
和6个月后分别接种第2针和3针乙肝疫苗各20g。意外暴露HBV后预防对患者和携带者的管理
-对慢性HBV携带者及HBV患者,除不能献血和
国家法律规定不能从事的特殊职业(如服兵役等)
以外,可照常生活、学习和工作,但要加强随访。-乙肝患者和携带者的传染性,主要取决于血液中
HBVDNA水平,与血清ALT/AST或胆红素水平无关。对患者和携带者的管理关于乙肝母婴传播?关于乙肝母婴传播?乙肝母婴传播的三种途径:(1)宫内传播:是分娩以前在宫内通过胎盘等途径传播,这种情况较少。(2)产时传播:发生在分娩过程中,由于母亲产道的血液、羊水和阴道分泌物中带有乙肝病毒,会使婴儿经口吞入或通过破损的皮肤黏膜而受传染,这种情况占绝大多数。(3)产后传染:有可能通过哺乳或密切接触等途径传播,这种传播属于水平传播,比较常见。乙肝母婴传播的三种途径:乙肝患者怀孕的时机及注意事项:乙肝患者一定要在肝功能正常、HBV-DNA阴性,维持半年以上怀孕。一旦怀孕,应终止使用各种具有肝毒性的药物,定期到医院进行孕期体检。合理调整饮食结构,主张均衡营养,避免体重增长过快,形成脂肪肝或造成肝脏负担。乙肝患者怀孕的时机及注意事项:HBsAg阳性孕妇分娩时应采取的预防措施:分娩后对胎儿复苏动作应轻,防止损伤咽黏膜,造成感染。避免婴儿吞下可被污染的液体。如果孕妇HBsAg阳性,伴有HBeAg者,行剖腹产,避免胎儿经产道时吞入被污染的阴道分泌物。HBsAg阳性孕妇分娩时应采取的预防措施:HBsAg阳性孕产妇儿童应采取预防措施:乙肝表面抗原阳性孕产妇所生的新生儿,在出生后24小时内注射乙肝免疫球蛋白(100国际单位),并按照国家免疫规划要求,完成24小时内及1月龄合6月龄儿童的三次乙肝疫苗接种。等宝宝周岁到医院复查。HBsAg阳性孕产妇儿童应采取预防措施:乙肝妈妈母乳喂养有何禁忌:肝功能正常、HBV-DNA阴性,孩子注射过乙肝免疫球蛋白和乙肝疫苗的情况才可以喂奶。但若婴儿口腔、咽喉、食道、胃肠粘膜等处有破损、溃疡或母亲乳头破裂者也应该尽可能避免给孩子哺乳。乙肝妈妈母乳喂养有何禁忌:欢迎指正欢迎指正慢性乙型肝炎慢性乙型肝炎
主要内容
乙型肝炎病毒
荧光定量PCR技术HBV-DNA与临床
主要内容
乙型肝炎病毒
什么是乙肝?什么是乙肝?乙肝:是指由乙型肝炎病毒引起的,以肝脏损害为主的一组全身性传染病。
临床表现:以疲乏、食欲减退、厌油、肝功能异常为主,部分病例呈现黄疸。
乙肝:是指由乙型肝炎病毒引起的,以肝脏损害为主的一组全身性传一、形态和生物学特性:
HBV感染者血清中存在三种形式的病毒颗粒:
①大球形颗粒(Dane):完整的病毒颗粒,含量最少
包膜:HBsAg,糖蛋白,脂质
核心:DNA,DNA聚合酶,HBcAg
是病毒复制的主体。
②小球形颗粒:
仅HBsAg,无核酸,无感染性,含量最多
③管形颗粒:仅HBsAg,无核酸,无感染性
HBV抵抗力很强,在血清中30-32℃可保存6个月,-20℃可保存15年。
一、形态和生物学特性:
HBV感染者血清中存在三种形式的病电镜下HBV颗粒HBV病毒结构示意图电镜下HBV颗粒HBV病毒结构示意图HBV基因组结构,1979年二、基因组结构和编码蛋白HBV基因组结构,1979年二、基因组结构和编码蛋白根据HBV全基因序列差异≥8%或S区基因序列差异≥4%,目前HBV分为A-H八个基因型。各基因型又可分为不同亚型。我国主要是B和C。IFN治疗HBV应答率:A>D,B>C,A、D>B、C基因型是否影响核苷类似物的疗效尚未确定。65℃10h、煮沸10min或高压蒸气均可灭活HBV。根据HBV全基因序列差异≥8%或S区基因序列差异≥4%,目前三、抗原抗体系统HBsAg是HBV感染的主要标志,2-12周出现。只有抗原性,无传染性。目前感染,患者或病毒携带者。抗-HBs保护性抗体,曾感染或免疫HBeAgHBV复制及强感染性的指标,仅见于HBsAg阳性患者,HBeAg阳性标本HBVDNA检出率90%左右,两者有着良好的相关性抗-HBe有一定的保护作用,感染恢复期,传染性低,病情趋于稳定,预后良好抗-HBc非保护性抗体,曾感染,病情趋于稳定。HBcAb-IgM提示HBV处于复制状态HBcAg主要存在于感染的肝细胞核心,血循环中游离的极少。与HBVDNA呈正相关,HBV复制及强感染性的指标。三、抗原抗体系统HBsAg是HBV感染的主要标志,2-12周四、分子生物学标记
1.HBV-DNA:主要存在于Dane颗粒中,是病毒复制和传染性的直接标志。
2.HBV-DNA多聚酶:位于核心部位,血清中HBV-DNA多聚酶活力是判断病毒复制、传染性高低的指标之一。
流行病学流行病学1.传染源:急、慢性乙型肝炎患者,病毒携带者;
2.传播途径:母婴传播、血液及血制品传播、破损的皮肤和黏膜及性接触传播,日常工作或生活接触一般不会传染HBV;经吸血昆虫传播未证实;
3.易感人群:抗HBs阴性者。婴幼儿是获得HBV感染的最危险时期。
1.传染源:急、慢性乙型肝炎患者,病毒携带者;
2.传播途径全球20亿曾感染HBV,慢性HBV感染者3.5亿我国属HBV感染高流行区,一般人群HBsAg阳性率为9.09%,总感染率为57.6%(包括既往感染和现症感染)。接种与未接种乙型肝炎疫苗人群的HBsAg阳性率分别为4.51%和9.51%。男性高于女性,有家庭聚集现象,婴幼儿感染多见。全球20亿曾感染HBV,慢性HBV感染者3.5亿自然史自然史12/11/202275急性
HBV感染慢性乙肝肝硬化肝癌失代偿期肝硬化
5年病死率70-86%代偿期肝硬化
5年病死率14-20%青少年和成人期
5-10%12-25%5年6-15%5年25-30%
婴幼儿期12/10/202215急性
HBV感染慢性乙肝肝硬化肝癌失发生肝硬化的高危因素包括:病毒载量高、HBeAg持续阳性、ALT水平高或反复地波动、嗜酒、合并HCV、HDV或HIV感染等。HBeAg阳性患者的肝硬化发生率要高于HBeAg阴性者HBV感染是HCC的重要相关因素。肝硬化患者发生HCC高危因素包括:男性、年龄、嗜酒、黄曲霉素、合并HCV或HDV感染、持续肝脏炎症、持续HBeAg阳性及HBVDNA持续高水平等发生肝硬化的高危因素包括:病毒载量高、HBeAg持续阳性、A发病机制发病机制免疫清除期非活动或
低复制期再活动期不治疗
但应检测免疫耐受
需治疗
不治疗
但应检测
需治疗
HBV携带者
HBsAg(+)HBeAg(+)/
抗-HBe(-)
HBVDNA+++
ALT–
肝活检-慢乙肝
HBsAg(+)HBeAg(+)/
抗-HBe(-)
HBVDNA++
ALT/AST+++
肝活检+++HBeAg(-)慢乙肝
HBeAg(-)/
抗-HBe(+)
HBVDNA+
ALT++
肝活检++非活动状态
HBsAg携带者
HBeAg(-)/
抗-HBe(+)
HBVDNA-
ALT/AST-
肝活检-免疫清除期非活动或
低复制期再活动期不治疗
但应检测免疫耐受乙肝或HBsAg阳性史超过6个月,现HBsAg和/或HBVDNA仍阳性者,可诊断为慢性HBV感染慢性
乙型肝炎隐匿性
慢性乙肝乙型肝炎
肝硬化
携带者
慢性HBV携带(耐受)非活动性HBsAg携带HBeAg(+)HBeAg(-)慢性
HBV
感染代偿期失代偿期HBsAg(-),HBVDNA(+)根据肝功能损害程度
分为轻度/中度/重度分为活动期/静止期ALT正常乙肝或HBsAg阳性史超过6个月,现HBsAg和/或HBV(一)携带者大三阳或小三阳,HBVDNA为阳性或阴性,但1年内连续随访3次以上
ALT和AST均在正常范围,肝组织学检查无异常(二)慢性乙型肝炎大三阳或小三阳,HBVDNA阳性,血清ALT持续或反复升高,或肝组织学检查有肝炎病变
(一)携带者(三)隐匿性慢性乙型肝炎
-血清HBsAg阴性,但血清和(或)肝组织中HBVDNA
阳性,并有慢性乙型肝炎的临床表现。患者可伴
有血清抗-HBs、抗-HBe和(或)抗-HBc阳性-另约20%隐匿性慢性乙型肝炎患者除HBVDNA阳性
外,其余HBV血清学标志均为阴性-诊断需排除其他病毒及非病毒因素引起的肝损伤(三)隐匿性慢性乙型肝炎HBsAg和HBeAg均阳性而HBVDNA阴性?●干扰素或拉米夫定等治疗后病毒复制受抑制。●PCR所用引物相应的DNA序列发生突变,此引物与突变DNA不能配对结合。●病毒DNA整合于宿主肝细胞染色体而血中游离HBVDNA很少或缺乏。HBsAg和HBeAg均阳性而HBVDNA阴性?为什么要检测HBV-DNA?为什么要检测HBV-DNA?
“大三阳”、“小三阳”、“携带者”等免疫学指标反应的是机体的免疫反应状态,不能反应体内病毒复制水平与感染程度。血清学指标(-)不能排除HBV感染。因此,要准确知道HBV是否处于复制状态,最准确的方法还是通过检测HBVDNA来决定。HBVDNA是HBV本身的遗传物质,是病毒存在和复制的最可靠、最直接的指标,也是患者具有传染性的标志。
“大三阳”、“小三阳”、“携带者”等免疫学指标反应的是怎样检测HBV-DNA?怎样检测HBV-DNA?荧光定量PCR技术荧光定量PCR技术荧光定量PCR技术Polymerasechainreaction(PCR),聚合酶链式反应,是一种DNA的快速扩增技术。PCR技术通过两个短的称为引物的DNA小片段和一种耐热酶(TaqDNA聚合酶)的作用,经过高温变性、低温退火、适温延伸三个步骤在3个小时内反复循环30-40次,把特定的DNA片段扩增1000万倍。每个PCR体系含4种主要成分:含有待扩增序列的DNA模板引物TaqDNA聚合酶脱氧核糖核酸三磷酸(dNTP)荧光定量PCR技术Polymerasechainreac
实时荧光定量PCR技术,是指在反应体系中加入荧光标记,利用荧光信号积累实时检测整个PCR过程,通过标准曲线对PCR终产物的分析,最终实现对未知的起始模版进行定量分析的一种技术,是迄今对已知基因序列的核酸测定中最灵敏的方法。实时荧光定量PCR技术,是指在反应体系中加入荧光标PCR反应过程5’5’3’3’d.NTPsTaq酶Primers5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’反应组分变性5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’PCR反应过程5’5’3’3’d.NTPsTaq酶Prim延伸5’3’5’3’5’3’5’3’3’5’3’TaqTaq5’5’重复退火延伸5’3’5’3’5’3’5’3’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’5’3’3’5’3’5’3’循环24个拷贝循环38个拷贝5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’3’5’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’5’3’3’5’3’5’TaqMan探针5’5’3’3’d.NTPsTaq酶Primers5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’反应体系变性5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’Taql5’3’RQProbe5’3’RQTaqMan探针5’5’3’3’d.NTPsTaq酶Prim5’3’5’3’5’3’RQ退火5’3’1.链取代Taq3’QR5’5’3’3’QTaqR5’2.水解3.聚合5’3’QTaqR3’5’4.检测荧光5’3’3’QTaqR5’l5’3’5’3’5’3’RQ退火5’3’1.链取代T每产生一条DNA链,就切断一条探针每切断一条探针,就产生一个荧光信号信号强度与结合探针的DNA分子数成正比原理图每产生一条DNA链,就切断一条探针原理图血清标本采集一次性无菌注射器抽取受检者静脉血3-5毫升,注入红帽无菌管中室温(22~25ºC)放置30~60分钟血标本使用水平离心机,4000转/分,离心5分钟吸取上层血清,转移至1.5ml灭菌离心管
严禁使用肝素抗凝血标本,抑制PCR反应血清标本采集一次性无菌注射器抽取受检者静脉血3-5毫升,注入结果分析结果分析实验室检查常用指标?实验室检查常用指标?常用指标免疫学检查病毒学检查肝功能检查常用指标免疫学检查指标HBsAg抗-HBsHBeAg抗-HBe抗-HBc诊断结果+++大三阳,急性或慢性现症感染,传染性强+++小三阳,有无传染性应结合HBVDNA检测结果++HBV感染恢复期,或S基因突变,++急性肝炎早期,传染性强++既往感染,有无传染性需结合HBVDNA++感染恢复期,有免疫力,无传染性++①窗口期,抗-HBs即将出现;②HBV感染已过+①注射疫苗后;②遥远的过去有过HBV感染免疫学检查-------乙肝五项分析指标HBsAg抗-HBsHBeAg抗-HBe抗-HBc诊断结乙型肝炎病毒DNA(HBVDNA<103copy/ml)乙肝病毒基因型检测乙肝病毒基因型变异检测病毒学检查病毒学检查肝功能检查
-
ALT、AST:一般可反映肝细胞损伤程度,最常用-血清胆红素(BIL):通常与肝细胞坏死程度有关-凝血酶原时间(PT):反映肝脏凝血因子合成功能-胆碱酯酶(ChE):反映肝脏合成功能,可作参考-白蛋白(ALB):反映肝脏合成功能,A/G可作参考-甲胎蛋白(AFP):出现明显升高往往提示发生HCC肝功能检查如何治疗?如何治疗?目前极少能治愈!是可以治疗的!病毒DNA整合于宿主肝细胞染色体能治愈吗?能治愈吗?乙型肝炎课件谁需要治疗?不论是大三阳还是小三阳,有以下情况者均需治疗:肝功能异常。有明显的肝炎症状:乏力、厌食、黄疸、肝区隐痛不适等。HBVDNA>103copy/ml)谁需要治疗?抗病毒:目前尚无一种能迅速、直接杀死清除乙肝病毒的药物,最好的抗病毒药物疗效也仅能达到50%左右。目前国际医学界公认的治疗慢性乙肝有确切疗效的抗病毒药物主要有两大类:
干扰素:重组人α-1b干扰素、α-2a、
α-2b干扰素等。核苷类似物:拉米夫定、阿德福韦。调节免疫保肝降酶抗病毒:目前尚无一种能迅速、直接杀死清除乙肝病毒的药物,最好乙型肝炎治疗原则改善症状,恢复肝功能;抗病毒;抗肝纤维化,延缓肝硬化的发生;预防和监控肝癌;无症状携带者无需抗病毒治疗。乙型肝炎治疗原则改善症状,恢复肝功能;如何预防?如何预
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 2024版个人健身教练服务及器材融资租赁合同3篇
- 2024年农药市场准入制度下采购合同范本2篇
- 2024年环保工程项目材料采购合同样本及服务内容2篇
- 内蒙古经贸外语职业学院《历史文选》2023-2024学年第一学期期末试卷
- 2024年新能源汽车充电停车位销售合同3篇
- 内蒙古建筑职业技术学院《医学遗传学》2023-2024学年第一学期期末试卷
- 2024年版防汛物资集中采购合同书3篇
- 2024年度股权投资合同标的:互联网企业注资2篇
- 2024年度房产抵押贷款贷后服务与客户满意度调查合同3篇
- 内蒙古机电职业技术学院《动画运动规律》2023-2024学年第一学期期末试卷
- 混凝土强度评定表(自动计算)
- 公安内勤培训课件
- 《5.1.2 弧度制》教学设计、导学案、同步练习
- ADS射频电路设计与仿真从入门到精通
- 喀什草湖镇发展规划方案
- 河道综合整治规划方案
- 粤教版科学四年级上册全册试卷(含答案)
- 民宿集体管理方案
- 食品工程原理课程设计说明书-水冷却牛奶的列管式换热器
- 语文一年级全册单元试卷及期末分类复习综合试卷(含答案)
- 消防安全检查巡查制度范本
评论
0/150
提交评论